QA Protocolos Laboratoriais TurmaB

Qumica Ambiental
Protocolos dos trabalhos laboratoriais propostos
CURSOS DE ESPECIALIZAO TECNOLGICA Anlises Qumicas e Biolgicas (ESTiG - IPB)

Microbiologia e Qumica Ambiental
Paulo Herbert 2010/2011
Microbiologia e Qumica Ambiental CET - Anlises Qumicas e Biolgicas (ESTiG - IPB)
Funcionamento das aulas:

A realizao dos trabalhos prticos ser feita em grupo. A preparao do trabalho experimental realizada durante a aula anterior aula laboratorial. Recomenda-se a leitura do protocolo laboratorial antes da aula de forma a esclarecer as dvidas existentes. A avaliao da preparao do trabalho ser feita de forma individual por resposta a uma ficha diagnstico. Nas aulas laboratoriais sero executadas as seguintes etapas: 1. Resposta ficha diagnstico ou a questes orais sobre a preparao do trabalho laboratorial. 2. Realizao do trabalho laboratorial. 3. Tratamento dos resultados experimentais. Recomenda-se que os alunos se organizem de forma a trazer um porttil por grupo para a aula.
Recomendaes importantes:
O uso de bata e culos de proteco obrigatrio nas sesses prticas. No permitido entrar no laboratrio sem este equipamento. obrigatria a preparao individual do trabalho prtico. No ser autorizada a realizao do trabalho sem que este tenha sido devidamente preparado. Todos os formandos devem ter mquina de calcular.
T1A. Determinao dos Slidos Dissolvidos Totais (SDT), Slidos Suspensos Totais (SST), Slidos Suspensos Volteis (SSV) e Slidos Sedimentveis em gua de rio e gua residual
Introduo
Numa gua, os slidos podem encontrar-se sob vrias formas: dissolvidos, suspensos ou flutuantes e podem ser de natureza orgnica ou inorgnica. Os slidos de natureza orgnica podem, se forem passveis de serem oxidados, levar reduo da concentrao de oxignio dissolvido numa gua. Os slidos inorgnicos, podem provocar o aparecimento de corroso e a formao de depsitos de xidos insolveis em tubagens e equipamentos. Das caractersticas fsicas das guas residuais, o teor de matria slida o de maior importncia, em termos de dimensionamento e controle de operaes das unidades de tratamento. Alguns conceitos: Slidos totais (ST) Resduo obtido aps evaporao completa de uma amostra Slidos suspensos totais (SST) Resduo obtido aps filtrao de uma amostra Slidos dissolvidos totais (SDT) Slidos que passam para o filtrado aps filtrao de uma amostra (podem ser obtidos aps evaporao do filtrado) Os slidos dissolvidos Totais (SDT) o resduo em ppm obtido pelo mtodo tradicional de evaporar uma amostra de gua at secar e aquecer a 180C. Este resduo inclui colides, compostos orgnicos no volteis e sais que so estveis a esta temperatura. Os sais inorgnicos constituem, de longe, a maior parte do resduo e o SDT usado como indicador do nvel total de compostos inorgnicos presentes em guas de alimentao. Pode ser medido directamente ou calculado multiplicando a condutividade da gua em S.cm-1 a 25C por 0,7. Slidos fixos (SF) Termo aplicado ao resduo dos ST, SST ou SDT aps secagem deste a determinada temperatura e por determinado perodo de tempo Slidos volteis (SV) Perda de massa do resduo dos ST, SST ou SDT verificada aps calcinao do mesmo
Material e mtodos Material e Reagentes

Sistema de filtrao por vcuo Membrana porosa de 0,45 m Balana analtica Estufa Mufla Placa de aquecimento Material de vidro Amostra de gua de rio Amostra de gua residual domstica
Procedimento experimental Slidos suspensos totais e volteis

- Colocar um filtro a secar na estufa a 103-105 C durante 15 minutos. - Transferir o filtro seco para num exsicador at arrefecer. - Medir a massa do filtro seco e registar a massa m1. - Fazer a montagem do equipamento de filtrao por vcuo. - Filtrar atravs do filtro j preparado 250 mL de gua a analisar. - Reservar o filtrado para determinar os slidos dissolvidos. - Levar o filtro novamente estufa at estar seco ou mufla a 550 C, durante 15 se pretender a determinao dos slidos suspensos volteis. A perda de massa durante a calcinao corresponde fraco voltil do resduo. - Depois de arrefecido no exsicador, medir a massa do filtro e registar a massa m2.
Slidos dissolvidos totais

- Colocar uma cpsula de porcelana a secar na estufa a 180 C, durante 15 minutos. - Medir a massa da cpsula de porcelana seca e registar a massa, m1. - Evaporar progressivamente 100 mL da gua filtrada no ensaio anterior. - Levar a cpsula novamente estufa at estar seca. - Depois de arrefecida no exsicador, pesar a cpsula e registar a massa m2.
Tratamento dos resultados Determinar os SST, SSV e SDT expressos em mg/L. Comparar os seus resultados com os restantes grupos.
Slidos sedimentveis
- Homogenizar 1L de amostra. - Transferir a gua homogeneizada para um cone de Imhoff. - Manter a gua no cone por 45min ao abrigo de luz e de poeiras. - Efectuar a leitura do nvel de material decantvel decorrido 0h30m, 1h, 1h30m e 2h.
Tratamento dos resultados Determinar os slidos sedimentveis, expressos em mililitros de matria decantvel por litro de gua analisada. Comparar os seus resultados com os restantes grupos.
T1B. Determinao da Condutividade em gua de rio e gua residual

Introduo
A gua pura m condutora de electricidade, embora no seja um isolante perfeito. difcil de se obter uma gua absolutamente pura, j que a gua um bom solvente. Mesmo a gua destilada de altssima qualidade tem algumas substncias qumicas dissolvidas. Essas impurezas, mesmo em concentraes bastante baixas, permitem gua conduzir electricidade muito melhor, j que impurezas como um sal se separam em ies livres na gua, atravs dos quais uma corrente elctrica pode fluir. A condutividade elctrica (o inverso da resistividade) de uma gua mede a capacidade que essa gua tem para conduzir corrente elctrica e expressa-se em S.cm-1. Em soluo, a corrente elctrica conduzida por caties e anies, enquanto que nos metais conduzida pelos electres. A condutividade de uma soluo depende de vrios factores, dos quais se pode destacar os seguintes: tipo, concentrao e mobilidade dos ies, valncia e temperatura. O seu valor pode ento ser considerado como uma medida da matria ionizvel presente numa gua. A gua pura pouco contribui para essa condutividade. A condutividade elctrica de uma gua aumenta muito com a presena de impurezas predominantemente inicas. Exemplos de valores de condutividade a 18C: guas doces: gua do mar: 100 2000 S.cm-1 45000 S.cm-1
A condutividade depende da temperatura. Um aumento da temperatura da gua resultar numa condutividade mais alta. A gua ultrapura tem uma condutividade de 0,045 S.cm-1 a 18C e de 0,055 S.cm-1 a 25C devido aos ies de hidrognio e hidrxido presentes. Para determinar a condutividade de uma soluo necessrio calibrar previamente o condutmetro com solues padro de condutividade conhecida, sendo este um referencial para determinar a condutividade em amostras desconhecidas. A condutividade tem como unidade de medida o mS/m ou S/cm.

Condutmetro e clula condutimtrica Material de vidro Solues padro de calibrao do condutivmetro Amostra de gua de rio Amostra de gua residual domstica
Procedimento experimental
Ligar o equipamento e seguir as instrues de calibrao do mesmo. Efectuar a leitura da condutividade das amostras de gua em estudo.
Tratamento dos resultados Compare o valor obtido com referncias encontradas na legislao e/ou literatura.
T1C. Determinao da Turvao em gua de rio e gua residual

Introduo
A turvao de uma gua causada por diversos materiais em suspenso e coloidais, de tamanho e natureza variados, tais como lamas, areias, matria orgnica e inorgnica finamente dividida, compostos corados solveis, plncton e outros organismos microscpicos. A presena destes materiais em suspenso numa amostra de gua causa a disperso e a absoro da luz que atravessa a amostra, em lugar da sua transmisso em linha recta. A turbidez a expresso dessa propriedade ptica e indicada em termos de unidades de turvao (NTU-Nephelometric Turbity Unit) A origem dos slidos numa gua pode ser natural (partculas de rocha, argila e silte, como tambm algas e outros microrganismos) ou antropognica (resduos industriais e domsticos, bem como microrganismos e eroso). A turvao de origem natural normalmente no coloca problemas sanitrios directos, mas esteticamente indesejvel. A de origem antropognica pode estar associada a compostos txicos e organismos patognicos. Tanto uma como outra diminuem a distncia de penetrao da luz em copros de gua, podendo levar a desiquilbrios nas biocenoses. Independentemente dos instrumentos utilizados, as medies da turbidez sero tanto mais rigorosas e precisas se for dada a ateno devida s tcnicas de medio. Deve-se medir a turbidez de uma amostra o quanto antes de forma a evitar alteraes na sua temperatura, estado de floculao e sedimentao. Deve evitar-se tanto quanto possvel a diluio das amostras. Dadas as incertezas associadas s medies de turbidez, os valores determinados devem ser reportados da seguinte forma:
Gama de valores (NTU) 0 1,0 1 10 10 40 40 100 100 400 400 1000 > 1000 Arredondar para NTU mais prximo de 0,05 0,1 1 5 10 50 100

Turbidmetro ou Nefelmetro Solues padro de formazina Banho ultra-sons Material de vidro e tubos para leitura da turbidez Amostra de gua de rio Amostra de gua residual domstica
Homegeneize a amostra de forma suave, de forma a no introduzir bolhas de ar na amostra. Se existirem bolhas, remova-as da amostra a analisar por exemplo atravs da utilizao de ultra-sons (10 s mx); Calibre o turbidmetro (ou nefelmetro) consoante as instrues do fabricante; Efectue a leitura da(s) amostra(s).
Tratamento dos resultados Determine a turvao expressa em mg/L de gua analisada. Comparar os seus resultados com os restantes grupos.
T2. Determinao da Cor (verdadeira e aparente) em gua de rio e gua residual

Introduo
O termo Cor utilizado para designar a Cor verdadeira, ou seja, a cor de uma gua cuja turvao foi removida. O termo Cor aparente designa no s a cor conferida por substncias dissolvidas, mas tambm a de matria em suspenso. A cor aparente determina-se na amostra sem filtrao. Nos casos em que h muita matria coloidal ou em suspenso, devem ser determinadas tanto a cor verdadeira como a cor aparente. Os mtodos comumente aceites para remover a turvao so a filtrao e a centrifugao. O primeiro pode interferir com a cor verdadeira e o segundo apresenta resultados que podem variar com a quantidade de amostra e condies de operao. Por estes motivos, deve ser referido o prtratamento utilizado na determinao da cor verdadeira. A cor verdadeira de uma gua provocada pelo slidos dissolvidos. No caso de terem origem natural so normalmente provenientes da decomposio da matria orgnica e ferro e mangans. Nos casos de colorao de origem antropognica as principais fontes so os resduos industriais e os esgotos domsticos. Estas substncias absorvem a radiao solar visvel, impedindo a sua penetrao na gua e reduzindo, em consequncia, a aco fotossinttica das espcies vegetais clorofiladas existentes no corpo receptor (particularmente as algas). A cor de uma amostra pode ser determinada por comparao visual, em que se compara a amostra com solues coradas de concentrao conhecida ou com peas calibradas de vidro colorido. O mtodo da platina-cobalto (ou do cloroplatinato) um mtodo em que a unidade de cor a conferida por uma soluo 1 mg/L de platina na forma de io cloroplatinato. As diversas tonalidades so conseguidas por diferentes propores de platina e cobalto. Este mtodo sobretudo adequado para gua potvel, em que a colorao presente devida a materiais naturais. Os efluentes fortemente corados devem ser analisados atravs de mtodos espectrofotomtricos. Sempre que necessrio efectuar diluies na determinao da cor, o resultado pode ser alterado j que a constituio qumica da amostra alterada.

Soluo-padro de cloroplatinato a 500 UC Espectrofotmetro UV-Vis Potencimetro e elctrodo de pH
6 bales volumtricos de 50 mL Pipetas automticas P1000 e P5000 Amostra de gua de rio Amostra de gua residual domstica
Preparar 6 padres de concentraes sua escolha a partir da soluo-padro de cloroplatinato fornecida, em bales de 50 mL, conforme indica a Tabela 1.
Tabela 1. Volume de soluo de cloroplatinato 500 UC a diluir a 50 mL para preparao dos padres Padro UC 5 10 15 20 25 30 40 50 Volume de Soluo-padro 500 UC (mL) 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 4,0 5,0
Ler a absorvncia dos padres a = 455 nm (entre 385 nm e 470 nm) e traar a curva de calibrao do espectrofotmetro absorvncia vs UC. Usar branco de gua destilada. Obtida a curva de calibrao, ler a absorvncia da amostra e obter a cor aparente. Filtrar ou centrifugar a amostra (se estiverem presentes matrias em suspenso), ler a absorvncia do filtrado e determinar a cor real. Se a cor exceder a gama de unidades dos padres deve proceder-se sua diluio.
Determine o pH da amostra.
Tratamento dos resultados Caso a amostra seja diluda (balo 50 mL), determine as unidades de cor da seguinte forma: Unidades = A*50/B
Em que
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A unidades de cor da amostra diluda; B mL de amostra diludos
Reporte os resultados arredondados da seguinte forma:

Unidades de cor 1-50 51-100 101-250 251-500 Arredondar (mais prximo) 1 5 10 20
Refira o pH da amostra
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T3. Determinao da Dureza em gua potvel e gua de rio

Introduo
A dureza total de uma gua definida como a soma da concentrao de clcio e magnsio presentes nessa gua., sendo expressa em mg/L de carbonato de clcio (CaCO3). Podem no entanto estar tambm presentes o Fe3+ e Si4+. O cido etileno-diamina-tetraactico (EDTA (MM = 372,24 g/mol)) forma complexos estveis com um grande nmero de caties, como por exemplo Ca2+, Mg2+, Ba2+, Cu2+, etc., sempre na proporo 1:1. Se se adicionar uma pequena quantidade de um corante como Eriocromo T, a pH 10 + 0,1, a soluo adquire a cor vermelho vinoso. Se se titular essa soluo com EDTA, os ies clcio e magnsio so complexados e, no fim da titulao (quando todos esses ies forem consumidos), a cor da soluo passa a azul. O ponto final da titulao tanto melhor definido quanto mais elevado for o pH. No entanto, no possvel aumentar o pH para valores demasiado altos devido possibilidade de precipitao de CaCO3 ou de hidrxido de magnsio (Mg(OH)2) e tambm porque o corante muda de cor a pH elevado. Os valores paramtricos de dureza de guas so: Macia 0 - 75 mg/L, Pouco dura 75 - 150 mg/L, Dura 150 - 300 mg/L e Muito dura > 300 mg/L. O valor expressa-se em mg de CaCO3 por litro de gua analisada. A determinao da dureza permanente faz-se aps precipitao e filtrao dos bicarbonatos (dureza temporria).

Placa de aquecimento 6 bales de Erlenmeyer de 250 mL 1 balo graduado de 100 mL 1 bureta de 25 mL 1 pipeta graduada de 1 mL
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1 pipeta volumtrica de cada uma das seguintes capacidades: 50, 25 e 100 mL (as duas ltimas destinam-se apenas a situaes em que seja necessrio utilizar um volume de amostra diferente) gua destilada recentemente fervida Soluo tampo: 67,5 g/L de cloreto de amnio (NH4Cl) e 114 mL/L de amnio a 22% em NH3. Soluo de cido clordrico (HCl) aprox. 1 mol/L Soluo indicadora de negro de eriocromio T Soluo titulante de EDTA Amostra de gua de rio Amostra de gua potvel recolhida no laboratrio
Procedimento experimental Dureza total

Medir 50 mL da amostra de gua para um Erlenmeyer de 250 mL. Adicionar 1 mL de soluo tampo e 6 gotas de soluo indicadora. Esperar cerca de 5 min antes de iniciar a titulao. Encher a bureta com a soluo titulante de EDTA e fazer-se a titulao, cujo ponto final detectado pela mudana de cor da soluo indicadora (de vermelho vinoso para azul). O volume de titulante gasto deve estar compreendido entre 1 e 5 mL. Se tal no acontecer, dever proceder-se a uma diluio ou utilizao de um volume superior de amostra, de forma a que o volume gasto de titulante esteja dentro do volume indicado. Realizar o ensaio em triplicado. Terminado o ensaio, lavar convenientemente a bureta e restante material de laboratrio.
Dureza permanente
Para um erlenmeyer de 250 mL mea 100 mL de amostra. Levar ebulio durante 20 a 30 minutos de forma a precipitar completamente os bicarbonatos correspondentes dureza temporria. No final arrefece-se a amostra rapidamente e transfere-se para um balo graduado de 100 mL. Completa-se o volume com gua recentemente fervida e fria. 13
Determina-se de seguida a dureza de forma idntica ao descrito para dureza total. Este ensaio no se realiza se o volume de titulante gasto na determinao da dureza total for inferior a 1 mL.
Tratamento dos resultados

Sendo: V volume de toma de amostra, expresso em mL V1 volume de soluo titulante gasto, expresso em mL
Calcule a dureza das vrias guas analisadas, exprimindo os resultados, arredondados s dcimas, da seguinte forma: Dureza em mg/L de CaCO3 = 1000 * V1/V Apresentando a mdia e desvio padro dos vrios ensaios realizados. Compare o valor obtido com referncias encontradas na legislao e/ou literatura.
Bibliografia
Norma Portuguesa NP-424 gua Determinao das Durezas (1966) Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20 ed (1999).
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T4. Determinao dos Nitritos em gua de rio e gua residual

Introduo
A importncia da presena de nitritos em guas, relaciona-se com o facto de ele constituir uma das formas intermdias da oxidao do azoto e, portanto, de estar relacionado com ciclo do azoto, e ainda por ser ele prprio nocivo para os humanos. O nitrito um composto instvel e pode oxidar-se ou reduzir-se conforme as condies do meio. O princpio do presente mtodo baseia-se na reaco entre o nitrito e a sulfanamida, em meio fortemente cido, originando um composto diazico vermelho, que absorve a 537 nm.

Pipetas graduadas Provetas Vidro de relgio Bales volumtricos de 50 mL Espectrofotomtro UV-Vis Reagente de diazotao juntar 800 mL de gua destilada 100 mL de cido fosfrico concentrado (H3PO4) e 40 g de sulfanamida (C6H8O2N2S). Agitar para dissolver e juntar 2 g de dicloreto de N-(1-naftiletilenodiamina) (C10H7NHCH2CH2NH2.2HCl). Agitar at dissolver completamente e completar o volume de 1000 mL. A soluo mantm-se estvel vrios meses se for conservada em frasco escuro, no frigorfico. Soluo j preparada. Soluo padro de nitrito (1 mg N-NO2/mL) pesar 492,9 g de nitrito de sdio e dissolver em gua destilada completando em balo graduado o volume de 1000 mL. Pipetar para outro balo de 1000 mL, 10 mL da soluo anterior e completar o volume com gua destilada. Soluo j preparada. cido clordrico (1:3) Amostra de gua de rio Amostra de gua residual
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Preparao da amostra se o pH da amostra for superior a 10 e a alcalinidade total superior a 600 mgCaCO3/l, ajustar o pH a 6,0 com cido clordrico. Curva de calibrao medir rigorosamente para bales volumtricos de 50,0 mL respectivamente: 0; 1; 2; 5; 10; 20; 30; 40 e 50 mL de soluo padro de nitritos. Completar o volume com gua destilada. Adicionar a cada balo 1,0 mL de reagente de diazotao; misturar bem e aguardar o desenvolvimento de cor durante 10 minutos; ler a absorvncias das solues a 537 nm Medir para um balo volumtrico de 50 mL, 50 mL de amostra, ou um volume menor, completando 50 mL com gua destilada, adicionar 1,0 mL de reagente de diazotao e aguardar 10 minutos antes de ler a absorvncia.

Calcule a concentrao de nitrito nas amostras analisadas. A concentrao de nitrito na amostra em mg N-NO2/L dada por: mg N-NO2/L = A x 50 /B
Sendo: A concentrao obtida a partir da curva de calibrao B volume de amostra tomada para anlise, expresso em mL
Compare o valor obtido com referncias encontradas na legislao e/ou literatura.
Bibliografia
ASTM, Annual Book of ASTM Standard, part 23, Philadelphia (1973) AFNOR, Recueil de Normes Franaises Eaux Method dessais, 2me edition, AFNOR Paris (1983) Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20 ed (1999). ISO 6777-1984 Water quality determination of nitrite molecular absorption spectrometric method
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T5. Determinao da Alcalinidade em gua potvel e gua de rio

Introduo
A alcalinidade de uma soluo uma medida do seu poder tampo. Esta propriedade est associada resistncia que a soluo tem a variaes de pH por adio de pequenas quantidades de cido ou de base. As solues-tampo so constitudas, habitualmente, por um cido ou uma base fracos e um sal da partcula conjugada, como por exemplo H2CO3/HCO3-, HCO3/CO32-, NH4+/NH3. A alcalinidade de uma gua corresponde presena de ies HCO3- e CO3- tambm HO-, podendo ser determinada volumetricamente por titulao com um cido forte (H2SO4 ou HCl), ou por potenciometria no caso das guas serem turvas ou coradas. O processo volumtrico requer o uso de dois indicadores cido-base, um com zona de viragem a cerca de 8-8,3 (fenolftalena) e outro com zona de viragem entre 4,2 e 5,4 (alaranjado de metilo). A maior parte das guas naturais de superfcie tem pH compreendido entre 6,5 e 7,5, sendo a alcalinidade sobretudo devida presena de quantidade de io hidrogenocarbonato. Quanto maior a quantidade deste io maior a alcalinidade e, por consequncia, maior a resistncia da gua a variaes do pH. A alcalinidade de uma gua pode ser classificada em simples e total:
2 Alcalinidade simples - corresponde ao teor em ies carbonato CO 3 e hidrxido
(OH ) . Neste caso, o indicador usado a fenolftalena, cuja zona de viragem inclui o pH do 1.
ponto de viragem.
2 Alcalinidade total - corresponde ao teor em ies carbonato CO 3 , hidrxido OH
e hidrogenocarbonato HCO3 . Neste caso, usa-se o alaranjado de metilo, cuja zona de viragem inclui o pH do 2. ponto de viragem.
No entanto, h incompatibilidade na presena simultnea de ies hidrxido (base forte) e hidrogenocarbonato (partcula anfotrica), dado que reagem segundo a equao:
OH (aq) + HCO3 (aq) H 2 O(l ) + CO32 (aq)

podendo resultar uma soluo contendo apenas io carbonato ou par conjugado
2 HCO 3 / CO 3 .
No incio da titulao existe uma soluo bsica rosada pela fenolftalena. Adicionando cido clordrico at viragem do indicador ocorre a transformao dos ies carbonato em hidrogenocarbonato:
CO32 (aq ) + H + (aq ) HCO3 (aq )
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Alm dos ies hidrogenocarbonatos provenientes da transformao anterior, na soluo, h ainda ies hidrogenocarbonato j existentes na gua que so titulados na presena do alaranjado de metilo, de acordo com a equao:
HCO 3 (aq) + H + (aq) CO 2 (g) + H 2 O(l)
As guas naturais podem no apresentar colorao rsea pela adio de fenolftalena pelo facto de terem uma concentrao muito baixa de CO 3 , tendo neste caso valor nulo de alcalinidade pela fenolftalena. As guas naturais podem muito raramente apresentar colorao alaranjada pela adio de alaranjado de metilo tendo neste caso valor nulo de alcalinidade pelo alaranjado de metilo. O processo qumico pode traduzir-se pelas equaes:
2
A titulao pode ser traduzida graficamente pela curva representada na figura que se segue.
At ao primeiro ponto de equivalncia gasta-se um volume V1 de titulante (soluo cida), correspondendo s reaces 1 e 2. Desde o incio do processo at viragem do alaranjado de metilo gasta-se um volume V2 de titulante.
Figura. Variao do pH em funo do volume de HCl adicionado.
Analisando a curva representada na Figura, se: o o o o o V1 = 0,00 mL a nica partcula presente na soluo ser HCO3V1 < V2, existe CO32- e HCO3V1 = V2 existe apenas CO32V1 > V2 existe OH- e CO32V1 = V2 s existe OH-
A alcalinidade expressa em miligramas de carbonato e clcio por litro de gua mg CaCO3 por litro de H2O, ou seja, ppm de CaCO3. Nos ecossistemas naturais a gua apresenta uma alcalinidade compreendida entre 20 e 200 ppm. Uma alcalinidade inferior a 10 ppm indica uma gua com fraco poder tampo, ou seja, incapaz de resistir a variaes de pH.
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Bureta Funil Erlenmeyers de 250mL Pipetas volumtricas de 100,00 mL Pipetador HCI 0,1 mol/dm3 Soluo alcolica de fenolftalena Soluo a 0,05% de alaranjado de metilo Amostra de gua de rio Amostra de gua residual
Procedimento experimental Determinao da alcalinidade pela fenolftalena ou alcalinidade simples

Preparao da amostra - Se a gua no estiver lmpida, filtrar rapidamente, de modo a limitar a aco do dixido de carbono do ar. Determinao - Colocar a bureta no suporte universal e lavar com gua desionizada. -Lavar e encher a bureta com soluo de HCI 0.1XXX mol/dm3 -Medir 100 mL da gua em estudo para o Erlenmeyer. -Adicionar 10 gotas de fenolftalena. Importante! Deve aparecer a cor rosa, caso contrrio, conclui-se que a alcalinidade fenolftalena nula e no se realiza a titulao. -Adicionar da bureta, gota a gota, a soluo titulante at desaparecimento da cor rsea. -Registar os volumes inicial e final de cada ensaio.
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Determinao da alcalinidade pelo alaranjado de metilo ou alcalinidade total

Preparao da amostra - Se a gua no estiver lmpida, filtrar rapidamente de modo a limitar a aco do dixido de carbono do ar. Determinao -Colocar a bureta no suporte universal e lavar com gua desionizada. -Lavar e encher a bureta com soluo de HCI 0,1 mol/dm3 -Medir 100 mL da gua em estudo para o Erlenmeyer. -Adicionar 5 gotas de alaranjado de metilo. -Adicionar da bureta gota a gota, a soluo titulante. O final da reaco detectado pela viragem da cor do indicador de amarelo para rsea. -Registar os volumes inicial e final de cada ensaio.

Determine a alcalinidade simples e total das amostras analisadas. A alcalinidade simples/total da gua expressa em mg CaCO3/L dada por:
Alcalinida de mgCaCO3 [HCl ] V (mL ) MCaCO3 1000 = L Vgua (mL )
Bibliografia
Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20 ed (1999).
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T6. Determinao do azoto amoniacal em gua residual e gua de rio

Introduo
A determinao do azoto amoniacal em guas engloba a quantificao das formas NH3 e NH4+. Como estas partculas formam um par cido-base conjugado, a quantidade relativa de cada uma delas existente numa dada soluo dependente do seu pH.
Tabela 1. Influncia do pH na relao entre a forma protonada e desprotonada da amnia pH % NH3 % NH4
+
6 0 100
7 1 99
8 4 96
9 25 75
10 78 22
11 96 4
Os dois principais factores a influenciar a escolha do mtodo de anlise do azoto amoniacal em amostras de gua so a presena de interferentes e a concentrao. Na maioria dos casos a determinao directa s possvel nos casos das guas de consumo, guas superficiais e subterrneas no contaminadas e efluentes em que foi realizada com sucesso a nitrificao. Nos restantes casos usual a realizao prvia de um passo de prvio de destilao. O mtodo da Nesslerizao baseia-se no facto de o reagente de Nessler (tetraiodomercurato) reagir com a amnia em meio alcalino e formar um composto corado amarelo, cuja intensidade de cor se mede entre os 400 e os 425 nm. A cor e a turvao das amostras podem interferir com esta determinao, bem como compostos que possam reagir nestas condies com o reagente de Nessler (como aminas, cetonas e lcoois). O mtodo da Nesslerizao directa, embora mais sujeito a interferncias, bastante mais expedito do que o da destilao prvia. aplicvel desde que no se pretenda uma preciso superior a 2 mg/L.

Material de vidro Pipetas volumtricas Pipetador Espectrofotmetro UV-Vis Cuvetes
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Potencimetro e elctrodo de pH Soluo de tampo borato - Juntar 88 mL de NaOH 0,1 N a 500 mL de soluo 0,025 N (9,5 g Na2B4O7.10H2O/L) de tetraborato de sdio, e completar o volume de 1000 mL. Soluo j preparada. Soluo de sulfito de sdio (0,9 g/L) Pesar 0,9 g de NaNO2 e dissolver em gua destilada. Completar o volume de 100 mL. Esta soluo deve ser preparada no dia. Soluo de NaOH 6 N Pesar 240 g de NaOH e dissolver em gua destilada. Deixar arrefecer e perfazer o volume de 1000 mL. Soluo j preparada. Soluo de NaOH 1 N Pesar 40 g de NaOH e dissolver em gua destilada. Perfazer o volume de 1000 mL. Soluo j preparada. Soluo de cido sulfrico 1N Pipetar 27 mL de H2SO4 concentrado com d=1,81 para um balo de 1000 mL contendo j cerca de 500 mL de gua destilada. Misturar bem e adicionar mais gua destilada at quase 1000 mL. Misturar bem, deixar arrefecer e completar 1000 mL. Soluo j preparada. Soluo de cido brico dissolver 20 g de H3PO3 em gua destilada, completar o volume de 1000 mL. Soluo j preparada. Soluo de sulfato de zinco dissolver, em gua destilada, 100 g de ZnSO4.7H2O e completar o volume de 1000 mL. Soluo j preparada. Soluo de EDTA dissolver 50 mg de EDTA em 60 mL de gua destilada contendo 10 g de NaOH. Se necessrio aquecer um pouco para facilitar um pouco a dissoluo. Deixar arrefecer e completar o volume de 100 mL. Soluo j preparada. Soluo de Rochelle dissolver 50 g de sal de Rochelle KNaC4H4O6.4H2O em 100 mL de gua destilada, ferver at reduzir o volume at 70 mL para eliminar a amnia que pode acompanhar o sal, deixar arrefecer e completar de novo o volume de 100 mL. Soluo j preparada. Reagente de Nessler dissolver 100 g de HgI2 e 70 g de KI em 75 mL de gua destilada, misturar bem com agitao suave (Soluo A); adicionar esta soluo a uma soluo j fria preparada por dissoluo de 160 g de NaOH em 500 mL de gua destilada (Soluo B). Completar o volume de 1000 mL e guardar em frasco de vidro escuro. Soluo j preparada.
Obs. Testar este reagente com uma soluo de amnia 0,1 mg N-NH4 /L. A colorao amarela deve aparecer ao fim de 10 min.
+
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Soluo padro de amnia dissolver em gua destilada 3,819 g de NH4Cl anidro e seco a 100 C, completar o volume de 1000 mL. Soluo j preparada. Amostra de gua de rio Amostra de gua residual
Destilao prvia Neutralizar previamente a amostra e adicionar 25 mL de tampo borato por cada 500 mL de amostra. Ajustar o pH a 9,5 com NaOH 6N. Para a destilao, medir 500 mL de amostra para um balo de destilao com um condensador vertical. Proceder destilao e receber o destilado (300 mL) em 50 mL de cido brico. Completar 500 mL com gua destilada. Preparao das amostras para a Nesslerizao directa adicionar 1 mL de soluo de sulfato de zinco por cada 100 mL de amostra para provocar a coagulao de substncias em suspenso. Adicionar soluo de NaOH 1 N at obter pH=10,5, agitar bem, deixar repousar e filtrar o sobrenadante. Padres de calibrao Medir, para bales volumtricos de 50 mL, respectivamente: 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 e 5,0 mL de soluo padro de amnia. Complete o volume com gua destilada. Para realizar a calibrao proceda como descrito no procedimento de determinao a seguir. Determinao Medir, em bales de 50 mL, 50 mL de amostra (tratada ou destilada se necessrio). Se existir clcio ou magnsio, adicionar uma gota de soluo de EDTA ou 1 ou 2 gotas de soluo de Rochelle. Misturar bem e juntar 2 mL de reagente de Nessler, no caso de ter usado a soluo de EDTA e 1 mL no caso de ter utilizado a soluo de Rochelle. Deixar desenvolver a cor durante 10 min e ler absorvncia a 410 nm. Analise as duas amostras disponveis com e sem tratamento prvio.
Nota todos os reagentes devem ser preparados com gua destilada isenta de amnia.

Determine, atravs da curva de calibrao, a concentrao de N-NH4+ nas amostras analisadas. A concentrao N-NH4+ nas amostras analisadas expressa em mg N-NH4+/L dada por:
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Amostras no destiladas
mg(N NH + ) / L = 4 50 A B
Sendo:
A - mg N-NH4+/L obtido por interpolao na curva de calibrao B Volume de amostra Nesslerizada (mL)
Amostras destiladas
+ mg(N NH4 ) / L =
50 A B CD
Sendo:
A - mg N-NH4+/L obtido por interpolao na curva de calibrao B Volume de destilado que se completou (mL) C Volume de destilado que se tomou (mL) D Volume de amostra Nesslerizada (mL)
Bibliografia
A. I. Vogel, Vogel, Anlise Inorgnica Quantitativa, 4a ed. (1981) Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20 ed (1999).
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T7. Determinao da Carncia Qumica de Oxignio (CQO) em gua residual e gua de rio
Introduo
A Carncia Qumica de Oxignio (CQO), tambm designada por COD (do ingls "Chemical Oxygen Demand"), usada como uma medida do oxignio equivalente fraco orgnica da amostra susceptvel de ser oxidada por um oxidante qumico enrgico. Outras anlises para a quantificao do carbono orgnico so a Carncia Bioqumica de Oxignio, CBO, e o Carbono Orgnico Total, COT. Para certos tipos de amostras, a CQO pode ser empiricamente relacionada com a CBO, e com o COT. Depois de estabelecida a correlao, esta anlise til para efeito de monitorizao e controlo. O mtodo do refluxo com dicromato prefervel a outros que usem outros oxidantes, devido sua maior capacidade de oxidao, aplicabilidade a uma grande variedade de amostras e facilidade de manipulao. A maioria dos compostos orgnicos oxidada em 95 % a 100 % do valor terico. A piridina e outros compostos do mesmo tipo apenas so oxidados enquanto estiverem em contacto com o oxidante. O amonaco, quer da amostra, quer o libertado a partir da matria orgnica que contm azoto, s oxidado na presena duma concentrao significativa de ies cloreto livres.
SELECO DO MTODO O mtodo do refluxo aberto o mais utilizado para uma grande variedade de amostras com valores de CQO entre 5 mg/L e 50 mg/L, no qual, de preferncia, se usam grandes volumes de amostra. Os mtodos de refluxo fechado so mais econmicos no que se refere ao uso de reagentes de sais metlicos, mas necessrio homogeneizar as amostras que contenham slidos suspensos para obter resultados reprodutveis. As ampolas e tubos de cultura com reagentes previamente medidos encontram-se disponveis comercialmente.
INTERFERNCIAS E LIMITAES Os compostos alifticos volteis de cadeia aberta so oxidados em pequena extenso. Isto ocorre em parte devido ao facto dos compostos orgnicos volteis estarem presentes no espao gasoso, no entrando em contacto com o lquido oxidante. Consegue-se uma oxidao
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mais efectiva destes compostos alifticos de cadeia aberta adicionando sulfato de prata (Ag2SO4) como catalisador. Contudo, o Ag2SO4 reage com o cloro, bromo e iodo originando precipitados que s so oxidados parcialmente. As interferncias devidas presena de haletos podem ser grandemente ultrapassadas, embora, pensa-se, no completamente, por complexao com sulfato de mercrio (HgSO4), antes de iniciar o refluxo. Embora seja aconselhvel 1 g de HgSO4 para 50 mL de amostra, pode-se usar uma quantidade menor, quando a concentrao de cloretos for inferior a 2000 mg/L, desde que se mantenha uma relao HgSO4/Cl- de 10/1. No use este mtodo para amostras que contenham Cl- em concentrao superior a 2000 mg/L. H outras tcnicas para determinar a CQO em guas salinas. Os nitritos (NO-) apresentam uma CQO de 1.1 mg/mg, expressa como massa de O2 por massa de azoto (NO2-- N). Esta interferncia normalmente considerada insignificante, e por isso desprezada, uma vez que as concentraes de NO2-- N nas guas, raramente excedem o valor de 2 mg/L. Para eliminar uma interferncia significativa devida ao NO2-, adicione 10 mg de cido sulfmico por cada miligrama de NO2-- N presente no volume de amostra usado; adicione a mesma quantidade de cido sulfmico ao recipiente de refluxo que contm o branco de gua destilada. As espcies inorgnicas reduzidas, tais como o io ferroso, sulfureto, mangansio, manganoso, etc., so quantitativamente oxidadas nas condies do ensaio. Para amostras que contenham quantidades significativas destas espcies pode assumir-se a oxidao estequiomtrica a partir da concentrao inicial das espcies interferentes, e corrigir o valor obtido para a CQO.
MTODO TITULOMTRICO REFLUXO FECHADO Este mtodo baseia-se no facto de a maioria dos compostos orgnicos serem oxidados por uma mistura de cido crmico e sulfrico, em ebulio. A amostra refluxada numa soluo fortemente cida, com uma quantidade conhecida de dicromato de potssio (K2Cr2O7) em excesso, na presena de um catalisador (Ag+). Aps a digesto, o dicromato de potssio no reduzido quantificado por titulao com sulfato de ferro e amonaco
e relacionada com o valor de CQO da amostra (6 mol de FAS, ou Fe2+, equivalem a 1 mol de dicromato ou 1,5 mol de O2)
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O tempo-padro de 2 h para o refluxo pode ser reduzido, quando se verificar que perodos mais curtos originam os mesmos resultados.

Material de vidro Pipetas volumtricas Amostra de gua de rio Amostra de gua residual Tubos de digesto - Use tubos de cultura de borossilicato, de 16 mm x 150 mm (so estes os disponveis nas aulas), 20 mm x 150 mm ou, ainda, 25 mm x 150 mm, com obturadores roscados revestidos com TFE. Como alternativa, use ampolas de borossilicato, com 10 mL de capacidade e dimetro entre 19 mm e 20 mm. Os graves danos que podem surgir nos obturadores da maioria dos tubos de cultura, durante o perodo de digesto, so uma potencial fonte de contaminao e aumentam as probabilidades de perda. S deve usar uma estufa para a digesto em tubo de cultura, depois de saber que 2 h de exposio a 150 C no danificam os obturadores. Confirme a qualidade dos tubos e rolhas, antes de os utilizar. S os tubos da marca Schott (tampa vermelha) podem ir estufa. No bloco de aquecimento tambm se podem usar os tubos de pirex (tampa escura). Bloco de aquecimento ou digestor de liga de alumnio, com 45 mm a 50 mm de altura, e com aberturas de tamanho suficiente para se ajustarem aos tubos de cultura ou ampolas. Para operar a 150 oC 2 oC. Soluo de digesto de dicromato de potssio, 0,0167 mol/L - adicione a aproximadamente 500 mL de gua destilada, 4,913 g de K2Cr2O7, reagente de grau 1, previamente seco a 103 C durante 2 h, 167 mL de H2SO4 concentrado e 33,3 g de HgSO4. Dissolva, deixe arrefecer at temperatura ambiente, e dilua at 1000 mL. Soluo j preparada. Reagente de cido sulfrico - adicione Ag2SO4 puro, em cristais ou em p, a cido sulfrico concentrado, na proporo de 5,5 g de Ag2SO4 para 1 kg de H2SO4. Deixe em repouso um ou dois dias, para dissolver o Ag2SO4. Este reagente e o anterior so fornecidos em dispensadores volumtricos. Verificar sempre se o volume est correctamente regulado. Soluo j preparada.
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Indicador de ferrona - dissolva 1,485 g de monohidrato de fenantrolina e 695 mg de FeSO4.7H2O em gua destilada, e dilua at 100 mL. De preferncia este indicador deve ser comprado j preparado. Soluo j preparada. Soluo titulante de sulfato de amnio ferroso (FAZ, do ingls) ~ 0.10 mol/L - dissolva 39,2 g de Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O em gua destilada. Adicione 20 mL de cido sulfrico concentrado. Arrefea e dilua at 1000 mL. Padronize a soluo diariamente com a soluo padro de dicromato. Soluo j preparada. cido sulfmico: s necessrio quando se pretender eliminar a interferncia de nitritos. Soluo-padro de hidrogenoftalato de potssio (KHP) - triture levemente e depois seque em estufa a 120 C, at peso constante, o hidrogenoftalato de potssio (HOOCC6H4COOK). Dissolva 212,5 mg em gua destilada e dilua at 1000 mL. O KHP tem uma CQO terica de 1,176 mg/mg, e a soluo anterior tem uma CQO terica de 250 mg/L. Esta soluo estvel durante 3 meses, se for guardada num frigorfico, e se no for visvel qualquer desenvolvimento biolgico. Soluo j preparada.
A amostra deve conter um valor de CQO inferior a 250 mg/L. Efectuar diluies caso necessrio. Analisar em duplicado. Lave os tubos de cultura e os obturadores com H2SO4 a 20%, antes de serem usados pela 1 vez, para evitar a contaminao. Recorra Tabela 1 para obter os volumes adequados da amostra e dos reagentes. Coloque a amostra no tubo de cultura ou ampola e adicione a soluo de digesto. Deite cuidadosamente o reagente de cido sulfrico, fazendo-o escorrer pela parede. Feche os obturadores dos tubos, ou sele as ampolas com firmeza, e inverta-os vrias vezes at que os reagentes se misturem completamente. Use o vrtex, at no se notarem diferentes fases. Assim, evita-se o aquecimento local no fundo do tubo e a possvel projeco do seu contedo. ATENO: Use uma proteco para o rosto (culos), e proteja as mos (luvas) do calor produzido enquanto mexe o contedo dos tubos ou ampolas. Cuidado com possveis respingos.
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Coloque os tubos, ou ampolas, previamente agitados no vrtex, no bloco de digesto ou estufa pr-aquecida a 150 C, e deixe refluxar durante 2 h. Deixe que arrefeam at temperatura ambiente e coloque-os no suporte para os tubos. Transfira o contedo de cada tubo para um gobl para a titulao (verta completamente e lave o tubo com gua destilada, vertendo a gua de lavagem no mesmo gobl). Adicione 1 ou 2 gotas de indicador de ferrona e uma barra de agitao magntica. Proceda titulao com FAS, 0,1 mol/L, mantendo a soluo com agitao. O ponto final detectado pela mudana de cor de azul esverdeado para castanho avermelhado. Proceda do mesmo modo (digesto e titulao) para o branco, que contm os reagentes e um volume de gua destilada igual ao de amostra, bem como para uma ou duas solues-padro de KHP. Para padronizar a soluo de FAS, titule uma mistura igual ao branco, mas sem digesto. NOTA: Os resduos desta anlise so despejados em recipiente prprio.

Calcule a CQO nas amostras analisadas atravs da seguintes expresso:
CQO(mg / L) =
(A B ) M 8000
E
sendo:
M= C 0,10 D
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A e B Volume de soluo de FAS, gasto a titular o branco e a amostra, respectivamente (mL) M Molaridade da soluo de FAZ (mol/L) C Volume de soluo de K2Cr2O7 (0,0167 mol/L) titulado (mL) D Volume de soluo de FAS, gasto na titulao da soluo anterior (mL) E Volume de amostra (mL)
Bibliografia
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T8. Determinao de sulfatos em gua residual e gua de rio

Introduo
O anio sulfato (SO42-) est amplamente distribudo nos meios naturais e, portanto, est naturalmente presente em guas naturais, podendo as suas concentraes variar desde alguns ppm at vrios milhares de ppm em algumas guas. Princpio O io sulfato (SO42-), por adio de cloreto de brio (BaCl) na presena de cido actico (CH3COOH) precipita sob a forma de cristais sulfato de brio (BaSO4) de tamanho uniforme. Os cristais formados podem ser detectados por turbidimetria, recorrendo ao uso de um nefelmetro ou de um espectrofotmetro. A radiao incidente desviada do seu percurso por coliso com os cristais de BaSO4. A quantidade de radiao desviada proporcional concentrao de cristais presentes na soluo, pelo que se consegue encontrar uma relao linear entre estas duas grandezas (numa determinada gama de concentrao). A presena de substncias coradas ou de partculas em suspenso ser uma fonte de interferncias para o mtodo. Este mtodo adequado para determinar sulfatos em gua na gama de 1 a 40 mg SO42-/L. Sendo um mtodo turbidimtrico, tanto a cor como a matria em suspenso afectam os resultados obtidos. Tambm a slica (> 500 mg/L) e a matria orgnica podem afectar a quantidade de sulfato de brio obtido por precipitao.

5 bales volumtricos de 50 mL 1 Pipeta volumtrica de cada uma das seguintes capacidades: 4, 7, 10, 12, 15 e 20 mL 5 Bales de Erlenmeyer de 100 mL para a preparao dos padres 2 Bales de Erlenmeyer de 100 mL/cada amostra a analisar Barra magntica Agitador magntico Espectrofotmetro ou nefelmetro Cronmetro Micro-esptula (0,2 a 0,3 mL de capacidade) Soluo tampo contendo 30 g/L de cloreto de magnsio (MgCl26H2O), 5 g/L de acetato de sdio (CH3COOH3H2O), 1,0 g/L de nitrato de potssio (KNO3), 0,111 g/L de sulfato de sdio (Na2SO4) e 20 mL/L de cido actico (CH3COOH) a 99%. Cloreto de brio (BaCl2) sob a forma de cristais 20 30 mesh
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Soluo padro de sulfato (SO42-) 100 mg/L Amostra de gua de rio Amostra de gua residual
Ligar o nefelmetro ou o espectrofotmetro, de acordo com as instrues de funcionamento. Se utilizar este ltimo, seleccionar o comprimento de onda de 420 nm. Fazer a leitura do zero com gua desionizada ou com amostra sem BaCl2, caso haja presena de cor ou turbidez.
Preparao dos padres A partir da soluo padro de SO42- 100 mg/L, preparar 5 solues padro (em bales volumtricos de 50,0 mL), com as seguintes concentraes em sulfato: 8, 14, 20, 24, 30 e 40 mg/L. Medir 50 mL do padro 1 para um matraz. Colocar a barra magntica dentro do matraz e iniciar a agitao da soluo. Adicionar 10 mL de soluo tampo e 1 medida de microesptula de cristais de cloreto de brio (BaCl2). Iniciar imediatamente a contagem do tempo com um cronmetro. Agitar a soluo durante 60 + 2 s a velocidade constante. Verter um pouco de soluo para uma cuvete, colocar no espectrofotmetro ou nefelmetro e medir a turbidez ao fim de 5 + 0,5 min. Repetir o procedimento anterior para todos os padres.
Preparao da amostra Preparar a amostra da mesma forma descrita anteriormente para os padres. Se a amostra tiver uma concentrao muito elevada, dever proceder diluio prvia adequada. Se houver matria em suspenso proceda sua filtrao. Cada amostra deve ser preparada pelo menos em duplicado.

Calcule a concentrao de SO42- na(s) amostra(s), apresentando a mdia e desvio padro dos vrios ensaios realizados. Compare o valor obtido com referncias encontradas na legislao e/ou literatura.
Bibliografia
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T9. Determinao da carncia bioqumica de oxignio em gua residual e gua de rio

Introduo
A Carncia Bioqumica de Oxignio (CBO, ou, do ingls, BOD) define-se como a quantidade de oxignio dissolvido, OD, habitualmente expresso com as unidades em mg/L, que consumido durante a oxidao biolgica aerbia da matria orgnica e/ou inorgnica, contida na amostra, aps incubao a 20 oC, em ambiente escuro. Este mtodo aplica-se a todas as guas cuja CBO seja igual ou superior a 3 mg/L, e no ultrapasse os 6000 mg/L. Para valores superiores o mtodo ainda aplicvel. No entanto, os erros decorrentes das diluies necessrias implicam que os resultados sejam encarados com precauo. Os resultados obtidos resultam de um conjunto de aces qumicas e bioqumicas, pelo que no possuem o carcter rigoroso e sem ambiguidade dos que se obtm atravs de um mtodo qumico, envolvendo processos bem determinados, como a CQO. No entanto, fornecem-nos uma indicao que permite avaliar a qualidade duma gua. A presena de certas substncias pode influenciar os resultados. Assim, substncias txicas para os microrganismos, como bactericidas, metais pesados ou cloro livre, podem inibir a oxidao bioqumica. As algas e/ou os microrganismos nitrificantes podem conduzir a resultados mais elevados. O mtodo baseia-se na determinao do OD (oxignio dissolvido) de uma amostra de gua antes e depois de incubada. A incubao, em frasco completamente cheio e rolhado, feita a uma temperatura controlada e na obscuridade, durante 5 dias. O clculo da massa de O2 consumida por litro de gua exprime a CBO5. Cada pessoa origina diariamente, em mdia, 50 g de CBO5. As guas naturais no poludas tm um valor de CBO5 normalmente compreendido entre 1 e 3 mg/L. Antes de se proceder incubao, a amostra de gua deve ser neutralizada e diluda com quantidades variveis de uma gua de diluio rica em OD e em microrganismos aerbios, com ou sem repressor da nitrificao, conforme o desejado. Devem ser executados, simultaneamente, ensaios de controlo do mtodo, utilizando uma soluo-padro de Glucose e cido glutmico. O oxignio dissolvido, OD, um dos parmetros mais importantes em sistemas aquticos, participando em processos biolgicos e qumicos de oxidao. um bom indicador da sade de um rio. A actividade microbiana crescente, por excesso de matria orgnica, torna o meio aqutico hostil macroflora e fauna natural (a truta morre se OD < 4 mg/L). Um sistema saudvel se OD = 0,90 ODsat, para temperatura e salinidade normais, mas muito poludo quando OD = 0,50 ODsat. Os ciprindeos exigem OD 5,0 mg/L, enquanto que os salmondeos, bastante mais exigentes, necessitam de OD 7,0 mg/L. Nas descargas muito poluentes so os salmondeos os primeiros a morrer.
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A temperatura influencia a concentrao de oxignio de saturao, sendo OD tanto menor quanto mais elevada for a temperatura da gua: a 10 oC (gua do mar), ODsat = 9,0 mg/L, mas ODsat= 6,7 mg/L, a 25 oC. A presso atmosfrica tem um efeito inverso, mas , normalmente, menos acentuado. Para processos biolgicos aerbios, o valor de referncia mnimo de OD anda volta de 4,0 mg/L, mas a sobressaturao, acima de 110 %, tambm pode ser prejudicial para a vida aqutica. Nos ensaios de campo, a medio de OD deve ser feita imediatamente, no local, registando-se tambm a temperatura e a presso atmosfrica, para posterior correco do valor. H sondas e registadores que j apresentam o valor de OD corrigido, apresentando-o tanto em percentagem de saturao, como em mg/L. Os contaminantes orgnicos provm de substncias orgnicas naturais, insecticidas, herbicidas e outros qumicos usados na agricultura. Efluentes urbanos e industriais tambm contribuem, em quantidades variveis. Efluentes industriais orgnicos txicos tm um duplo efeito negativo na vida aqutica. A CBO5 dum esgoto domstico, em mdia, no muito elevada, rondando os 300 mg/L. Os efluentes das indstrias de lacticnios, pelo contrrio, tm valores que facilmente atingem 3000 mg/L (dez vezes mais), podendo ser ainda bastante mais altos, dependendo do processo. O COT, mtodo bastante mais caro, d uma expresso mais directa, mais rpida e mais exacta do que a CBO (o mtodo mais lento) ou a CQO. Muitos compostos oxidados pelo dicromato no so biodegradveis, pelo que a CBO subestima o valor de oxignio necessrio para a oxidao completa. No entanto, h lcoois que o dicromato no oxida, mas so biodegradveis. A CQO tambm no d qualquer informao sobre a cintica (normalmente de primeira ordem) de degradao natural. Uma razo CBO/CQO elevada sugere uma grande proporo de material biodegradvel. Neste trabalho pretende-se utilizar o mtodo do OXITOP. Pela aco microbiana, a matria orgnica consumida e h consumo simultneo de oxignio. O CO2 que libertado absorvido em pellets de NaOH que se colocam na parte interior da tampa de frascos de incubao, onde o equipamento regista e armazena os valores de presso que se geram no headspace dos frascos. Se o volume de amostra for adequado sua concentrao e ao tamanho do frasco, a quantidade de oxignio que fica armazenado no headspace do frasco suficiente para que o seu decrscimo seja detectado e a partir dele se possa calcular a carncia bioqumica de oxignio ao fim de 5 dias (BOD5 ou CBO5). O mtodo baseia-se ento na medio da presso no espao gasoso do frasco de incubao, acima da amostra lquida, durante 5 dias, com registo dirio automtico desse valor. O valor da presso convertido em dgitos, entre 00 e 40. Valores entre 40 e 50 ainda so registados, mas j so valores pouco exactos. Os dgitos, multiplicados pelo factor correcto, permitem obter a CBO5, expressa em mg/L. O consumo de O2 reflecte-se num abaixamento da presso, que lhe proporcional. O CO2, resultante da oxidao do carbono, reage com NaOH, sendo anulado o seu efeito na presso. Este mtodo aplica-se directamente, a todas as guas cuja CBO seja inferior a 4000 mg/L.
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Tampas OxiTop Agitadores magnticos Placa de agitao Incubadora, WTW Model TS 606/2: Esta incubadora possui uma unidade de microcontrolo da temperatura (TMC Temperature Microcontrol Unit), que garante temperaturas estveis de 20 oC 1 oC. Quando se liga o interruptor, as quatro tomadas prova de choque do interior recebem potncia (230 V, 50 Hz); Medidores Oxitop: Existem medidores (iguais quanto ao funcionamento) de cor amarela e de cor verde. Fazem a medio da presso, por recurso a sensores electrnicos. A sua funo AUTO TEMP faz o controlo do ajuste da temperatura, e incio automtico da medio (entre 1h e 3h). A temperatura, T, das amostras deve situar-se no intervalo 15oC T 20oC. Durante os cinco dias de incubao, o Oxitop mede e guarda os valores da presso diariamente, e apresenta os dgitos correspondentes para o clculo da CBO. O valor actual o que aparece no medidor, depois de se pressionar o boto M, durante cerca de 1 s. Alm do M, tem apenas mais o boto S. Frascos de anlise vidro mbar (510 ml) Provetas Hidrxido de sdio (pellets) Amostra de gua residual domstica Amostra de gua de rio
Seleco do volume de amostra Medir um volume de amostra adequado para os frascos de incubao. A tabela 1 traduz a relao entre o volume de amostra e o factor de converso. Normalmente, as guas residuais domsticas no contm substncias txicas ou inibidoras do crescimento microbiano. Contm por norma sais minerais e microrganismo em quantidade suficiente. Sob estas condies, a determinao da CBO5 com o sistema Oxitop possvel sem que haja necessidade da diluio das amostras
Para escolher a gama de concentraes esperada estime o valor de CBO5 esperado para a gua residual a analisar (aprox. 80% do valor do CQO).
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Tabela 1. Volume de amostra e correspondente factor de converso.

Volume de amostra (mL) 432 365 250 164 97 43,5 Gama de concentraes esperadas (mg/l) 0-40 0-80 0-200 0-400 0-800 0-2000 Factor 1 2 5 10 20 50
Determinao Iniciar a medio premindo os dois botes simultaneamente, durante cerca de 2 s (at aparecer 00). Os valores armazenados de anteriores medies apagam-se. Colocar duas pastilhas de NaOH (ou equivalente noutro formato, numa quantidade de cerca de 400 mg) em cada frasco, por baixo do medidor, na zona alta da fase gasosa, dentro do pequeno saco de borracha, que tambm serve de vedante. Esta introduo tem por finalidade remover todo o CO2 que se forme no processo. No deve nunca sair do saco e ser misturado com a amostra, pois provocaria uma alterao drstica do pH. Fixe os medidores aos frascos de incubao, rodando at apertar bem. Colocar o conjunto nos tabuleiros magnticos da incubadora com uma barra magntica em cada frasco. Ligar os tabuleiros, atravs dos respectivos transformadores, s tomadas existentes no interior da incubadora. As amostras so identificadas pela posio nos tabuleiros e com etiquetas. Efectuar a leitura ao fim de 5 dias.

Calcule a CBO5 nas amostras, apresentando a mdia e desvio padro dos vrios ensaios realizados.
Para o clculo da CBO5, em cada frasco, basta multiplicar o valor dos dgitos do dia 5, pelo factor de converso correspondente (Tabela 1).
Bibliografia
Operation of the Single Measuring System Oxitop, Instruction manual, WTW (2004)
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T10. Determinao de fsforo total e solvel em gua residual e gua de rio

Introduo
O fsforo ocorre nas guas naturais principalmente sob a forma de fosfatos (ortofosfatos, fosfatos condensados, e fosfatos orgnicos) e pode encontrar-se dissolvido, em material particulado e nas clulas de organismos aquticos. As principais fontes de fsforo nas guas so: os tratamentos efectuados em algumas guas de consumo; as utilizaes domsticas e industriais (lavagem e gua de aquecimento); as aplicaes efectuadas nos terrenos agrcolas e a decomposio da matria orgnica. O principal problema associado com a presena de fosfatos na gua a eutrofizao que ele pode promover. As anlises de fsforo em gua compreendem dois tipos gerais de procedimentos de anlise: a determinao directa dos ortofosfatos dissolvidos e a converso das diferentes formas de fsforo existentes em ortofosfatos dissolvidos e sua subsequente determinao. A filtrao atravs de membrana de 0,45 m de dimetro de poro permite separar as formas dissolvidas (ou solveis) das formas suspensas. Os fosfatos que respondem directamente reaco colorimtrica denominam-se fosfatos reactivos e podem ocorrer quer na forma suspensa quer na dissolvida. A determinao dos fosfatos reactivos pode ser efectuada atravs do mtodo do cido ascrbico, em que o cido fosfomolbdico formado na reaco com os fosfatos reduzido pelo cido ascrbico, formando-se um composto azul fortemente corado. Com este mtodo e com clulas espectrofotomtricas de 1 cm de percurso ptico possvel dosear fsforo na gama de concentraes dos 0,15 aos 1,3 mg/L.

Membranas de filtrao de 0,45 m de dimetro de poro Sistema de filtrao por vcuo Material volumtrico Matrazes Espectrofotmetro cido sulfrico 5 N : diluir 70 mL de cido sulfrico concentrado a 500 mL com gua destilada soluo j preparada. Soluo reagente de antimoniltartarato de potssio (K(SbO)C4H4O6.1/2 H2O) dissolver 1,3715 g de K(SbO)C4H4O6.1/2 H2O em 500 mL de gua destilada soluo j preparada.
37
Soluo de molibdato de amnia: dissolver 20 g de (NH4)6Mo7O24.4H2O em 500 mL de gua destilada soluo j preparada. Soluo de cido ascrbico 0,1 M: dissolver 1,76 g de cido ascrbico em 100 mL de gua destilada; esta soluo estvel durante 1 semana a 4C soluo j preparada. Reagente combinado: para obter 100 mL de reagente combinado misturar 50 mL de H2SO4 5N, 5 mL de soluo de antimoniltartarato de potssio, 15 mL de soluo de molibdato de amnia e 30 mL de soluo de cido ascrbico. Misture bem pela ordem indicada e at obter soluo lmpida. Este reagente estvel durante 4 h. Soluo me de fosfato 50 mg P/L Indicador de fenolftalena Amostra de gua residual Amostra de gua de rio
A partir da soluo me, prepare 100 mL de uma soluo padro de fosfato 2,5 mg/L e de seguida prepare 5 solues padro (100 mL de cada) com concentraes desde os 0,15 aos 1,0 mg P/L. Filtre a quantidade suficiente de amostra de forma a poder determinar o teor de fsforo reactivo solvel e suspenso. Mea rigorosamente 50,0 mL de padro (ou amostra) para um matraz. Adicione 1 gota de indicador de fenolftalena. Caso a soluo fique rosa, adicione H2SO4 gota e gota at a soluo ficar incolor. Adicionar 8,0 mL de reagente combinado e agite. Aguarde 10 min. (30 min mx) e leia absorvncia a 880 nm, usando um branco de reaco para acertar o zero do espectrofotmetro no caso dos padres e a amostra sem reagente no caso da amostra. Repetir o procedimento anterior para todos os padres e de seguida para as amostras. Analise tanto as amostras como os padres em duplicado.

Calcule a concentrao de fsforo reactivo total e solvel na(s) amostra(s), apresentando a mdia e desvio padro dos vrios ensaios realizados. Compare o valor obtido com referncias encontradas na legislao e/ou literatura.
Bibliografia
38
T11. Determinao de cloro residual livre em gua potvel e gua de piscina

Introduo
A adio de cloro a guas e guas residuais tem como principal propsito destruir ou desactivar microrganismos patognicos. Um segundo benefcio, sobretudo no caso da gua potvel, advm do facto do cloro reagir com a amnia, ferro, mangans, sulfuretos e algumas substncias orgnicas presentes. No entanto, a clorao pode produzir tambm efeitos negativos, atravs da formao de compostos organoclorados carcinognicos. O cloro aplicado a guas, quer na forma molecular quer na forma de hipoclorito (ClO-), sofre hidrlise e origina em simultneo cloro livre, cido hipocloroso (HClO) e anio hipoclorito. A proporo relativa de cada uma destas espcies depende do pH e da temperatura, sendo que, ao pH da maioria das guas, predominam o cido hipocloroso e o hipoclorito.

Bales volumtricos de 100 mL Pipetas volumtricas Espectrofotmetro UV-Vis Soluo tampo de fosfato: Dissolver 24 g de Na2HPO4 e 46 g de KH2PO4 em 100 mL de gua destilada que contm 800 mg de EDTA. Completar com gua destilada at 1000 mL e estabilizar com 20 mg de HgCl2 soluo j preparada. Soluo de DPD (p-amino-N,N dietilanilina): pesar 1,5 g de sulfato de DPD (ou 1 g de oxalato de DPD), e dissolver em gua destilada, isenta de cloro, e que contm 8 mL de soluo de H2SO4 (1:3); adicionar 200 mg de EDTA, agitar e perfazer o volume de 1000 mL; guardar em frasco de vidro castanho; preparar no prprio dia soluo j preparada. Soluo me de permanganato de potssio dissolver 891 mg de KMnO4 em 1000 mL de gua destilada soluo j preparada. Amostra de gua da piscina Amostra de gua potvel
Preparar 100 mL de soluo A da seguinte forma: diluir 10 mL da soluo me de KMnO4 em 100 mL de gua. Paulo Herbert 39
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Preparao dos padres Preparar, em bales de 100 mL, uma srie de padres contendo respectivamente: 0,05; 0,5; 1, 2, 3 e 4 mg/L de cloro, sabendo que 1 mL da soluo A de KMnO4 quando diluda a 100 mL origina 1 mg/L de cloro em reaco com o DPD. Determinaes A 100 mL de amostra (ou padro) adicionar 5,0 mL da soluo tampo de fosfato e 5,0 mL de soluo DPD. No caso das amostras pode ser necessrio ajustar o pH a 6,2-6,4. Traar a curva de calibrao lendo absorvncias a 515 nm. Ler a absorvncia das amostras.
Preparar um branco contendo 100 mL de gua destilada e 5,0 mL da soluo tampo de fosfato e 5,0 mL de soluo DPD.

Calcule a concentrao de cloro livre na(s) amostra(s), apresentando, se possvel, a mdia e desvio padro dos vrios ensaios realizados. Compare o valor obtido com referncias encontradas na legislao e/ou literatura.
Bibliografia
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Qumica Ambiental

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CURSOS DE ESPECIALIZAO TECNOLGICA Anlises Qumicas e Biolgicas (ESTiG - IPB)

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Funcionamento das aulas:

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Material e mtodos Material e Reagentes

Procedimento experimental Slidos suspensos totais e volteis

Slidos dissolvidos totais

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T1B. Determinao da Condutividade em gua de rio e gua residual

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Material e mtodos Material e Reagentes

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T1C. Determinao da Turvao em gua de rio e gua residual

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Material e mtodos Material e Reagentes

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T2. Determinao da Cor (verdadeira e aparente) em gua de rio e gua residual

Material e mtodos Material e Reagentes

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A unidades de cor da amostra diluda; B mL de amostra diludos

Reporte os resultados arredondados da seguinte forma:

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T3. Determinao da Dureza em gua potvel e gua de rio

Material e mtodos Material e Reagentes

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Procedimento experimental Dureza total

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Tratamento dos resultados

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T4. Determinao dos Nitritos em gua de rio e gua residual

Material e mtodos Material e Reagentes

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Tratamento dos resultados

Compare o valor obtido com referncias encontradas na legislao e/ou literatura.

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T5. Determinao da Alcalinidade em gua potvel e gua de rio

OH (aq) + HCO3 (aq) H 2 O(l ) + CO32 (aq)

CO32 (aq ) + H + (aq ) HCO3 (aq )

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Figura. Variao do pH em funo do volume de HCl adicionado.

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Material e mtodos Material e Reagentes

Procedimento experimental Determinao da alcalinidade pela fenolftalena ou alcalinidade simples

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Determinao da alcalinidade pelo alaranjado de metilo ou alcalinidade total

Tratamento dos resultados