UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

AREA DE PESQUERIA

ENFERMEDADES VRICAS, NATURALEZA, VIRUS PATGENOS Y EL VIRUS DEL IHN (NECROSIS HEMATOPOYETICA INFECCIOSA)

CURSO: Ictiopatologia y Parasitologa

DOCENTE: Ing. Felix Rodolfo Meza Romualdo

PRESENTADO POR: Yeny Ruth Aliaga Huahuala

SEMESTRE: Dcimo

PUNO PER

2011

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

1. INTRODUCCION Los virus son agentes infecciosos infinitamente pequeos, que solo pueden multiplicarse dentro de las clulas vivas del husped, siendo esta una de las caractersticas distintivas adems de su estructura sencilla, formada de ADN o RNA. El estudio de las enfermedades viricas en los peces ha sido, y en muchos casos aun sigue siendo, un tema muy poco conocido. En los peces, el estudio de los virus es relativamente reciente, y se diferencian de los que atacan a otros animales en su especificidad hacia el hospedero y la temperatura a la que se realiza su replicacin. En peces de aguas fras, se multiplica a una temperatura entre 5 C y 25 C, mientras que en aguas templadas los hacen entre 15 C y 30 C ya que no toleran temperaturas iguales o mayores a 37 C y su grado de virulencia depende de la temperatura. 2. LOS VIRUS Es una entidad infecciosa microscpica que slo puede multiplicarse dentro de las clulas de otros organismos. Los virus infectan todos los tipos de organismos, desde animales y plantas, hasta bacterias y arqueas. Los virus se diseminan de muchas maneras diferentes y cada tipo de virus tiene un mtodo distinto de transmisin. Entre estos mtodos se encuentran los vectores de transmisin, que son otros organismos que los transmiten entre portadores. El cido nucleico en los virus contiene la informacin especfica y el potencial para modificar operaciones en la clula infectada. Existen cuatro posibles tipos de cido nucleico viral: ADN de cadena sencilla, ADN de cadena doble, ARN de cadena sencilla y ARN de cadena doble. Virus que contienen cualquiera de estos tipos de cido nucleico pueden ser encontrados tanto entre los fagos como entre los virus que infectan a plantas o animales. 2.1. CLASIFICACION Los virus pueden clasificarse por las siguientes caractersticas: Dependiendo de sus caractersticas estructurales (tamao y morfologa) Dependiendo de su material gentico (tipo y estructura del cido nucleico ADN ARN) Pueden agruparse dependiendo de las caractersticas de la enfermedad que producen, tejidos que afectan, forma de transmisin o tipo de vector.

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

Figura 1: clasificacin de virus de clulas animales

Figura 2: estructura de un virus

2.2. CICLO DE REPLICACIN VIRAL La cintica de replicacin viral vara dependiendo del tipo de genoma que posea el virin, esto permite inferir los mecanismos de interaccin virus clula de un virus desconocido a partir de hallazgos presentes en virus con caractersticas genticas similares. La replicacin viral requiere de una interaccin entre los distintos compartimentos celulares y las macromolculas virales

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

Los virus se multiplican solo en clulas vivas. Es necesaria la sntesis de protenas virales por la maquinaria de sntesis proteica de la clula hospedera El virus debe ser capaz de producir un ARNm

El ciclo de replicacin de los virus consta generalmente de las siguientes

fases: fijacin y entrada en la clula, eclipse, multiplicacin y liberacin del virus. 2.2.1. Fijacin o Adsorcin El primer paso en la infeccin viral es la adsorcin a la membrana de la clula susceptible por medio de la adhesin de ligandos virales (protenas de la capside o glucoprotenas de las espculas, por ejemplo a receptores superficiales de la clula). La distribucin en el cuerpo del hospedador de ciertos tipos de receptores celulares explica el tropismo tisular y de hospedador de los virus. Los tejidos y clulas que carecen de receptores especficos de virus determinados no son infectados por dichos viriones. La naturaleza de los receptores es variable y ciertos virus pueden tener ms de un tipo de receptor. 2.2.2. Penetracin Los virus complejos producen una rotura en la membrana celular del hospedador en uno de los puntos de anclaje, gracias a la presencia de algunas molculas de enzimas hidrolticas entre las protenas de la cpsida. A travs de la rotura, el tubo central inyecta el ADN vrico, quedando la cpside vaca en el exterior de la clula diana y el cido nuclico libre en el citoplasma. La presencia de cpsidas en la superficie celular es un buen indicio de que ha sufrido una infeccin vrica. 2.2.3. Eclipse Segn la duracin de la fase de eclipse, se suelen distinguir dos modalidades de ciclo infeccioso de un virus: Ciclo ordinario: el cido nucleico vrico procede inmediatamente a la transcripcin de su mensaje gentico en los ARN necesarios para su multiplicacin, y prosigue rpidamente el ciclo vital. Este tipo de ciclo es el ms extendido en la naturaleza. Ciclo lisognico: El ADN vrico se cierra por sus extremos generando un ADN circular. Este ADN se inserta en el ADN bacteriano en un lugar especfico en el que la secuencia de nucletidos bacterianos es semejante alguna regin del ADN vrico. La bacteria prosigue sus funciones vitales sin que el virus realice ninguna accin, y cuando el ADN bacteriano se duplica tambin lo hace el ADN
4

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

vrico, de manera que el genoma del virus pasa a las dos bacterias hijas. La multiplicacin bacteriana puede seguir durante generaciones sin que el virus se manifieste. Pero ante una alteracin de las condiciones ambientales, el ADN vrico se separa del bacteriano y prosigue entonces las restantes fases de ciclo infeccioso, produciendo la muerte de la bacteria y nuevos ejemplares del virus. La Fase de Eclipse es la fase del ciclo donde ocurre replicacin viral, el virin infectante se rompe y pierde su infecciosidad, despus de este perodo existe un intervalo de rpido acumulo de una progenie infectante de partculas virales, tras el ensamblaje FASE DE ECLIPSE Se suelen distinguir dos modalidades de ciclo infeccioso de un virus: Ciclo ordinario: el cido nucleico vrico procede inmediatamente a la transcripcin de su mensaje gentico en los ARN necesarios para su multiplicacin, y prosigue rpidamente el ciclo vital. Ciclo lisognico: La bacteria prosigue sus funciones vitales sin que el virus realice ninguna accin, y cuando el ADN bacteriano se duplica tambin lo hace el ADN vrico, de manera que el genoma del virus pasa a las dos bacterias hijas. La Fase de Eclipse es la fase del ciclo donde ocurre replicacin viral, el virin infectante se rompe y pierde su infecciosidad, despus de este perodo existe un intervalo de rpido acumulo de una progenie infectante de partculas virales, tras el ensamblaje ETAPAS DE LA REPLICACION VIRAL Reconocimiento y unin a la clula - Fijacin: Unin del virin a los receptores de la clula. Penetracin: la partcula viral es internalizada en la clula diana por medio de endocitosis y viropexia Perdida de cobertura - Desnudamiento: separacin fsica del acido nucleico de los otros componentes estructurales del virin. Ocurre al mismo tiempo de la penetracin, liberando el genoma en forma de acido nucleico libre o como nucleocapside Expresin del genoma viral y sntesis de componentes: Transcripcin de ARNm especfico a partir del cido nucleico viral, para expresin y duplicacin de la informacin gentica

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

Ensamblaje y liberacin: Los genomas virales recin sintetizados y los polipptidos de la cpside se unen para formar las partculas virales. Las clulas infectadas sufren lisis, liberando las partculas virales

Figura 3: ciclo de replicacin de un virus

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

3. NATURALEZA Los virus son agentes infecciosos infinitamente pequeos, que solo multiplicarse dentro de las clulas vivas del husped. Estas propiedades son propias de algunas pequeas bacterias, pero las caractersticas distintivas de consisten en su estructura sencilla y su mecanismo de replicacin. Se siguiente: pueden tambin los virus tiene lo

Tamao pequeo: los virus tienen un tamao entre 20 a 300nm. El tamao de cada particula de un determinado tipo de virus es absolutamente constante. Material gentico: el genoma puede ser DNA o RNA, pero nunca ambos juntos. Replicacin: los virus no pueden multiplicarse en un medio sencillo, sino solo dentro de las clulas vivas del husped y con la ayuda de las diferentes partes constitutivas de la celula (ribosomas por ejemplo). En el interior de la celula del husped, el genoma del virus es responsable de la produccin de nuevos virus cuyas partculas no crecen en tamao y tampoco pueden reproducirse por fision binaria.

4. ENFERMEDADES VIRICAS Hasta el presente solo se han podido caracterizar con suficiente detalle unos pocos virus de aquellos que han sido aislados del pez. Solo los rhabdovirus y el virus del pez gato estan suficientemente caracterizados para incluirlos en las tablas de los virus animales.

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

5. VIRUS PATOGENOS Son varias las principales enfermedades causadas por virus, todas estas consideradas de alto riesgo por la Oficina Internacional de Epizootias (cuya funcin es evitar la distribucin de enfermedades certificables y notificables) de las primeras, su control y/o erradicacin es muy difcil y hace que el pas que las presente deba de declararlo ante esta Oficina, y por lo tanto se tiene restringido la exportacin para de evitar su propagacin a otros pases. Estas enfermedades son:

Necrosis Hematopoytica epizotica Septicemia Hemorrgica Viral (VHS) Necrosis Hematopoytica Infecciosa (IHN) Enfermedad Viral del Bagre de Canal (CCVD) Necrosis Eritroctica Viral (VEN) Viremia de Primavera de la Carpa (SVC) Herpesvirus de Ictaluridae tipo 1 (Virus del Bagre de Canal) Encefalopata y Retinopata virales Necrosis Pancretica Infecciosa (IPN)

(RODRIGUEZ, et al. 2001)

6. IHN - NECROSIS HEMATOPOYETICA INFECCIOSA La necrosis hematopoytica infecciosa (IHN) es una enfermedad vrica que afecta a varias especies de salmnidos. Las consecuencias clnicas y econmicas ms importantes de la IHN se producen en criaderos de truchas arco iris alevines o juveniles en agua dulce donde los brotes agudos pueden producir una alta mortalidad; sin embargo, tanto el salmn del Pacfico como el del Atlntico criado en agua dulce o salada pueden resultar gravemente afectados. La enfermedad, causada por un rabdovirus, el virus de la necrosis hematopoytica infecciosa (IHNV), se caracteriza por sntomas llamativos que incluyen letargo entremezclado con brotes de actividad frentica y anormal, oscurecimiento de la piel, branquias plidas, ascitis, abdomen dilatado, exoftalmos, y hemorragias petequiales internas y externas. Internamente, el pez parece anmico y con falta de alimento en el intestino. El hgado, el rin y el bazo estn plidos. Los hallazgos histopatolgicos revelan necrosis en tejidos hematopoyticos, rin, bazo, hgado, pncreas y tracto digestivo. La sangre de los alevines afectados muestra hematocrito reducido, leucopenia, degeneracin de leucocitos y trombocitos, y grandes cantidades de restos celulares. La infeccin por IHNV conduce a menudo a mortalidad debida a la alteracin del equilibrio osmtico, y tiene lugar dentro de un contexto clnico de edema y hemorragia. La multiplicacin del virus en las clulas endoteliales de los capilares sanguneos, tejidos hematopoyticos y clulas del rin subyace a las lesiones microscpicas. Los peces jvenes infectados emiten elevados niveles del virus. La
YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 8

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

temperatura del agua es el factor ambiental ms importante que afecta al progreso de la IHN. En condiciones naturales, la enfermedad clnica tpica se produce entre 8 y 15 C. Los brotes de IHN varan de explosivos a crnicos dependiendo de la especie del pez, condiciones de crianza, temperatura y, hasta cierto punto, la cepa del virus. En brotes agudos, las prdidas suponen varios porcentajes de la poblacin por da, y la mortalidad acumulativa puede alcanzar 90-95% o ms. En los casos crnicos, las prdidas se prolongan y se pueden observar varios estadios de la enfermedad en el estanque. La enfermedad se hace ms grave por la coinfeccin con algunos patgenos bacterianos, tales como el Flavobacterium psychrophilum. (WINTON y LEONG, 2000) 6.1. ETIOLOGIA La enfermedad est producida por un virus englobado en la familia Rhabdoviridae, gnero Lisavirus. Posee la estructura tpica de los Rhabdovirus con forma de proyectil (similar al virus de la rabia canina) y de 170 x 70 nm de tamao. Estructuralmente posee una nica cadena de RNA no segmentada incluida en una nucleocpside. Adems est constituida por 5 protenas estructurales: L, G, N, M1 y M2, que sern las responsables de sus caractersticas de virulencia y de inmunogenicidad. Se han descrito diversas cepas del virus IHN en funcin del peso molecular de las protenas que las constituyen, no obstante, parece que los estudios ms recientes limitan a tres los serotipos existentes. La temperatura de multiplicacin del virus se encuentra entre 4 y 20 C, con el ptimo trmico alrededor de los 12C. El virus es lbil a temperaturas superiores a 23-25C. Frente al virus IHN, el pez produce anticuerpos neutralizantes, Inmunoglobulinas similares estructuralmente a las IgM de mamferos pero funcionalmente ms prximas a las IgG y cuya actividad neutralizante est directamente relacionada con el nmero de protenas G de la superficie viral. Tambin se ha observado la produccin de interfern por aquellos animales que han sufrido la infeccin por este virus. 6.2. EPIDEMIOLOGIA 6.2.1. FACTORES DEL HOSPEDADOR Las especies susceptibles son: trucha arco iris (Oncorhynchus mykiss), trucha comn (Salmo trutta), el salmn del Pacfico incluyendo el salmn real (O. Tshanytscha), el salmn rojo (O. nerka), el salmn keta (O. keta), el salmn japons (O. masou), el salmn plateado (O. kisutch) y tambin el salmn del Atlntico (Salmo salar). Histricamente, el mbito geogrfico del IHN se limit a la parte oeste de Norteamrica, pero la enfermedad se ha extendido a Europa
YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 9

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

continental y al lejano Oeste por la importacin de pescado y huevos infectados. Una vez que el IHNV se establece en una piscifactora o en una cuenca fluvial, la enfermedad puede implantarse entre los portadores. Hay un alto grado de variacin en la susceptibilidad al IHNV entre los individuos de cada especie de peces. La edad de los peces es extremadamente importante: cuanto ms joven es el pez ms susceptible a la enfermedad, un estado general de salud bueno en los peces disminuye la susceptibilidad al IHN. Los peces se convierten en ostensiblemente resistentes a la infeccin con la edad hasta el desove, que es cuando de nuevo se hacen muy susceptibles y pueden eliminar grandes cantidades del virus en los productos sexuales. Los supervivientes de la IHN muestran una gran inmunidad protectora por la sntesis de anticuerpos circulantes frente al virus y, en ciertos individuos, un estado portador oculto. (WINTON y LEONG, 2000) 6.2.2. TRANSMISION La transmisin puede ser por fecas y orina a travs del agua incluyendo el agua de mar, alimento y verticalmente se transmite por el semen y fluidos ovricos. La dosis infectante en fluidos ovricos alcanza a 1010 pfu/ml. En ovas que no estn infectadas pero contaminadas, es decir con virus en superficie, pueden ser desinfectadas en forma efectiva. Es interesante que IHN puede atacar las clulas espermticas lo que podra indicar su transmisin vertical. Los vectores pueden incluir parasitos invertebrados (coppodos y sanguijuelas); las aves piscivoras tambien pueden ser vectores de enfermedad. 6.2.2.1. VIAS DE TRANSMISION

La transmision del virus de IHN puede ser horizontal o vertical: 6.2.2.1.1. Transmision Va Horizontal La va horizontal directa se origina por el contacto entre el pez enfermo, tanto en forma clnica como portadores asintomticos, y el sano. La entrada del virus en el pez sano se produce por las branquias, principal va, o por el tracto gastrointestinal al contactar con el virus en suspensin en el agua, con las heces eliminadas, o por el propio canibalismo. Transmisin horizontal indirecta, como consecuencia del mal manejo por parte del piscicultor que no desinfecta los salabres, botas, camiones cisterna, etc. Dentro de la transmisin horizontal indirecta debemos considerar el papel que desempean especies no cticas como reservorios de la enfermedad, es el caso de las aves ictifagas (Gaviota, Garza, Bho), que actan como vehculos animados del virus en el pico al ingerir peces infectados, o
YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 10

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

eliminando el virus con las heces. Tambin algunos mamferos que se alimentan de peces podran actuar como vehculos, es el caso del Visn. 6.2.2.1.2. Transmisin Va Vertical Se produce a travs de los huevos embrionados procedentes de progenitores infectados. El virus se localiza en los fluidos ovricos y en el esperma, pero una vez embrionado el huevo, se desconoce si el virus se localiza dentro de los mismos, o por el contrario se encuentra en la capa externa, en la cutcula, pasando a infectar al alevn una vez que ha eclosionado el huevo, si bien el hecho de que la enfermedad se ha presentado en alevines nacidos de huevos embrionados que haban sido desinfectados en la fase de incubacin tienden a confirmar la primera de las hiptesis.
(ALVAREZ et al, 1988).

6.2.3. FUENTES DE VIRUS El virus virulento se expande de los peces infectados a travs de los excrementos, la orina, los flujos sexuales y la mucosa de los epitelios de la branquia y de la piel. Por medio de aguas de transporte infectadas, as como redes, cubos u otras herramientas contaminadas.

A travs de los huevos procedenes de cras infectadas.

6.2.4. DISTRIBUCION GEOGRAFICA La enfermedad ha sido registrada en salmones y truchas en varios ros, lagos y criaderos situados al oeste de Amrica del Norte y se ha propagado debido a los movimientos de los peces y de los huevos a distintas partes de Europa y Asia. La enfermedad no es endmica en todas las regiones de los pases donde ha sido declarada. En general, la enfermedad se produce en aguas que estn a una temperatura comprendida entre 4C y 18C. Los peces jvenes hasta 1 ao de edad son los ms propensos al contagio. 6.3. PATOGENIA La infeccin se inicia por el contacto del virus con las branquias o el intestino mediante la ingestin del mismo. En ambos casos el virus atraviesa el epitelio de las laminillas branquiales o del intestino, pasando a localizarse en los endotelios vasculares, lugar donde se produce la primera replicacin del virus. A partir de ese momento, se produce una diseminacin a las clulas epiteliales de las branquias o del intestino, donde se origina la segunda replicacin del virus.
YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 11

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

Posteriormente, el virus pasa a localizarse en la sangre asociado a algunas subpoblaciones de leucocitos que los transportan a los rganos diana, donde comienza a localizarse a partir de los das 2 o 3 postinfeccin (Hgado y Rin anterior fundamentalmente). 6.4. CUADRO CLINICO 6.4.1. SINTOMAS En animales muy jvenes la nica manifestacin de enfermedad que se observa es la repentina muerte de los animales, muerte que puede llegar a alcanzar el 100% de la poblacin. En estos casos la mortalidad suele comenzar entre los 5 y 14 das postinfeccin. En animales ya jvenes o en adultos la enfermedad cursa de forma menos grave. El proceso comienza rpidamente, en un perodo que abarca desde las 24 a 72 horas postinfeccin, con la inapetencia del pez, eliminacin de finas hebras de heces que son restos de descamacin del epitelio intestinal. El pez comienza a presentar un estado letrgico y natacin anormal con prdida del sentido de la orientacin. Se observa oscurecimiento de la superficie corporal, distensin abdominal con ascitis, exoftalmos, en la base de las aletas y la cola se pueden observar fenmenos hemorrgicos en forma de petequias, y ms espordicamente las hemorragias se observan en la dermis, msculo, cabeza y boca, y finalmente los peces pierden totalmente el sentido de la orientacin, nadan errticos para finalmente morir. En algunos casos, las branquias aparecen muy plidas y en la boca, piel y musculatura se observan hemorragias. En los animales supervivientes puede observarse escoliosis y lordosis. En sangre se observa leucopenia, degeneracin de leucocitos y trombocitos y acmulo de restos celulares.

Figura 4: truchas arco iris que arrastran filamentos fecales que penden del recto.
YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 12

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

6.4.2. LESIONES Las lesiones producidas por este virus se localizan en cavidad abdominal con acmulo de material seroso y hemorrgico en algunas ocasiones. Este material tambin se presenta en el intestino. Tambin afecta al tejido heptico, esplnico, renal e intestinal, as como a msculo esqueltico y vejiga natatoria que en general se presentan anmicos y con petequias. Ocasionalmente el pncreas presenta un intenso estado necrtico y en las fases ms avanzadas de la enfermedad ese tejido necrtico se observa en hgado, que adems sufre el acmulo de tejido ceroide, y en los glomrulos y en los tbulos renales. Las clulas de estos rganos sufren intensos fenmenos de necrosis con picnosis, cariorrexis e infiltracin intracitoplasmtica. Existe en estos tejidos una intensa infiltracin de macrfagos y leucocitos polimorfonucleares. Se observan acmulos de eritrocitos en el tejido muscular estriado que ocasionalmente puede aparecer necrosado.

Figura 5: Tejido pancretico del Salmon Coho afectado por el IHN

Figura 6: Clulas hematopoyticas de trucha arco iris picnoticas o totalmente necrosadas.

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 13

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

6.5. DIAGNOSTICO El estudio del cuadro clnico y la epidemiologa demuestra que existe gran similitud con el resto de las enfermedades vricas e incluso con algunas bacterianas de los peces, lo que hace muy difcil realizar un diagnstico clnico objetivo. Esto supone que se debe recurrir al diagnstico laboratorial, que puede hacerse mediante tcnicas directas (detectan el virus) o indirectas (detectan los anticuerpos producidos frente al virus), la actual legislacin exige que el diagnstico se realice mediante tcnicas directas consistentes en el aislamiento del virus en cultivos celulares, preferentemente la linea continua EPC, y la posterior identificacin del mismo mediante Seroneutralizacin, Inmunofluorescencia o ELISA. 6.5.1. Tcnicas Directas La recogida de muestras en estos casos debe realizarse, siempre que sea posible, por el personal del laboratorio especializado en enfermedades vricas de peces. En ese caso, se toman un mnimo de 60 peces con manifestaciones de la enfermedad. A estos animales se les tomaran muestras de Hgado, Bazo, Rin anterior, Cerebro, Gnadas, Corazn y Pncreas. Si no es posible el desplazamiento de los tcnicos especializados a la piscifactora y las manifestaciones clnicas afectan a una parte muy importante de la poblacin, deben enviarse un mnimo de 10 peces vivos pero afectados de enfermedad al laboratorio, para lo cual se utilizaran depsitos de transporte de peces, o bien sern introducidos en bolsas de plstico a medio volumen con agua y oxgeno.

Figura 7: envo de muestras para laboratorio

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

14

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

a.- Cultivos celulares Las muestras son maceradas e inoculadas en cultivos celulares. Las lineas celulares ms frecuentemente utilizadas son, Epithelioma Papullosum Cyprini (EPC) y Fatheat Minow (FHM). El aislamiento de los virus se realiza a partir de macerados de los rganos recogidos. Una suspensin de esos macerados se inocula, por adsorcin, en los cultivos celulares y posteriormente se incuban a 14 C, y se observan diariamente con el fin de determinar la aparicin de efecto citoptico. Las clulas inoculadas se analizan durante unos 10 das, tras estos, se realiza un segundo pase e incluso un tercer pase por cultivos celulares sanos con el fin de asegurar la existencia de virus y descartar que el posible efecto citoptico se deba a toxicidad de los macerados de rganos que se han inoculado. Los virus que se han aislado en el cultivo celular son identificados por medio de la tcnica de seroneutralizacin utilizando antisueros especficos frente al virus IHN (producidos generalmente en conejo). b.- Otras tcnicas utilizables son: -Inmunofluorescencia -Inmunoperoxidasa -E.L.I.S.A -Inmunoblotting -Complejo Inmunohistoqumico Avidina-Biotina-Peroxidasa -Inmuno-microscopa electrnica

6.5.2. Tcnicas Indirectas La deteccin de anticuerpos circulantes en el suero de los peces se utiliza para la deteccin de portadores asintomticos, si bien su eficacia es baja y por tanto las tcnicas utilizadas para ello no son reconocidas, por el momento, como diagnsticos de referencia. Actualmente, se utilizan las tcnicas de Neutralizacin indirecta y la Inmunofluorescencia indirecta. 6.6. TRATAMIENTO Y PROFILAXIS 6.6.1. TRATAMIENTO Los tratamientos de carcter curativo a base de antibiticos son absolutamente ineficaces para el control y erradicacin de la enfermedad, y solamente las medidas de manejo y control de los peces de las piscifactoras van a permitir evitar y controlar la presencia de estos virus. 6.6.2. PROFILAXIS
YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 15

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

Higinica El mejor mecanismo de control de estas enfermedades es la prevencin mediante la aplicacin de medidas de carcter higinico-sanitarias basadas en la limpieza de los estanques, el uso continuado de desinfectantes (amonios cuaternarios, formalina, clorados, organofosforados, iodforos) y medidas que eviten el stress de los animales tales como manejo adecuado, el control de la excesiva densidad de poblacin, anestesia a los animales en la manipulacin de los mismos, etc. La posibilidad de que la enfermedad se transmita de forma vertical, hace que el momento de la fecundacin de los huevos pueda constituir un punto clave en la infeccin de los mismos, por ello, la fecundacin deber realizarse en presencia de Yodforos que inactivan el virus, lo que evitar (o reducir) la posibilidad de que se produzca la transmisin vertical. Del mismo modo, se debe controlar la entrada en la piscifactora de potenciales portadores asintomticos, de forma especial las especies cticas de vida salvaje existentes en el ro que pueden ser portadores de los virus y provocar de nuevo la infeccin en la piscifactora, as como las aves ictifagas y mamferos que pueden entrar en las mismas, y que actan como vehculos de los agentes vricos. Las importaciones de huevos embrionados y alevines deben realizarse a partir de piscifactoras que posean certificados expedidos por la O.I.E. en los que quede demostrada la ausencia de, no slo sta sino de todas, las enfermedades de las listas A y B del cdigo Zoosanitario Internacional de la O.I.E. y de las listas I y II de la legislacin de la Unin Europea para la acuicultura. Una vez instaurada la enfermedad en la piscifactora, deben establecerse medidas de erradicacin que pasan por realizar el vaciado sanitario de la misma durante un perodo mnimo de 3 meses con desinfecciones continuas a base de clorados, cal viva y amonios cuaternarios en los estanques. Una vez que se haya cumplido esta etapa, la reintroduccin de nuevos animales se realizar a partir de explotaciones que puedan demostrar estar exentas. Vacunal Las primeras medidas de inmunoprofilaxis que se instauraron, consistan en la inoculacin del virus a peces adultos. Posteriormente a estos se les extraa el suero, que era inoculado a peces sanos, lo que confera cierto grado de inmunidad. Posteriormente, y siempre a nivel experimental hasta el momento, se utilizaron vacunas inactivadas con formalina que producan respuesta protectora cuando

YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA

16

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ICTIOPATOLOGIA Y PARASITOLOGIA

eran inoculados por inyeccin, pero no por inmersin o bao hiperosmtico, lo que haca muy compleja su utilizacin. Ms tarde, se utilizaron vacunas vivas atenuadas. En este sentido se utilizaron 2 sistemas diferentes de atenuacin, pases sucesivos en cultivos celulares y aumento de la temperatura. En ambos casos la inmunidad era buena, pero mantena cierto poder patgeno que en algunas ocasiones originaba de nuevo la infeccin natural. Actualmente se est trabajando con fracciones antignicas del virus, que puedan ser inmungenas pero que evitan el trabajar con virus ntegro y vivo, lo que permite controlar su poder patgeno. No obstante estos estudios se encuentran en fases iniciales, por lo que se puede suponer que se tardar unos aos en que esas vacunas sean aplicables al campo. Todos estos acontecimientos hacen que hoy por hoy el control de esta enfermedad, as como del resto de los procesos vricos en acuicultura, se base fundamentalmente en la utilizacin de medidas higinico-sanitarias y control de los peces, as como de cualquier otro factor que produzca stress y que se transforma en factor predisponente de cara a la aparicin de una enfermedad infecciosa. Tampoco puede olvidarse, como medida que puede reducir la transmisin vertical de la enfermedad, la desinfeccin de los huevos embrionados en las fases de incubacin. 6.7. IMPORTANCIA DE SALUD PUBLICA El virus IHN no posea ningn riesgo conocido a los humanos ni a cualquier otro animal salvo que la trucha y el salmn. No hay restricciones en el procesamiento o venta de peces infectados para el consumo humano y no hay necesidad de tomar cuidados particulares desde la perspectiva de la salud pblica. (TROUTLODGE). 7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ALVAREZ P, P., BARJA J., BLANCH A., ETVEZ A., FIGUERAS A., GIORGETTI G., JOFRE J. 1988. Patologa en acuicultura. Editorial Espaa. S.L. Madrid Espaa. 550 pg. RODRIGUEZ G. M, RODIGUEZ C.G, MONROY G.Y, MATA S. J. 2001. Manual de enfermedades de peces. Boletn del programa nacional de sanidad acucola y la red de diagnostico. Xochimilco Mxico. V:3. N:15. pp. 14. ROBERTS R. 1981. Patologa de los peces. Ediciones Mundi Prensa. Madrid - Espaa TROUTLODGE. Enfermedad de virus necrosis hematopoietica infecciosa (IHN). Technicall bulletin. Washington USA. pp. 3. WINTON J y LEONG J. 2000. Necrosis hematopoytica infecciosa. OIE. Pars Francia.
YENY RUTH ALIAGA HUAHUALA 17