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ENSAYO

El espermatozoide, desde la eyaculacin hasta la fertilizacin

Martha Olivera1,2, MV, Dr Sci Agr; Tatiana Ruiz1,2, MV, Ms, PhD; Ariel Tarazona1,2,Z,Ms; Carlos Giraldo1,2,MV, Ms.
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Fisiologa y Biotecnologa de la Reproduccin, 2Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Antioquia, A.A 1226, Medelln, Colombia. molivera@catios.udea.edu.co (Recibido: 23 de junio, 2006; aceptado: 14 de septiembre, 2006)

Resumen En los ltimos aos se ha hecho un inmenso progreso en el entendimiento de los mecanismos moleculares involucrados en la maduracin del gameto masculino y su trnsito desde la gnada hasta la fertilizacin del oocito. A lo largo de este trayecto el espermatozoide modifica su morfologa y sus componentes moleculares especialmente, y adems ocurren procesos que conducen a la activacin para la entrada al oocito, para activar a su vez los mecanismos que conducen a la formacin del zigoto. Este artculo presenta, a partir de la interpretacin de la literatura actual un modelo de los eventos que se suceden a partir de la eyaculacin hasta la fertilizacin, con nfasis en los mecanismos celulares y moleculares conocidos, y seala algunos vacos de informacin an existentes. Palabras clave: activacin, adhesin, capacitacin, fusin, reaccin acrosomal.

Generalidades sobre la produccin y anatoma espermtica en mamferos La clula germinal masculina se produce en la gnada (testculo) mediante un proceso permanente de divisin de las clulas germinales o espermatogonias. El proceso de divisin meitica denominado espermatognesis est controlado hormonalmente por el eje hipfisis-hipotlamognada. A partir de cada espermatogonia se producen cuatro espermatocitos haploides que permanecen unidos entre s por puentes citoplasmticos y a la vez estn en comunicacin con la clula nutricia o de Sertolli; estas ltimas, a partir de molculas sealizadoras, inducen el proceso denominado espermiognesis o metamorfosis que convierte las espermtides en espermatozoides.

Se reconocen cuatro fases caractersticas en esta transformacin: la fase de Golgi, la de capuchn, la acrosomal y la de maduracin. En la fase de Golgi, la organela del mismo nombre se acerca al ncleo, desprende vesculas que se le sobreponen y poco a poco se unen para convertirse en la vescula acrosomal que se localiza en la parte apical del ncleo (vase Figura 1). Los centrolos situados en forma de T, muy cercanos al aparato de Golgi, van migrando hacia lo que ser la base del ncleo. El centrolo proximal se sita en la parte basal del ncleo y, a partir del centrolo distal crece el axonema (vase Figura 1) conformado por dos microtbulos centrales y 9 pares de microtbulos perifricos. En la fase de capuchn, la vescula acrosomal se aplana formando una verdadera

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capucha sobre el ncleo. El ncleo se compacta mucho ms al cambiar las histonas por protaminas, de tal forma que no puede haber ni replicacin ni transcripcin (Fase G0 del ciclo celular). La inactividad transcripcional del ncleo hace que el espermatozoide sea dependiente de modificaciones postranscripcionales como la fosforilacin de protenas necesarias para adaptar su funcin de acuerdo a las necesidades. Las fosforilaciones ocurren desde las clulas germinales, casi siempre en los residuos de tirosina, distinto a otras clulas eucariticas en las que la mayora de las fosforilaciones ocurren en residuos de serina y treonina.

por desplazamiento del mismo hacia la pieza terminal de la cola originando la llamada gota citoplasmtica. El proceso de maduracin termina con la espermiacin, o liberacin de los espermatozoides a la luz del tbulo seminfero. Mediante movimientos peristlticos los espermas son transportados de la rete. testis a los ductos eferentes y de all al epiddimo en cuya cola se almacenan. Durante la eyaculacin los espermatozoides junto con el plasma seminal pasan por la uretra y a travs de movimientos peristlticos se liberan en el tracto genital femenino. La eyaculacin es el reflejo de expulsin de los espermatozoides y el plasma seminal fuera del tracto reproductivo. El reflejo eyaculatorio es el resultado de la estimulacin sensorial especialmente en el glande, lo que causa contracciones musculares coordinadas. Una vez se introduce el pene en la vagina se inicia el reflejo por impulsos que se transmiten del glande a travs del nervio pdico hasta la regin lumbosacra de la mdula espinal. As el semen es forzado a pasar a la uretra lo que induce la contraccin de los msculos uretrales, isquicavernosos y bulboespongiosos. El eyaculado contiene, adems, las secreciones de las glndulas anexas (vesculas seminales, prstata, glndulas bulbouretrales). Movimiento del flagelo El espermatozoide adquiere la capacidad de mover el flagelo en su trnsito por el epiddimo, pero el movimiento empieza despus de la eyaculacin. Este proceso es conocido como la activacin del esperma. El movimiento del flagelo es caracterstico y consiste en un bateo simtrico de la cola que hace que el espermatozoide se desplace en forma progresiva. El esperma pasa rpidamente a travs del cuello y el tero de la hembra; a 10 minutos de la deposicin del semen en el tracto femenino se encuentran espermatozoides en la unin tero-tubal (vase Figura 2). De aqu los espermatozoides pasan a lo que se conoce como el reservorio del oviducto (istmo) caracterizado por cilios luminales epiteliales y plegamientos de la mucosa que forman criptas (vase Figura 2). Los espermatozoides son retenidos en las criptas oviductales y all pierden los factores

Figura 1. Morfologa del espermatozoide y metabolismo energtico que realiza esta clula a partir de glucosa en la pieza principal y en la pieza media.

En la fase acrosomal la espermtide gira de tal forma que el acrosoma queda en direccin de la membrana basal; se depositan grnulos en el acrosoma, el citoplasma se desplaza hacia la base de la cabeza y se localiza por debajo de la unin ncleo axonema; las mitocondrias se agrupan alrededor de este ltimo en su parte cercana al ncleo, formando la pieza media. En esta fase el espermatozoide adquiere su morfologa definitiva. Finalmente se sucede la fase de maduracin, donde se observan las caractersticas finales de los espermatozoides: forma de la cabeza caracterstica de cada especie (oval y plana), cubierta en sus dos terceras partes por el acrosoma; y la cola compuesta por las piezas media, principal y terminal (vase Figura 1); en la pieza media se encuentran las mitocondrias en forma de hlice. En esta fase se elimina gran parte del citoplasma

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decapacitantes como mucopolisacridos y protenas que haban aportado las glndulas anexas; ste es el comienzo del proceso conocido como capacitacin (vanse Figuras 2 y 4), nombre que indica el potencial que adquiere el espermatozoide para hiperactivarse y para lograr la reaccin acrosomal. Este proceso se lleva a cabo en las

criptas del istmo donde se adosan los espermas, y termina con la liberacin del mismo hacia el mpula (vase Figura 2); aqu al encontrar el oocito ocurre el reconocimiento y la adherencia para que el espermatozoide empiece a atravesar la zona pelcida.

Figura 2. Secuencia de los procesos que sufre el espermatozoide en el tracto reproductivo de la hembra: 1) Activacin, 2) Capacitacin, 3) Hiperactivacin, 4) Reconocimiento entre gametos, 5) Reaccin acrosomal, 6) Adhesin y 7) Fusin.

Figura 3. Modelo de los eventos moleculares que inducen la activacin y la hiperactivacin del flagelo.

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Figura 4. Modelo de eventos moleculares que se suceden durante la capacitacin, el reconocimiento entre los gametos y la reaccin acrosomal.

Figura 5. Fertilizacin: adhesin y fusin.

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La reaccin acrosomal es un proceso de fusin de la membrana citoplasmtica externa, con la membrana acrosomal externa en la zona apical de la cabeza; de aqu se liberan enzimas que estaban almacenadas dentro de esta vescula exoctica, esto es fundamental para el paso a travs de la zona pelcida. Cuando el espermatozoide alcanza el istmo del oviducto inicia un movimiento asimtrico, amplio y acelerado del flagelo (caracterstico de la hiperactivacin), lo que lo lleva a moverse en crculos y lo ayuda a liberarse de las criptas oviductales para avanzar a travs del lumen y alcanzar el mpula, atravesar el cmulus ooforus (clulas de la granulosa que rodean el oocito) y aponerse a la zona pelcida donde es reconocido (reconocimiento entre gametos) (vanse Figuras 2 y 4). Una vez que el espermatozoide alcanza el espacio perivitelino, se produce la adherencia (vase Figura 5) entre la membrana plasmtica de la zona ecuatorial espermtica y las microvellosidades de la membrana citoplsmica del oocito; luego se fusionan las dos membranas (vase Figura 5); y de esta manera el ncleo y dems organelas de la clula espermtica ingresan al ooplasma del oocito. Los depsitos de Ca++ almacenados entre la teca perinuclear y el ncleo del espermatozoide son liberados al ooplasma, junto con la oscilina (factor espermtico), que es una protena espermtica muy parecida a la enzima bacterial isomerasa glucosalina 6 fosfato (GNPI) o a la deaminasa (GNPDA). A este factor se le atribuye la accin de inducir las oscilaciones de calcio que conducen a la activacin del oocito. Esta activacin comprende: oscilaciones intracelulares de Ca++, la expulsin del segundo cuerpo polar, la formacin del proncleo femenino, el reemplazo de las protaminas por histonas en el ncleo espermtico, la formacin del proncleo masculino y la ubicacin del centrolo espermtico para formar el aster masculino que es necesario para la migracin de su proncleo. Las oscilaciones de Ca++ inducen tambin la exocitosis del contenido enzimtico de los grnulos corticales almacenados en la periferia citoslica del oocito, modificando tanto la zona pelcida como la membrana del oocito, para prevenir la poliespermia.

Activacin e hiperactivacin La movilidad del esperma se desencadena por cambios en el medio inico extracelular, por interaccin con ligandos especficos y por glucosa, presentes en el lquido seminal y en el tracto reproductivo femenino; estos cambios inducen seales citoslicas flagelares, a travs de la fosforilacin de protenas, de canales de Ca++ y de vas dependientes de nucletidos cclicos (GMPc y AMPc) (vase Figura 3). Los ligandos especficos ms conocidos son: la progesterona y el esteroide sulfatado SAAF (Sperm Activating and Attracting Factor) que inducen la entrada de Ca++; el pptido activador de espermatozoide (PAS) y el pptido atrial natriurtico (PAN) que actan, ya sea por medio de un receptor de membrana, o por activacin directa de la guanilil ciclasa ligada a membrana (GCm). Otros ligandos especficos son los factores de tipo olfatorio y odorante (hOR17-4) producidos por el oocito para inducir la quimiotaxis del espermatozoide. Los cationes y los aniones tambin juegan un papel importante en la modulacin de la movilidad espermtica, el efecto mayor se atribuye a cationes tales como Ca++, Na+, K+ y H+. El trnsito de estos cationes inducido por diferencias de concentracin extra e intracelular, lleva a cambios en la composicin inica intracelular y subsecuentemente a cambios en el potencial funcional y de movilidad del espermatozoide. Los cambios que produce la glucosa se describirn ms adelante. La activacin se desencadena cuando las seales extracelulares de las que hablamos anteriormente activan las ciclasas, lo que produce un aumento transitorio de GMPc, de AMPc y la activacin de la guanilil ciclasa transmembranal (GCm) o soluble (GCs). La GCm se activa por la unin del pptido PAS a su receptor, o por el aumento en la concentracin de GMPc; a la GCs la activa el xido ntrico (ON) producido por accin de la xido ntrico sintasa. Consecutivamente se abren los canales de K+ dependientes de GMPc, lo que provoca la salida de K+ con la consecuente hiperpolarizacin de la membrana espermtica dependiente de AMPc.

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La hiperpolarizacin activa el intercambiador de voltaje dependiente Na+/H+ con la consecuente salida de H+ lo que induce la alcalinizacin del citosol y activa las dinenas (vase Figura 1). El aumento de AMPc se debe a la activacin de la adenilil ciclasa de dominio transmembranal (ACm), y a la activacin de la fosfodiesterasa (PDE), reguladas, a su vez, por la subunidad alfa de la protena G y por Ca++ /CaM (calmodulina) respectivamente. La forma soluble de la adenilil ciclasa (ACs) tambin produce AMPc, y en mayores cantidades que la ACm debido a que es independiente de protena G. Esta ACs es dependiente de bicarbonato (HCO3-), que ingresa por mediacin del cotransportador Na+/HCO3-. El Ca++ tambin ingresa a travs del CatSper (canales catinicos especficos del esperma). El siguiente paso en la activacin de la movilidad flagelar es la fosforilacin y la defosforilacin de tirosinas, mediadas por la protena quinasa dependiente de AMPc (PKA) (vase Figura 3). La subunidad cataltica de la PKA, posee una estructura nica y especfica en el espermatozoide y parece que se encuentra anclada a los microtbulos. La PKA est ubicada muy cerca al brazo de dinena externo y esto podra explicar la rpida fosforilacin que sufren los polipptidos de la cadena liviana de este brazo (Tctex-2) en el momento de la activacin de la movilidad. Estas PKA se fijan en dominios de algunas de las protenas relacionadas con la activacin y candidatas a ser fosforiladas; ellas son 1) las hexoquinasas, 2) las AKAP (AKAP 82, AKAP 220, AKAP 110, AKAP 3, AKAP 4, AKAP 97). Las AKAP estn presentes en los radios y los pares de microtbulos externos del axonema; la AKAP 82 se ha encontrado en abundancia en la capa fibrosa del flagelo (pieza principal) (vase Figura 1), 3) una protena no caracterizada de 15 kDa en la base de flagelo y 4) la glicgeno sintasaquinasa. La defosforilacin de las protenas est a cargo de fosfatasas entre otras la tipo B2 dependiente de Ca++, que fue encontrada unida al axonema y relacionada con la regulacin de la fosforilacin de la dinena. El espermatozoide, activado y capturado por las microvellosidades del istmo del oviducto (vase

Figura 2), se capacita, y esto desencadena seales intracelulares que inducen la hiperactivacin (vanse Figuras 2 y 3). La activacin y la hiperactivacin utilizan mecanismos moleculares similares para generar el movimiento del flagelo cuyo eje funcional es el axonema y cuya protena motora principal es la dinena (vase Figura 1). El axonema, adems, est compuesto por microtbulos, molculas chaperonas, protenas fijadoras de calcio y protenas quinasas/fosfatasas. Es una estructura de 9x2 pares de microtbulos que corre a lo largo del flagelo rodeado, en la pieza media, por mitocondrias y capas de fibra densa; en la pieza principal est rodeado por una capa fibrosa, y en la final est en contacto directo con la membrana plasmtica (vase Figura 1). El movimiento del flagelo se da por la activacin de los complejos de ensamble y de regulacin de dinena; el ATP provee la fuerza que se requiere para el deslizamiento entre los brazos y los microtbulos, y la hidrlisis del mismo, junto con la ruptura de la unin entre el microtbulo B. La dinena garantiza que el movimiento contine como reaccin en cadena de los nueve pares de microtbulos externos generando el movimiento en forma de bateo. Simultneamente se dan fenmenos de fosforilacin y defosforilacin asociados a la unin del brazo externo del microtbulo A, al microtbulo B del brazo adyacente. El par de microtbulos centrales con dominio AKAP, dirigen el plano de inclinacin flagelar, enviando seales a los radios que regulan el brazo interno de dinena por medio de fosforilacin/defosforilacin de protenas. Los radios estn compuestos por 22 polipptidos con una protena de 97 kDa con un dominio AKAP en su base. El par de microtbulos centrales al dirigir el plano de inclinacin, determinan la asimetra de la onda de movimiento flagelar,caracterstica y diferencial de la hiperactivacin. La capa fibrosa de la pieza principal (vase Figura 1), est compuesta por al menos 18 polipptidos y parece servir como andamio de algunas enzimas en el metabolismo energtico, y como molcula de seal para desencadenar la movilidad espermtica. Esta capa est compuesta

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por varias protenas, entre ellas la hexoquinasa y las AKAP 3, AKAP 4, AKAP 80; relacionadas con la fosforilacin de tirosina de otros componentes de la capa fibrosa. El metabolismo energtico a partir de glucosa (vase Figura 1) es requerido para la activacin del axonema e incluye la produccin y regeneracin de ATP y de intermediarios como el NADPH, necesarios para las vas de sealizacin interna, que conducen a la fosforilacin de las protenas flagelares al movimiento. El ingreso de glucosa al citosol se da a travs de transportadores como el GLUT3 en la pieza intermedia o el GLUT8 en la regin acrosomal, o por reservas endgenas en forma de glicgeno. La glucosa es transformada en glucosa6- fosfato por la enzima hexoquinasa, para generar ATP o NADPH, por una de tres vas, dependiendo del dominio del flagelo: la glicoltica, la va pentosa fosfato y la va mitocondrial de la fosforilacin oxidativa; sta ltima fuente principal de ATP (vase Figura 1). El NADPH est involucrado en reacciones de oxido-reduccin y es requerido para enzimas como la oxidasa que genera superxido y la oxido ntrico sintasa que genera xido ntrico. La hiperactivacin del flagelo se debe al Ca++ que se fija a sus protenas fijadoras en el brazo externo de la dinena, lo que induce el movimiento asimtrico. Este Ca++ proviene de varias fuentes: de las reservas intracelulares de Ca++ (RIC) mediada por los receptores de inositol 1,4,5 trifosfato (IP3), del Ca++ proveniente de la mitocondria o de la teca perinuclear (vase Figura 3) o del Ca++ que ingresa gracias a sistemas antiporte Na+/H+ y Na+/Ca++ +. Adems del calcio, la hiperactivacin requiere de AMPc, cuya produccin parece estar modulada por las especies reactivas de oxgeno (ROS), entre las que se encuentran el superxido (SO) y el xido ntrico ON (vase Figura 3). El superxido se origina en el transporte de electrones en la mitocondria y es trasformado a perxido de hidrgeno por la enzima superxido dismutasa (SOD). Este perxido activa la adenililciclasa de membrana, que acta corriente arriba en la ruta de PKA, para que sta fosforile algunas protenas flagelares. (vase Figura 3).

La capacitacin El espermatozoide, en la cola del epiddimo y en el vas.deferens, sufre cambios en los dominios de los esteroles de membrana, en la cabeza y en la cola, confirindo una distribucin heterognea de los mismos a los largo de toda la membrana. Estos dominios llamados complejos de esterolcaveolina, sirven como andamio en la membrana para acoplar protenas que inducirn diferentes rutas de sealizacin. En la cabeza hay dos subdominios de membrana plasmtica, la acrosomal y la subacrosomal. La primera cubre la regin del mismo nombre y se caracteriza por presentar islas de composicin ordenada de colesterol y esfingolpidos anclados a caveolinas, inmersas en una membrana de composicin desordenada. La segunda, o regin subacrosomal, es rica en fosfolpidos. Las islas juegan un papel importante en la compartamentalizacin de las vas de sealizacin en regiones especficas de la clula; son diseos prefabricados durante la espermatocitognesis ya que, como se mencion anteriormente, el espermatozoide, una vez en el lumen testicular, no puede transcribir ni traducir. La capacitacin, se caracteriza por la salida de colesterol de la membrana y el ingreso de Ca++ y HCO3- al citosol (vase Figura 4). El fluido oviductal es rico en albminas y HDL, capaces de retirar el colesterol de la membrana del esperma, lo que la hace ms fluida al producir la ruptura de la unin de las caveolinas con las protenas de fusin; estas ltimas al quedar libres forman complejos de sealizacin de fusin de membranas (reaccin acrosomal); el aumento de la fluidez tambin permite que protenas integrales puedan interactuar con las protenas ancladas a membrana. La prdida de colesterol favorece adems la translocacin de algunas protenas a la zona ecuatorial, donde son necesarias para que el espermatozoide posteriormente pueda adherirse al oocito. La salida de colesterol durante la capacitacin tambin induce la activacin de los canales de Ca++ dependientes de voltaje y de los canales de HCO3-. El ingreso de ste ltimo al citosol, activa la

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adenililciclasa dependiente de HCO3- (ACs) que aumenta las concentraciones de AMP cclico, activando, a su vez, la protena quinasa A1 (PKA1); esta ltima fosforila algunas protenas en los residuos de serina desencadenando la fosforilacin de las tirosinas de otras protenas citoslicas. La PKA1 tambin activara en la membrana acrosomal externa un canal de Ca++, con el consecuente aumento de las concentraciones citoslicas de este catin, las cuales gradualmente activan la fosfolipasa C acoplada al receptor del factor de crecimiento epidermal.

capacitante en la membrana citoplasmtica (vase Figura 4). El receptor de TK y la protena G, pueden activar un intercambiador de Na+-H+ en la membrana plasmtica, lo que alcaliniza el pH citoslico. El incremento de Ca++regula su propia salida tanto en la membrana plasmtica como en la acrosomal, mediante la activacin de canales de Ca++, dependiente de ATP, y con la activacin de los intercambiadores Na+- Ca++. La PKA fosforila los residuos de serina de las protenas (PSP); stas, a su vez, fosforilan los residuos de tirosina de las protenas citoslicas que junto con el aumento del pH y de Ca++ citoslico, permiten la fusin de membranas (citoplasmtica y acrosomal externa) (vase Figura 4), y de esta manera se produce la exocitosis del contenido enzimtico del acrosoma. El esperma atraviesa la zona pelcida (ZP) y alcanza el espacio perivitelino, los mecanismos involucrados en este paso an se desconocen. Para evitar la poliespermia se suceden dos mecanismos, uno inmediato que es el cambio de potencial de membrana del oocito, que a su vez cambia la polaridad interna de la ZP; y otro subsiguiente que es la remodelacin de la ZP, que ocurre por exocitosis del contenido enzimtico de los grnulos corticales al espacio perivitelino; esta exocitosis est regulada por PKC dependiente de factores lipdicos e independiente de los iones de calcio. Se han identificado dos poblaciones de grnulos corticales que son liberados a tiempos y en lugares diferentes: el primer grupo, se libera durante la expulsin del primer cuerpo polar y el segundo muy cerca del sitio en donde comienza la citoquinesis de la primera divisin celular. El mecanismo propuesto para la remodelacin de la zona pelcida, es a partir de la alteracin de los residuos de galactosa alfa y beta de la misma, particularmente las enzimas hidrolticas y las glicoprotenas liberadas por los grnulos corticales. Los residuos de GlcNAc de la ZP3 que contiene la zona pelcida (receptores de la Galtasa espermtica) seran removidos por la N-acetilglucaminidasa, una de las enzimas que contienen los grnulos corticales, lo que no permitira que ms espermatozoides se adhirieran a la ZP3.

Interaccin espermatozoide zona pelcida y reaccin acrosomal La zona pelcida expone glicoprotenas de reconocimiento (vase Figura 4) que interactan con la membrana del espermatozoide de varias formas: protena protena, donde se reconoce el receptor de 95KDa del esperma (receptor tirosina quinasa, TK); y protenacarbohidrato para el reconocimiento de la Galtasa como receptor acoplado a protena G, que se une a la N acetil glucosamina de la ZP3. Una vez que acoplan estas molculas se activa la fosfolipasa C 1 (PLC1) por una parte y, por la otra, posiblemente se activa la adenilil ciclasa, con el subsecuente aumento los niveles de AMP cclico que activaran la protena quinasa A (PKA), y permiten la apertura de un canal de Ca++, voltaje dependiente, en la membrana acrosomal externa. Este pequeo incremento de Ca++ intracitoplasmtico activa la fosfolipasa C que se une al receptor de tirosina quinasa para inducir una ruta de sealizacin va PIP2. Cuando se da la interaccin protenacarbohidratos, el receptor unido a protena G, activa la fosfolipasa C1, lo que induce la hidrlisis del fosfatidil inositol difosfato (PIP2) con generacin de diacil glicerol (DAG) e inositol trifosfato (IP3). El DAG activa la proteina quinasa C, lo que lleva a la apertura de un canal dependiente voltaje en la membrana plasmtica y permite el ingreso de altas cantidades de Ca++. El IP3 y la PKA abren un canal en la membrana acrosomal externa, lo que lleva a la deplesin del Ca++ en el espacio intraacrosomal, y esto activa el canal de Ca++

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La adhesin del espermatozoide y la fusin de las membranas oocito-esperma Las vellosidades del oocito tienen integrinas 6 y 1 (vase Figura 5), a las que se adhiere el espermatozoide mediante la exposicin de protenas como la fertilina y y ciritestina, (protenas de la familia ADAMS con dominios disintegrina y metaloproteasa). Recientemente se han candidatizado las protenas de anclaje del oocito CD9 y glicosilfosfatidil inositol (GPI) y la protena epididimal DE, en el espermatozoide, como las molculas candidatas a ser las responsables de la fusin membranal entre el esperma y el oocito. Sin embargo an no se han podido analizar claramente las interacciones protena-protena en esta fusin, por lo que el mecanismo molecular permanece sin dilucidar. La fusin de membranas contina a travs (vase Figura 5) de una protena presente en el oocito, de la familia de las tetraspaninas conocida como CD9. Esta protena se caracteriza por tener cuatro dominios transmembranales y dos bucles extracelulares; en el mayor de estos bucles se fijan los complejos de fusin del esperma. Las microvellosidades se encuentran por toda la superficie del oocito, exceptuando la zona por donde se expulsar el segundo cuerpo polar. Al fusionarse las membranas del oocito y del esperma se libera, del Glosario: abreviaturas usadas en las figuras
MP: membrana plasmtica MAE: membrana acrosomal externa Ca++: in calcio PTP: Protena tirosina fosfatada PSP: protena serina fosfatada PKA1:Protena quinasa A1 AMPc: adenosin monofosfato cclico ATP: adenosin trifosfato ADP: adenosin difosfato Pi: fsforo inorgnico HCO3: in bicarbonato sAC: adenilato ciclasa activada por bicarbonato Na+: in Sodio CO2-: in dioxido de carbono Cl-: in cloro EGF: factor de crecimiento epidermal

espermatozoide, una molcula de superficie que parece ser una protena de 30-100 kDA llamada oscilina o factor espermtico, que activa el oocito produciendo la liberacin de Ca ++ en forma de ondas (vase Figura 5). Cada vez que se sucede una onda de Ca++, cambia su concentracin intracitoplasmtica de 50 a 600-1000 nmol/litro. Estas ondas se dan peridicamente cada 2 - 30 minutos dependiendo de la especie y pueden durar varias horas. El inicio de las ondas de Ca++ induce la activacin del oocito que termina con la formacin de los proncleos. En los cambios que ocurren en el oocito para que se libere el Ca++ intracelular y se produzcan los eventos corriente abajo, podran estar involucradas las quinasas de la familia de las Src (Src-K); entre stas la c-Fyn, y la c-Yes que estn distribuidas en la corteza del oocito (vase Figura 5). La c-Fyn tambin se encuentra alrededor del huso mittico; la activacin de esta quinasa resulta en la activacin de la fosfolipasa C (PLC) que cataliza la hidrlisis del PIP2 a DAG e IP3. IP3 acta en el receptor de IP3 (IP3R) que se encuentra en el retculo endoplsmico y hace liberar el calcio. El mismo calcio participa en su autorregulacin y junto con otros moduladores del receptor de IP3 induce las oscilaciones intracelulares descritas, y que tienen como objetivo la activacin del oocito. Sin embargo, cmo se activan las Src-K es una pregunta que se permanece sin respuesta.

PLC : Fosfolipasa C gamma PIP2: Fosfatidil inositol difosfato DAG: Diacil glicerol IP3: Inositol trifosfato GALtasa:Galactosil transferasa TK: tirosina quinasa G1: protena G CCE: Calcio capacitante CaM: calmodulina CaMK: calmodulina quinasa REnd: retculo endoplsmico Ubiq: ubiquitina MPF: factor promotor de la maduracin CD9: receptor familia citoquinas DE: protena epididimal

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GPI: glicosil fosfatidil inositol, protena de anclaje AKAP: Protenas de dominios de fijacin de PKA PAN: Pptido Atrial Natriurtico. PAS: Peptido Activador de Esperma. ON: xido Ntrico. ACm: Adenil Ciclasa de Membrana. GCm: Guanil Ciclasa de membrana. CaM: Calmodulina. ACs: Adenil Ciclasa Soluble. PKA: Protena quinasa dependiente de AMPc PTK: Proteina Tirosina Quinasa. CCp: Canal de Calcio Putativo. PLC Fosfolipasa C

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IP3: Inositol Trifosfato. RCaIC: Reserva de Calcio Intracitoplasmtico P4: progesterona SAAF: Factor espermtico de activacin y atraccin (sperm activating and attracting factor) PASA: pptido activador de espermas GCm: Guanil Ciclasa ligada a membrana hOR17-4: factores odorantes GCs: guanil ciclasa soluble ON: xido ntrico ACm: adenilciclasa de dominio transmembranal ACs: adenil ciclasa soluble CatSperm: canales catinicos del esperma

Summary The sperm cell: from eyaculation to fertilization During the last recent years there has been a great increase of information regarding the molecular mechanisms involved in the maturation of the male gamete as well as its progression from the gonad up to fertilizing the oocyte. Along this way the sperm completes its maturation adding some molecular components; additionally along this trail take place all the processes leading to activation of the sperm for the entrance into the oocyte to initiates molecular cascades for the formation of a zygote. This article, based on updated literature proposes a model that integrates known cellular and molecular interactions and pinpoints some steps still requiring further research. Key words: acrosome reaction, activation, adhesion, capacitation, fusion.

Referencias
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