Composio e atividade antimicrobiana de leos essenciais de Poiretia bahiana C.

Muller (Papilionoideae-Leguminosae)

A espcie Poiretia bahiana, popularmente conhecida como arrudinha, arruda da serra ou arruda brava, tem uma ocorrncia restrita aos campos rupestres da Chapada Diamantina, BA. Suas partes areas apresentam um aroma pungente e usada pelo povo do local no controle de infestao por pulgas e no tratamento de hemorridas, dores nas articulaes e sinusite. Neste trabalho, relatamos a composio dos leos volteis das partes areas de cinco espcimes e do leo voltil obtido dos frutos de uma espcime de P.bahiana, os quais foram coletados em diferentes regies da Chapada Diamantina. Nos leos volteis que foram analisados por CG-FID e CG-EM foram identificados vinte e nove componentes sendo que os dois primeiros foram a umbelulona, em concentraes entre 55,0% e 75,3%, e sabineno, em concentraes entre 10,3% e 25,2%. O leo das partes areas de um espcime e o leo dos frutos de outro espcime foram avaliados quanto s suas propriedades antimicrobianas contra seis bactrias, duas leveduras e cinco fungos filamentosos pelos ensaios de difuso em gar e microdiluio. Os leos exibiram atividade contra Escherichia coli, Salmonella choleraesuis, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus herbarum, Microsporum canis, Trichophyton rubrum e foram inativos contra Pseudomonas aeruginosa, Aspergillus fumigatus e Penicillium notatum. A toxicidade do leo das parte areas foi determinada contra Artemia salina apresentando uma LC50 de 459,03 g mL.

Introduo
O gnero compreende 12 espcies que so comuns na Amrica tropical e subtropical, do Mxico e Antilhas at a Argentina. No Brasil, as pessoas utilizam algumas espcies com fins teraputicos. Assim, P. tetraphyla usado como tnico estomacal, P.latifolia usado para entrada de aroma para o ch e considerada como um afrodisaco e outra espcie Poiretia utilizado no estado de Mato Grosso como antiemtico, contra a febre e meningite. P.bahiana foi relatada pela primeira vez em 1984 e sua ocorrncia restrita aos campos rupestres na Chapada Diamantina, BA, na regies nordeste do Brasil. As partes areas de P.bahiana, conhecido como "arrudinha", apresentam um odor pungente e tm sido utilizados pelas comunidades locais como fumigante para matar pulgas, no tratamento de hemorridas, dor de articulao e descongestionante nasal em sinusite. No tratamento da sinusite, a planta usada por inalao dos vapores liberados na gua fervida e possvel que, alm de uma ao descongestionante, h tambm uma ao antimicrobiana contra bactrias e fungos, geralmente associada sinusite. Como fumigante para matar pulgas, a parte area da planta so dispersas pelos lugares infestados. O objetivo deste trabalho o estudo da composio dos leos volteis das partes areas de cinco espcimes e do leo voltil dos frutos de um espcime de P.bahiana, alm da avaliao do sistema operacional Propetiesantimicrobiana do leo a partir de dois espcimes contra seis bactrias,Leveduras Duas e cinco fungos filamentosos e da toxicidade do leo das partes areas contra Artemia salina. As amostras foram colhidas em quatro lugares diferentes da Chapada Diamantina chamado Morro do Pai Incio,Mucug, Morro de chapu e Chapadinha.

Experimental
Material vegetal

As partes areas de trs espcimes de P.bahiana foram coletadas em julho de 2004 no Morro do Pai Incio (MPIFI), Mucug (MFI) e Chapadinha (CFI), quando as plantas estavam florescendo. Os frutos foram coletados a partir da espcime encontrada na Chapadinha (CFr). Em setembro de 2004, quando as plantas no apresentavam flores, partes areas das duas amostras foram coletadas em Mucug (MWFl) e Morro do Chapu (MCWFI). As espcies foram identificadas pela Prof. Maria Lenise da Silva Guedes e espcimes comprovadas foram depositadas no herbrio Alexandre Leal Costa no Instituto de Biologia, UFBA, sob os nmeros 032231, 032232, 032233, 032244 e 032245, respectivamente, para MPIFI, MFI, CFI, MWFI e MCWFI. Anlise de leos essenciais A parte area e frutos foram secados ao ar em temperatura ambiente e reduzidos em pedaos pequenos. Os leos volteis foram obtidos por 3h de hidrodestilao em um aparelho do tipo Clevenger. A identificao dos compostos foi realizada por comparao de seus ndices de reteno e espectros de massa com os relatados na literatura e armazenados nas bibliotecas NIST. Os ndices de reteno foram calculados pela co-injeo com uma srie homloga padro de n-alcanos. GC anlises foram realizadas conforme descrito anteriormente. Estirpes microbianas Treze estirpes microbianas foram usadas para acessar as propriedades antimicrobianas das amostras: seis bactrias, duas leveduras e cinco fungos filamentosos. Microorganismos foram obtidos a partir das colees de cultura do Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade - INCQS/Brasil da seguinte forma: Eschericia coli ATCC 25922, Salmonella choleraesuis ATCC10708, Pseudomonas aeuginosa ATCC 27853, Proteus mirabilis ATCC29906, Staphylococcus aereus ATCC 25923, methicilinresistentes Staphylococcus aereus (MRSA) ATCC 33591, Candida albicans ATCC 90028, Cryptococcus neofomans ATCC 32045, Aspergillus fumigatus ATCC 16913,Cladosporium herbarum ATCC 26362, Microsporum canis ATCC 32903, Penicillium notatum ATCC 9478 e Trichophyton rubrum ATCC 28189. As bactrias foram cultivadas em Agar Mueller Hinton (MHA) e fungos em AgarSabouraud Dextrose (SDA). Inculos foram preparados como descrito anteriormente. Diluio de leos essenciais Os leos essenciais foram testados puros e em diluies que variam de ,5 mg mL 0, 5 3mg mL ) para o mtodo de difuso em Agar e para a determinao da concentrao inibitria mnima por ensaios de microdiluio. As diluies foram preparadas em gua destilada estril com adio de Tween 80 (Merck) para a primeira diluio em uma concentrao de 10% (v / v); cada diluio misturada em aparelho Vortex. Devido similaridade das composies de leos, apenas os leos das partes areas coletadas em Morro do Pai Incio e de frutos coletados na Chapadinha tiveram suas propriedades antimicrobianas e toxicidade testada.

umbellulane

sabinene

Mtodo de difuso em gar Para avaliar a atividade antimicrobiana, os ensaios foram realizados em duplicata, como descritos anteriormente. Os resultados de bioensaio foram expressos em termos de mdia de zona de inibio dimetros: < 9 mm, inativo; 912 mm, parcialmente ativo; 12-18 mm, muito ativo. Concentrao inibitria mnima MIC ensaios foram realizados pelo mtodo de microdiluio em caldo, conforme descrito anteriormente. Toxicidade contra Artemia salina O ensaio de letalidade de camaro salmoura foi realizado pelo mtodo de McLaughlin e colegas de trabalho. Ovos de artemia (Artemia salina) foram incubados em soluo salina de NaCl (38gL). O leo essencial foi testado nas concentraes de 300, 500 e 1000gL. Sobreviventes foram medidos aps incubao de 24h a 10 C. Os dados coletados foram informatizados e valores LC50 determinado pela anlise de Probit. Resultados e Discusso Vinte e nove compostos foram identificados nos leos essenciais das partes areas e frutos de P.bahiana. Umbellulone o principal constituinte nos leos essenciais das partes areas de todas as espcimes de P.bahiana com flores ou sem flores, com uma concentrao mdia de 60,6%. O prximo componente mais concentrado foi sabinene, com uma concentrao mdia de 16%. O leo essencial de frutos apresentaram umbellulone (58,2%) e sabinene (25,2%) como compostos predominantes tambm.