Gua: Equipamiento bsico en bacteriologa

ESCUELA DE SALUD

GUA EQUIPAMIENTO BSICO EN BACTERIOLOGA

DIRIGIDO A ALUMNOS DE:

Tcnico de laboratorio Clnico y Banco de Sangre

PRE-REQUISITO:
LCS 2100, talleres de INS1100

Autores: TM Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC

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INTRODUCCIN.Un laboratorio de microbiologa, ante todo debe ser extremadamente limpio y funcional. Debe constar de una sala para preparar los medios de cultivos donde generalmente se ubican: autoclave, horno Pasteur, destilador de agua y otros equipos. Adems, debe existir una sala destinada a las manipulacin propiamente tal, donde se realizan los aislamientos y siembras; manipulaciones que generalmente se ejecutan bajo una cmara de flujo laminar. Es esencial que el laboratorio posea una pieza para lavado y secado del material utilizado, as como tambin de sistemas de esterilizacin de desechos. Otra sala importante que debe existir es la de reactivos y en muchas ocasiones es fundamental tambin exista una para material de vidrio. El laboratorio debe tener instalacin de gas y agua, as como tambin tomas de vaco, pudiendo estar dotado de un dispositivo productor de gas inerte para el cultivo de microorganismos anaerbicos.

OBJETIVOS:
Al finalizar el taller el alumno ser capaz de Identificar los equipos bsicos de la seccin de bacteriologa y su uso para el desarrollo de los anlisis microbiolgicos. Trabajar con materiales propios de la seccin. Manipular cuidadosamente el material de un laboratorio

REALIZADO POR:
Tecnlogo Mdico, Bioqumico de laboratorio clnico, Medico laboratorista.

DURACIN:
90 minutos

NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE

Mximo 20 alumnos.

Autores: TM Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC

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MARCO TEORICO
La seccin de bacteriologa es la de mayor riesgo biolgico en un laboratorio clnico y por lo tanto es importante conocer como esta organizada desde su infraestructura, equipos, y materiales que son ms propios de esta unidad, pero no necesariamente todos exclusivos de ellas. Esto nos permitir saber desplazarnos, cuidar y mantener su material y sin duda trabajar sin riesgo Materiales ms utilizados por reas: Sala de preparacin de material: Es un rea donde se recicla el material que ha sido sometido al proceso de lavado y/ o desinfeccin y deber seleccionarse, prepararse y distribuirse nuevamente. Contaremos con mesones, protectores oculares, iluminacin, Sala de lavado y de secado de material. Esta rea recibe todo el material utilizado y es aqu donde se descontamina, lava, desinfecta para ser eliminado o recicla. Contaremos con mesones, lavamanos profundos, protectores oculares, lupa, muy buena luz, destilador o bidones de agua. Debe existir extractores o una buena ventilacin ; ya que se trabaja con muchos productos txicos y / o voltiles AUTOCLAVE Equipo fijo de acero inoxidable, que se emplea para la esterilizacin de material de laboratorio en forma manual o automtica los objetos que resisten altas temperaturas, por medio de vapor directo. Los autoclaves se usan para la descontaminacin bacteriana segn Normas procedimientos, tcnicas de laboratorio ISP 1994

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Sala de proceso de exmenes:

Encontraremos una gran variedad de equipos y materiales que se describen a continuacin

Algunos de los instrumentos ms utilizados en los laboratorios, son los elaborados en vidrio que se caracterizan por ser resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dixido de silicio, bajo lcali, xido brico y vestigios de otros xidos, lo que condiciona su escaso coeficiente de dilatacin, teniendo una gran aplicacin en la fabricacin de materiales de laboratorio, uno de los mas conocidos es el vidrio PYREX. As como los elaborados de distintos metales pesados como platino, mercurio, aluminio, cobre que les otorgan caractersticas como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son muy manejables sin alterar su composicin. MATERIALES PARA REALIZAR TECNICAS O PROCEDIMIENTOS Los siguientes materiales estn formados de uno o varios elementos de los antes mencionados. ASA BACTERIOLGICA: Esta formada de una base que puede estar hecha de platino, acero, aluminio y un filamento que puede ser de nicromo, tungsteno o platino que termina o en aro o en punta, este instrumento de laboratorio nos ayuda transportar o arrastrar microorganismos de un medio a otro medio para su adecuado desarrollo, as como para la realizacin de frotis .ASA MICOLGICA: Esta formada de una base que puede estar hecha de platino, acero, aluminio y un filamento ms grueso que el asa bacteriolgica que puede ser de alambre o platino que termina o en un ngulo de 45 o forma de L, este instrumento de laboratorio nos ayuda transportar o arrastrar hongos de un medio a otro medio para su adecuado desarrollo, as como para la realizacin de frotis. TERMMETRO: Medir la temperatura es una de las operaciones fundamentales en los laboratorios de microbiologa y parasitologa, as como en una gran cantidad de procesos biolgicos. El termmetro esta formado de un tubo de vidrio de paredes gruesas, graduado con un bulbo lleno de mercurio o alcohol en uno de sus extremos el cual al dilatarse pasa por un tubo capilar en el interior del t al reaccionar a los cambios de temperatura. ( recuerda taller de Lectura de termmetros) MATRAZ ERLENMEYER: Tiene forma acampanada con el fondo plano, graduado, sirve para preparar o medios de cultivo, reactivos, colorantes, soluciones o para mantener en medio liquido una gran cantidad de microorganismos. No mide correctamente los lquidos. VASO DE PRECIPITADO: Tiene forma cilndrica con base plana y en su borde superior una ranura triangular que le sirve para verter los lquidos son graduados en diferentes capacidades.

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PROBETA: Son cilindros de dimetro variable. La base de la probeta es amplia y plana y en el extremo superior generalmente tiene doblado el borde en forma de pico su capacidad es muy variable ya que hay desde 50 ml hasta 1000 ml o ms. Graduada en su exterior con unidades variables

TUBO DE ENSAYO: Tubo de cristal con base convexa y en el otro extremo una apertura que puede ser lisa o en rosca, se puede encontrar en diversos tamaos, sirven para contener sustancias liquidas, slidas o semislidas. CAJA DE PETRI (PLACA DE PETRI): En forma de plato plano con bordes elevados que consta de una base y una tapa. Contiene medios de cultivo slidos (Agar), que sirven para el crecimiento, desarrollo y aislamiento de microorganismos.

PORTA OBJETOS: Placa de vidrio rectangular que sirve para realiza diferentes tipos de frotis. CUBREOBJETOS: Placa de vidrio muy delgada, de forma cuadrada o rectangular que sirve para colocarla sobre frotis hmedos o fijos. MECHERO DE BUNSEN: Es un tubo con un dimetro de 1.5 cm. con una base redonda de aproximadamente 10 cm. de dimetro, que en la parte baja del tubo se encuentra una entrada para el gas butano y un anillo regulador. Por la parte superior del tubo se forma la flama del mechero la cual brinda un margen de seguridad al formar un rea de esterilidad de aproximadamente 15 a 25 cm. de radio.

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PIPETAS PASTEUR: Se prepara a partir de un tubo de vidrio de diferente dimetro (2 a 8 Mm.). En un extremo debe tener algodn card y el otro de ha estirado y cerrado a la llama

Pipetas Pasteur
MATERIALES PARA OBSERVACIN ESTEREOMICROSCOPIOS (LUPAS)

MICROSCOPIO El mas usado es el de campo claro. Este utiliza como fuente de iluminacin la luz blanca, cuyo haz pasa directamente a travs del objeto que se desea observar.

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Gua: Equipamiento bsico en bacteriologa EQUIPOS DE CUIDADOS Y MANTENCION ESPECIAL REFRIGERADORES Unidades de refrigeracin, cuya utilidad es la mantencin de los medios de cultivos La temperatura para mantencin de medios es de 4 C. CMARAS DE CULTIVO Las estufas o cmaras de cultivo son unos equipos indispensables en la seccin de bacteriologa, se utilizan a una temperatura de 37C para realizar cultivos de bacterias, hongos a una temperatura igual a la del cuerpo humano. Existen estufas especiales al vaco para cultivo de anaerobios, el aire de la estufa se elimina por una bomba de vaco y se sustituye por nitrgeno, hasta obtener una atmsfera pura.

BALANZAS Instrumento de precisin para pesar los medios de cultivos y reactivos que se preparan en un laboratorio de microbiologa.

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CENTRFUGAS Son equipos mdicos utilizados en los laboratorios clnicos y otros, para la separacin de los solutos y sus solventes.

EQUIPOS DE ANLISIS: Equipo lector de exmenes de orina CMARA DE FLUJO LAMINAR: Equipo para manipular muestras biolgicas bajo una atmsfera microbiolgicamente controlada. Gabinete de seguridad biolgica con ventana frontal deslizable y alarma que indica el nivel de apertura de la ventana. Flujo de aire vertical y recirculacin de aire filtrado. De acero inoxidable. Con filtros absolutos de eficiencia del 99.99% (HEPA) y retencin de partculas de 0.3 micras. Con llave para toma de oxgeno.

Nota: Recordar taller de Campanas de seguridad

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Gua: Equipamiento bsico en bacteriologa DOCUMENTOS Y NORMAS Precauciones y condiciones de trabajo en el Laboratorio (Normas de bioseguridad) 1. Lavarse las manos al entrar y salir de la unidad 2. Usar pecheras o protectores segn trabajos a realizar en la seccin ( retirar al salir) 3. Usar guantes segn actividad ( retirar al salir) 4. -Para evitar posibles contaminaciones, es esencial mantener la limpieza y el orden dentro del laboratorio. 5. Antes de comenzar a trabajar se debe limpiar el rea limpia con una solucin de hipoclorito de sodio 5% o una solucin de amonio cuaternario. 6. Se recomienda trabajar sentado frente a mesones lavables 7. Se debe escoger el sitio con menor corriente de aire (las ventanas deben estar cerradas) y alejado de las zonas de circulacin de otras personas. 8. Se debe trabajar en las proximidades de un mechero. 9. Los tubos de ensayo o matraces que contengan medios de cultivos o cultivos de microorganismos, nunca deben abrirse en posicin vertical, sino lo ms horizontalmente posible (inclinados) y para quitar el tapn de algodn se mantendrn inclinados con una mano y se abrirn con la otra, la que sostendr a su vez el asa (con el dedo meique, se retira el tapn de algodn que obtura el tubo). NOTA: RECORDEMOS QUE LOS REFRIGERADORES SON SOLO DE USO DEL LABORATORIO Y JAMS DE USO PERSONAL. NO PIPETEAR CON LA BOCA Instrucciones para siembra bacteriolgica 1. Una vez abierto el tubo de la forma sealada, se flamea en el mechero por algunos segundos por la parte del orificio, repitiendo dicha operacin una vez realizada la siembra (el tapn nunca debe dejarse sobre el mesn). 2. Antes de utilizar las asas con hilos de platino, que sirven para las siembras y/o repiques, stas deben flamearse al rojo en posicin vertical bajo la accin de la llama; tambin debe flamearse el mango.

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3. Antes de efectuar la siembra y/o repique debe esperarse algunos segundos a que se enfren, pudiendo enfriarse tambin en el borde de la placa de Petri que contiene el medio de cultivo. Inmediatamente despus de haberlas utilizado, deben flamearse nuevamente. Esta ltima operacin as como la de siembra debe realizarse lentamente evitando diseminar el microorganismo en el medio ambiente. 4. Las placas de Petri deben abrirse mantenindolas en lo posible en posicin vertical. 5. Una vez utilizadas, las pipetas se depositan en un recipiente para desecho de material corto punzante siendo recomendable descontaminarla antes de su eliminacin. NOTA: Con la descontaminacin en autoclave no se recomienda manipular la pipeta, sino que eliminar directa e inmediatamente en la caja de cortopunzante contaminado

INSUMOS Y EQUIPOS NECESARIOS PARA EL TALLER

Sala de Laboratorio clnico Microscopios Centrifugas Refrigerador Balanza Cmara de flujo laminar Mecheros Pecheras Protectores oculares Guantes desechables Material de vidrio ( pipeta, placa petri, termmetro, tubos, probetas Equipo de anlisis de orina

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DESCRIPCIN DEL PROCEDIMIENTO

Actividad 1 El docente proceder a hacer una descripcin de cada uno de los equipos, productos e instrumentos que se analizan en la gua detallando su utilidad en el proceso de anlisis microbiolgico. Actividad 2 A los alumnos se le asignar uno de los equipos, productos e instrumentos que deber analizar en detalle con su compaero y el docente.

BIBLIOGRAFA
Introduccin al laboratorio de microbiologa. Prof. Jaime R. Montealegre A. Ctedra de microbiologa general- 2002 Universidad de Chile Normas, procedimientos, tcnicas de laboratorio.ISP 1994

METODOLOGA DE EVALUACIN:
El taller ser evaluado mediante la realizacin de preguntas en relacin a un equipo, instrumento o producto del rea de uso en bacteriologa referente a lo observado. y relacionando esto con su comportamiento segn los casos que le indique el docente Se aplicara una pauta de cotejo

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Gua: Equipamiento bsico en bacteriologa Ejemplo de preguntas El alumno deber contestar el siguiente cuestionario. 1.- Nombre el Equipo que se utiliza para optimizar el desarrollo bacteriano, a que temperatura funciona? R.- INCUBADORA O ESTUFA DE CULTIVO. 37C 2.- Como se llama el equipo que se utiliza para esterilizar el material contaminado, a que temperatura y cuanto tiempo debe colocarse. R.- AUTOCLAVE .15 MINUTOS A 121C. 3.-Funcin de La cmara de flujo laminar. R.- Proporciona aislamiento de las muestras y de los medios de cultivo, para evitar contaminaciones. El alumno debe usar los artculos de bioseguridad al manipular los materiales y retirarlos adecuadamente Nombre del alumno: Fecha: Nota:

Equipamiento bsico en bacteriologa 1.Cumple con una correcta presentacin personal: -delantal -pelo tomado -uas cortas y limpias 2. Sabe el nombre y uso del equipo o material asignado por el docente para evaluar 3.- Ordena y limpia su unidad al finalizar el taller 4.- Respeta las normas de bioseguridad - eliminacin de corto punzante - respeta rea limpia-y sucia 5. Responde con seguridad y certeza, fundamentando cientficamente. Observaciones.. C: Competente MC: Medianamente Competente NC: No Competente

MC

NC

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