CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA I. OBJETIVOS a) Conocer la tcnica de cromatografa en capa fina, (c.c.f.

), sus caractersticas y los factores que en ella intervienen. b) Calcular valores de r.f. de varias sustancias. c) Deducir, a travs del r.f., la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados. d) Aplicar la tcnica de c.c.f. como criterio de pureza de las sustancias. e) Aplicar la tcnica de c.c.f. como criterio parcial de identificacin de sustancias.

II. MATERIAL

Pipeta de 5 ml * Probeta de 25 ml * Tubos capilares Agitador de vidrio * graduados

1 1 3 1

Esptula Frasco p/cromatografa c/tapa Portaobjetos

1 3 6

III. SUSTANCIAS P-Hidroxiacetanilida m-Nitroclorobenceno Benzona Hexano Metanol Etanol Acetona Acetato de etilo Yodo Sulfato de sodio anhidro Nipagn Nipasol

IV. INFORMACION a) En cromatografa en capa fina (c.c.f.) el grado de elucin de las sustancias depende de su polaridad, as como de la polaridad del eluyente utilizado. b) En c.c.f., despus de eluir y revelar una sustancia pura, sta se observa como una mancha bien definida.

c) En cambio, sustancias impuras y mezclas dejan varias manchas o una estela en su recorrido por la placa. d) Sustancias iguales tienen el mismo comportamiento en c.c.f. bajo las mismas condiciones experimentales.

V. PROCEDIMIENTO Experimento 1.- Polaridad de las sustancias. Es un experimento comparativo en el que se desea saber cul sustancia es ms polar y cul menos polar. Para ello se le proporcionar a usted las soluciones 1 y 2. Prepare 3 cromatoplacas (nota 1) y aplique estas soluciones en cada una de ellas (nota 2), de tal manera que queden como se indica en la siguiente figura:

Solucion

Solucin 2

Eluya la primera cromatoplaca con hexano, la segunda con AcOEt y la tercera con MeOH. En cada caso, deje evaporar el eluyente y revele con luz ultravioleta, observe y anote sus resultados (nota 3), luego revele con yodo, observe nuevamente (nota 4). Con base en los resultados obtenidos, conteste: a) Cul es el eluyente adecuado?, porqu? b) Cul es la sustancia ms polar? porqu? c) Cul es la sustancia menos polar? porqu? Experimento 2.- Pureza de las sustancias. Se desea saber cul sustancias es pura y cul es impura.

Para ello se le proporcionar a usted las soluciones 3 y 4. Prepare una cromatoplaca y aplique en ella ambas soluciones por separado, como en el experimento anterior. Eluya entonces con AcOEt. Revele con luz U.V. y luego con yodo. Anote sus observaciones. Conteste: Cul es la sustancia pura? y Cul es la impura? Experimento 3. Influencia de la concentracin. Se desea saber cul es el efecto de la concentracin de una sustancia en c.c.f. Para ello se le proporcionar a usted la solucin 5. Prepare una cromatoplaca y en ella haga 3 aplicaciones de esta solucin en orden creciente de concentracin como se indica en la siguiente figura:

3 gotas

gota 9 gotas

Eluya entonces con AcOEt. Revele con luz U.V. y luego con yodo. En cada caso observe la intensidad de la coloracin de las manchas. Con base en lo anterior, deduzca la relacin que existe entre la intensidad de la coloracin de las manchas y la concentracin de la sustancia en cada caso. Experimento 4.- La c.c.f. como criterio parcial de identificacin. Se desea identificar los componentes de una mezcla, por medio de su comportamiento en c.c.f. y comparndolo con el de sustancias estandar

bajo las mismas condiciones experimentales. Para esto, se le proporcionarn a usted las soluciones 6 A y 6 B, (nota 5). Prepare dos cromatoplacas y en ambas haga las siguientes aplicaciones:

A+B B

Luego, eluya una de las cromatoplacas con AcOEt revelando con luz U.V. y despus con yodo. Anote sus observaciones. La otra cromatoplaca elyala varias veces (7 por lo menos) con un eluyente menos polar, por ejemplo una mezcla de hexano-AcOEt (4:1), dejando secar la placa entre una elucin y otra. Observe la placa a la luz U.V. despus de cada elucin. S despus de la cuarta elucin la mezcla no se separa, siga eluyendo hasta lograr la separacin. Finalmente revele con yodo. Anote sus observaciones.

Rf = Factor de retencin.

Frente del eluyente

Mancha

Punto de aplicacin

Rf = a/b (a) = Distancia del punto de aplicacin a la mancha. (b) = Distancia del punto de aplicacin al frente del eluyente Rf ideal = 0.5

Notas 1) Para preparar las cromatoplacas se introducen dos portaobjetos juntos, limpios y secos, en una suspensin de gel de slice al 35% en AcOEt. 2) Para aplicar las soluciones a las cromatoplacas utilice los capilares, los que previamente deben ser estirados en la flama del mechero con el fin de que tenga el dimetro adecuado. 3) Con un lpiz, marque ligeramente el contorno de las manchas para mejor ubicacin de las mismas. 4) Para mayor claridad de los resultados, incluya en su informe los dibujos de las cromatoplacas de todos los experimentos de esta sesin. Hgalos del mismo tamao de las placas. 5) En este caso son soluciones de nipagin y nipasol respectivamente.

6) No marque la ubicacin de las manchas en la cromatoplaca hasta despus de la separacin. VI ANTECEDENTES. a) Concepto de cromatografa. Clasificacin de la cromatografa. Cromatografa de adsorcin y cromatografa de particin. Ejemplos. b) Fenmeno de adsorcin. La propiedad de retencin. Concepto de R.f. c) La cromatografa en capa fina, sus caractersticas y aplicaciones. d) Eluyentes, soportes y reveladores ms comunes para cromatografa en capa fina. e) Factores que influyen en una separacin por cromatografa en capa fina.

VII CUESTIONARIO a) En el experimento 1, cul de las dos sustancias, la ms polar o la menos polar, recorre mayor distancia en la placa a partir del punto de aplicacion? porqu?. b) En ese mismo experimento, calcular los valores de r.f. y contestar Cul de las dos sustancias tiene r.f. mayor y cul menor?. c) En el experimento 3 cul es la relacin que existe entre la concentracin de la mancha de una sustancia en una c.c.f.? d) Qu significa que una sustancia tenga: rf> 0.5 ? rf = 0.5 ? rf<0.5? e) En el experimento 4, cul de las dos formas de elucin permiti mayor separacin de la mezcla?, a qu se debe sto?. f) Porqu la c.c.f. es un criterio parcial y no total de identificacin?.

VIII BIBLIOGRAFIA a) Moore J.A. and Dalrymple D.L. Experimental Methods in Organic Chemistry Second Edition, W.B. Saunders Co., Philadelphia, 1976. b) Brewster R.Q., Vander Werf C.A., Mc Ewen W.E.

Curso Prctico de Qumica Orgnica 2a. Ed., Ed, Alhambra, S.A., Madrid, 1979. c) Robert R.M., Gilbert J.C. and Rodewald L.B. Modern Experimental Organic Chemistry Third Edition, Holt, Rinehart and Winston, N.Y., 1979.