El nacimiento del microscopio

B r ia n J. Fo r d Ca r d i U n ive r s it y
Resumen Utilizando el equipo y las tcnicas originales el aue tor re{crea el trabajo de los primeros microscopistas y revela lo que realmente observaron con sus microscopios simples de una sola lente. Introduccin <Maravilloso! fue la palabra que o marc el nacimiento de la biologa moderna. El o cientco sac cuidadosamente un delgado tubo de o vidrio con una peque~a gota de cieno verde de la sun percie de un lago y lo peg con cera en la aguja o de su peque~o microscopio de una sola lente. Girann do un peque~o tornillo coloc el peque~o tubo cerca n o n de su lente hasta que la imagen se hizo clara y la imagen qued enfocada. Describi ese momento con las o o siguientes palabras: \V tantos y tan peque~o ani n malitos, cuyo movimiento era tan rpido, tan vaa riado, hacia arriba, hacia abajo, alrededor, que verlo era maravilloso". Era el mes de agosto de 1674; hab nacido la microbiologa. a Cuando Antony van Leeuwnhoek, fabricante de pa~os en Delft, Holanda, hizo este notable descubrin miento los microscopios ya ten dcadas de exisan e tir. Los primeros microscopios consist de dos lenan tes; el primer registro escrito de uno de stos se hae lla entre 1590 y 1608 en Middelburg, Holanda, donde Zacaras Jansen (fabricante de anteojos), Hans Jan sen y Hans Lippershey construyeron un instrumento con dos tubos concntricos deslizantes y una lene te en cada extremo. Ten un aumento de casi 10 vea ces del tama~o real y era, en realidad, una versin del n o ya bien conocido telescopio astronmico. Estos mio croscopios experimentales, con todo, revelaban delicadas estructuras, gura 2. A mediados del siglo XVII, los microscopios compuestos (sumamente ornamentados) fueron muy comunes entre los investigadores adinerados. Ms que a instrumentos cient cos eras juguetes recreativos para los aristcratas. Algunos de los ms nos fueron o a hechos en Londres y construidos de cartulina y madera con un no recubrimiento de laca. Fue con uno de esos nos instrumentos que Robert Hook vi por o primera vez las clulas vivas en 1663 en unas muese tras de musgo. Poco despus, ese mismo a~o, hie n zo su ms famosa observacin microscpica con dela o o 29 Figura 1: Clulas epidrmicas de una cebolla vistas e e con un microscopio simple de Robert Brown (1773{ 1858). Se ve claramente el ncleo de cada clula con u e un aumento de 350X

30

ContactoS 45, 29{38 (2002)

Figura 3: Dibujo detallado hecho por un dibujante de Leeuwenhoek. gadas secciones de corcho. Hooke nomr a las delio cadas cmaras \clulas", nombre an empleado. a e u Las observaciones de Hooke fueron publicadas en su magn co libro Micrographia en 1665. Este libro contiene bellos y detallados dibujos de insectos, semillas, plumas, hojas, cabellos. . . y alleres y otros objetos de uso comn. Rpidamente se converti en u a o un xito editorial y tuvo gran inuencia. El famoe so periodista ingls, Samuel Pepys, hab comprae a do un microscopio cuando trabajaba en la Armada Real, y escribi en su diario que le y disfruo a taba su libro Micrographia hasta altas horas de la noche. El microscopio compuesto hab llegado a ser el insa trumento ms familiar de los gabinetes cient a cos. Para los primeros microscopistas era cmodo un mio croscopio compuesto: se colocaba en una mesa y el ocular quedaba a la altura de los ojos, lo cual permit prolongadas observaciones. Sin embargo, el a microscopio de una sola lente fue el que llev a los o descubrimientos fundamentales de la biologa mo derna. El trabajo de Hooke revela los intrincados detalles de objetos visibles a simple vista; sin embargo, el de Leeuwenhoek inicia la investigacin de la vio da en el universo microscpico. o

Figura 2: Bacterias del gnero Spirillum vistas con e un microscopio simple

El nacimiento del microscopio. Brian J. Ford

31

Figura 5: Microscopio de bronce hecho a mano por Leeuwenhoek, 1770 Figura 4: Secciones de corcho de Micrographia de Robert Hooke Al siguiente a~o de la publicacin de Micrograpn o hia, Leeuwenhoek viaj a Inglaterra por razones coo merciales. Sin lugar a dudas vio una copia del libro de Hooke en Londres, con sus detallados grabados de varios gneros textiles. En el prefacio de ese te libro est un muy poco citado pasaje que da la pria mera descripcin de un microscopio simple. En el dio se~o de Hooke, una peque~a lente plano{convexa n n est sujeta entre los oricios de un par de placas a metlicas en forma muy semejante al dispositivo de a Leeuwenhoek. Los primeros espec menes que ste e describi fueron corcho, gura 4 mdula REVISAR o e ELDER PITH y una pluma para escribir, los mismos que Hooke presenta en su libro y en el mismo orden. Los microscopios simples eran mucho ms peque~os a n que los compuestos pero exig gran paciencia y an habilidad. Las placas del microscopio de Leeuwenhoek que sosten la lente eran 4:5 2:5 cm, an gura 5. El microscopio completo era de unos 8 cm y deb a sostenerse frente a los ojos. Leeuwenhoek construy o ms de 500 de estos diminutos instrumentos con los a que observ sus \animalculos" (protozoarios y mio crobios) y clulas de sangre, de esperma, de plane tas, hongos y algas. Si bien Hooke saba que los microscopios simples da ban imgenes ms claras que el compuesto muy poa a cas veces lo emple pues encontr que era difcil ajuso o

Figura 6: Descripcin del microscopio de Leeuweno hoek.

32

ContactoS 45, 29{38 (2002)

tarlo y muy cansado usarlo. Todav hoy persisa te el equ voco popular acerca de la calidad de imagen de los microscopios simples; slo los libros ms o a recientes se~alan que pueden verse detalles sutiles n con ellos. Los microscopios, a decir verdad, tienen una historia plagada de errores y confusiones; los logros de los microscopistas pioneros, como Leeuwenhoek, han sido menospreciados como si hubieran sido exageraciones suyas o meros golpes de suerte. Pocas personas tienen una idea objetiva de lo que estos primeros cient cos pudieron ver realmente. Muchos textos arman que las imgenes de un microscopio sima ple son difusas y degradadas por una halo de colores. Por el contrario, producen imgenes de notaa ble claridad. Al parecer los autores de estos libros nunca los han usado y se limitan a perpetuar el mito de una generacin de autores de libros de texo to a la siguiente. Es cierto que unos cuantos cient cos han logrado obtener imgenes detalladas con un microscopio sima ple, como lo es tambin que los tcnicos actuales son e e incapaces de usarlos adecuadamente. Con los microscopios simples de mucho aumento las imgenes tienen una coloracin anmala: la abea o o rracin cromtica; se debe a la diferente refraccin o a o que una lente produce en la luz de diferente longitud de onda. La luz de mayor longitud de onda, esto es, hacia el extremo rojo del espectro de luz visible, se refracta menos que la luz de longitud de onda peque~a (hacia el extremo azul del espectro). n Lo anterior est lejos de ser un problema en la a prctica; como muestran las fotograf de este a as art culo, la aberracin cromtica no afecta a la clao a ridad esencial de las imgenes. Cuando se usan adea cuadamente, los microscopios simples dan excelentes imgenes. De hecho los primeros microscopios a compuestos aumentaban a la vez las imgenes y la a aberracin al extremo que casi toda la historia del o miscroscopio compuesto es la historia de los intentos por evitar la aberracin cromtica y la aberrao a cin esfrica. Los microscopios simples fueron meo e nos afectados por este tipo de problemas pticos o por lo que fueron de ms importancia para la hisa toria de la microscop en sus primeros dos siglos. a >Y qu decir de los especmenes preparados por esos e pioneros? Tambin aqu los escritores actuales han e perpetrado muchas confusiones. Segn un libro: u "Ninguna preparacin del siglo XVII ha sobrevivio do, de donde es muy probable que todas las muestras fueran slo temporales. El detalle visible en los mono tajes secos es m nimo, y se preparaban con poca delicadeza". El enunciado anterior es falso en cada una

Figura 7: Especmenes preparados por Leeuwenhoek conservados en la Royal Society de Londres. de sus armaciones. En 1981 encontr los primee ros especmenes preparados por Leeuwenhoek que, a pesar de todo, hab llegado hasta nuestro tieman po, gura 7. Con el apoyo de Sir Andrew Huxley, presidente de la Royal Society de Londres, tuve acceso a los documentos de Leeuwenhoek y, entre ellos, descubr nue ve paquetes de espec menes, entre ellos, algas, cortes de nervio ptico y secciones de vegetales; too do ese material haba permanecido intacto duran te tres siglos. Lo mejor de todo era la excepcional calidad de las muestras; de hecho, las muestras de corcho de Leeuwenhoek son mucho mejores que las reproducciones de algunas publicaciones recientes. Estas imgenes histricas nos permiten recorrer nuea o vamente los pasos de algunos de los grandes pioneros de la biolog moderna y ver lo que ellos viea ron. Utilizando sus instrumentos autnticos y con e el apoyo de de lentes que se ajustan al dise~o orin ginal he recreado alguna de las observaciones hechas por los primeros microscopistas. Los resultados de estos instrumentos \primitivos"son de extraordinaria calidad y son comparables a los de los microscopios actuales de los laboratorios. Un peque~o microscopio de Leeuwenhoek revela clan ramente una bacteria, por ejemplo. La gura 8 es una muestra de sangre vista a travs de un microse copio de Leeuwenhoek autntico que se halla en la e Universidad de Utrecht, Holanda; que puedan verse los glbulos rojos sorprende a muchos cient o cos, y ms notable es el hecho de que el microscopio de a Leeuwenhoek revle la forma lobulada del ncleo de u los glbulos blancos, o una estructura de 0.002 mm! menor que muchas bacterias!

El nacimiento del microscopio. Brian J. Ford

33

Figura 9: Los estudios de la Hydra emplearon el microscopio de John Ellis, tambin usado por el natue ralista sueco Carlos Linneo para denir los principios bsicos de gnero y especie. a e Uno de los microscopios simples ms populares fue a el de barril atornillado, un instrumento cil ndrico que se manten a la altura de los ojos. Consista a de una lente simple montada en un disco circular que giraba en las estras del barril principal. Los es pec menes se colocaban en peque~as placas de hueso n o marl horadadas y soportadas entre discos de mica transparente. Una abertura lateral del barril permit colocar la muestra. El enfoque se lograba por a medio de la rosca en el extremo del barril opuesto a la lente al acercar o alejar el espcimen. Este tie po de microscopio era fcil de construir y era resisa tente, sin embargo no todas las muestras podan ob servarse en l. Al inicio del siglo XVIII los microscoe pios simples hab sido un instrumento valioso paan ra el estudio de la cnidaria de agua dulce Hydra, gura 9, descrita por primera vez en 1702 por Leeuwenhoek. Abraham Trembley, lsofo natural suizo, exo periment con injertos y la regeneracin de la Hyo o dra de forma que el peque~o plipo se hizo un obn o jeto popular para el estudio microscpico; acomoo dar el delicado organismo, por ejemplo, para que sus tentculos respondieran a las ms ligeras vibracioa a nes, presentaba serios retos a los microscopistas. Esta clase de trabajo demandaba un nuevo tipo de ins-

Figura 8: Muestra de sangre con 300X y acercamiento de un leucocito

34

ContactoS 45, 29{38 (2002)

Figura 10: Microscopio fabricado por Bancks and Son utilizado por R. Brown. trumento; el resultado fue el microscopio dise~ado n por el ptico ingls John Cu: un instrumento de o e mesa con un vidrio reloj conten el espcimen en a e agua, el vidrio descansaba en una plataforma circular y la lente se colocaba en foco con un brazo trans versal. Este fue el tipo de microscopio usado por el botnico sueco Carlos Linneo y que tuve el privilea gio de emplear en Uppsala, Suecia. Al comienzo del siglo XIX, el joven cirujano escocs e Robert Brown utiliz un dise~o mejorado del mio n croscopio descrito para estudiar el tejido de las plantas, gura 10 y 11. Brown haba viajado a Australia en busca de nue vas plantas; estaba fascinado por los mecanismos reproductivos de stas y emple mucho tiempo en el ese o tudio de las orqudeas. Al observar la estructura na de las clulas descubri una caracter e o stica comn u a todas: \En cada clula de la epidermis. . . puee de observarse una sencilla aureola circular, generalmente ms opaca que la membrana de la clula", a e gura 12. Estimulado por su descubrimiento, nuevamente hizo observaciones de otras familias de plantas. Brown encontr que esta nueva estructura era comn a las o u clulas de muchos organismos, identic una las cae o ractersticas fundamentales de todas las clulas vi e vas el ncleo como lo nombr en 1828. u o Figura 11: Esquema del microscopio de Bancks and Son.

Figura 12: Tejido de una orquidea con 525X visto con un microscopio de Brown.

El nacimiento del microscopio. Brian J. Ford

35

Figura 13: Muestra original de Leeuwenhoek de mdula ELDER PITH Sambucus vista con un mie croscopio de l mismo. e Ciertamente no fue Brown el primero en observar el ncleo de las clulas. Leeuwenhoek tambin lo hiu e e zo al observar las clulas sanguneas de un pez, pee ro no reconoci su amplia distribucin en la naturao o leza, guras 13 y 14; tambin observ el incesane o te y azaroso movimiento de las peque~as partculas n suspendidas en los uidos. En 1827 hizo un estudio sistemtico de este fenmeno y mostr que ocua o o rre tanto materia inanimada como en clulas vivas. e Fue exhaustivamente investigado por Albert Einstein en 1905 y hoy se conoce al fenmeno como movio miento browniano el cual resulta del bombardeo irregular de las molculas del uido sobre las partculas e suspendidas. Puesto que Leeuwenhoek y Brown hicieron sus observaciones con microscopios simples muchos investigadores dudaban de su veracidad. A Leewenhoek se le calicaba como \un dilettante de una muy frtil e

Figura 14: Vista de la muestra de la gura 13 con un moderno microscopio Leitz.

36

ContactoS 45, 29{38 (2002)

imaginacin". Tambin se dudaba de la competencia o e de Brown para observar el movimiento que hoy lleva su nombre. Muchos textos arman que Brown slo o observ el movimiento de los granos de polen cuano do, en realidad, observ el movimiento de partculas o ms nas dentro de los granos de polen. Una reciena te evaluacin del microscopio de Brown concluy que o o pudo ser util para disecciones aunque difcilmente habr permitido observar estructuras tan peque~as a n como el ncleo. Por el contrario, utilizando el miu croscopio original de Brown (preservado en la Sociedad Linneana de Londres) y repitiendo sus experimentos, pude observar el ncleo de la clula y, u e adems, el movimiento browniano. Las publicacioa nes referentes a las limitaciones de este microscopio se deben, muy probablemente, a un uso inadecuado del instrumento pues ajustado correctamente da imgenes sumamente n a tidas. Debo subrayar que ninguna de las fotograf de este ensayo ha sias do retocada. La era de la biolog moderna, fundamentada en el a conocimiento de la clula, no result exclusivamene o te de los microscopios compuestos del siglo XIX con sus novedosas lentes acromticas (las que correg a an la aberracin cromtica). Los descubrimientos clao a ve fueron hechos con microscopios simples. A decir verdad, muchos de stos pudieron lograrse sin nae da ms que microscopios como el de Leeuwenhoek a desde 1600. Los miscroscopios simples de los siglos XVIII y XIX estn hechos de bronce y tienen muy bellos acabaa dos. Una de las compa~as fabricantes ms exiton a sas fue la Bancks and Son. Esta rma es, sin embargo, poco mencionada por los historiadores de la ciencia; slo conservamos unos cuantos catlogos de sus o a productos. Pero es incuestionable que fueron muy utilizados; Brown usaba un microscopio de Bancks and Son, igual hizo Charles Darwin. Tambin sumie nistr uno al Pr o ncipe de Gales que llegara a ser Jor ge IV de Gran Breta~a. n La falta de inters por los productos de Bancks and e Son es un resultado del desinters por los microse copios simples como instrumentos de investigacin o seria. El ms extraordinario jams elaborado fue hecho en a a 1760 para Jorge III de Gran Breta~a por George n Adams, gura 15; tiene como accesorio un microscopio compuesto pero es, bsicamente, un microsa copio simple. Con su barroca construccin y sobreo cargados ornamentos gticos es un inolvidable objeo to de arte as como un instrumento cient co. Quizs el microscopio simple ms desarrollado es uno a a de bolsillo fabricado por John Dollond en 1830, gura 16; tiene muchas de las caracter sticas de los insFigura 15: Microscopio del rey Jorge III, 1760

El nacimiento del microscopio. Brian J. Ford

37

Figura 16: Microscopio hecho por John Dollond, es menor que una cajetilla de cigarros y fue usado por Robert Brown. trumentos modernos: un plataforma que permite rotar al espcimen, desplazarlo de un lado a otro, o elee varlo o bajarlo en el campo visual. El microscopio tambin est equipado con un control no de ene a foque cerca de la base del tubo principal y una serie de lentes intercambiables, cada una montada en una plaquita. Su lente ms potente aumenta los oba jetos 480 veces su tama~o real. Desafortunadamente n se ha perdido; sin embargo es de suponer que pod an llegar a 800 aumentos. Los microscopios simples fueron muy populares durante ms tiempo del que los historiadores imagia naron. Aunque en 1830 se introdujeron los microscopios compuestos con lentes acromticas, en 1820 a Darwin utilizaba un microscopio semejante al de Robert Brown, gura 16 y en 1848 an usaba un microsu copio simple, guras 17 a 19. En 1862 gan un preo mio importante el dise~o de Field de un microscon pio simple. Los microscopios pticos de hoy son descendientes o directos de los instrumentos acromticos victorianos. a El microscopio compuesto del siglo XVII, con sus tubos deslizantes, plataforma nivelada y pilar termin o por morir. Cuando naci el microscopio compuesto o acromtico se instal en el mismo montaje de los mia o croscopios Bancks; este nuevo dise~o tena una con lumna principal con los controles de enfoque, una plataforma para los espec menes, un brazo transversal para componentes ptico, un espejo bilateral y o un lente condensador para dirigir la luz a travs de e la muestra. Algunos de los modelos ms elaboraa dos del siglo XIX, como el Dollond, ten una plaan taforma mecnica. a

Figura 17: Levadura de cerveza con un microscopio simple 120X de Robert Brown.

Figura 18: Levadura de cerveza, 325X con microscopio simple de R. Brown.

38

ContactoS 45, 29{38 (2002)

H a y muc ho s pro ble ma s de a lg e bra e le me nta l q ue tie ne n una la rg a histo ria . U no de e llo s e s e l de l ta nq ue q ue se lle na c o n do s tube r a s de dife re nte c a uda l. La prime ra re fe re nc ia se ha lla e n la M e tric a de H e ro n (1 0 0 e .c .), e n D io fa nto (2 7 5 e .c .), e n lo s e pig ra ma s de M e tro do rus (5 0 0 e .c .) pa ra se r de l do minio public o de Oc c ide nte y Orie nte c e rc a de l sig lo IX . C o n la impre nta e l pro ble ma de l ta nq ue o c iste rna fue \ c a ba llito de ba ta lla " de T o nsta ll (1 5 2 2 ), F risius (1 5 4 0 ) y Re c o rde (1 5 4 0 )." El pro ble ma tra ta una situa c io n c o mun e n lo s pa se s de l M e dite rra ne o , pe ro ha sufrido c a mbio s. A l inic ia r e l sig lo X V e nc o ntra mo s v a ria nte s c o n un le o n, un pe rro , un z o rro y o tro s a nima le s q ue c o me n una o v e ja . En e l sig lo X V I se tra ta de un ho mbre q ue c o nstruy e un muro o una c a sa : \ >Si Jua n le v a nta un muro ig ua l e n 4 d a s y Pe dro e n tre s d a s >c ua nto tie mpo le s lle v a ra le v a nta r e l muro junto s?" En una o bra de F risius (1 5 4 0 ) e l pro ble ma tie ne tinte s do me stic o s:

Figura 19: Levadura de cerveza, 750X, con un microscopio de Leeuwenhoek. Los microscopios modernos incluyen algunas caracter sticas de los primeros modelos y son un recordatorio de que el trabajo de los pioneros an viu ve, si bien como reencarnaciones ms desarrolladas, a en los laboratorios del nuevo milenio.

\ U n ho mbre be be un ba rril de v ino e n 2 0 d a s. C ua ndo lo be be junto c o n su muje r le s dura 1 4 d a s. >C ua nto tie mpo le dura ra e l ba rril a la muje r so la ?" C o n e l a ug e de l c o me rc io e s e x plic a ble q ue e l pro ble ma to ma ra nue v a s fo rma s: \ U n ba rc o c o n tre s v e la s e mple a do s se ma na s e n un v ia je usa ndo so lo la v e la ma y o r. C o n la v e la me dia na ta rda 3 se ma na s y c o n la v e la me no r 4 se ma na s. >C ua nto tie mpo ta rda si usa la s tre s v e la s? En e sta v e rsio n e l pro ble ma ig no ra q ue la v e lo c ida d de un ba rc o no e s pro po rc io na l a la supe rc ie de v e la me n." Pro ba ble me nte e l c l ma x de l a bsurdo lo a lc a nz o o tro a uto r c o n la sig uie nte v e rsio n: \ Si un sa c e rdo te pue de sa c a r un a lma de l purg a to rio re z a ndo 5 ho ra s, mie ntra s q ue o tro ne c e sita 8 ho ra s >c ua nto tie mpo ne c e sita ra n si re z a n junto s?"

cs