CUADERNO DE PROTOCOLOS

CUERPO ACADEMICO DE INVESTIGACIN Y DESARROLLO AGROINDUSTRIAL

Extraccin de biomoleculas

Universidad Politcnica de Chiapas

INGENIERA AGROINDUSTRIAL

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Dr. Sergio Saldaa Trinidad Dra. Peggy Elizabeth Alvarez Gutirrez Dra. Delfeena Eapen M en C. Yolanda del C Prez Luna M. en C. Roberto Berrones Hernndez

Teresa Guadalupe
Teresa Guadalupe Gutirrez de Coss

Gutierrez de Coss
Marzo 2009
Universidad Politcnica de Chiapas Eduardo J Selvas s/N Col Magisterial Tuxtla Gutirrez, Chiapas

+52 961 6120484 www.upchiapas.edu.mx

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Mtodo de extraccin de aceite de soya......................................................................................3 Mtodo de extraccin de aceite de palma....................................................................................7 Mtodo de extraccin de aceite de canola.................................................................................11 Mtodo de extraccin de grasa de cerdo....................................................................................13 Extraccin de caroteno............................................................................................................15 Extraccin de clorofila...............................................................................................................17 Extraccin de taninos.................................................................................................................19

INDICE

Mtodo de extraccin de aceite de soya

____________________________________________________________________________ Fundamento: Pese a ser nuestro pas uno de los primeros exportadores mundiales de soja y derivados, el consumo interno de la harina de soja para alimentacin humana es insignificante. La soja es considerada tradicionalmente como una fuente de aceite para uso humano o industrial y la harina residual rica en protenas se identifica principalmente como fuente de protena para alimentacin animal. A nivel mundial se est poniendo un gran nfasis en el uso de los derivados de soja, no solamente en el uso del aceite, sino tambin en la utilizacin de la harina como fuente de protena de excelente calidad para consumo humano.

Objetivo: Desarrollar el mtodo para extraer aceite a partir de la semilla de soya mediante el empleo de solvente. Definiciones. Nutraceuticas: Alimentos nutracuticos a los alimentos que proveen beneficio para la salud ms all de la nutricin bsica. Miscela: Mezcla homognea. Desodorizacin: Proceso que eliminan de una corriente gaseosa los compuestos que provocan los malos olores. Smbolos y abreviaturas: g Gramo Ml Mililitros h Hora min Minutos mm milmetro C Grados centgrados Reactivos: Hexano Agua destilada Hidrxido de sodio Tierra de diatomeas Arcilla neutra Materiales: Frijol de soya Matraz Erlenmeyer 500 ml Vaso de precipitado 500 ml Probeta 500 ml Papel absorbente Esptula Embudo de separacin 1000 ml Soporte universal Pinzas para soporte Malla de asbesto Matraz esfrico (baln) 100 ml

Cabezal de destilacin Tapon monohoradado Condensador para enfriamiento (refrigerante) Pieza acodada de salida de la destilacin Mechero de bunsen Mangueras Equipos e instrumentos: Balanza granatara Potencimetro Molino Presa de tornillo Termmometro Centrifuga Procedimiento:

1 3 1 1 1 3
OHAUS Hanna Instruments HI 98107

PHYSIS 5301T10110 SIGMA, 3K30

C6H14 H2O NaOH Opcional

2 2 1 2 1 1 2 3 1 1

1. El grano debe estar libre de daos por insectos, hongos, etc. 2. El grano se almacena en condiciones de humedad de 14% o menos, previniendo las reacciones de alteracin. 3. Posteriormente se realiza la operacin de limpieza donde se eliminan cuerpos extraos, previamente al ingreso de la semilla al molino donde la semilla es partido en 6 a 8 trozos y se calienta hasta 65-68C, para pasar luego por la prensa de tornillos donde se obtiene laminas de espesor comprendidos entre los 0,3 y 0,4 mm. Durante el laminado se incrementa entre cuatro y seis veces el rea expuesta y lograr la ruptura de clulas que contienen aceite. 4. El solvente empleado en la extraccin es hexano.

5. La temperatura ptima de extraccin est en el rango de 60 a 65 C. Valores superiores llevaran a una excesiva presurizacin del extractor y posible prdida de solvente. Por el contrario temperaturas inferiores reducen la velocidad de extraccin. 6. La humedad de la materia prima debe estar entre el 9,5 y el 10,5 %, dado que a valores inferiores el material tiene tendencia a romperse. 7. La relacin solvente / semilla es 1:1. La semilla se pone en contacto con el solvente y se extrae el aceite formando una miscela. 8. Esta miscela es posteriormente destilada para separar el aceite y recuperar el solvente. 9. El aceite obtenido por extraccin por solventes, se conoce como aceite crudo. ste contiene una serie de impurezas que no lo hacen apto para su consumo por lo que debe ser sometido a un proceso de refinacin constituida por diversas etapas (desgomado, neutralizacin, decoloracin y Desodorizacin), 10. Desgomado: Es la extraccin acuosa de compuestos hidrosolubles, como protenas, hidratos de carbono, agua y fosftidos, que o todos los aceites se someten al desgomado. Al aceite crudo se le aade 2-3% de agua, se calienta a 50-60C y la fraccin acuosa se separa por centrifugacin; los fosftidos se hidratan, esponjan y precipitan, sobre todo si se incrementan la temperatura, se recuperan y se deshidratan. Al producto resultante se le llama lecitina, aunque en realidad contiene una baja proporcin de esta, su valor depende del fosfaro, elemento que

en promedio equivale a casi 4% de un fosfolpido puro. 11. Neutralizacin: Este tratamiento elimina cidos grasos libres y monocilgliceridos y los fosfolipidos residuales del desgomado. Entre mayor sea la cantidad de cidos grasos libres, menos ser el rendimiento de la refinacin. La neutralizacin es una saponificacin con NaOH al 10-15%, en la cantidad precisa para que solo reaccione con cidos libres, cuya concentracin se determina previamente; un exceso de NaOH, saponificara los triglicridos, con lo que se perdera aceite. La neutralizacin se efecta en forma continua o en sistemas discontinuos; la mezcla aceite/NaOH se calienta a 60-70C para acelerar la reaccin y se produce una pasta jabonosa (soap stock) que se separa por una primera centrifugacin y se emplea en la fabricacin de jabones, en la obtencin de cidos grasos y en la elaboracin de alimento para ganado, despus de neutralizarla con H2SO4. As, el aceite todava contiene algo de jabn que se elimina con un lavado subsiguiente al mezclarlo con agua caliente y someterlo a una segunda centrifugacin. 12. Decoloracin: Sirve para eliminar pigmentos (carotenoides, clorofila y xantofilas), aun que en los pasos anteriores se extraen muchos de ellos. En una adsorcin que utiliza agentes adsorbentes, como tierra de diatomeas, arcillas neutras derivadas de la bentonita, las tierras acidas deben lavarse, ya que confieren acidez al aceite y provocan su hidrlisis y la liberacin de cidos grasos. La mezcla

aceite/adsorbente se calienta a 80de la extraccin de aceite contiene, 90C por 15/20 min para eliminar en promedio un 30 % en peso de humedad y activar el material; solvente y una humedad del 12 %. posteriormente se enva a un filtro En las siguientes etapas del proceso prensa y se obtiene, por un lado, el se debe eliminar el solvente aceite y por el otro, el adsorbente embebido y reducir el contenido de que puede regenerarse. En forma humedad. Para ello se emplea un ideal, este proceso debe efectuarse desolventizador tostador. Este a vacio para evitar la accin del dispositivo es un recipiente cilndrico oxigeno, ya que los lpidos oxidados encamisado que cuenta en su reducen la eficiencia. interior con bandejas 13. Desodorizacin: Hasta este punto, calefaccionadas perforadas. Sobre el aceite todava contiene bajas las bandejas actan paletas que concentraciones de sustancias vuelcan las escamas de harina voltiles provenientes de la desde las bandejas superiores a las oxidacin y responsables de olores inferiores. En las primeras bandejas indeseables, como cetonas o se realiza una inyeccin directa de aldehdos y, en ciertos aceites, vapor sobre el producto, que cidos grasos libres de menos de 12 aumenta su humedad hasta tomos de carbono. El proceso aproximadamente 19 %. Este consiste en calentar el aceite a 230incremento del contenido de agua 260C y hacerle circular una favorece la inactivacin de factores corriente de vapor desairado que antinutricionales. Las bandejas arrastre los compuestos voltiles; reciben tambin calefaccin esto es posible ya que existe una indirecta con vapor. De esta manera gran diferencia entre la volatilidad se llega a temperaturas cercanas a de estos ltimos y de los los 107C que favorecen el secado y triglicridos. El proceso se efecta a tostado de la harina. El tiempo de presin reducida (5 mm Hg) para residencia oscila entre los 10 a 20 evitar el deterioro del aceite, aunque minutos. en ocasiones se aaden antioxidantes o agentes Expresin de resultados: secuestradores, como el acido ctrico para eliminar la accin Rendimiento harina = Peso neto del producto x 100% catalizadora de los metales en%la oxidacin. Peso muestra seca 14. Hibernacin o winterizacion: Este proceso permite eliminar triglicridos saturados de alto punto % Rendimiento aceite = Peso neto soya - Rendimiento harina x 100% de fusin para evitar que el aceite se enturbie Peso aceite extrado al enfriarse. 15. Harinas de extraccin: Como se Referencias dijo anteriormente, las harinas de Badui Dergal Salvador. 2006. Qumica de los extraccin constituyen el principal alimentos. Cuata edicin. Editorial subproducto de la industrializacin Pearson Educacin, Mxico. de oleaginosas. La harina resultante

Lehninger Albert L, et al. 1995. Principios De Bioqumica. Editorial Omega. 1128 pginas The Protein Book - A Guide to Soy Protein for Animal Nutrition. 1990. Divisin Central Qumica de Soya,

Gallardo Miriam. 2005. Soja: Harinas de extraccin para la alimentacin del ganado. Instituto Nacional de Tecnologa Agropecuaria
Florencia V. Grasso, Beatriz G. Maroto y Celso C. Camusso. 2006. Pretratamiento Enzimtico de Expandido de Soja para la Extraccin de Aceite con Solvente. Informacion Tecnologica Vol. 17 N3. Pag. 41-46 Rodrguez Julin, Nicols Jorge, Rodari, Andres, Canepare, Carlos. 2004. Produccin de aceite y harina semidesgrasada de soja de alta calidad mediante el proceso de extrusin-prensado.cINTI-Cereales y Oleaginosas Sede 9 de Julio

Mtodo de extraccin de aceite de palma

____________________________________________________________________________ Fundamento: El aceite de la almendra del fruto la palma corozo (Acrocomia aculeata) es una de las principales materias primas para la elaboracin de aceite y grasas, el cual tiene un nicho de mercado muy definido que son las refineras. Sin embargo en el proceso de refinacin pierde caractersticas como su valor nutritivo, calidad de cidos grasos y se reduce su vida til. Objetivo: Determinar el rendimiento extraccin por prensado en refinacin fsica del aceite almendra del fruto de la palma (Acrocomia aculeata). de la frio y de la corozo

Definiciones. Epicarpio: Es la parte ms externa de la pared del fruto. Mesocarpo: Parte comestible del fruto (pulpa). Endocarpo: No es la semilla, sino ms bien una parte del fruto. Smbolos y abreviaturas: Kg Kilogramo g Gramo ml Mililitros h Hora min Minutos rpm Revolucin por minuto C Grados centgrados p/p Peso / peso Reactivos: Agua destilada Cloruro de potasio 1% Glicerina Materiales: Fruto de palma africana Matraz Erlenmeyer 500 ml Vaso de precipitado 500 ml Probeta 500 ml Papel absorbente Esptula Embudo de separacin 1000 ml Soporte universal Pinzas para soporte Malla de asbesto Matraz esfrico (baln) 100 ml Cabezal de destilacin Tapn mono horadado Condensador para enfriamiento (refrigerante) Pieza acodada de salida de la destilacin Mechero de bunsen H2O KCL C3H8O3 1 Kg 2 2 1 2 1 1 2 3 1 1 1 3 1 1 1

Mangueras Charola de aluminio Martillo Probeta 100 ml Agitador magntico Baln de 2 bocas Cubeta Equipos e instrumentos: Balanza granatara Autoclave Secador solar Liofilizador Molino mecanico Plancha electrica Termmometro Centrifuga Secador en estufa

3 1 1 1 1 1 1

OHAUS ALL AMERICAN Ultra Dry EV04FXDW

MCLBA012332 PHYSIS 5301T10110 SIGMA, 3K-30 Blinde FED 53UL

Soluciones: Cloruro de potasio 1% 500 ml Ingredientes: Agua destilada 500 ml Cloruro de potasio 2g Preparacin: Disolver los 2 g de cloruro de potasio en los 500 ml de agua destilada. Condiciones de almacenamiento La solucin debe ser almacenada en un recipiente limpio y sellado. Procedimiento: 1. El fruto se somete a un secado ambiental por 5 das, a condiciones controladas de temperatura y humedad, 25C y 60% respectivamente.

2.

3.

4. 5.

6.

Realizado el secado se procede a fracturar el epicarpio con la ayuda de un martillo, separando el mismo del resto del fruto. El resto de las partes del fruto conformado por el mesocarpo, endocarpo, y almendra, se somete a una segunda extraccin mecnica, fracturando de esta manera al mesocarpo y facilitando la extraccin manual de la almendra, almacenndolo en un ambiente refrigerado. La almendra se pasa a un molino mecnico del cual se obtiene diferentes tamaos de partculas. Las etapas de proceso de refinacin fsica son las siguientes: desgomado, seguido de un proceso de blanqueado y por ltimo desacidificacin y desodorizado, los cuales se realizan en conjunto. Desgomado: El objetivo del desgomado es eliminar los fosftidos o fosfolipidos de un aceite con una mnima prdida de aceite neutro. El proceso de desgomado se realiza en dos etapas para eliminar los fosftidos hidratables y no hidratables. La primera etapa consiste en lavar con agua al aceite, para eliminar todos aquellos fosfolipidos hidratables como por ejemplo la lecitina. El aceite se calienta hasta alcanzar una temperatura cercana a los 60 C, en ese momento se le adiciona 3% p/p de agua destilada, la cual se calienta previamente hasta una temperatura aproximada de 60 C, antes de adicionarla al aceite. La mezcla se deja con agitacin constante por 30 min a una temperatura entre 60 70 C. Finalizado el tiempo, se deja

7.

enfriar la mezcla, se centrfuga a 3500 rpm por 30 min para separar el aceite de los fosfolipidos hidratables. La segunda etapa consiste en eliminar los fosfolipidos no hidratables, los cuales son sales de calcio y magnesio del cido fosfrico. Estas sales son ms solubles en aceite que en agua y por ende no se hidratan. De prevalecer estas sales, se podran generar problemas en los pasos subsecuentes del refinado, de all la importancia de eliminarlos. El aceite obtenido en la primera etapa es tratado con una solucin de cloruro de potasio al 1% y en una relacin muestra de aceite / cloruro de potasio de 98:2. La mezcla se calienta con agitacin constante a una temperatura entre los 60 70 C, por 15 min. La mezcla se deja enfriar hasta la temperatura ambiente y se centrfuga a 3500 rpm por 30 min para separar el aceite de los fosfolipidos no hidratables. Blanqueado: El objetivo de este proceso es el de descomponer los perxidos, eliminar los compuestos oxidantes y cualquier vestigios de gomas y jabones, y decolorar. El proceso de blanqueo se realiza con el uso de tierras de blanqueo, especficamente Tonsil. El aceite desgomado se calienta hasta una temperatura aproximada de 80 C, en ese momento se le adiciona 3% de la tierra de blanqueo antes mencionada, la cual estuvo 2 h, en la estufa a 80 C para eliminar cualquier vestigio de humedad que pudiera afectar el proceso. La mezcla de aceite y tierra se mantiene con agitacin constante por 15 min a una temperatura entre

8.

80 90 C. La mezcla se deja enfriar a temperatura ambiente, se centrifuga a 3500 rpm por 30 min para separar el aceite de las tierras de blanqueo. Proceso de desacidificacin y desodorizacin: El objetivo de esta etapa es reducir los cidos grasos libres, producir un aceite con poco o ningn sabor y un color tenue. El proceso consiste en someter al aceite a una destilacin por carga al vaco, de manera de eliminar los cidos grasos libres, cetonas y aldehdos, los cuales poseen punto de ebullicin ms bajos que el resto de los triglicridos presentes en el aceite. El aceite desgomado y blanqueado se introduce en una baln de dos bocas, que a su vez se coloca en una cuba que contiene glicerina como medio de calentamiento. La glicerina se calienta hasta una temperatura entre 100 120 C, mediante una plancha elctrica. Una de las bocas del baln que contiene el aceite se le coloca un termmetro, el cual indica la temperatura del mismo. La otra boca del baln es conectada a un condensador y a su vez ste a la manguera de la lnea de vaco. La operacin antes indicada se realiza durante 3,5 h con vaco constante. Finalizado el tiempo, el baln es retirado del bao de glicerina y colocado en otra cuba con agua a temperatura ambiente, de manera de lograr un rpido enfriamiento, todo esto sin desconectar el sistema del vaci, de forma tal de no permitir la entrada de aire.

RP = MAP x 100% PM Donde: RP: Rendimiento del primer prensado MAP: Masa o peso de aceite extrado en la primera prensada. PM: Peso o masa de la muestra de almendra utilizada PR = MAR PM - MAP x 100%

Donde: RR: Rendimiento del reprensado. MAR: Masa o peso de aceite extrado del reprensado de la torta. Referencias
Badui Dergal Salvador. 2006. Qumica de los alimentos. Cuata edicin. Editorial Pearson Educacin, Mxico. Badui Dergal Salvador. 1997. Qumica de los alimentos. Cuata edicin. Editorial Pearson Educacin, Mxico Lehninger Albert L, et al. 1995. Principios De Bioqumica. Editorial Omega. 1128 pginas Hernandez Carlos, Mieres Pitre Alberto. 2002. Rendimiento de la extraccin por prensado en fro y refinacin fsica del aceite de la almendra del fruto de la palma corozo (Acrocomia aculeata). Universidad de Carabobo. Facultad de Ingeniera. Escuela de Ingeniera Qumica Valencia. Venezuela. Pag. 19. AOAC. 1995. Official Methods of Analysis. 16 th Edicin. Ed. AOAC International. Virginia. EE.UU. P n d ARAYA,H; BACIGALUPO, A. 1986. Importancia del aceite de palma africana en la alimentacin Latinoamericana. Ed. FAO. Valledupar. Colombia. 213p. BACIGALUPO, A. 1988. Palma Aceitera. Utilizacin del aceite de palma en la

Expresin de resultados:

alimentacin humana. Ed FAO. Santo Domingo. Ecuador. 170p. Amatller Perez Guther Rodolfo, Dvila Npoles Angela Lucia. 2002. Procesamiento de aceite rojo de palma Africana Elaesis guineensis Jacq, Escuela de agricultura de la region tropical humeda.

Mtodo de extraccin de aceite de canola

____________________________________________________________________________ Fundamento: La extraccin del aceite de canola, se realiza mediante un sistema continuo combinando los mtodos de extraccin por prensado y extraccin con solventes en los cuales se logra la desactivacin enzimtica.La ventaja de consumir aceite de canola es que contiene la menor cantidad de grasa saturada (7% del contenido total) en comparacin con los aceites que se consumen ms comnmente. Objetivo: Extraer aceite a partir de la semilla de canola

Smbolos y abreviaturas: g Gramo ml Mililitros h Hora min Minutos mm milmetro C Grados centgrados Reactivos: Hexano Agua destilada Hidrxido de sodio Tierra de diatomeas Arcilla neutra C6H14 H2O NaOH Opcional

2. Las semillas se calienta a una temperatura de 35C, para facilitar romper las paredes de la clula y desactivar la enzima mirosinasa. 3. Las semillas se secan. Extraccin por prensado 4. Una vez limpias pasan a un molino laminador de rodillos ajustados para romper el mayor numero de paredes celulares de la cascarilla de la semilla sin daar la calidad del aceite y se obtienen hojuelas entre 0.3 y 0.38 mm. 5. Las hojuelas de la semilla de canola cocida pasan por una prensa de tornillo continuo a baja presin (expeller), en el cual se remueve la mayor parte del aceite entre un 60 y 70% contenido en la semilla. Extraccin con solvente 6. Dado que el prensado no puede remover todo el aceite de la semilla de canola y se quiere optimizar la extraccin, por esto se somete a la pasta prensada a una extraccin con solventes para remover el aceite remanente que contienen entre 10 y 14% de aceite. 7. La pasta se deposita en el extractor que se inunda de solvente o miscela. Una serie de bombas roca los miscela encima de la pasta prensada y en cada etapa se usan miscela gradualmente ms delgados que as contienen una proporcin mayor de solvente en relacin con el aceite y al final la

Materiales: Semilla de canola Olla Pala de madera Colador Papel absorbente Esptula Embudo de separacin 500 ml Soporte universal Pinzas para soporte Vaso de precipitado 500 ml Equipos e instrumentos: Balanza granatara Potencimetro Molino Prensa de tornillo Termmetro Centrifuga Plancha elctrica Procedimiento: 1. La semilla se limpian eliminar las impurezas.

1 1 1 2 1 1 2 3 2

OHAUS Hanna Instruments HI 98107

PHYSIS 5301T10110 SIGMA, 3K-30 MCLBA012332

para

pasta contiene menos de 1% de aceite residual. 8. Luego el aceite pasa al tanque clarificador donde se le aplica agitacin constante con el fin de acelerar la separacin de la mezcla. 9. El aceite ya separado de las otras fases es decantado y enviado a un tanque de aceite el cual cuenta con serpentines para mantener la temperatura a 80 C, para luego ser almacenado. 10. La semilla debe ser almacenada con una humedad del 8% a menos de 15 C, para evitar que incrementen los cidos grasos libres y disminuya su calidad. 11. Ver diagrama de bloques del proceso en anexo 8.

PM: Peso o masa de la muestra de almendra utilizada

Referencias
Jachmanin Ivn, Margenat Luca, Torres Ana I., y Grompone Maria A. 2006. Estabilidad oxidativa y contenido de tocoferoles en el aceite de canola extrado con CO2 supercrtico. Grasas y Aceites, 57 (2),155-159, Sierra exportadora. Proceso de extraccin de aceite de canola. Badui Dergal Salvador. 2006. Qumica de los alimentos. Cuata edicin. Editorial Pearson Educacin, Mxico. Lehninger Albert L, et al. 1995. Principios De Bioqumica. Editorial Omega. 1128 pginas Florencia V. Grasso, Beatriz G. Maroto y Celso C. Camusso. 2006. Pretratamiento Enzimtico de Expandido de Soja para la Extraccin de Aceite con Solvente. Informacion Tecnologica Vol. 17 N3. Pag. 41-46

Expresin de resultados: RP = MAP x 100% PM Donde: RP: Rendimiento del primer prensado MAP: Masa o peso de aceite extrado en la primera prensada.

Mtodo de extraccin de grasa de cerdo

____________________________________________________________________________ Fundamento: La obtencin de grasas consiste en conseguir grasas fundidas empleando la fusin por vapor directo en autoclave o fusin discontinua en el que se emplean temperaturas altas y lentitud y solventes, as el producto se ve menos afectado en lo que respecta a su olor, color y contenido de cidos grasos libres as como su capacidad de conservacin. Objetivo:

Oobtencin de grasa de cerdo a partir del tejido adiposo por el mtodo Folch. Smbolos y abreviaturas: g Gramo ml Mililitros h Hora min Minutos rpm Revolucin por minuto C Grados centgrados Reactivos: Cloroformo Metanol Agua destilada Hidrxido de sodio 1 N Acido clorhdrico 3 N Acido sulfrico 1% Hexano CHCl3 CH3OH H2O NaOH HCl H2SO4 C6H14 1 Kg 2 2 1 2 2 1 2 3 1 1 1 3 1 1 1 3

AMERICAN

Horno solar Soluciones: Hidrxido de sodio 0.1 N 500 ml Ingredientes: Agua destilada 500 ml Hidrxido de sodio 2g Preparacin: Disolver los 4 g de hidrxido de sodio en los 500 ml de agua destilada. Condiciones de almacenamiento La solucin debe ser almacenada en un recipiente limpio y sellado. Acido clorhdrico 3 N 500 ml Ingredientes: Agua destilada 500 ml Acido clorhdrico 54 g Preparacin: Disolver los 54 g de acido clorhidrico en los 500 ml de agua destilada. Condiciones de almacenamiento La solucin debe ser almacenada en un recipiente limpio y sellado. Acido sulfrico 1% 500 ml Ingredientes: Agua destilada 500 ml Hidrxido de sodio 2g Preparacin: Disolver los 2 g de acido sulfrico en los 500 ml de agua destilada. Condiciones de almacenamiento La solucin debe ser almacenada en un recipiente limpio y sellado. Procedimiento:

Materiales: Fruto de palma africana Matraz Erlenmeyer 500 ml Vaso de precipitado 500 ml Probeta 500 ml Pipeta 1/10 Vaso de precipitado Embudo de separacin 500 ml Soporte universal Pinzas para soporte Malla de asbesto Matraz esfrico (baln) 100 ml Cabezal de destilacin Tapn monohoradado Condensador para enfriamiento (refrigerante) Pieza acodada de salida de la destilacin Mechero de bunsen Mangueras Equipos e instrumentos: Balanza granatara Autoclave

OHAUS ALL

1.

La muestra se extrae con una solucin de coloroformo:metanol

2.

3.

2:1, la cual, sobre todo en el caso de carne o productos crnicos, se debe tratar para eliminar el agua extrada en un embudo de decantacin para separar la fase orgnica que se recoge, se lava con una solucin salina y a continuacin se evapora para proceder a calcular el contenido total de grasa y con una alcuota determinar los cidos grasos. Una vez extrada la grasa se procede a su saponificacin para liberar los cidos grasos. Esto se consigue con una solucin de una base, generalmente NaOH o KOH, en concentraciones en el intervalo 0,3 a 1 N en metanol. Existen otras tcnicas de formacin de los steres metlicos que se basan en una transesterificacin en medio bsico con metxido sdico, o tambin en aislar los cidos grasos a partir del material saponificado mediante acidificacin y posteriormente derivatizar el residuo recuperado con hexano con soluciones cidas en metanol: 3N HCl en metanol o 1 2 % de H2SO4 (95%) en metanol. Ver diagrama de bloques del proceso en anexo 9.

Referencias
Garca Regueiro J. A., Daz I. 2002. Nuevas tendencias en el anlisis de cidos grasos. Centro de Tecnologa de la Carne. Unidad de Qumica Alimentaria. Granja Camps i Armet. 17121 Monells. En lnea. Internte. http://www.recercat.net/bitstream/207 2/4751/1/NUEVAS+TENDENCIAS+E N+EL+AN%C3%81LISIS+DE+ %C3%81CIDOS+GRASOS.pdf

Extraccin de caroteno
____________________________________________________________________________ solubles en solventes apolares y Fundamento: se deben extraer de tejidos Los carotenoides debido a la alta frescos, eliminando el agua conjugacin de enlaces dobles contenida. presentes en sus molculas se descomponen por efecto de la luz, la Objetivo: Obtencin de -caroteno a temperatura y el aire que son los partir de la raz de tubrculos o frutas. factores que deben estar ausentes al momento de la extraccin. Los Definiciones: carotenoides en su mayora son

Carotenoides: Son tetraterpenoides (terpenoides con 40 tomos de carbono) que derivan biosintticamente del cido mevalnico a travs de dos unidades C20 de geranilgeranilpirofosfato (GGPP). -caroteno: Es una sustancia de origen vegetal que el organismo convierte en vitamina A. Tambin acta como antioxidante y potenciador del sistema inmunolgico. Smbolos y abreviaturas: ml Mililitros Aprox Aproximadamente GGPP geranil-geranilpirofosfato Reactivos: Acetona C3H6O

1. La zanahoria se raya y se coloca en cajas petri para ser secada en el horno a una temperatura de 50C por espacio de dos horas aprox. 2. Extraccin Llenar 2/3 del mortero con la muestra seca y aadir una cucharada de arena humedecida con acetona. Posteriormente se macera la mezcla anterior durante dos minutos. Asimismo se pone el papel filtro en el embudo humedecindolo con acetona. La muestra obtenida se filtra. Evaporar el filtrado y conservar el residuo. El residuo que se obtuvo del filtro es el -caroteno. Ver diagrama de bloques del proceso en anexo 10.

3. 4. 5. 6. 7. 8.

Materiales: Mortero Embudo Papel filtro Vidrio de reloj Plato evaporador Rayador Cuchara Probeta 10 mL Zanahoria Caja petri Arena

Expresin de resultados 1 1 1 2 1 1 1 1 4 2 Lo que se obtiene despus de todo el proceso es pesado en la balanza analtica y as se obtiene los gramos obtenidos de beta caroteno. El mtodo seco da un rendimiento de 67 g de caroteno/1000 kg de zanahorias. En el mtodo hmedo, la extraccin se efecta con tetrahidrofurano y da un rendimiento de 62-72 g de caroteno a partir de 1000 kg de zanahorias con un contenido en caroteno de 90-100 g

Equipos e instrumentos: Secador en estufa Blinde FED 53-UL Procedimiento:

Referencia
Martnez, Martnez Alejandro. Carotenoides. Universidad de Antioquia. Facultad de Qumica Farmacutica. Medelln, Febrero 2003. GOODWIN, T. Analysis of carotenoids pigments. "Chemistry and Biochemistry of plant pigments". N. Y. Academic Press, 1965. Cap. 18. pp. 494-531

Extraccin de clorofila
____________________________________________________________________________ Fundamento: La clorofila es el pigmento que da el color verde a las plantas, algas, algunos otros protistas ya las cianobacterias. Esta molcula se encarga de captar la luz necesaria para realizar la fotosntesis; absorbe sobre todo la luz roja, violeta y azul, y refleja la verde por lo tanto, la gran concentracin de clorofila en las hojas y su presencia ocasional en otros tejidos vegetales, como los tallos, tien de verde estas partes de algunos organismos fotosintticos. Sin embargo, no es el nico pigmento que poseen los seres que realizan la fotosntesis. Tambin existen los llamados pigmentos accesorios que incluyen a la clorofila b (en algas y protistas las clorofilas c,d y e),

Objetivo: Extraccin de clorofila de espinacas. Definiciones: Clorofila: Son un grupo de sustancias en las plantas que se e encuentran en los pigmentos verdes de las hojas en los cloroplastos unidos a los pigmentos amarillos, carotenoides y xantofila. Smbolos y abreviaturas: ml Mililitros g Gramos Reactivos: Acetona Agua destilada Materiales: Espinaca Mortero Matraz de filtracin Matraz aforado 50 mL Probeta 100 mL Vaso precipitado 200 mL Pipeta 5mL Tubos de ensayo Papel filtro Arena

3. Posteriormente la mezcla se filtra. 4. A la pulpa obtenida se le agrega 10 ml de acetona y se vuelve a moler para luego ser filtrada nuevamente. 5. En seguida se afora a 25 ml de acetona y se filtra. 6. El extracto ya clarificado se deposita en tubos de cristal limpios y con tapa rosca. 7. Ver diagrama de bloques del proceso en anexo 11.

C3H6O H2O

Referencia
Martnez, Martnez Alejandro. Carotenoides. Universidad de Antioquia. Facultad de Qumica Farmacutica. Medelln, Febrero 2003. GOODWIN, T. Analysis of carotenoids pigments. "Chemistry and Biochemistry of plant pigments". N. Y. Academic Press, 1965. Cap. 18. pp. 494-531

3 hojas 1 1 1 1 1 1 2 5

Equipos e instrumentos: Blinde FED Secador en estufa

53-UL

Procedimiento: 1. 2. Colocar 1 g, de hojas de espinaca, cortada en trozos pequeos y agregar arena y 1 ml de acetona. Moler la mezcla y en caso que la acetona se evapore agregar 5 ml.

Extraccin de taninos
____________________________________________________________________________ aire, es inodoro y de sabor muy agrio. Fundamento: Es soluble en agua, alcohol y acetona Los taninos son pticamente activos, y casi insoluble en benceno, se distinguen por una reaccin cloroformo, ter y ter de petrleo, es cromtica, generalmente se presentan combustible y se descompone a 210C en tres formas: como polvo amorfo, siendo su punto de inflamacin de brillante y dbilmente amarillo, como 199C y su temperatura de auto escamas brillantes o como una masa ignicin de 528.5C. Es esponjosa. Se oxidan fcilmente moderadamente txico por ingestin e ennegrecindose al contacto con el inhalacin caracterstica, la extraccin

se realiza utilizando el mtodo de extracciones sucesivas con agua y sulfito de sodio al 2%, ya que es el ms eficiente para obtener el mayor porcentaje de rendimiento de taninos. Objetivo: Obtencin de taninos a partir de la corteza de especies forestales. Definiciones: Taninos: Son compuestos polifenlicos amorfos coloidales no cristalizables, de reaccin cida, caracterizados por la acumulacin de hidrxidos alifticos y fenlicos, y en algunos casos por grupos carboxlicos; elaborados en el interior de las plantas principalmente herbceas y leosas, que desempean una funcin bastante heterognea, algunas veces como formadores de diversas sustancias (aceites esenciales, resinas, lignina, etc.), protectores (propiedades fungicidas y bacteriostticas, moderador de las oxidaciones, antifermentos) y sustancias de reserva formado por carbono, hidrgeno y oxgeno. Smbolos y abreviaturas: ml Mililitros g Gramos % Porcentaje Reactivos: Sulfato de sodio 2% Agua destilada Materiales: Corteza de rbol Matraz Erlenmeyer 1000 ml Agitador Na2SO3 H2O

Papel filtro Colador Agitador magntico Vasos de porcelana

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Equipos e instrumentos: Blinde FED 53Secador en estufa

UL

Secador solar Molino de martillo Plancha elctrica

MCLBA012332

Soluciones: Sulfato de sodio 2% 500 ml Ingredientes: Agua destilada 500 ml Sulfato de sodio 4g Preparacin: Disolver los 4 g de sulfato de sodio en los 500 ml de agua destilada. Condiciones de almacenamiento La solucin debe ser almacenada en un recipiente limpio y sellado. Procedimiento: 1. En el secador solar coloca la cortesa hasta que tenga un 25% de humedad, con ello se evita el ataque de microorganismos que pudieran afectar el proceso de extraccin de taninos y poder macerar con facilidad la corteza. 2. Se triturar la corteza seca en un molino de martillos procediendo a su tamizado. 3. La corteza tamizada se le adiciona agua (70C) en una relacin agua/corteza 1:5, se mantiene la temperatura por 45 minutos, con agitacin constante. 4. Se filtra y se guarda la solucin obtenida (fase I).

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El residuo se vuelve a filtrar agregndole igual cantidad de agua (70C) y se mantiene la temperatura por 45 minutos. 6. Se filtra y se guarda la solucin obtenida (fase II). 7. El residuo se filtra y se le agrega la solucin de sulfito de sodio al 2% con la misma relacin 1:5. 8. Se filtra y se guarda la solucin obtenida (fase III). 9. El residuo se filtra y se le agrega la solucin de sulfito de sodio al 2%. 10. Se filtra y se guarda la solucin obtenida (fase IV). 11. El residuo de la corteza se desecha. 12. Las cuatro soluciones obtenidas de las filtraciones sucesivas, sin mezclarse se calientan en un horno a una temperatura no mayor a 70 C, hasta total sequedad. 13. Finalmente se pesan los residuos de los extractos tnicos. 14. Ver diagrama de bloques del proceso en anexo 12. 5.

Saravia Molina Jos Mario, Cano Morales Telma Maricela, Chvez Quiones Blanca Luz, Cano Daz Ericka Johana, Cerezo Quezada Otto Javier. 2002. Digiextraccin y caracterizacin de taninos en corteza de 3 especies forestales cultivadas en guatemala, pino ocote (pinus oocarpa schiede), encino negro (quercus brachystachys benth) y aliso comn (alnus jorulensis hbk.). Una alternativa de desarrollo agroindustrial para el uso de taninos naturales. Facultad de Ingeniera Centro de investigaciones de ingeniera CII Facultad de agronoma Instituto de Investigaciones Agronmicas IIA-Direccin General de Investigacin DIGI. Guatemala.

Referencias