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BREVE HISTRICO
O objeto de cristal da rocha conhecido como lente de Lanyard, datado de 721 a.C., pode ter sido a primeira lente criada pelo homem
Zacharias Jansen e um microscpio que, acredita-se, tenha sido fabricado por ele. O modelo foi encontrado na Holanda, no sculo XVII (1590)
Modelo de microscpio italiano, utilizado por volta do ano 1600. Eram simples e pequenos.
O primeiro desenho de um microscpio com trip (1631), e o microscpio de John Yarwell, construdo em 1683
Microscpio solar de projeo, modelo italiano de 1760 Em 1665, o ingls Robert Hooke, publica o livro Micrographia. Hooke fabrica um microscpio ptico composto. O primeiro a fazer observaes microscpicas De materiais biolgicos foi o Antonie van Leeuwenhoek (1632 - 1723).
Fonte: www.invivo.fiocruz.br
Microscpio com espelhos e conjunto de acessrios. Modelo construdo pelo italiano Giovan Battista em 1813
Microscpio de Culpeper
Microscpio de Cuff
Fonte: www.invivo.fiocruz.br
Microscopia ptica
Microscopia eletrnica
MICROSCPIOS
Existem duas categorias de microscpios: A) Microscpio ptico: utiliza-se da radiao de ondas luminosas (feixes de luz), sendo esta refratada atravs de sistemas de lentes de vidro. O campo microscpico (ou a rea observada) aparece brilhantemente iluminado e os objetos estudados se apresentam mais escuros. Geralmente, os microscpios desse tipo produzem um aumento til de aproximadamente, 1.000 X. Poder de resoluo: 0,2m B) Microscpio eletrnico: feixes de eltrons A radiao empregada a de feixe de eltrons que se propaga no vcuo, sendo ele refratado por meio de lentes eletromagnticas. O microscpio eletrnico produz aumentos teis de 200 a 400 mil vezes, sendo seu poder de resoluo cerca de 100 vezes maior que o do microscpio de luz. No entanto, impossvel observar material vivo neste tipo de microscpio. MICROSCPIO TICO: sistema composto : oculares + objetivas Campo claro, campo escuro, contraste de fase, fluorescncia imagem duas dimenses ampliao at 1.000 - 2.000 x
Na prtica os microscpios modernos tem um grande nmero de outros elementos ticos incorporados ao caminho da luz dentro do tubo, como filtros, analisadores, prismas, espelhos , lentes Zoom, etc. Na microscopia de luz existem vrios tipos de aparelhos, os quais apresentam sistemas de lentes e filtros que selecionam um ou outro tipo de luz, diversificando as imagens formadas.
Charriot
Oculares
Objetivas
Estes aparelhos so Microscpios especiais e so chamados: microscpio de campo claro, campo escuro, fluorescncia, invertido, confocal, etc.
Condensadora
Macro /Micro
Filtros
http://micro.magnet.fsu.edu/optics/intelplay/simulator/index.html
Microscopia de campo claro O microscpio de campo claro o mais comum microscpio de luz. Nesse microscpio, o campo de viso aparece iluminado e os objetos que esto sendo observados
Luz convencional
Contraste de fase
PROPRIEDADES DO MICROSCPIO PTICO - RESOLUO E AUMENTO Normalmente, a utilidade do microscpio est associada a sua capacidade de ampliao da imagem de um dado objeto. No entanto, a qualidade de um microscpio est, antes de tudo, ligada ao seu poder de resoluo, que pode ser inferido indiretamente, atravs de resoluo do sistema ptico.
Processamento de material biolgico para Microscopia ptica Para uma compreenso adequada da estrutura e funcionamento das clulas, tecidos e rgos, essencial o conhecimento das ferramentas e dos mtodos de investigao. O procedimento mais usado no estudo de tecidos ao microscpio consiste na preparao de cortes histolgicos e sua colorao. No microscpio ptico a imagem se forma aps a passagem de um feixe de luz atravs de alguma estrutura. No entanto, na maioria dos casos os tecidos e rgos so espessos, e no permitem a passagem adequada da luz para formao de uma imagem. Alm disso, com poucas excees, os tecidos so
Para que possam ser guardadas por muito tempo, as amostras de clulas e tecidos precisam em geral
de um tratamento qumico que garanta sua preservao. Esse tratamento inclui vrias etapas: 1. Fixao: o tratamento da amostra com substncias qumicas, como o formol, que preservem sua
forma original.
2. Desidratao: a substituio da gua presente dentro e fora das clulas por um solvente orgnico, como o etanol ou metanol. Esse solvente tanto pode ser removido, deixando a lmina secar, quanto
pode ser substitudo por parafina ou outra resina que torne o tecido rgido, permitindo que seja
fatiado. 3. Microtomia: tecidos como fgado ou msculo so muito espessos e precisam ser cortados em fatias
mais finas, que permitam a passagem parcial da luz. Uma vez embebidos em parafina, deixa-se
solidificar e o tecido pode ser cortado (fatiado). 4. Colorao: como a maioria das clulas e seus componentes no so naturalmente coloridos, uma srie de corantes foi testada e, devido a sua afinidade qumica por determinados componentes celulares, usada, ajudando na identificao dos diferentes compartimentos celulares. O azul de metileno um desses corantes.
Fixao
Desidratao Incluso ou infiltrao
Micrtomo
Microtomia
Montagem dos cortes Colorao Lamnula
10mm
10mm
Microscpio de fluorescncia:
PRTICA