METODOLOGIA DE LA INVESTIGACION Ivn A. Fandez G. Biotecnologa MARCO TEORICO Revisin bibliogrfica Femenia M. 2007.

7. Caracterizacin de cepas de hongos del genero Colletotrichum sntesis de gloeosporiol, diseo y sntesis de modelos de agentes fungiestticos. Tesis doctoral ciencias qumicas, Universidad de Cdiz. Puerto Real, Espaa. Las especies de Botrytis constituyen uno de los grupos de patgenos de plantas y saprfitos ms extendido geogrficamente. Se encuentran desde zonas fras como Alaska o Canad, hasta reas subtropicales como Egipto, ocasionando importantes prdidas en los cultivos comerciales. (P6) La podredumbre gris es la enfermedad ms extendida y econmicamente ms importante que afectan a un amplio nmero de cultivos, especialmente las uvas, reduciendo su calidad y cantidad. (p8) Fernndez J. 2006. Aplicacin de la proteomica a la caracterizacin de mecanismos de patogenicidad en Botrytis cinerea, utilizacin y evaluacin de nuevos fungicidas. Tesis doctoral, Universidad de Cdiz. Cdiz, Espaa. 89pp. Botrytis cinerea es un hongo pleomrfico caracterizado por poseer un estado perfecto denominado Botryotinia fuckeliana. Considerando las distintas formas anatmicas del hongo, destaca: - Estado Imperfecto o Anamorfo, donde se incluyen las formas de reproduccin asexuales del hongo: Forma conidial denominada Botrytis, Forma microconidial denominada Mycroconidium, Forma esclerocial, denominada Sclerotium. - Estado Perfecto o Teleomorfo, caracterizado por la produccin de esporas meiticas denominado Botryotinia. Reino Phylum Subphylum Clase Orden Familia Gnero Especie Fungi Ascomycota Pezizomycotina Leotiomycetes Helotiales Sclerotiniaceae Botryotinia Botryotinia fuckeliana

Rivera A. 2007. Evaluacin y caracterizacin de la actividad antifungica de la especie Quillaja saponaria mol. Cultivada in vitro en Botrytis cinerea Pers. Tesis Doctoral en ciencias de recursos naturales. Universidad de la Frontera. Temuco, Chile. 179pp. B. cinerea produce un micelio blanquecino y de aspecto lanoso en el tejido infectado, el cual se vuelve gris durante la esporulacin, lo que puede ocurrir dentro de unos pocos das luego de que la infeccin se ha iniciado, debido a esto, las enfermedades causadas por este hongo son comnmente denominadas pudricin gris. B. cinerea produce conidios multinucleados, heterocaroticos, hialinas o levemente coloreadas, unicelulares, ovoides o esfricas, sobre pequeos esterigmas en el extremo de conidiforos ramificados. El patgeno posee hifas septadas

ramificadas y forma una variedad de estructuras de penetracin, incluyendo apresorios, con los cuales invade la epidermis del tejido vegetal. Adems, las especies del gnero Botrytis producen esclerocios, que actan como estructuras de resistencia para proteger al patgeno de condiciones climticas desfavorables. Arias J. & Jerez A. 2008. Elaboracin de un atlas para la descripcin microscpica y macroscpica de hongos fitopatogenos en especies de flores de corte cultivadas en la sabana de Bogot. Tesis microbiologa industrial. Pontificia Universidad Javeriana. Bogot, Colombia. 142pp. Las esporas grises son las encargadas de diseminar el microorganismo e iniciar infecciones en hojas y flores de otras plantas, adems puesto que ste es saprofito, y produce formas resistentes (clamidosporas), puede ser fcilmente diseminado en los residuos de la cosecha, en el suelo o sustrato, mediante el riego, el movimiento del personal, la cosecha y la propagacin, lo que requiere por tanto, la adopcin de medidas mas estrictas para su control, como las evidenciadas en el cultivo del rosal, en el cual se realizaba el cubrimiento de la flor con bolsas de papel para prevenir su expansin, lo que mostr la capacidad del microorganismo para afectar varias especies de plantas, y desarrollarse ampliamente, atribuyendo este hecho principalmente a los bajos requerimientos nutricionales y ambientales del mismo. Snchez V. & Salas W. 2006. Avances en el control biolgico de Botrytis cinerea en chile y tomate cultivados bajo techo. Manejo Integrado de Plagas y Agroecolgica. Costa Rica. Se han descrito diversos hongos y bacterias como controladores biolgicos del moho gris, entre los hongos ms estudiados se encuentran especies de Trichoderma y Cladosporium. Varios aislamientos han resultado eficaces para el control de este patgeno en cultivos dentro de invernadero, se encontraron reducciones de las infecciones en tomate hasta del 100% utilizando T. harzianum y Cladosporium cladosporioides, el Aislamiento del patgeno y los antagonistas se recolectaron de tallos infectados con B. cinerea en invernaderos comerciales de chile y tomate en tres localidades, los cuales se colocaron en una cmara hmeda para estimular el crecimiento del hongo. Cuando se observ la esporulacin del patgeno, este se aisl en medio papa-dextrosaagar (PDA), incubado a 22 C con luz fluorescente alterna cada 12 horas. Se us una mezcla de los aislamientos obtenidos para evaluar los antagonismos. Villalobos C. 2006. Caractersticas morfolgicas y patognicas de aislamientos de Botrytis cinerea Pers. ex Fries desde arndano (Vaccinium corymbosum L. y Vaccinium virgatum Ait.) resistentes a benomilo. Tesis agronoma, Universidad Austral De Chile. Valdivia, Chile. Los fungicidas han pasado a constituir una pieza clave en la obtencin de buenos rendimientos y productos de calidad. Actualmente en el mercado se encuentra una amplia gama de estos, pudiendo satisfacer las expectativas de control al ataque de diferentes hongos, la aplicacin de fungicidas en tratamientos de pre y postcosecha del huerto de arndanos y tratamientos de postcosecha a la fruta, mejoran la calidad del producto durante su almacenamiento y comercializacin, sin embargo los costos asociados no son menores.

Hammami I., Kamoun N. & Rebai A. 2011. Biocontrol of Botrytis cinerea with essential oil and methanol extract of Viola odorata L. flowers. Archives of Applied Science Research (USA). 3 (5):4451. Este estudio mostr que el aceite de V. odorata L. (violeta dulce) tiene una fuerte actividad antifngica contra B. cinerea. As que este aceite esencial se puede utilizar como un potencial fungicida para hongos patgenos y saprfitos, y para el diseo ecolgico-botnico sostenible en la proteccin de algunos productos alimenticios almacenados sin embargo se necesitan ms estudios para evaluar el potencial in vivo de este aceite y su efecto sobre la respuesta del vigor de las semillas. Molina G., Zalda S., Gonzlez G. & Sanfuentes E. 2006. Seleccin de hongos antagonistas para el control biolgico de Botrytis cinerea en viveros forestales en Chile Bosque 27(2): 126-134. Una vez introducido B. cinerea en los cultivos, puede sobrevivir en sustrato orgnico, hojas muertas cadas en la superficie de los recipientes y en tejidos de plntulas como componente de la biota del filoplano. Tradicionalmente el principal mtodo de control de B. cinerea ha sido mediante el uso de fungicidas, aunque estos continan siendo el soporte del manejo del moho gris, recientes estudios han constatado una menor efectividad en las aplicaciones, producto del abrupto aumento de los niveles de resistencia del patgeno a fungicidas benzimidazoles, asi tambin un desarrollo paulatino de resistencia a dicarboximidas, por el uso repetitivo de estos grupos de fungicidas, por este y otros motivos se buscan soluciones alternativas con la implicancia de biocontroladores o antagonistas. Chaves N. & Wang A. 2004. Combate del moho gris (Botrytis cinerea) de la fresa mediante Gliocladium roseum. Agronomia Costarricense (Costa Rica). 28(2): 73-85. Los resultados obtenidos demuestran que al emplearse fungicidas de contacto y G. roseum se protege los tejidos nuevos de la infeccin de B. cinerea ms eficientemente, con lo que se logra un mejor combate de la enfermedad. Esto porque, al senescer y estar colonizados por el biocontrolador, los tejidos no producirn o generarn menos inculo secundario de B. cinerea, que es el que infecta las partes florales; que a su vez son la principal fuente de inculo para la fruta. Esta ltima tambin estar protegida por la accin del antagonista. El antagonista, al colonizar de manera sistmica los tejidos, reduce el nicho disponible para B. cinerea; adems, luego de establecido, producir inoculo secundario, dando una proteccin continua a los tejidos de la planta. As, con el tiempo la cantidad de inculo secundario del patgeno debera disminuir, al haber menos nichos disponibles para su produccin. Ernesto P. Benito, Arranz M. & Arturo P. Eslava. 2000. Factores de patogenicidad de Botrytis cinerea. Revista Iberoamericana de Micologa (Espaa). 17: S43-S46 Las esporas de B. cinerea pueden ser producidas sobre cualquier material vegetal y transportadas grandes distancias por corrientes de aire. Una vez que la espora ha alcanzado la superficie del husped se inicia el ciclo de infeccin descrita mediante los siguientes pasos: la adhesin y germinacin de las esporas sobre la superficie del husped; su penetracin en el tejido vegetal, bien a travs de heridas o de aberturas naturales, bien directamente mediante la participacin de distintas actividades enzimticas o mediante la participacin de diversos procesos mecnicos; el establecimiento del patgeno en la zona de penetracin; en lesiones primarias es

capaz de vencer las barreras defensivas de la planta e inicia su diseminacin en el tejido circundante, determinando la colonizacin y la maceracin del tejido infectado en un breve periodo de tiempo donde produce una nueva generacin de esporas.

Tarea HIPOTESIS: Chaves N. & Wang A. 2004. Combate del moho gris (Botrytis cinerea) de la fresa mediante Gliocladium roseum. Agronoma Costarricense (Costa Rica). 28(2): 73-85. Una posible alternativa no qumica para el combate de esta enfermedad es el uso del biocontrolador Gliocladium roseum, un Hyphomycete que es conocido por colonizar como un parsito no patognico al hospedero y que ha sido probado con xito como agente biocontrolador de Botrytis cinerea en fresa, frambuesa, semillas de conferas, begonia, geranio, rosa, pastora, pepino, tomate, pimienta, violeta persa y ciclamen los mismos demostr ser igual o ms efectivo para el combate del patgeno mencionado que los tratamientos fungicidas.