Otoo

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Lainhibicindelagluclisisenclulas cancerigenas.
Por:DanielArturoZavalaOrtz.
TrabajodeUnidadII:MetabolismodeCarbohidratos. TraduccindeInhibationofGlycolysisinCancercells:Anovelstrategyto Overcomedrugresistanceassociatedwithmitochondrialrespiratory defectandhipoxya CancerRes2005;65(2).Enero15,2005.

Profa.:M.C.ZaidaOrtaFloresBioqumicaI(8:00a.m9:00a.m.)

InstitutoTecnolgicodeVeracruzIng.Bioqumica.

Inhibicindelagluclisisenclulascancerigenas:Unanueva
estrategiaparasuperarlaresistenciaafrmacosasociadaconeldefecto mitocondrialrespiratorioeHipoxia.
Rui-hua Xu1,3, Helene Pelicano1, Yan Zhou1, Jennifer S. Carew1, Li Feng1, Kapil N. Bhalla4, Michael J. Keating2 and Peng Huang1

Departamentos de 1 Patologa molecular y 2 Leucemia, Universidad de Texas M.D. Anderson Cancer Center, Houston, Texas; 3 Departamento medico de ontologa, Sun Yat-Sen Cancer Center Universitario, Guangzhou, China; y 4 Departamento interdisciplinario de oncolgica, H. Lee Moffitt Cancer Center e Instituto de investigacin, Tampa, Florida.

Resumen:
Las clulas cancerigenas generalmente presentan un incremento en la gluclisis para la generacin de ATP (Efecto Warburg) debido en parte a lesiones en la respiracin mitocondrial y la hipoxia, los cuales son frecuentemente relacionados a la resistencia de agentes teraputicos. En la presente se reporta que la inhibicin de la gluclisis agota las reservas de ATP en las clulas cancerigenas, especialmente en clones de clulas cancerigenas con defectos respiratorios mitocondriales, lo que da paso a una rpida desfosforilacion de la molcula BAD integradora de la gluclisisapoptosis en SER112, una relocalizacin de BAX a la mitocondria, y una masiva muerte celular. Es importante mencionar que la inhibicin de la gluclisis termina efectivamente con clulas de cncer de colon y linfoma en un ambiente hipxico en el cual las clulas cancerigenas muestran una elevada actividad glucoltica y decrementa su sensibilidad a agentes anticancergenos. Cabe destacar que el agotamiento de ATP mediante la inhibicin de la ruta glucolitica tambin induce la apoptosis a las clulas resistentes a mltiples medicamentos, lo cual sugiere que la privacin de suministro de energa puede ser una forma eficaz de superar la resistencia a la mltiple resistencia a medicamentos. Nuestro estudio muestra una prometedora estrategia teraputica para acabar con las clulas cancerigenas y superar la resistencia a mltiples medicamentos. Debido a que el efecto Warburg y la hipoxia se presentan frecuentemente en canceres humanos, estos descubrimientos pueden tienen grandes implicaciones clnicas.

Introduccin:
Hace mas de 70 aos , Warburg observo que las clulas cancerigenas muestran frecuentemente un incremento en su va glucolitica y dependen fuertemente en esta ruta metablica para la generacin de ATP usado en la satisfaccin de sus necesidades. El atribuyo esta alteracin metablica a la lesin respiratoria mitocondrial y considero esta como la alteracin metablica fundamental en la transformacin maligna o el origen de clulas cancerigenas. Durante las pasadas dcadas, el efecto Warburg ha sido observado sistemticamente en un amplio espectro de canceres humanos, aunque los mecanismos fundamentales Bioqumicos y moleculares son extremadamente complejos y aun no son definidos. Entre los posibles mecanismos, el funcionamiento defectuoso mitocondrial y la hipoxia en el microambiente tumoral son considerados dos de los principales factores contribuyentes del efecto Warburg. Sin embargo, si el incremento de la actividad glucolitica en clulas cancerigenas es principalmente debido a alteraciones metablicas inherentes debido a un ambiente anaerobio en el tejido tumoral sigue siendo una controversia. Bajo condiciones fisiolgicas, la generacin de ATP a travs de fosforilacin oxidativa en la mitocondria es un proceso eficiente y preferido, la cual produce mas molculas de ATP de una determinada cantidad de glucosa comparada con la gluclisis. No obstante, cuando la habilidad de la

clula para generar ATP a travs de la fosforilacin oxidativa mitocondrial se encuentra comprometida, , la clula es capaz de adaptarse mediante rutas metablicas alternativas, como el incremento de la va glucolitica, para as mantener su suministro de energa. La funcin respiratoria mitocondrial puede ser afectada negativamente por mltiples factores, incluyendo mutaciones en el ADN mitocondrial (mtADN), mal funcionamiento en la cadena transportadora de electrones, expresiones anormales de enzimas involucradas en el metabolismo energtico e insuficiente oxigeno disponible en el microambiente celular. Es sabido que el ADN mitocondrial contiene un bucle desplazado, y la secuencia gentica que codifica a 13 importantes protenas que componen el complejo de respiracin mitocondrial sin intrones. Es probable que las mutaciones en el ADN mitocondrial causen alteraciones en protena codificada y comprometan la funcin de la cadena respiratoria. As, se cree que las frecuentes mutaciones del ADN mitocondrial observadas en una variedad canceres humanos contribuye a mal funciones respiratorias en las clulas cancerigenas. La constante generacin de especias reactivas de oxigeno dentro de la mitocondria y el incremento de radicales libres in clulas cancerigenas

pueden causar dao adicional tanto al ADN mitocondrial como a la cadena transportadora de electrones, de tal manera que incrementa las mal funciones respiratorias y la dependencia de la gluclisis. La hipoxia es otro factor importante que contribuye al efecto Warburg. El rpido crecimiento de las clulas cancerigenas y su rpida expansin en la masa tumoral usualmente supera la generacin vascular, resultando en un insuficiente suministro de sangre en ciertas reas del tejido tumoral. Tal ambiente hipxico en la masa tumoral limita la disponibilidad de oxigeno para su uso en la respiracin mitocondrial y sntesis de ATP, lo cual forza a las clulas cancerigenas a regular en aumento la va glucolitica como va principal en generacin de energa. La habilidad del Oxigeno para regular el metabolismo de glucosa es conocido como el efecto Pasteur y es regulado mediante varias vas involucrando diversas cinasas. En este caso, el incremento de la actividad glucolitica en clulas cancerigenas no es necesariamente causado por defectos mitocondriales intrnsecos, sino es inducido por el microambiente tumoral mediante procesos de adaptacin metablica, incluyendo preferentemente la expresin de enzimas requeridas en la gluclisis.

Aunque los mecanismos subyacentes responsables del efecto Warburg son bastante complejos y pueden ser atribuidos a una variedad de factores como los defectos mitocondriales y la hipoxia, las consecuencias metablicas son similares. La habilidad comprometida de las clulas cancerigenas para generar ATP mediante fosforilacin oxidativa forza a la clula a incrementar la gluclisis para as mantener su suministro de energa haciendo que de esta forma la clula cancerigena se haga altamente dependiente de esta va para sobrevivir. De esta forma, es concebible que las alteraciones metablicas en clulas malignas puedan ser explotadas para servir como una base bioqumica para el desarrollo de estrategias teraputicas enfocadas en estas anormalidades metablicas. Una posibilidad es inhibir la gluclisis y preferentemente matar las clulas cancerigenas que son dependientes de la va glucolitica para la generacin de ATP. Diversos agentes, incluyendo la 2-desoxi-d-glucosa y compuestos con arsnico, han sido conocidos como desactivadotes de la generacin de ATP a travs de la va glucolitica. Por ejemplo, la 2-desoxiglucosa es un anlogo de la glucosa y es capas de unirse y suprimir la hexocinasa II, la enzima que cataliza el paso metablico inicial con la conversin de

glucosa a glucosa-6P. La inhibicin de este paso limitante por la 2-desoxiglucosa causa el agotamiento del ATP celular, conduciendo a un bloqueo en el desarrollo del ciclo celular in Vitro, y exhibe actividad antitumoral in vivo. Sin embargo la efectividad de la 2desoxiglucosa es significablemente afectada por la presencia de su contraparte glucosa, y al parecer solo reduce parcialmente la disponibilidad de glucosa en la gluclisis. Por otra parte, los compuestos arsnicos pentavalentes no inhibe directamente la gluclisis sino que abole completamente la generacin de ATP causando una arsnolisis en la reaccin de deshidrogenacin del Gliceraldehido 3P, previniendo la generacin del 1,3 bisPG. Sin embargo, al parecer los compuestos pentavalentes de arsnico muestran una limitada especificidad debido a otros efectos txicos. Estudios mas recientes muestran que el 3bromopiruvato (3-BrPA) es un potente inhibidor de la hexocinasa II e inhibe efectivamente la gluclisis. Este compuesto es efectivo para matar clulas cancerigenas hepticas de conejo en la implantacin tumoral VX2 en el modelo tumoral animal cuando es dada por una infusin local. En el presente estudio, se han utilizado sistemas experimentales definidos para examinar las implicaciones teraputicas potenciales del efecto Warburg probando la sensibilidad de clulas cancerigenas a la inhibicin glucolitica bajo hipoxia, condiciones normales de toxicidad y defectos mitocondriales genticos. Nosotros mostramos que las clulas cancerigenas con tales anormalidades respiratorias fueron menos sensitivas a los agentes de quimioterapia usados comnmente en el tratamiento clnico del cncer pero que pueden ser efectivamente matadas inhibiendo la gluclisis usando 3-BrPA. Adems se observo que la inhibicin de la gluclisis causa una rpida desfosforilacion de protena BAD en el residuo de serina numero 112, conduciendo a la localizacin de BAX a la mitocondria y una masiva muerte celular. Importante es resaltar que las clulas que expresan un fenotipo de resistencia a mltiples medicamentos (MDR) continan siendo sensibles a la inhibicin de la gluclisis. Debido a que las alteraciones del metabolismo energtico y al incremento en su dependencia de la va glucolitica se presentan comnmente en clulas cancerigenas, nuestros resultados sugieren amplias implicaciones teraputicas potenciales en la utilizacin de inhibidores de la va glucolitica para el tratamiento del cncer.