13/11/2009

TRADUO
Fluxo da Informao Gentica DNA Transcrio RNA Traduo Protena

DECODIFICAO DA INFORMAO GENTICA:

- TRADUO E ENDEREAMENTO DE PROTENAS

Estrutura das Protenas : subunidades vinte aminocidos (aa) diferentes H

+H N 3

C R

COOH

AMINOCIDOS
Ligao Peptdica: Ligao Peptdica: covalente entre o grupo carboxila de um aa e o grupo amino de outro aa com liberao de uma molcula de H2O.

PROTENAS
Protenas: estrutura tridimensional complexa - Primria seqncia linear dos aa - Secundria interaes de aa que esto juntos na cadeia linear, mais comumente formando uma hlice .
Primria

Secundria

PROTENAS
Protenas: estrutura tridimensional complexa - Terciria Dobra da hlice ou outra estrutura secundria (fora de Van der Walls, pontes dissulfeto) - Quaternria Juno de duas ou mais estruturas tercirias atravs de ligaes covalentes
Terciria Q Quaternria

CDIGO GENTICO
Caractersticas: - trs nucleotdeos por cdon - 4 bases (A, U, C e G); 4X4X4 = 64 cdons escritos de 5 3 G); - cdons de iniciao (AUG) e terminao (UAA, UAG, UGA) - Cdigo degenerado (mais de um cdon pode codificar um aa) - Cdons sinnimos especificam o mesmo aa. aa. - Quase universal: um cdon codifica o mesmo aa em todos os universal: organismos (na mitocndria ligeiramente diferente). diferente). Ex.: Ex.: UGA codifica Fim no cdigo universal UGA codifica Trp no cdigo mitocondrial humano

13/11/2009

TRADUO

TRADUO
- RNAts isoaceptores: RNAts diferentes com anticdons diferentes isoaceptores: que especificam o mesmo aa. aa. - Oscilao: mais de um cdon pode se parear com o mesmo Oscilao: anticdon. anticdon.

TRADUO
Traduo: sntese de polipeptdeos usando moldes de RNAm e acopladores (RNAt); Estgios: iniciao, alongamento e trmino; Local: Citoplasma; Maquinaria necessria: ribossomos (formados por RNAr + protenas ribossomais), RNAt e RNAm.

RIBOSSOMO
Um ribossomo liga-se perto da ponta 5 de um filamento de RNAm e move-se para ponta 3, traduzindo os cdons medida que progride. A sntese comea na ponta amino da protena e a protena protena, alongada pela adio de novos aa ponta carboxila. Cada RNAm pode ser simultaneamente traduzido por vrios ribossomos, produzindo polirribossomos.

AMINOACILAO
Ligao das molculas de RNAt a seus aminocidos apropriados: quando ligado a seu aa, um RNAt leva seu aa ao ribossomo, onde o anticdon do RNAt faz par com um cdon no RNAm. Enzimas aminoacil RNAt sintetases: 20 enzimas para os 20 aa diferentes. Cada sintetase reconhece um aa, bem como todos os RNAts que aceitam esse aa. Formao dos aminoacil-RNAt.

INICIAO DA TRADUO
Procariotos - Ribossomos: 70S = subunidade 30S + 50S (vivem se unindo e se separando); - Requer que a seqncia conservada AGGAGG (Shine-Dalgarno) localizada na posio -7 antes do AUG (cdon de iniciao) pareie q p com uma seqncia complementar do RNAr da subunidade 30S do ribossomo; - O primeiro aminocido ligado ao RNAt adicionado uma fMetRNAt (Metionil-RNAt formilada). Auxlio de Fatores de Iniciao (IFs): IF3 + subunidade menor do ribossomo, impedindo a ligao da subunidade maior e auxiliando a ligao da subunidade menor ao RNAm. IF2 + fMet-RNAt IF1 + GTP

13/11/2009

INICIAO DA TRADUO

INICIAO DA TRADUO

INICIAO DA TRADUO

INICIAO DA TRADUO
Eucariotos: - Ribossomos: 80 S = subunidade 40S + 60S (vivem se unindo e se separando); - Requer que as protenas ligadoras do cap-5 (CBP = capbinding protein) liguem se ao cap-5 no RNAm para que outros protein ) liguem-se cap 5 fatores de iniciao da traduo (IFs) juntem-se ao complexo CBPRNAm e permitam a ligao da subunidade 40S do ribossomo formando o complexo de iniciao; - O incio determinado pelo primeiro AUG (cdon de iniciao) prximo extremidade 5 do RNAm encontrado pelo complexo de iniciao que escaneia o RNAm, o primeiro aminocido ligado ao RNAt adicionado uma Met-RNAt (no formilada).

INICIAO DA TRADUO

ALONGAMENTO DA TRADUO
Procariotos e Eucariotos: - Trs etapas sucessivas de adio de aminocidos: aminocidos: 1) ligao de um aa-RNAt no stio A do ribossomo; aaribossomo; 2) transferncia da cadeia polipeptdica crescente ligada ao RNAt no stio P do ribossomo para o aa-RNAt do stio A pela enzima peptidil aatransferase e formao de nova ligao peptdica; peptdica; 3) translocao do ribossomo ao longo do RNAm liberando o stio A para o prximo aa-RNAt e passando o peptidil-RNAt para o stio P e aapeptidilo RNAt sem aminocido ligado para o stio E (exit=sada); requer (exit=sada); fatores de alongamento da traduo (EFs), e GTP. GTP.

13/11/2009

ALONGAMENTO DA TRADUO

ALONGAMENTO DA TRADUO

ALONGAMENTO DA TRADUO
Procariotos: Procariotos:

TRMINO DA TRADUO

- A terminao sinalizada pelos cdons de terminao UAA, UAG e UGA na seqncia do RNAm, requer dois fatores de liberao (RFs): RF1 reconhece UAA e UAG, RF2 reconhece UAA RFs) RF1 RF2 e UGA e RF3 se liga a GTP e estimula a ligao ribossmica de RF1 RF3 RF1 e RF2; RF2 Eucariotos: Eucariotos: - Possuem um nico fator de liberao eRF que reconhece os trs cdons de terminao. terminao.

TRMINO DA TRADUO

TRMINO DA TRADUO

13/11/2009

MODIFICAES PS-TRADUO PSPara que as protenas apresentem a estrutura tridimensional final (conformao nativa) pode ocorrer: - Dobramento espontneo, por "automontagem" dependente apenas da estrutura primria; - Li Ligao d protena a um co-fator; da t f t - Modificaes catalisadas por protenas quinases ou outras enzimas; -Interaes com outras protenas, nesse caso, a conformao final estvel e ativa surge somente por interferncia de outras molculas proticas; Na compactao correta da protena a maioria dos resduos hidrofbicos ficam escondidos na regio central.

MODIFICAES PS-TRADUO PS-

Cadeia polipeptdica em formao

Dobramento e ligao com o co-fator co-

A Modificaes covalentes catalisadas por enzimas especficas (fosforilao, acetilao)

A Ligaes a outras Protena funcional madura subunidades proticas

MODIFICAES PS-TRADUO PSChaperonas moleculares: protenas que tm por funo assistir outras protenas na obteno de seu dobramento apropriado. Convertem a forma glbulo malevel em uma conformao compacta final; - Inicialmente identificadas em E. coli; - Muitas chaperonas so protenas heat shock (Hsp), ou seja, protenas expressas em resposta a elevao de temperatura (~42C) ou outra criticidade celular. O dobramento da protena muito afetada pelo calor e, portanto, estas chaperonas agem em reparar o dano potencial causado pela falha de dobramento; - Outras chaperonas esto envolvidas no dobramento de novas protenas que deixam o ribossomo. Apesar da maioria das novas protenas sintticas poderem dobrar-se na ausncia destas.

MODIFICAES PS-TRADUO PSProtenas que tenham uma rea considervel de aminocidos hidrofbicos expostos em sua superfcie geralmente anormal porque ou: ou: Falhou no dobramento aps deixar o ribossomo, ou; ou; Sofreu um acidente que a desdobrou parcialmente, ou; ou; p p Falhou no encontro de uma subunidade companheira par formar um complexo protico maior. maior. Esta protena intil e pode ser perigosa; perigosa; Formao de agregados que se precipitam e so txicos; txicos; Causam doenas humanas. humanas.

MODIFICAES PS-TRADUO PSAs chaperonas moleculares podem atuar no reparo de protenas defeituosas, reconhecendo e removendo as regies hidrofbicas, dando outra chance de dobramento protena e evitando sua degradao precoce; precoce; Quando h falha nesse redobramento, a protena destruda por protelise; protelise; A via proteoltica segue dois passos principais: principais: - Reconhecimento da regio hidrofbica anormal da protena; protena; - Destruio protica atravs denominada proteossomo; proteossomo; de um complexo de proteases

MODIFICAES PS-TRADUO PSO proteossomo um complexo protesico dependente de ATP, presentes em muitas cpias dispersas no citososl e no ncleo; ncleo; Consiste em um cilindro vazio (central 20S) formado por mltiplas 20S) subunidades proticas, associado a um grande complexo protico (capa 19S 19S) com ~20 polipeptdeos diferentes, localizado em cada extremidade e que contm protenas ATPases. ATPases.

Cilindro

Capa

13/11/2009

MODIFICAES PS-TRADUO PSO proteossomo tambm pode agir sobre protenas que foram marcadas para serem destrudas por outras protenas denominadas ubiquitina, ubiquitina, atravs do processo de ubiquitinio; ubiquitinio; A ubiquitina uma protena constituda por 76 aa, especialmente encontrada em clulas eucariotas; eucariotas; A ubiquitinao de uma protena envolve 3 enzimas E1 (enzima enzimas, ativadora da ubiquitina), E2 (enzima conjugadora) e E3 (protenas acessrias). acessrias). E2 + E3 formam o complexo ubiquitina-ligase. ubiquitina-ligase. O processo consome 1 ATP para a ativao de cada molcula de ubiquitina e tambm no desdobramento da protena realizado pelo proteossomo. proteossomo.

MODIFICAES PS-TRADUO PSA via da ubiquitina-proteossomo consiste nas seguintes etapas: ubiquitina- Ativao: A enzima E1 ativa a molcula de ubiquitina. O resduo CAtivao: ubiquitina. terminal da ubiquitina ligado covalentemente a um resduo de sulfidrilsulfidril-cistena da enzima E1. Isso ocorre na presena de Mg2+ e com o consumo de 1 ATP, liberando AMP e pirofosfato (PPi). (PPi). -Transferncia: A ubiquitina transferida para a enzima E2, liberando Transferncia: a enzima E1. -Reconhecimento: A enzima E3 reconhece e se liga protena-alvo Reconhecimento: protenaformando um complexo no covalente. covalente. - Ubiquitinao: O complexo E2-ubiquitina ligado E3 de modo que Ubiquitinao: a ubiquitina seja transferida de E2 para o alvo. A enzima E3 se solta, alvo. liberando a enzima E2 e a protena ubiquitinada. ubiquitinada.

MODIFICAES PS-TRADUO PS- Poli-ubiquitinao: As etapas 3, 4 e 5 se repetem vrias vezes, formando uma ou mais Poli-ubiquitinao: cadeias de ubiquitina. As ubiquitinas que formam cadeias, se ligam aos resduos de ubiquitina. lisina (48) da ltima da cadeia. 48) cadeia. A cadeia de ubiquitina reconhecida pelo proteossomo. A protena proteossomo. desubiquitinada por enzimas prprias, a protena desdobrada com consumo de ATP e hidrolisada formando pequenos peptdeos (de 7 a 9 aminocidos). aminocidos).

MODIFICAES PS-TRADUO PSProtenas com destruio regulada: Algumas protenas normais regulada: especficas sofrem mudanas em suas concentraes de acordo com alteraes no estado da clula (Ex. ciclinas mitticas que tm vida longa (Ex. durante o ciclo celular mas so degradadas ao fim da mitose). mitose). Formas de controlar a destruio regulada: regulada: - Ubiquitinao - Fosforilao de um stio especfico da protena que desmascara um sinal de degradao oculto; oculto; - Dissociao de uma subunidade protica; protica; - Degradao por clivagem de uma ligao peptdica levando a criao de uma nova extremidade N-terminal desestabilizadora, que ser reconhecida por E3.

ENDEREAMENTO DAS PROTENAS

A maioria das protenas produzidas pela traduo permanecem no citosol onde desempenham suas funes; funes;

ENDEREAMENTO DAS PROTENAS

Tipos de transporte: transporte: - Mediado: trfego da protena Mediado: entre o citosol e o ncleo atravs dos poros nucleares; nucleares; - Transmembrnico: atravs e Transmembrnico: transportadores d t t d de protenas t aderidos membrana (citosol/RE; citosol/mitocndria). (citosol/RE; citosol/mitocndria). Requer, em geral, desdobramento da protena a ser transportada; transportada; - Vesicular: atravs de pequenas Vesicular: vesculas esfricas de transporte contidas na membrana (RE/Golgi). (RE/Golgi).

Outras, entretanto, apresentam um sinal de endereamento que as direcionam ao ncleo, ao RE, s mitocndrias, aos cloroplastos ou aos peroxissomos. peroxissomos. Os sinais de endereamento guiam as protenas transportadas e sinalizam para protenas receptoras complementares. complementares.

13/11/2009

ENDEREAMENTO DAS PROTENAS

Duas formas pelas quais um sinal de endereamento est embutido em uma protena: protena: - O sinal reside numa seqncia nica de ~15 a 60 aa, denominada seqncia sinal, em geral localizada na extremidade da cadeia sinal, protica; protica; Estas seqncias podem ser removidas por peptidases de sinal aps o processo de endereamento ter ocorrido; ocorrido; - Uma regio sinalizadora pode ser formada pela justaposio de aminocidos das regies que esto fisicamente separadas antes do enovelamento, mas se aproximam com o enovelamento. enovelamento.
Protena Distendida Protena Enovelada
COOH NH2 SS NH2 NH2 COOH RS COOH COOH

NH2

Seqncia Sinal (SS)

Regies Sinalizadoras (RS)