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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS Universidad del Per, DECANA DE AMRICA FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA E. A .

P CIENCIA DE LOS ALIMENTOS

LABORATORIO N 7

PROFESORA: Dra. Delia Whu Whu ALUMNA: Alvarado Cotrina, Zulma Esthepany AO: 2 10040135

2011

La mayora de los problemas analticos reales comienzan con una compleja mezcla a partir de la cual es necesario aislar, identificar y cuantificar uno o ms componentes de la misma. Se pueden plantear las siguientes cuestiones: una, de carcter cualitativ o (de qu componente se trata?), y otra de carcter cuantitativo (cunto hay de ese componente?). Para ello, se puede utilizar el mtodo instrumental de anlisis, como es la espectrofotometra para medir la absorcin de radiacin ultravioleta y visible que interacta con la materia (tomos y molculas), la misma es considerada una tcnica cualitativamente y cuantitativa basndose en la medicin del color o de la longitud de onda de una radiacin e intensidad de la misma. Se har una descripcin del mt odo espectrofotomtrico para dar al lector una idea del empleo del mismo y su utilidad en los ensayos de sustancias

Desde Newton, sabemos que la luz blanca se descompone en los colores que la integran si la hacemos pasar a travs de un prisma. Es el efecto que se repite, por ejemplo en el arco iris, el cual se dice es el espectro de la luz visible procedente del sol, son las gotas de lluvia y el aire atmosfrico lo que hacen de espectroscopio. La principal emisin de radiacin de l os cuerpos es la radiacin electromagntica en forma de luz visible , de la misma manera cada elemento qumico absorbe y emite luz de colores que componen su espectro. La longitud de onda de la radiacin puede ser desde muy pequea, en el caso de la llamada radiacin gamma, hasta muy grande en las ondas de radio. Se mide, pues, usando desde nanmetros y ngstroms hasta cientos de metros. Recordemos que un nanmetro es la milmillonsima parte de un metro (1 m = 109 nm) y que un ngstrom es la diez mil millon sima parte de un metro (1 m = 1010 A), por lo que un nanmetro equivale a 10 ngstrom (1nm = 10 A). La luz que recibimos del Sol es radiacin electromagntica que se desplaza a 300.000 kms/s, en su totalidad, pero la longitud de onda no es la misma en todos los fotones luminosos, sino que vara entre los 4000 A y los 7000 A, aproximadamente, o lo que es lo mismo, entre los 400 nm y los 700 nm. La luz blanca se descompone, en definitiva, en un espectro de diferentes bandas coloreadas, cada una definida por u na longitud de onda distinta. As, la luz de menor longitud de onda es la luz violeta, que es de alrededor de unos 4000 ngstroms, y la luz de mayor longitud de onda es la luz roja, que es de alrededor de unos 7000 mgstroms. Sin embargo, hay radiaciones de mayor y tambin de menor longitud de onda, es decir, que tienen una longitud de onda inferior a 4000 Angstroms y que tienen una longitud de onda superior a los 7000 Angstroms. Las radiaciones que van desde el violeta al rojo se dice que forman el espectro visible, pues proceden de la descomposicin de la luz blanca. Las radiaciones de longitud de onda inferior al violeta se llaman radiaciones ultravioletas, rayos X y rayos gamma, por orden decreciente en la longitud de onda. Las radiaciones de longitud de onda superior al rojo son las denominadas infrarrojas, microondas y ondas de radio, por orden creciente en longitud de onda.

ESPECTROFOTOMETRIA La espectrofotometra es un mtodo analtico que utiliza los efectos de la interaccin de las radiaciones electromagnticas con la materia (tomos y molculas) para medir la absorcin o la transmisin de luz por las sustancias. O La espectrofotometra se refiere a los mtodos, cuantitativos, de anlisis qumico que utilizan la luz para medir la concentracin de las sustancias qumicas. Se conocen como mtodos espectrofotomtricos y, segn sea la radiacin utilizada, como espectrofotometra de absorcin visible (colorimetra), ultravioleta, infrarroja. Espectrofotmetro: La absorbancia y la transmitancia de una sustancia en disolucin se miden con un aparato denominado espectrofotometro, el cual consta bsicamente de los siguientes componentes: Fuente de luz: Lmpara que emite una mezcla de longitudes de onda. Colimador: Conjunto de lentes que enfocan la luz convirtindola en un haz de rayos paralelos. Monocromador: Dispositivo que selecciona luz de una nica longitud de onda. Detector fotoelectrico: Transductor de luz en electricidad. La luz provoca el desplazamiento de electrones en el metal del detector, produciendo una corriente elctrica que es proporcional a la intensidad de la luz recibida. Registrador: Mide la seal del detector, la compara y genera una medida en una escala determinada.

Muestra: azul bromofenol (500 g/ml) Con lectura 4g/ml

Concentracin original x volumen deseada = concentracin deseada x fiola de capacidad 100ml (500) x V1= 4 x (100) V1=0.8 ml

nm 500 505 510 515 520 525 530 535 540 545 550 555 560 565 570 575 580 585 590 595 600 605

% transmitancia 97.7 97.4 97.2 96.5 96.2 95.8 95.3 94.7 94.2 935 92.8 92.3 91.6 90.7 89.6 88.4 86.9 85.7 85.2 85.7 87.6 90

615 620 625 630 635 640 645 650 655 660 665 670 675 680 685

92.6 94.8 96.6 97.8 98.4 98.9 99.2 99.4 99.5 99.6 99.6 99.6 99.7 99.7 99.6

Sera la acetona un buen disolvente para la espectroscopia ultravioleta. Los disolventes deuterados se requieren siempre que se realiza investigacin qumica. Son indispensables para el mtodo ms importante en el anlisis estructural de molculas orgnicas espectroscopia de RMN. La RMN es una tcnica analtica rica en informacin y no destructiva que ayuda a los investigadores a entender estructuras y dinmicas moleculares. Dependiendo de la aplicacin y la sensibilidad del espectrmetro de RMN. Para todos los productos patrones deuterados hidrosolubles, el contenido en agua se especifica por Karl Fischer y RMN.

En muchos espectrofotmetros, la anchura de la re ndija es ajustable. Cules son las ventajas de una re ndija estrecha y una rendija ancha?

Una de las caractersticas ms importantes del sistema monocromador son el sistema de barrido y el mecanismo dispersor ya que esto nos permitir tener una mejor resolucin en la escala de longitud de onda para las mediciones que se realicen de transmitancia o absorbancia espectral.

La anchura de banda efectiva de un monocromador depende de la dispersin de la red o del prisma as como de la anchura de las rendijas de entrada y salida.
Cuando se necesita resolver estrechas bandas de absorcin o de emisin es preferible usar anchuras de rendija muy pequeas. Por otra parte, un estrechamiento de las rendijas origina una disminucin pronunciada de la potencia radiante disponible, siendo ms difcil realizar mediciones exactas de dicha potencia. Por lo tanto, las anchuras de rendija amplias pueden usarse ms para los anlis is cuantitativos que para los trabajos cualitativos, en los que el detalle espectral es importante. Finalmente a partir del sistema monocromador lo que se obtiene entonces es un espectro continuo y/o lneas de emisin que en ambos casos el mecanismo dispersor hace llegar a la rendija de salida ver figura 2. Es en este proceso de donde podemos obtener el concepto de ancho de banda espectral (ABE) e l cual se define como el intervalo de longitudes de onda de radiacin saliente de la rendija de salida de un monocromador medido en la mitad de un pico del flujo radiante detectado, as el ABE determina el rasgo espectral ms estrecho que puede resolver un espectrofotmetro.

Porque no son de confianza las lecturas de absorbancia demasiado altas (por ejemplo9 superiores a 1.5 en la mayora de instrumentos)? qu error instrumental puede presentarse?

La luz monocromtica atraviesa una muestra de espesor b, y se mide la potencia radiante de la luz que sale. Es necesario calibrar el espectrofotmetro con un blanco antes de medir las absorbancias de la disolucin problema. Esta celda o cubeta de referencia sirve para compensar los efectos de reflexin, dispersin o absorcin de luz de la celda con el disolvente.

Cuando emerge poca luz de la muestra (absorbancia alta), la intensidad es difcil de medir. Cuando emerge mucha luz de la muestra (absorbancia baja), es difcil detectar la diferencia de absorbancia entre las celdas de muestra y de referencia.

Explique la absorcin de un cromoforo en el visible .

La luz en relacin con los cuerpos que la reciben puede comportarse de tres maneras: puede ser reflejada, transmitida o absorbida a travs del cuerpo sobre el que incide. Slo la luz absorbida ceder su energa y tendr, por tanto, algn efecto fotobiolgico. Un cromforo es una molcula capaz de absorber la luz. Muchos de los componentes normales de la piel son cromforos y la luz tiene unos efectos fotobiolgicos sobre estos. Cada cromfor o absorbe selectivamente una banda de determinadas longitudes de onda que le es especfica y a la que llamamos su espectro de absorcin. La luz absorbida cede su energa, alterando o modificando el cromforo de forma transitoria o permanente. Tambin son cromforos algunos productos del metabolismo, o sustancias procedentes del mundo exterior que pueden llegar a la piel por contacto o por la circulacin, como ciertos cosmticos o medicamentos. La cadena de reacciones provocada por la luz en los cromforos (fotorreacciones)situados en la piel determinarn unos efectos perjudiciales o beneficiosos. El fundamento fotobiolgico de algunos filtros solares es que son cromforos que se comportan como una accin barrera impidiendo que determinadas longitudes de onda de la luz entren en contacto con la piel.
o o o

Determine la energa de un foto n, cuya longitud de onda es de : 470 nm 410 nm 520 nm

Hallar

E=hc/
o o o

= 520 (KMnO4) =530 (Azosulfamida) =227 (Isopreno)

http://www.merck-chemicals.com/pharmaceuticalingredients/rmn-espectroscopia-de-resonancia-magneticanuclear-solventesdeuterados/spanish/c_9seb.s1L23AAAAEWZisfVhTn http://www.cancerpiel.com/solrad.htm http://ocw.usal.es/ciencias-experimentales/analisis-aplicado-ala-ingenieria-quimica/contenidos/course_files/Tema_6.pdf

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