Modulo II sub mdulo II Practica No 3 Cromatografa de capa fina (CCF) OBJETIVO: Conocer la cromatografa de capa fina como un mtodo

o de separacin e identificacin cualitativa de una sustancia. Elegir mediante cromatografa en capa fina el eluyente o mezcla de eluyentes ideales para separar los pigmentos del guajillo. MATERIALES E INSTRUMENTOS Vaso de precipitados de 100 ml Vidrio de reloj Papel filtro Capilar. Lpiz Regla Tijeras Frasco con tapa Chile guajillo. Alcohol etlico. Acetona Benceno

EQUIPOS Licuadora.

Actividad N 1. Preparacin de la sustancia problema. 1.1. Maceracin del chile guajillo. a) b) Triturar con uso de la licuadora 6 chiles guajillos en 40 ml de alcohol etlico. Vaciar la solucin en un frasco con tapa y dejar macerar por un da.

Actividad N2 Instalacin de equipo para CCF (cromatografa en capa fina). 2.1. Preparacin del papel filtro. a) Recortar un rectngulo 5.0-6.0 cm de largo y un ancho de 2.0 cm, cuidar no dejar muescas o rebabas al cortar esto puede daar el ascenso de la fase mvil. b) Marcar una lnea con lpiz, que indicara el origen, a un centmetro del extremo inferior del papel filtro. c) Sealar con lpiz el lugar donde sern colocadas las aplicaciones, cuidando una distancia entre 0.5 cm entre cada una de las marcas. d) Colocar la aplicacin de las muestra con ayuda de un capilar previamente estirado con calor para que la aplicacin sea lo ms fina posible (cromatograma). 2.2. Preparacin de la cubeta cromatografa. a) Colocar el vaso de precipitados en una superficie plana. b) Vaciar el eluyentes o mezcla de eluyentes en el vaso de precipitados de manera que no sobrepasen el punto de aplicacin. c) Introducir el cromatograma de forma vertical en el vaso de precipitado (cubeta de cromatografa), evitando que se caiga en el interior. d) Colocar el vidrio de reloj en la parte de arriba del vaso de precipitado ( cubeta de cromatografa) 2.3. Obtencin del RF

a) Al finalizar la etapa final se retira el cromatograma y se deja secar. b) Analizar el cromatograma (esquema1), si las manchas obtenidas no logran observarse como en la figura (b) claramente separadas, repetir el paso 2.2 con otra eluyente o mezcla de eluyentes. Si son fcilmente diferenciadas cada una de las manchas continuar con el siguiente paso.

Esquema 1

c) Marcar con lpiz la distancia entre el punto de origen y la distancia recorrida por la fase mvil (frente del disolvente). Anotar este dato. d) Encontrar la distancia entre el origen y el centro de cada una de las manchas obtenidas. e) Anotar el valor del RF de cada una de las manchas (esquema 2).

Esquema 2

Actividad N3. Identificacin del grupo carbonilo y alcoholes 3.1. Prueba a la gota del grupo carbonilo. a) Disolver cuatro gotas de muestra problema en 5.0 ml de dioxano y agitar. b) Agregar 1.0 ml de NaOH al 10% y despus el lugol. c) Observar y anotar los cambios. 3.2. Prueba a la gota del grupo alcohol. a) En un tubo de ensaye colocar 0.5 ml de la solucin problema. b) Aadir con cuidado 0.3 ml de cloruro de acetilo. c) Observar si hay desprendimiento de calor. Actividad N5. Cuestionario. 1. 2. 3. 4. 5. Define Qu es fase estacionaria? Define Qu es fase mvil? A que se llama RF, que utilidad tiene y cmo se calcula? De qu manera afecta la polaridad del eluyente a la CCF? Cmo se puede elegir el mejor eluyente para obtener una separacin adecuada de los compuestos? 6. Coloque un esquema de los tipos diferentes de cromatografa y su utilidad en la actualidad. 7. Cul es el fundamento de la cromatografa?

8. Investigue las siguientes siglas CP,CCF,CG,CLAR(HPLC) y CLUR(UPLC) 9. Si el compuesto analizar no es colorido Qu se debe realizar para observar dichos compuestos? 10. Mencione Qu es un revelador qumico e investigue 5 tipos de reveladores?