PRUEBAS DE BIODEGRADABILIDAD E INDUCCIN DE LA BIODEGRADACIN DE DETERGENTES Evangelina POLACO MENDOZA y Vctor Manuel LUNA PABELLO Universidad Nacional Autnoma

de Mxico, Facultad de Qumica, Departamento de Biologa, Laboratorio de Microbiologa Experimental. Cd. Universitaria, D. F., Mxico, Cdigo Postal 04510. Tel/Fax: + (52)56223763. Email: lpvictor@servidor.unam.mx., santapolash@gmail.com Palabras clave: biodegradabilidad, detergentes, tensoactivos no inicos. RESUMEN Se evalu la biodegradabilidad, en base a la relacin DBO5/DQO, de cinco detergentes comerciales (D1, D2, D3, D4 y D5) de uso comn en la Cd. de Mxico. Se seleccion uno de ellos tomando en cuenta los siguientes criterios: Mejor reproducibilidad de resultados (menor interferencia analtica), mayor consumo comercial y menor biodegradacin. El detergente seleccionado fue el D5 (DBO5/DQO = 0.1), el cual fue procesado para separar al tensoactivo no inico (nonilfenol), a efecto de substituirlo, ya que este tiende a formar ceras de bajo punto de fusin, que dificultan la biodegradabilidad del detergente. Para ello, se emplearon mtodos de intercambio de iones y lnea de vaci. La presencia de este compuesto se confirm aplicando espectroscopia de luz ultravioleta e infra-roja. Se aplicaron, por separado, las pruebas DBO5 y DQO para conocer el grado de biodegradabilidad de cada uno de los compuestos (nonilfenol, 12% y alquilbencensulfonato de sodio, 10%). Finalmente se efectuaron pruebas estndar internacionales de biodegradabilidad aerobia rpida (OECD 301-A, 1997), tanto el detergente en su conjunto, como a los dos componentes aislados. Los resultados indicaron que el detergente D5, ABS y nonilfenol no pueden considerarse como fcilmente biodegradables, debido a que despus de 28 das no se alcanz el 70% establecido por la OECD, sino nicamente el 40%, 37% y 31%, respectivamente. Para aumentar el nivel de biodegradabilidad del D5, una opcin es sustituir al nonilfenol por ester de sacarosa y al ABS por sulfatos de alcoholes lineales que son ms biodegradables. INTRODUCCIN Los detergentes constituyen un grave problema de contaminacin ambiental ya que adems de contaminar suelos y cuerpos acuticos superficiales, tambin llegan a mantos freticos. Los sistemas de tratamiento convencional de aguas residuales, nicamente logran un bajo porcentaje de eliminacin. En trminos generales, en Mxico, los detergentes presentes en las aguas residuales son separados mediante procesos de espumacin y decantacin, siendo enviados a canaletas laterales que eventualmente confluyen con las aguas residuales que no son tratadas, es decir, no reciben tratamiento alguno (Gordon, 1997). En el mbito nacional, debe resaltarse que no existe una normatividad asociada a la evaluacin de la biodegradabilidad de los detergentes que se

comercializan. No obstante, es cada vez ms frecuente que la autoridad ambiental exija a productores, intermediarios y prestadores de servicios de limpieza, certificados nacionales de biodegradabilidad de los productos de limpieza empleados incluidos, por supuesto, el de los detergentes. Estratgicamente, el problema de detergentes ha sido abordado por eliminacin del consumo, cambio de materias primas y tratamiento, una vez que han sido incorporados a la corriente de agua. Actualmente la normatividad existente prohbe la descarga de aguas residuales fuera de los lmites mximos permisibles de descarga establecidos (NOM-001-SEMARNAT-1996). Los detergentes constituyen compuestos regulados cuya concentracin debe ser reducida antes de ser descargados en cuerpos acuticos y terrestres receptores. Algunos tensoactivos los cuales conforman un detergente, no forman espumas, por lo que son preferidos para ser empleados en superficies duras. No obstante, al ser depositados en agua, tienden a formar ceras de bajo punto de fusin, lo que dificulta la depuracin del agua residual. Asimismo, al combinarse con otras substancias, como el nonilfenol, forma compuestos txicos aumentando as la dificultad para su biodegradacin. En este trabajo se usaron detergentes lquidos que contienen disolventes miscibles en agua como el etilenglicol y que se emplean como limpiadores de superficies duras, lo cual contribuye al aumento de su consumo en el mercado (Harold, 1999). MATERIALES Y MTODOS Tabla I. Relacin de tcnicas empleadas para ejecucin de las pruebas experimentales Parmetro Tcnica Referencia Demanda Bioqumica de Mtodo de botella Winkler APHA (1998) oxgeno (DBO5) Demanda Qumica de Oxgeno Mtodo de reflujo cerrado APHA (1998) (DQO) pH Mtodo electroqumico APHA (1998) Biodegradabilidad aerobia Prueba de disminucin de OECD 301-A rpida (BAR) COD Oxgeno disuelto (OD) Mtodo de electrodo de APHA (1998) y membrana manual del equipo. Para la seleccin de un detergente, de los 5 evaluados, se emplearon los siguientes criterios: Mejor reproducibilidad de resultados (menor interferencia analtica), mayor consumo comercial y menor biodegradacin. En el caso de esta etapa se valor la biodegradabilidad de los cinco detergentes de acuerdo a la relacin DBO5/DQO. Para ello primero se realiz la prueba DQO (por duplicado) llevando a cabo diversas diluciones de la muestra, de modo tal que la concentracin obtenida quedara dentro del intervalo de la curva patrn. Las diluciones se realizaron partiendo de una alcuota de un mililitro de detergente el cual se aforo a 100mL. Posteriormente, se hicieron 3 diluciones ms de esta ltima, con alcuotas de medio, uno y dos mililitros aforndose cada una a 10mL, respectivamente. La DBO5 corresponde a la cantidad de oxgeno disuelto necesario para la degradacin de materia orgnica en cinco das empleando un inoculo de lodos activados mezclado con el medio mineral

empleado para diluir la muestra a evaluar. El oxgeno disuelto consumido se midi mediante un electrodo de membrana marca Corning M-90 Checkmate Determinacin de *DQO y DBO5 a los cinco detergentes lquidos Anlisis y seleccin de un detergente (amplio uso y menor biodegradabilidad)

Separacin de los tensoactivos

Desecacin del detergente lquido Disolver el slido en etanol reflujo por una hora y llevar a

Efluente a desecacin disolver en agua y dejar en refrigeracin

Columna intercambiadora de aniones y cationes a 50C * Lnea de vaco gas inerte con NACl, NaHCO3 y acetato de etilo. Llevar a desecacin

Anlisis cualitativo por espectroscopia ultravioleta a diferentes longitudes de onda e infrarroja (IR)

Determinacin de los componentes tensoactivos contenidos en el detergente Determinacin de DQO, DBO5 y de biodegradabilidad aerobia rpida OCED301 A al detergente seleccionado y a nonilfenol y alquilbencensulfonato de sodio Figura 1. Mtodo aislamiento del compuesto alquilbencesulfonato de sodio (ABS) y el tensoactivo no inico (nonilfenol).
* Las columnas de intercambio inico se trabajaron a 50C, esto con la finalidad de que los cidos grasos de los detergentes no precipiten (73/404/CEE, 1997)

RESULTADOS Los resultados de DQO obtenidos, se presentan en la Tabla II. De acuerdo con los valores promedio obtenidos para cada detergente, se aprecia que el de menor concentracin es el D1 y el de mayor corresponde al D3. Estos resultados permiten determinar la dilucin necesaria para poder llevara a cabo la determinacin de la DBO5 de cada detergente. Los resultados obtenidos se presentan en la Tabla III Tabla II. Resultados de la prueba DQO para los cinco detergentes comerciales D1 D2 D3 D4 D5 Factor de Factor de Factor de Factor de Factor de dilucin dilucin dilucin dilucin dilucin (mgO2/L) (mgO2/L) (mgO2/L) (mgO2/L) (mgO2/L) 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 273285 276663 141685 121944 283743 289910 237428 219042 141592 101763 288796 282589 117419 113182 260618 272544 212387 191807 136598 105794 288337 119953 138495 285889 267700 218847 210174 103655 130419 114269 237428 128804 X = 281934 X = 123849 X = 276734 X = 218101 X =121232 = 6912 =11535 =11536 =15994 =16925

Tabla III. Valores de Oxgeno disuelto de la prueba de DBO5 Tipo de Primer da Quinto da OD1ODblanco detergente/ OD1 mg/L OD5 mg/L OD5 OD1y5 rplica R1 R2 R1 R2 R1 R2 R1 R2 D1 5.7 5.6 1.9 2 3.8 3.6 1.45 1.65 D2 D3 D4 D5 Blanco mineral Blanco inoculo 5.8 7 5.4 6.8 5.3 5.4 5.9 6.8 5.6 6.9 5.2 5.2 0.8 2.6 3.2 1.1 5 5.1 1 2.8 3 1.2 5.1 5.3 5 4.5 2.2 5.7 4.9 4 2.6 5.7 0.25 0.75 3.05 0.51 0.35 1.25 2.65 0.51

DBO5 mg /L 83333 1152 7291 132 54687 1356 159855 12456 12123 1121

Una vez obtenidos los resultados de las pruebas DQO y DBO5, se valor biodegradabilidad de acuerdo a la relacin BDO5/ DQO, cuyo valor empleado para la seleccin del detergente al que se le efectuara determinacin de componentes activos y biodegradabilidad aerobia rpida los mismos.

la es la de

Tabla IV. Relacin de criterios de seleccin para los detergentes bajo estudio Tipo de DQO DBO5 BDO5/ Biodegradabilidad Consumo detergente mgO2/L mgO2/L DQO domstico D1 281934 83 333 0.29 No +++ D2 123849 7 291 0.05 No ++ D3 276073 54 687 0.19 No + D4 217001 159 855 0.73 s +++ D5 121232 12 123 0.1 No +++ Nota: + Escaso, ++ Moderado , +++ Alto En funcin de la Tabla IV, se seleccion al detergente (D5), procedindose al aislamiento de los tensoactivos inico y no inico. Para ello, se compar la mezcla resultante con una sustancia pura de nonilfenol con la tcnica de barrido en luz ultravioleta (Fig.2).
nonifenol y mezcla
1 absorbancia 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 200 400 600 800 1000 longitud de onda y = -0.0008x + 0.8384 de la mezcla

Figura 2. Resultado del anlisis por cromatografa de gases del detergente D5 El procedimiento realizado implic llevar la mezcla a desecacin, formndose como resultado un slido blanco y un aceite anaranjado. Se realiz de cada uno un espectro IR. El espectro del aceite amarillo, corresponde a alquilbencen sulfonato (Fig. 3), mientras que el espectro del slido blanco representa el nonilfenol (Fig. 4).

Figura 3. Espectro infrarrojo del compuesto alquilbencensulfonato de sodio

Figura 4. Espectro infrarrojo nonilfenol A los dos compuestos se les determin su grado de biodegradabilidad, en base a los resultados de DBO5 y DQO (Tabla V). Tabla V. Biodegradabilidad de las componentes aislados del detergente de acuerdo a la relacin BDO5/DQO. DQO mgO2/L Alquilbencensulfonato 253421 de sodio Nonilfenol 134236 Compuesto DBO5 mgO2/L 27778 16667 DBO5/DQO 0.10 0.12 Fcilmente Biodegradable? No No

Se realiz la prueba de biodegradabilidad aerobia rpida de acuerdo a lo establecido en la OECD 301-A (1992) al detergente D5, al tensoactivo alquilbencensulfonato de sodio y al compuesto nonilfenol y se incubaron a 22 2 oC en oscuridad y agitacin durante 28 das, durante este periodo se tomaron muestras de 2.5 ml, para su posterior evaluacin de DQO, adems a cada matraz se le realizaron mediciones de pH y OD. En esta prueba se trabajo con 7 muestras: la sustancia control benzoato de sodio (Cr), D5, ABS, nonilfenol, blanco del inoculo (BI), control de adsorcin (CA) y control de degradacin abitico estril (DA) (Fig. 5, 6 y 7). A lo largo de las pruebas realizadas con detergentes, el intervalo de pH oscil entre 6.4 y 7.4 unidades.
70 60
DQO (mgO2/L Cr D5 Blanco CA DA

50 40 30 20 10 0 0 10
tiempo (dias)

20

30

Figura 5. Valores de biodegradabilidad aerobia rpida, medidos en trminos de DQO, en un lapso de 28 das para D5. 6

70 60 DQO mgO2/L 50 40 30 20 10 0 0 5 10 15 tiempo (das) 20 25 30 Cr ABS BI CA DA

Figura 6. Valores de biodgradabilidad aerobia rpida, medidos en como DQO, en un lapso de 28 das para ABS.
70 60 DQO mgO2/L 50 40 30 20 10 0 0 5 10 15 20 tiempo (das) 25 30
Cr Nonilfenol BI CA DA

Figura 7. Valores de biodgradabilidad aerobia rpida, medidos en como DQO, en un lapso de 28 das para nonilfenol. Con el tratamiento de los debido de los datos (APHA, 1998) se calcul el porcentaje de remocin de materia orgnica en un intervalo de 28 das.

45 40 35 DQO mgO2/L 30 25 20 15 10 5 0 0 5 10 Tiempo (das) 20 15

D5 pendiente=1.5801 ABS pendiente=1.5779 Nonilfenol 25 pendiente=1.5801 30

Figura 8. Porcentaje de remocin para D5 y los compuestos nonilfenol y ABS DISCUSIN Los Criterios de seleccin del detergente analizar fueron: amplio uso, reproducibilidad y el menor valor que resultante de la relacin DBO5/DQO, es decir, el menos biodegradable. El detergente D5 tiene una baja relacin DBO5/DQO = 0.1 en un intervalo que va del 0 al 1, esto quiere decir que solo es biodegradable el 10%. Aunque el D5 no tiene la ms baja biodegradabilidad, su uso comercial es muy alto, comparado con el que tiene ms baja biodegrdabilidad que es el D2 (Tabla IV). La separacin y anlisis de los tensoactivos no inicos se realiz de acuerdo a la figura 1, comprobndose el aislamiento por tcnicas de espectroscopia ultravioleta e IR. (Fig. 2, 3 y 4). El alquilbencensulfonato de sodio no es un compuesto que se encuentre reportado dentro de la ficha tcnica proporcionada por le fabricante, por lo que no se esperaba su presencia. A los dos compuestos se les determin su grado de biodegradabilidad, en base a los resultados de DBO5 y DQO (Tabla V). De acuerdo con dichos resultados, se puede afirmar que no pueden ser catalogados como de fcil biodegradacin ya que slo denotan nicamente entre el 10 y 12% de degradacin respecto de su contenido total de carbono. Los resultados de la prueba de biodegradabilidad aerobia rpida para el detergente D5 y los tensoactivos ABS y nonilfenol (Fig. 5, 6 y 7) muestran que BI indica cuanta materia orgnica aporta el inculo, si esta es biodegradable y que tan rpido la degradan. En CA se observa que el detergente tiene una pequea pendiente lo que indica un efecto de adsorcin del detergente a los lodos activados y al matraz. Sin embargo, esta cantidad corresponde al 1% del detergente. Con el ensayo de DA se puede observar que la degradacin del detergente es realizada 8

principalmente por los microorganismos y no a causa de efectos fsicos, ya que al final del ensayo no hay un cambio significativo de la cantidad de DQO inicial, lo que tambin indica que la adsorcin del detergente es principalmente al inculo y no al material de vidrio del vaso de reaccin empleado. Se observa que el compuesto de referencia (Cr) es biodegradable ya que la materia orgnica, medida por DQO, llega a valores cercanos de cero, mientras que para D5 y los tensoactivos ABS y nonilfeno, este valor oscila entre 30 y 25 mgO2 /L. Los resultados indican que el detergente D5, ABS y nonilfenol (Fig. 8) no pueden considerarse como fcilmente biodegradable, lo anterior debido a que despus de 28 das no se alcanz el 70% establecido por lel procedimiento indicado en a OECD 301 A, sino nicamente el 40%, 37% y 31%, respectivamente. La degradacin de D5 result ser ms rpida que la de ABS y que la de nonilfenol por separado, siendo este ltimo compuesto el ms lento para degradarse. A lo largo de las pruebas realizadas con detergentes, el intervalo de pH oscilo entre 6.4 y 7.4 unidades, lo cual no resulta limitante para el desarrollo de la actividad microbiana en los matraces de prueba. Mediante la prueba estandarizada y reconocida internacionalmente, se confirma que el detergente D5, no es biodegradable, al igual que dos de sus principales componentes. Al comparar la prueba de biodegradabilidad aerobia rpida OECD 301-A con la relacin de DBO5/DQO, se observa que el porcentaje de remocin de la primera es de 40% para el D5 en un lapso de 28 das, mientras que para la segunda es del 10% empleando para ello 5 das de prueba. Esto indica que con un anlisis relativamente rpido, como lo es la relacin BDO5/DQO, se puede tener una idea aproximada de si el compuesto es o no biodegradable, lo cual en este caso quedo confirmado mediante la aplicacin de la prueba de OECD 301-A. Para aumentar el nivel de biodegradabilidad del D5, una opcin es sustituir al ABS por sulfatos de alcoholes lineales que son ms biodegradables y al nonilfenol por ester de sacarosa.

AGRADECIMIENTOS

Se agradece el apoyo econmico recibido a travs DGAPA/PAPIME EN213104 y PAIP 2005 (VMLP) 6190-14.

del

Proyecto

REFERENCIAS APHA. (1998). Standard Methods for the examination of water and wastewater. 20th Edition, Washington D. C.

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