ESTERILIZACION

La esterilizacin puede definirse como la ausencia de todas las formas de vida viables. En la practica, la muerte de un microorganismo se alcanza cuando no es posible detectarlo en un medio de cultivo en el cual ha mostrado que es capaz de proliferar. Este crecimiento se observa mediante la aparicin de colonias en un medio slido o la presencia de una turbidez en un medio liquido. La esterilidad, como ausencia de todas las formas de vida en trminos absolutos y prcticos es inviable. El proceso de esterilizacin es un proceso dinmico que se ve influenciado por el grado inicial de contaminacin que puede tener el material de partida, as como por los equipos y condiciones de trabajo, que deben estar controladas adecuadamente para ser desfavorables a la introduccin y desarrollo de microorganismos

ESTERILIZACION
La inactivacin de los microorganismos mediante el empleo de procesos de esterilizacin implica un dao irreversible en algunas estructuras moleculares celulares. Por tanto la exposicin a los agentes esterilizantes puede producir deterioro del material que se va a esterilizar. Esto implica que se hace necesario establecer un equilibrio adecuado entre el mximo nivel de esterilidad aceptable y el mnimo nivel de efectos adversos producidos sobre el material que se va a esterilizar.

TECNICAS DE ESTERILIZACION
La esterilizacin de un producto se puede conseguir mediante el empleo de distintos procesos. La eleccin de la tcnica mas adecuada depende de las condiciones de estabilidad del producto que va a ser sometido a esterilizacin. En funcin del agente empleado, pueden clasificarse las t cnicas de esterilizacin en: 1. Esterilizacin por agentes fsicos 2. Esterilizacin por agentes qumicos La esterilizacin por agentes fsicos se clasifica a su vez en: a. Esterilizacin por calor b. Esterilizacin por radiaciones c. Esterilizacin por filtracin y manipulacin asptica En el caso de la esterilizacin por agentes qumicos se utiliza mediante el empleo de agentes gaseosos, oxido de etileno , la betapropiolactona y el formaldehdo.

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

El calor puede producir la muerte del microorganismo mediante cambios en la estructura qumica. Los daos producidos dependen del tipo de calor empleado. En presencia de agua (calor hmedo) la muerte de los microorganismos se puede atribuir a la coagulacin y desnaturalizacin de sus protenas esenciales, mientras que con calor seco la inactivacin del microorganismo es debida probablemente a procesos de oxidacin, que requieren temperaturas mas altas y tiempos de exposicin mas prolongados. El proceso de esterilizacin por calor se suele expresar mediante una expresin matemtica segn una funcin de probabilidad que indican que un ejemplar a menos de una muestra de 10 6 sea no estril, en estos procesos se deben conocer los siguientes parmetros:

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

a.-Constante de in activacin de microorganismos (K): El caso mas sencillo en las cinticas de destruccin de microorganismos es el de poblaciones homogneas cuya cintica de esterilidad se asemeje a una reaccin de primer orden. Esto implica que el logaritmo de la fraccin de microorganismos supervivientes (Nt/N0) disminuye linealmente con el tiempo de aplicacin del tratamiento de esterilizacin. b.-Valor D: El valor D puede definirse como el tiempo requerido para que la poblacin de microorganismos se reduzca en un 90%. Tambin es posible definirlo como el tiempo de exposicin necesario para que se produzca la disminucin de un ciclo logartmico en las curvas de supervivencia.

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

Tanto el valor D como la constante K son especificas para las condiciones en que se realiza el proceso de esterilizacin, siendo una medida de la resistencia de un microorganismo a un proceso particular de in activacin la relacin entre el valor D y la constante K se expresa segn la siguiente expresin:

D=

2,303 K

c.-Valor Q: El valor Q es la medida del cambio de la constante de in activacin del microorganismo con la temperatura y puede expresarse como el cociente entre dos constantes de in activacin a dos temperaturas que se encuentran separadas por 10C .

Q=

K K

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

d.-Valor F: Este parmetro es una medida de la letalidad de un proceso de esterilizacin con respecto a un microorganismo determinado. Este valor esta relacionado con el valor Z, que se define como el incremento de temperatura necesario para reducir el valor D en un 90%. Para una temperatura de referencia de 121C y un valor Z de 10C, el valor F se define como Fo, unidad de referencia de letalidad y puede ser determinado de acuerdo a la siguiente ecuacion:

Fo = D121 *(logNo logNt)

Donde D121: es el valor D a 121 C para las esporas de referencia, y No y Nt son el numero inicial y final de esporas viables, respectivamente. LA espora de B. steaothermophilus es empleada usualmente como microorganismo de referencia y presenta unos valores de Z y D de 10C y 1.5 min respectivamente, en soluciones acuosas.

EQUIPOS DE ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

Agua hirviendo Tindalizacin Esterilizacin bajo presin 1. Mtodo por agua hirviendo Este sistema no asegura un proceso de esterilizacin, por lo que no puede ser considerado un mtodo de esterilizacin propiamente dicho. Su utilizacin se reduce a un uso domiciliario como sistema de proteccin para biberones, tetinas y, en general para todo material que tiene un contacto directo con la boca de los bebes. El tiempo eficaz de desinfeccin se fija en unos 5 minutos, los artculos a esterilizar deben estar completamente limpios, y hallarse sumergidos por completo en el agua durante el tiempo que dura el proceso. No debe incluirse nuevo material a un ciclo ya iniciado.

EQUIPOS DE ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

2.- Tindalizacin: Se trata de un sistema de esterilizacin en condiciones de presin atmosfrica mediante el empleo de agua hirviendo. Consiste en calentar el medio liquido a una temperatura de 100 grados centgrados entre 20-45 minutos a lo largo de tres das sucesivos. En los intervalos de tiempo se produce la germinacin de esporas supervivientes antes de ser sometidas a un nuevo ciclo. En cada nuevo ciclo se destruyen las nuevas formas vegetativas formadas. Esta t cnica no se utiliza en la industria farmacutica, aunque si se emplea en algunos laboratorios de anlisis microbiolgicos.

EQUIPOS DE ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

3.- Esterilizacin con presin y temperatura: La eficacia del calor hmedo es debido a un proceso de condensacin que se acompaa de la liberacin de calor latente. Esta tcnica se caracteriza por un rpido calentamiento de la superficie y una buena penetracin en materiales porosos. La esterilizacin bajo estas condiciones se realiza en un autoclave. El autoclave consta de:

C mara del autoclave Instalacin perifrica Elementos de control

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

En general, todos los mtodos de esterilizacin poseen una capacidad limitada para la destruccin de microorganismos. Cada mtodo presenta unos requerimientos especficos. El mtodo de esterilizacin por calor hmedo es considerado el mtodo de eleccin siempre que las condiciones lo permitan. La esterilizacin de materiales porosos se suele realizar a altas temperaturas (134- 138 C) lo que permite la realizacin de ciclos de esterilizacin cortos. La esterilizacin de material quirrgico por calor hmedo se caracteriza por permitir la realizacin de ciclos de esterilizacin cortos al operar en un rango de temperaturas elevadas. Si se trata de materiales plsticos, el polietileno y el polipropileno son los materiales plsticos que pueden ser sometidos a estos procesos de esterilizacin. En este tipo de materiales no es recomendable repetir su esterilizacin.

CONTROLES DE LA ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

Sondas de temperatura y presin Disposiciones de las sondas de temperatura y presin en el interior del autoclave. Integridad de los filtros Bioindicadores Indicadores qumicos

ESTERILIZACION POR CALOR SECO

Es el m todo de esterilizacin para aquellos productos que son sensibles a la humedad pero resistentes a la temperatura, as como para aquellos materiales impermeables al vapor de agua. Este proceso es el de elecci n en la esterilizacin de ceras, aceites, parafinas, glicerol, y en general de todos aquellos fluidos no acuosos estables al calor. La esterilizacin por calor seco se puede realizar por distintos procesos: 1. Flameado 2. Horno o estufa de calor seco 3. Tnel de esterilizacin 1.- Flameado: Se trata de una operacin habitual en bacteriologa que se realiza de manera rutinaria antes y despus de proceder a la resiembra de un cultivo. Esta tcnica esta en desuso.

ESTERILIZACION POR CALOR SECO

2.- Estufas de calor seco: La transferencia de calor en estos equipos se da por medio de un mecanismo de conduccin. Se trata de un proceso por lotes (discontinuo). En este tipo de proceso es especialmente importante la colocacin de los materiales que vayan a esterilizarse de manera que permitan una correcta circulacin de aire entre ellos. Las fases del proceso son: 1. Fase de secado
2. 3. 4.

Fase de calentamiento Fase de esterilizacin Fase de enfriamiento

ESTERILIZACION POR CALOR SECO

3.- Tnel de esterilizacin: Se utilizan a escala industrial, en t neles que trabajan en continuo a temperaturas superiores a 250 C, que en determinadas zonas ascienden a mas de 300 C durante cortos intervalos de tiempo. La transferencia de calor se puede producir mediante radiacin infrarroja. Un ciclo de esterilizacin puede dividirse en las siguientes zonas: Zona de secado

Zona de calentamiento Zona de esterilizacin Zona de enfriamiento

ESTERILIZACION POR RADIACIONES

Las radiaciones son un mtodo fsico de esterilizacin. Se pueden clasificar en dos grupos: particularmente como son los rayos , rayos , protones y neutrones; y electromagneticos como los rayos X, los rayos y la radiacin ultravioleta (UV). La nica radiacin particular utilizada en la actualidad en esterilizacin son los rayos o electrones acelerados. Las radiaciones electromagnticas mas utilizadas en esterilizacin son la radiacin UV y los rayos . Los rayos , los X y los son radiaciones ionizantes mientras que la radiacin Uv carece de esta caracteristica.

ESTERILIZACION POR RADIACION UV

La radiacin UV comprende aquella porcin del espectro electromagntico con longitudes de onda desde 190 nm hasta 390 nm aproximadamente. Como la radiacin UV pasa a travs de la materia, los electrones de los tomos absorben energa, con lo que pasan a un estado altamente energtico y se ve alterada su reactividad. Aplicaciones: Se utilizan principalmente para reducir la contaminacin del aire, agua y de superficies de las zonas de procesamientos de productos farmacuticos. La eficacia germicida de la radiacin UV varia con la susceptibilidad de los organismos y es funcin de la intensidad de la radiacin y del tiempo de exposicin.

ESTERILIZACION POR AGENTES QUIMICOS

Esterilizacin por oxido de etileno: Es el esterilizante gaseoso mas ampliamente utilizado para dispositivos mdicos y en la industria farmacutica. El oxido de etileno ejerce su accin letal sobre microorganismos al producir la aniquilacin de molculas nucleofilicas que son esenciales para la reproduccin de la clula. Estas molculas nucleofilicas pueden ser aminocidos del ADN o ARN (Adenina Guanina), encimas proteicos. En general las esporas bacterianas muestran una mayor resistencia a la accin letal del oxido de etileno: son de 5 a 10 veces mas resistentes que las formas vegetativas. Aplicaciones: La esterilizacin de medicamentos con oxido de etileno esta limitada a algunos productos slidos compatibles qumicamente con el gas. Se utiliza sin embargo, de forma extensa para la esterilizacin de materiales plsticos y de acero inoxidable, artculos de goma e instrumental medico delicado.