EXAMEN DE LQUIDO SEMINAL

CONCEPTO: Consiste en determinaciones cualitativas o cuantitativas de los espermatozoides y est encaminado a determinar las causas de infertilidad. INSTRUCCIONES DE RECOLECCIN: Tener de 2 a 5 das de abstinencia sexual. Lavarse las manos y el pene con agua y jabn y enjuagar bien antes de obtener la muestra. Obtener la muestra por masturbacin (no con relaciones sexuales) en el recipiente estril provisto. Captar la muestra en su totalidad. En caso de que no est completa, informar esto al laboratorio al momento de entregarla. Completar con su NOMBRE y dems datos la etiqueta autoadhesiva provista y colocarla en el recipiente. La muestra debe entregarse al laboratorio dentro de los 40 minutos de recolectada, sin exponerla a temperaturas extremas (20C a 37C)

EXAMEN MACROSCOPICO: (Caractersticas Fsicas)

Volumen: Normal: 2 6 ml (3 5 das de abstinencia) Polisemia: mayor de 8ml Oligosemia: menor de 2ml Para medir el volumen usaremos un tubo graduado de 15ml cnico. Licuefaccin: Normal: 15 minutos tras emisin Aumentada: mayor a 15 minutos tras emisin Color: Normal: blanquecino opalescente Amarillento: proceso supurativo (piosperma), por prolongacin de abstinencia sexual. Rosado Rojizo: presencia de sangre. PH: Normal: 7.3 7.4 Variacin Fisiolgica: 7 8.1 Patolgica: mayor de 8 inflamaciones de glndulas sexuales. Vesiculitis, epididimitis, menor de 8 oclusiones de conductos eyaculatorios (pat. Crnicas). Usaremos tiras reactivas insertaremos una tira dentro del tubo con semen solo por 30 segundos luego comparamos con la escala de colores. Si el pH sale acido ser por motivo de infeccin Viscosidad: Cogeremos una pipeta Pasteur con semen y dejaremos caer su contenido, el valor de referencia es por goteo o veremos que se forme un filamento menor a 2 cm.si el resultado es mayor pondremos viscosidad anormal. Olor:: se describe como sui generis o caracterstico. La espermina al parecer es la sustancia que determina el olor que algunas personas la relacionan con el olor del hipoclorito de sodio. Filancia: se realiza cuando el semen esta ya licuado el semen forma un filamento de hasta 1 cm al introducir una varilla fina o una asa de siembra y retirarlo suavemente .aumentada cuando el filamento es mayor de 1 cm (semen no licuado o viscosidad aumentada).

EXAMEN MICROSCOPICO examen directo: Se coloca una gota de esperma entre un portaobjeto y un cubreobjetos a 37C y se observa al microscopio a 40x para determinar el porcentaje de espermatozoides mviles y sus distintos tipos de motilidad, la proporcin de espermatozoides inmviles, el numero por campo microscpico de leucocitos, eritrocitos, clulas epiteliales y la presencia o no de cristales se deben considerar distintos grados de motilidad. Se observarn: presencia y ausencia de espermatozoides y clulas espermticas concentracin aproximada de espermatozoides movilidad aglutinacin de espermatozoides leucocitos/ hemates Cristales.

Estudio de Motilidad: Se valora observando varios campos (40x) contando por lo menos 200 espermatozoides.Se registran el porcentaje total de espermatozoides que presentan movilidad y el porcentaje de inmviles. Se debe hacer porcentaje cualitativo (%) de la motilidad clasificando los espermatozoides segn categoras. Otra forma de clasificarlos es segn: Movilidad activa ------------------- avanzan Movilidad pasiva--------------------se mueven pero no avanzan Movimiento rpido y rectilneo----------------- categora a Movimiento progresivo no rectilneo---------- categora b Movimiento sin progresin---------------------- categora c Inmviles-------------------------------------------- categora d INTERPRETACION CLINICA: Normal: 60 50 % movilidad Astenospermia: menos del 50 % de formas mviles a las 2 horas Necrospermia: Todas las formas carecen de movilidad.

ndice de Vitalidad: Los espermatozoides inmviles pueden estar vivos o muertos, para determinar cules estn vivos se realiza el test de eosina, el cual consiste en mezclar en un portaobjeto una gota de semen con una gota de eosina. Cuando las clulas mueren pierden su capacidad de permeabilidad de membrana y permiten el paso libre de los fluidos, por lo cual los espermatozoides muertos se observaran al microscopio como teidos de rosado y los vivos estarn sin teir este examen es de gran valor en los casos de astenoozpermia. Los resultados se expresan como % de espermatozoides teidos Normal: ------------coloracin con eosina <40% Patolgica: ------ infertilidad >40% Otros mtodos Tambin existe otras tcnicas una de ellas es con azul de metileno: se cogen 2 tubos de ensayo en uno se coloca 2ml de azul de metileno (control) en el otro se agregara 1ml de azul de metileno + 1ml de lquido seminal. Luego se lleva a la estufa a 37C al cabo de media hora o 1 hora debe observarse el color azul pero puede variar al haber tubidez y se presenta por cruces.

RECUENTO: (se hace despus de la licuefaccin del semen) a) Se homogeniza la muestra se hace una dilucin 1/20 con diluyente macomber b) Se prepara y se llena la cmara de neubauer se deja reposar 2 minutos (cmara hmeda) c) Observar la muestra a 10x en 2 cuadrados de la cmara d) Calculo espermatozoides por ml

Numero de espermatozoides contados= NC N espermatozoides/ml= NC*100 000

normal= 50 120 millones de espermatozoides / ml

MORFOLOGIA Para el estudio morfolgico es necesario realizar extendidos que se dejan secar al aire, se fijan y se colorean con hematoxilina, eosinagiemsa,etcse observa con objetivo de inmersin de 100. Valora el potencial fecundativo junto con el nmero total de espermatozoides y su motilidad. Se valora los tipos de espermatozoides normales y anormales en extensiones teidas tambin se observa clulas de espermiogenesis.se registran los porcentajes de espermatozoides normales y anormales y dentro de esta ultima el tipo de anormales encontrados y su proporcin anormalidades en cola, cabeza y cuello tambin se informa de la presencia de clulas de espermatognesis, clulas sanguneas y cualquier otro tipo de clulas que se puedan observar. Normal: ndice de malformaciones < 30% Patologa: > 40% esterilidad definitiva, lquido seminal hipo fecundante alteraciones morfolgicas 30-40%

PRUEBAS BIOQUMICAS Evala algunas funciones de las glndulas sexuales accesorias. La determinacin decido ctrico para la evaluacin de la prstata, la de fructosa para la evaluacin delas vesculas seminales y la de L-carnitina para el epiddimo son las ms utilizadas. PRESENCIA DE LEUCOCITOS: La pruebade la peroxidasa se utiliza para identificar los leucocitos en el semen. Losleucocitos son peroxidasa positivo, mientras que las otras clulas redondas comolas germinales inmaduras y del tracto genital masculino son peroxidasa negativo. Se considera leucocitospermia a ms de un milln de leucocitos por mililitro, lo cual indica una probable infeccin. FRUCTOSA Las vesculas seminales son glndulas secretoras cuyo contenido es rico en fructosa y otros nutrientes, fibringeno y prostaglandinas. Durante la eyaculacin cada vescula seminal vaca su contenido en el conducto eyaculador, poco despus de que el conducto deferente vace el semen. Esto aumenta considerablemente el volumen de semen eyaculado, en tanto que la fructosa tiene gran valor nutritivo y protector para los espermatozoides. ACIDO CTRICO: La prstata secreta un lquido alcalino que contiene cido ctrico, calcio, fosfatasacida, una enzima coagulante y una profibrinolisina. Durante la eyaculacin estasecrecin se une a la masa del semen. El lquido prosttico aumenta la motilidad y fertilidad de los espermatozoides.El citrato seminal bajo indica trastornos funcionales. El citrato seminal alto esfisiolgico en hombres entre 30 y 40 aos, con funcionalismo pronunciado de laactividad prosttica. El citrato seminal muy alto indica insuficiencia de vesculasseminales. El citrato seminal mximo indica oclusin en la parte alta de la vaseminal.

Materiales y equipos Materiales Esperma Tubo cnico Porta objetos y cubreobjetos Cmara de neubauer Tiras para medir pH Pipeta Pasteur

Reactivos Giemsa,, Wright Mc Comber agua destilada

Equipos Microscopio

Procedimiento
Examen fsico Cuando llega la muestra observar lo siguiente: Volumen. Medir con los tubos cnicos Licuefaccin: Medir el tiempo que demora la muestra en ponerse liquida Color: observar el color pH: se mide con el papel de tornasol solo unos segundo y se realiza la lectura Viscosidad: con la ayuda de una pipeta observar la frecuencia de la cada de la muestra Filancia: (realizarlo cuando el semen ya esta licuado) medir la distancia de los ligamentos que se forman utilizando una varilla.

Volumen

Licuefaccin

filancia

pH

Examen microscpico

1.

Examen directo

Calentar el portaobjeto a 37C luego colocar una gota de semen y cubrirlo con un cubreobjetos para realizar el examen directo donde observaremos presencia y ausencia de espermatozoides, concentracin aproximada de espermatozoides, aglutinacin, cristales, leucocitos y hemates.

Observar al microscopio a 40x Para conocer el pH se utilizan las tiras reactivas las cuales se sumergen

2.

Examen motilidad Se coloca i gota de la nuestra en una lmina Tapar con una laminilla Observar en el microscopio a 10X Contar 200 espermatozoides diferenciando los tipos de movimiento

3.

ndice de vitalidad Mtodo Di Paola Colocar 1 gota de semen en una lamina Agregar 1 gota de de azul de cresilo Cubrir con la laminilla Esperar 5 minutos Observar al microscopio Contar 200 espermatozoides determinando el porcentaje de los vivos y de los muertos

4.

Recuento Homogenizar la muestra Hacer una dilucin 1/20 con Mc Comber Llenar la cmara de Neubauer Observar a 10x Contar 2 cuadrados grandes

5.

Formula morfolgica colocamos una gota de semen en un extremo del portaobjeto luego con otro arrastramos e hicimos el extendido dejamos secar luego agregamos wraith por 1 minuto agregamos ligeramente hasta cubrir la lamina con agua destilada por 15 minutos observamos el brillo metalico enjuagamos luego secamos observamos a 100X

Resultados

Paciente: Merino falcn

ANALISIS DE LQUIDO SEMINAL Condiciones del Examen Edad: 33

Metodo de obtencin: Masturbacion Abstinencia sexual: no Ultimo proceso febril: no recuerda EXAMEN MACROSCOPICO Aspecto: Turbio Licuefaccin: 15 minutos Filancia: 3cm PH: 8 EXAMEN MICROSCOPICO

Hora de eyaculacin: 8:15 am Hora de examen: 8:25 am Tiempo de transporte: 10 mnts

Volumen: 2.5ml Color: blanquecino Viscosidad: Normal Olor: Sui Generis

PREPARADO DE ORIENTACION: Espermatozoos: si Clulas: no se observo Espermiofagia: no se observo

Aglutinacin: si Cristalizacin: No se observo Leucocitos x campo: 1

NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML MOVILIDAD: Inmviles: 5% Movilidad total: 95%

Activa: 85.0%

Pasiva: 10%

VITALIDAD: Espermatozoos vivos mviles coloreados: 66% Espermatozoos vivos inmviles coloreados: 32% Espermatozoos muertos no coloreados: 2% ESPERMIOCITOGRAMA: Espermatozoos normales: 97% Espermatozoos anormales: 3% Alteraciones de cabeza: 2% Alteraciones de cola: 1% Celulas de espermiogenesis: ausencia

Leucocitos: Ausencia

Glosario: Anlisis de semen: es una prueba que se lleva a cabo del semen eyaculado para evaluar los parmetros de una eyaculacin normal incluyendo conteo, motilidad y otros factores Aglutinacin: coagulacin de los espermatozoides que restringen su motilidad.

Astenoozpermia: reduccin de la motilidad o movilidad de los espermatozoides. Azoospermia: trastorno en el cual no se detectan espermatozoides en el semen.

Eyaculacin:.liberacin del semen compuesto por espermatozoides y liquido prosttico y seminal entre otras secreciones. Espermatognesis: produccin de espermatozoides en los conductos seminferos. Epididimitis: inflamacin del epiddimo, algunas veces causa infertilidad en los hombres.

Morfologa: diversas formas que presentan los espermatozoides.Trmino que describe la forma y la configuracin. Una clula espermtica con morfologa incorrecta tiene una malformacin y a menudo es incapaz de fertilizar un vulo. Licuefaccin: proceso por el cual el semen cambia de consistencia