UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO Facultad De Estudios Superiores Zaragoza Campo II

Laboratorio de Microbiologa General II

Nombre: Flores Tufio Arturo

Equipo: 12

Grupo: 2701

Reporte: Aislamiento de Bacterifagos

Fecha: 18 de mayo del 2011.

Lectura de 24 hrs.

Lectu las 24 Hrs de Escherichi coli procedente de moscas. TUBO ACLARA ENTO 1 Pos vo 2 Pos vo 3 Pos vo 4 Pos vo
        

Lectura de 48 hrs.

Lectura las 48 Hrs Escherichi coli procedente de moscas. TUBO ACLARA ENTO 1 Positivo 2 Positivo 3 Positivo 4 Positivo
 

Lectura las 48 Hrs Escherichi coli procedente de de H2O residual. PLACA CALVAS 1 No apreciables, se observa desarrollo de mltiples colonias bacterianas 2 Se observan mltiples calvas, sin desarrollo de colonias bacterianas 3 Se observa una calva muy clara, no crecimiento hay de bacterias 4 Se observan mltiples calvas, sin desarrollo de colonias bacterianas
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PLACA 1 2 3 4

Lectura las 24 Hrs Escherichi coli procedente de moscas.. CALVAS No aprec ables, colonias bac erianas Sin calvas, desarrollo bac eriano Se observa una sola calva, sin presencia de colonias bac erianas Presencia de calvas, desarrollo de 1 colonia bac eriana grande


Mu st

RESUL A

S de Mos s:

Muestra Agua Residual.

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Lectura de 24 hrs.
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Lectura las 24 Hrs de Escherichi coli procedente de H2O residual. TUBO ACLARA ENTO Tubo claro presento poco crecimiento de Escherichia coli, lo que demuestra 1
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2 3

Lectura las 24 Hrs Escherichi coli procedente de de H2O residual. PLACA CALVAS Se observo la presencia de calvas 1 UFP/mL, este resultado no es confiable 1
debido a que el agar blando no solidifico de manera homognea y la calva se observo en una peque a porcin del agar, el cual si solidifico de manera homognea. No se observo la presencia de calvas 0 UFP/mL No se observaron la presencia de placas debido al mal vaciado del agar blando y el medio nos solidifico de una manera irregular. No se observo la presencia de calvas esto es congruente dado que es la placa que tiene la menor dilucin.

2 3 4

Lectura de 48 hrs.
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Lectura las 48 Hrs Escherichi coli procedente de de H2O residual. TUBO ACLARA ENTO Tubo claro presento muy poco crecimiento de Escherichia coli, lo que 1
demuestra la presencia de los fagos, mas sin embargo aunque es la dilucin con mayor cantidad de fagos, no lisaron completamente a las bacterias. Presento turbide pero presento mayor que en el tubo 3 lo cual es incongruente debido a que el 3 tiene una dilucin mayor. Los resultados siguieron el mismo patrn que la lectura a las 24 horas. Presento desarrollo de turbide lo cual significa que el fago no liso por -2 completo a la bacteria, presento menor turbide que en la dilucin 10 lo cual no concuerda con lo esperado, dado que se esperaba que en este tubo se presentara mayor turbide que en el tubo 2 Este tubo fue el que presento mayor turbide debido a la poca o nula presencia de fagos debido a que es la mayor dilucin, por lo cual no se lisaron las clulas de E. coli y crecieron de forma habitual

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la presencia de los fagos Presento turbide pero presento mayor que en el tubo 3 lo cual es incongruente debido a que el 3 tiene una dilucin mayor. Presento desarrollo de turbide lo cual significa que el fago no liso por -2 completo a la bacteria, presento menor turbide que en la dilucin 10 lo cual no concuerda con lo esperado. Este tubo fue el que presento mayor turbide debido a la poco presencia de fagos debido a que es una dilucin muy grande, por lo cual no se lisaron las clulas de E. coli

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2 3 4

Aclaramiento tubos 24 hrs Muestra de H2O residual

Aclaramiento tubos 48 hrs Muestra de H2O residual

Aclaramiento tubos 48 hrs Muestra de H2O residual

PLACA 1

Lectura las 48 Hrs Escherichia coli procedente de moscas CALVAS Se observo la presencia de calvas 5 UFP/mL este resultado no es confiable debido a que nicamente se realizo el conteo de calvas en la parte del medio que nos lo permiti dado que el agar blando no solidifico de manera homognea. Se observo la presencia de calvas 3 UFP/mL No se observaron la presencia de placas debido al mal vaciado del agar blando y el medio nos solidifico de una manera irregular. No se observo la presencia de calvas esto es congruente dado que es la placa que tiene la menor dilucin y por ende menor cantidad de bacterifagos nicamente se observo el medio turbio debido al crecimiento bacteriano.

Aclaramiento tubos 24 hrs Muestra Moscas

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Aclaramiento tubos 24 hrs Muestra Moscas

Aclaramiento tubos 48 hrs Muestra Moscas

ANAL SIS DE RESUL ADOS Los fagos, como la mayora de los parsitos, son muy especficos en relacin con la s bacterias hospedadores que parasitan. La mayora de las bacterias son susceptibles a ataque por bacterifagos. Transcurrido el tiempo de centrifugado de las muestras, se encuentra en el sobrenadante las partculas vricas. A partir ste es de donde tomamos la muestra para analizar. En ambas muestras se logro observar el aclaramiento del medio (calvas), esto debido a que las bacterias (E. Coli) al ser infectadas, liberan muchas partculas nuevas de fagos cuando su pared se rompe. Este proceso de rotura se denomina lisis. Tras la lisis, los fagos descendientes infectan a las clulas vecinas. Este fenmeno produce un incremento exponencial en el nmero de clulas lisadas. Quince horas despus del comienzo de un experimento en placa de agar (segn la literatura revisada), pueden verse los efectos a simple vista: se observa un rea clara, calva o halo, en el csped opaco de bacterias sobre la superficie de una placa de medio slido. Tal y como se observo con las observaciones a 24 hrs y 48 hrs de incubacin de las placas. Estos halos, su tamao, y su claridad son dependientes del tipo de fago. Por tanto, la morfologa del halo es un carcter del fago que pueden ser objeto de anlisis. y Muestr Moscas: Musca domestica o mosca comn , es una especie cosmopolita que constituye un problema de salud pblica en aquellas reas urbanas y explotaciones animales con un manejo sanitario inapropiado. Como especie polfaga es atrada a diferentes sustratos: alimentos, desperdicios, secreciones y excretas para alimentarse. Este contacto con fuentes de contaminacin y alimentos la transforman en un vector mecnico eficiente de patgenos productores de enfermedades para el hombre y los animales en condiciones naturales. Este insecto puede transportar microorganismos a nivel de su morfologa externa, e internamente en su tubo digestivo, est en la razn por la cual el nmero de calvas fue mucho mayor al ser comparada con la muestra recolectada de agua. y Muestra A ua Resi ual. Es un tipo de agua que est contaminada con sustancias fecales y orina, procedentes de desechos orgnicos humanos o animales. Su tratamiento nulo o indebido genera graves problemas de contaminacin debido a los agentes patgenos de origen humano presentes en las excretas con el propsito de cortar el ciclo epidemiolgico de transmisin. Estos son, entre otros: - Coliformes totales - Salmonellas - Coliformes fecales - Virus La muestra de agua residual pareci tener una menor cantidad de fagos presente, ya que el nmero de calvas fue escaso, y fue apreciable visualmente hasta una periodo incubatorio de 48 hrs, a las 24 hrs apenas y era apreciable los halos
9 8 7 6 5

CONCLUSIONES Se logro en esta prctica detectar y cuantificar bacterifagos especficos de Escherichia coli (coliformes) en una muestra de agua residual y en moscas. Se estableci la contaminacin de ambas fuentes de bacterifagos especficos (probablemente bacterifagos T4, que son parsitos especficos para la E. Coli), Identificando un mayor nmero de UFP en las tres disoluciones que correspondan a la solucin de la maceracin de las moscas que fue filtrada despus de centrifugarse. Debido a que este insecto puede transportar bacterifagos a nivel de su morfologa externa, e internamente en su tubo digestivo.

BIBLIOGRA IA 1. Carballal G. Virologa Mdica. Buenos Aires: El Ateneo, 1991; 1- 23. 2. Fields B. Microbiologa, 2 ed. Buenos Aires: Editorial Mdica Panamericana, 1994.; 415- 436. 3. Jawetz E, Melnick J, Adelberg E. Microbiologa Mdica. Mxico: El Manual Moderno, 1992; 397- 420.
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