COLUMNA DE WINOGRADSKY Y COMPOST TIPO WINDROW

WINOGRADSKY COLUMN AND TYPE COMPOST WINDROW

RESUMEN La columna de Winogradsky es empleada bsicamente para aislar y crear una colonia de microorganismos con un metabolismo energtico ms variable, es decir, microorganismos que poseen unos cambios y transformaciones de la energa ms rpido de lo normal. Este proceso se llev a cabo durante cinco (5) semanas; en las cuales la columna estuvo expuesta a diferentes pruebas qumicas, biolgicas, fsicas, y microbiolgicas. Pruebas que fueron realizadas cada semana. Al cabo de varios das se presentaron cambios que se vean reflejados en cada fase del cilindro (columna); adems de esto, con la ayuda de un microscopio fue posible observar los diferentes microorganismos interactuando entre si y como se alimentaban unos a otros gracias a sus respectivas actividades metablicas Tambin se pudo observar durante dichas semanas que se establecieron relaciones entre los distintos microorganismos. Se adaptaron y nutran de la materia orgnica y se localizaron en cierto lugar de esta, de acuerdo a su naturaleza. Desde fuera se

pudo constatar una estratificacin gracias a la formacin de distintos colores. Adems de la columna de Winogradsky, se observ el proceso de degradacin de la materia orgnica debido a microorganismos aerobios (compostaje), anaerobios y facultativos, con el fin de diferenciar los distintos microorganismos que encontramos y para entender cmo ocurren los ciclos biogeoqumicos. ABSTRACT Winogradsky`s column is basically used to isolate and create a colony of microorganisms with a more variable energy metabolism, namely, microorganism that have some changes and energy transformations faster than normal. This process was carried out during five (5) weeks; in which the column was exposed to different chemical, biological, physical and microbiological tests. These tests were performed each week. After several days there were changes that were reflected in every phase of the cylinder (column) in addition to this, with the aid of a microscope it was possible to observe the different microorganisms interact inwardly

and how they feed each other thanks to respective metabolic activities. It was also noted during those weeks that were established relations between the different microorganisms. They adapted and fed on the organic matter and they were localized in a certain place of this, according to them nature. From outside we could state stratification through the formation of different colors. Besides Winograsdky column, we observed the degradation of organic matter process due to the aerobic (composting), anaerobic and facultative microorganisms, in order to differentiate the different organisms that we could find and to understand how happened the biogeochemical cycles. The composting process is a starting point in the treatment of organic waste, in which is involved physical, chemical and microbiological parameters.

anaerobias y facultativas, los diferentes microorganismos que sobreviven en estos medios y como es su comportamiento all. Lo principal como ya lo dijimos es conocer los microorganismo que se producen y reproducen en las columnas y en el compost durante estas semanas y como es que trabajan y se nutren unos a otros dentro de estas estructuras. Ahora veremos los resultados arrojados por los estudios hechos a estos medios; observaremos las diferentes bacterias que podemos encontrar y como es que estos microorganismos pueden sobrevivir en medios no muy agradables y al mismo tiempo convertirlos en beneficio para s y para la naturaleza. METODOS DE ELABORACIN OBTENCIN DE PRUEBAS Preparacin del compost: Primero que todo se construye una caja de madera o de cartn (o el material que usted crea necesario) de unos 50 cm de alto por 50cm de ancho y 50 de largo. En la parte inferior de la caja llevara poda (pasto) en un 10%, seguida de un 5% de desechos de plaza, 8% de aserrn, 15% de estircol de vaca, 5% de aserrn, 2% de desechos de plaza, 10% de poda y al 45% restante se le echa estircol revuelto con aserrn; las cantidades en porcentajes que se introducen van de acuerdo a la altura de la caja. Es indispensable estar proporcionndole agua a la pila, ya que esto lo ayuda a mantener fresco y a no elevar demasiado la temperatura pero cada tercer da hay que Y

INTRODUCCION La columna de Winogradsky nos da a conocer los distintos microorganismos que podemos encontrar en la materia orgnica (CHONs) presentes en nuestro medio, estos microorganismos sern tiles para los estudios que se realizaran durante todo el curso y durante la carrera. A parte de la columna tambin tendremos en cuenta los procesos que se realizan en las pilas de compost, debido a que se construyeron pilas de tipo aerobias,

aplicarle cal apagada o hidrxido de calcio Ca(OH)2 que ayuda a mantener una temperatura estable. Adems de la temperatura y la humedad hay que proporcionarle oxigeno (O2) y dixido de carbono (CO2) para la pila aerbica y este ultimo (CO2) con xidos de nitrgeno (NOx) para la pila facultativa.

Obtencin de pruebas: Para cada semana hay que determinar las pruebas fsicas qumicas y microbiolgicas de cada columna y de cada pila del compost, estos parmetros se toman por medio de los lixiviados en el caso del compost y con una pequea muestra de agua que se toma de la pila. En los parmetros qumicos vamos a encontrar (pH) potencial de hidrogeniones, (NO2) Ion Nitritos, (NO3) Ion Nitratos, (NH3) Amonio, (PO4) Ion Fosfatos, entre otros, fsicos como olor, color, temperatura, etc. y microbiolgicos, en este ltimo se harn siembras de cultivos de Azotobacter, Azospirillium, Nitrobacter, Nitrosomonas, Medio Nutritivo y PDA. La medicin de estos parmetros se realizan a travs de sustancias qumicas como en el caso del Tiosulfato de Sodio (Na2S2O3) en la parte para realizar la prueba de oxigeno disuelto las pruebas de colorimetra para detectar los Nitritos (NO2), Nitratos (NO3), Fosfatos (PO4), entre otros. (aunque en la mayora se usan sustancias qumicas); las dems pruebas se tomaran con instrumentos que son especialmente para dichos parmetros como en el caso del potencionemetro (pHchimetro) que se usa para medir el pH, el termmetro para la temperatura, etc.

Preparacin de la columna: El primer paso que debemos realizar para crear la columna es lavar el frasco o esterilizarlo (el frasco tiene que ser en vidrio), se esteriliza con agua, una cucharada de sal y un cuarto (1/4) de cloro, se agita hasta formar espuma y luego se vierte, se deja sin tapa boca abajo por veinte y cuatro (24) horas. El frasco se empieza a llenar con papel peridico rasgado 10cm, el papel es para cuando haya presencia de hierro (Fe) dentro de la columna, el papel se torne de color rojo; 20cm de tierra abonada o tierra frtil, para la respiracin bacteriana; 1cm de viruta, para la oxidacin; 25cm de los lodos, se usaran lodos de la Planta de Tratamiento de Agua, del Canal del Salitre, Industriales (Alfagras) y del Parque Nacional; el resto del frasco es aforado con agua.

RESULTADOS Luego de registrar los datos obtenidos durante las cinco (5) semanas correspondientes, nos damos cuenta de que microorganismos actuaron tanto en el compost como en las columnas y que cambios sufrieron tanto en la parte qumica, fsica y microbiolgica. Ahora analizremos cada uno de los cambios que se presentaron en las columnas y en las pilas de compost. Pilas de compost 1. Compost aerobio 2. Compost anaerobio 3. Compost facultativo El primer paso como ya se dijo anteriormente es construir las pilas dependiendo de la cantidad de compost que se quiera producir. Para obtener los datos necesarios y determinar que bacterias actuaron all se realizaron las pruebas qumicas y microbiolgicas a los lixiviados que cada semana arrojaban las pilas debido al constate riego que se le efectuaba. Para el compost numero uno (1) aerobio, sea en presencia de O2 por medio de un tubo agujerado, los resultados que se lograron fueron: en la primera semana su olor era ftido debido al estircol, su color aparentemente era caf verdoso, en la segunda tercera y cuarta semana su olor no cambio y su color se torno verde con puntos blancos debido a la cal que cada tercer da se le proporcionaba, en la quinta semana el olor que originaba era a azufre y su color cambio a caf con franjas amarillas.

El compost numero dos (2) anaerobio, con presencia de NOx...

...Durante las cinco (5) semanas no se notaron muchos cambios en la parte superficial, el color inicial se mantuvo un color caf amarilloso aunque luego de aplicarle la cal apagada aparecieron races de color blancas y se seco mucho ms que los otros debido a que solo obtuvo agua de la que se le rociaba diariamente, los lixiviados en la primera semana eran de color verde y al finalizar la quita semana se tornaron de color caf, el olor para durante todo el tiempo fue el mismo: ftido. El compost numero tres (3) facultativo, presencia de CO2 y NOx, en la primera, segunda y tercera semana tubo un color caf amarilloso con puntos blancos debido a la cal apagada suministrada cada tercer da, debido a que tena un tubo de PVC en el centro, al llover obtuvo demasiada agua y esto hizo que la temperatura bajara y se produjera H2S (acido sulfhdrico), esto ocurri en la cuarta y quinta semana, donde el color cambio a caf verdoso y los lixiviados se tornaron rojos.

Columnas de Winogradsky 1. 2. 3. 4. Lodos industriales (Alfagres S.A) Lodos Parque Nacional Lodos Rio el Salitre Lodos Planta de Tratamiento

Para la elaboracin de la columna de Winogradsky se necesita papel peridico, tierra abonada, viruta y los respectivos lodos que se quieren manejar. Los materiales anteriormente mencionados se mezclan en el frasco de vidrio y la columna queda lista para empezar a producir los microorganismos que sobreviven en este medio. En la zona inferior de lodos se desarrollan organismos que desarrollan procesos fermentativos que producen alcohol y cidos grasos como subproductos de su metabolismo. Estos productos de "desecho" son a su vez el sustrato para el desarrollo de bacterias reductoras de sulfato. Como resultado se liberan sulfuros que difunden a la zona superior oxigenada creando un gradiente en el que se desarrollan bacterias fotosintticas que utilizan el azufre. (1) A continuacin veremos un esquema de la columna de Winogradsky, las etapas y su clasificacin bacteriana con respecto a los diferentes colores que se forman

En la columna numero uno (1) que corresponde a los lodos industriales, en este caso la empresa Alfagres la cual produce y comercializa materiales para la construccin y decoracin; los resultados de las pruebas fsicas como el color fueron: inicialmente la columna tubo un color blanco el cual se mantuvo durante las siguientes semanas, el olor que produca para las primeras tres (3) semanas fue a cemento y arena y en las dos ltimas semanas el olor producido era a azufre.

. En la parte media de la columna se puede observar que hay un color verde, eso significa que hay presencia de materia orgnica (CHONs) y un poco de color rojo lo que quiere decir que hay cantidades mnimas de hierro (Fe), la presencia de hierro en la columna nos indica que hay bacterias fijadoras de nitrgeno. Para la columna numero dos (2), correspondiente a los lodos del Parque Nacional, esta columna no sufri grandes cambios sino hasta la semana cuatro (4) y cinco (5), su color inicial que era caf el cual desapareci y se crearon colores anaranjados que indica la corrosin a causa de la viruta, el verde que como ya se dijo indica las grandes cantidades de materia orgnica (CHONs) y el amarillo que indica las cantidades de azufre (S) que hay. En la columna numero tres (3) correspondiente a los lodos del Canal del Salitre se notaron cambios a partir de la segunda semana, el olor inicial ftido cambio a azufre (S), el color vario en gran cantidad, se torno verde (presencia de CHONs) y el hierro (Fe) producto de la oxidacin de la viruta se precipito y cambio el color del papel peridico a rojo, hubo gran presencia de acido sulfhdrico (H2S) y en la parte superior de la columna se formaron biofilms (biopelicula) de color verde; en esta columna se presentaron los ciclos biogeoqumicos del nitrgeno (N), hierro (Fe), azufre (S), carbono (C) y del fosforo (P).

Observaciones generales acerca del comportamiento dentro de la columna de Winograsdky: En primer lugar se establece un gradiente de oxgeno. La zona ms baja de la columna es la zona anaerobia (sin oxgeno) y adquirir un color negruzco. En esta zona se desarrollan los anaerobios estrictos como Clostridium que digiere la celulosa en glucosas y las usar mediante fermentacin produciendo compuestos orgnicos simples como el etanol, cido acticos, stos sern usados por bacterias del gnero Desulfovibrio como alimento mientras respira anaerbicamente. Esto generar H2S que, en parte, reaccionar con el hierro del sedimento dando sulfuro ferroso, responsable del color negro. Otra parte del H2S difunde hacia arriba creando otro gradiente que se superpone al del oxgeno. (2) Microbiologa Winogradsky: de la columna de

Para la columna nmero cuatro (4) que corresponde a los lodos de la Planta de Tratamiento en las primeras tres (3) semanas el color no cambio pero en la cuarta semanada su color se amarillo y en la quinta semana se torno verde, el color amarillo indica la presencia de hidrxido de hierro Fe(OH)2 y el color ver materia orgnica (CHONs); el olor inicial era ftido pero al terminar la quinta semana la columna no produca ningn olor.

Zona anaerobia: Hay dos tipos de organismos que pueden crecer en condiciones anaerobias: los que fermentan la materia orgnica o los que realizan la respiracin anaerobia. La fermentacin es un proceso en el que los compuestos orgnicos son degradados de forma incompleta (por ejemplo, las levaduras fermentan los azcares a alcohol). La respiracin anaerbica es un proceso en el que los sustratos orgnicos son completamente degradados a CO2, pero usando una substancia distinta del oxgeno como aceptor terminal de electrones (Algunas bacterias, por ejemplo, utilizan nitratos o iones sulfato en vez del oxgeno).
(2)

Zona aerobia: La parte superior de la columna de agua puede contener abundantes poblaciones de bacterias de diferentes tipos. Son organismos aerobios que se encuentran habitualmente en los hbitats acuticos ricos en materia orgnica (estanques poco profundos, arroyos contaminados, etc.) Suelen ser flagelados, lo que les permite moverse y establecerse en nuevas reas. Puede desarrollarse tambin microorganismos fototrficos variados procedentes directamente del agua o del barro utilizado originalmente en el montaje de la columna. La superficie del barro puede presentar en esta zona un ligero color castao. Esta es la parte de la columna ms rica en oxgeno y ms pobre en azufre. (2) DISCUSION Al terminar las pruebas y los anlisis que se hicieron durante cinco (5) semanas nos dimos cuenta de lo que se puede llegar a obtener por medio de lodos (en el caso de las columnas) y simples desechos (en el caso de el compost) que son muy ricos en materia orgnica (CHONs). Se pueden obtener microorganismos capaces de degradar rpidamente los CHONs y sin necesidad de fertilizantes o algn qumico que altere las condiciones generales. Durante el tiempo que se tuvo estas muestras nos dimos cuenta de cmo se alimentan y sobreviven distintos tipos de bacterias en lugares tan pequeos, reproducindose y alimentndose de dicha materia en descomposicin. Adems de observar la vida de los microorganismos que viven all, notamos

como se producen los ciclos biogeoqumicos a travs de la degradacin que las mismas bacterias realizan. Ya para terminar, como se pudieron dar cuenta, hay muchas formas de utilizar la materia orgnica (CHONs) que diariamente producimos en diferentes medios que contaminan el medio y que por medio de cultivos bacterianos se puede disminuir un poco y crear ambientes ms tiles. ANEXOS 1. Graficas de cada uno de los parmetros realizados a las columnas y al compost. 2. Fotografas de algunas columnas y del compost. 3. Tablas de los datos obtenidos durante las pruebas. REFERENCIAS (1) http://www.microinmuno.qb.fcen.uba .ar/SeminarioBiodiversidad.htm (2) http://www.madrimasd.org/blogs/bio cienciatecnologia/2008/02/22/85149 (3) Microbiologa ambiental, microbiologa general, 2006-2007. (4) Jos P. Lpez Prez, La columna de Winogradsky. Un ejemplo de microbiologa bsica en un laboratorio de de educacin secundaria, DTO de gentica y microbiologa universidad de Murcia. (5) https://www.ucursos.cl/ingenieria/2006/1/BT45A/1/ MATERIAL_docente/objeto/ (6) Andrs Molano, procesos de control para el montaje y operacin de un sistema de compost tipo Windrow mediante el estimado de parmetros

biolgicos y biognicos, Universidad Manuela Beltrn. ANEXOS 1. Graficas de los resultados

14 9 4 -1 columna 1 columna 2 Columna 3 columna 4

1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 columna 1 columna 2 columna 3 columna 4

FIGURA 4: NO2 columnas semana 1 a 5

3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0

FIGURA 1: pH columnas de la semana 1-5

2000 1500 1000 500 0 -500 -1000 -1500 -2000 columna 3 columna 4 columa 1 columna 2

columna 1 columna 2 columna 3 columna 4

FIGURA 5: PO4 columnas de la semana 1 a 5

12 10 8 6 columna 1 columna 2 columna 3 columna 4 4 2 0 CW 1 CW 2 CW 3 CW 4

FIGURA 2: ce columnas semana 1- 5

120 100 80 60 40 20 0

FIGURA 6: NH4+ columnas semana 1 a 5 FIGURA 3: NO3_ columnas semana 1-5

1400 1200 1000 800 600 400 200 0

CW 1 CW 2 CW 3 CW 4

4500 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 0

pH CE NO3NO2PO4= NH4+ SST compostaje compostaje compostaje 1 2 3

FIGURA 7: SST columnas semana 1-5

30 25 20 15 10 5 0 pH CE NO3NO2PO4= compostaje compostaje compostaje NH4+ 1 2 3 SST

FIGURA 10 Parmetros qumicos compostaje semana 3.

4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 0

pH CE NO3NO2PO4= NH4= SST

FIGURA 8: Parmetros qumicos compostaje semana 1.

80 70 60 50 40 30 20 10 0

FIGURA 11; Parmetros qumicos compostaje semana 4 2. Fotografas durante las pruebas
pH CE NO3NO2PO4= NH4+ SST

FIGURA 9: Parmetros qumicos compostaje semana 2.

FOTO 1: prueba de DBO, DQO y oxigeno disuelto.

FOTO 2: compost facultativo segunda semana.

FOTO 4: compost anaerobio quinta semana.

FOTO 3: compost facultativo quinta semana.

FOTO 5: columna de Winogradsky tercera semana