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Sommaire
1. Capteurs / lectrodes mtalliques (EM) 2. Capteurs / lectrodes spcifiques ioniques (ESI) 3. Capteurs / lectrodes spcifiques gaz (ESG) 4. Biocapteurs / lectrodes enzymes ou anticorps immobilis(e)s 5. Conclusions et perspectives
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4. Biocapteurs lectrochimiques
Sommaire 4.1. Dfinition des biocapteurs 4.2. Classements des biocapteurs 4.3. Constituants des biocapteurs : slectivit et sensibilit, tape sensibilit cintiquement limitante 4.4. Originalit des biocapteurs 4.5. Utilisation de biocapteurs en milieux aquatiques : possibilits & limites 4.6. Conclusion et perspectives
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Optique
Optrode, rsonance de plasmon de surface (SPR)
Enthalpimtrique
Micro-calorimtrie
Massique
Quartz pizo-lectriques, ondes acoustiques de surface
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Nutriments
Micro-DBO (micro dans sa dure et non sa taille !)
2. Type de transducteur
Ampromtrique Potentiomtrique
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Adsorption du membrane : facile & peu stable Liaison covalente, rticulation sur membrane : complexe mais stable
Activation de la membrane, activation de l enzyme et raction spontane Contact d enzyme avec une membrane active
Psolution
Composition de la solution analyse modifie, par la raction, sur une paisseur ( fonction de l agitation de la solution)
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Raction du/des substrat(s) S catalyse par l enzyme (Michaelis-Menten) V = Vmax . Smembrane / (Smembrane + KM,S)
avec Vmax activit enzymatique et KM,S (Michaelis) transport de partie du/des produits P vers le transducteur (rponse) et vers l chantillon (inutile)
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Vmax / KM,S >> DS / forte activit immobilise Vmax et/ou barrire diffusionelle externe (DS faible) rponse indpendante de l activit immobilise TB!
Vmax / KM,S << DS / faible activit immobilise et/ou forte agitation ( ) rponse dpendante de l activit immobilise => peu souhaitable pour instrumentation analytique !
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2. Cintiques htrognes
Rgime chimique: cintique enzymatique limitante Rgime diffusionnel: transport du substrat limitant (permet une plus grande stabilit du capteur)
3. Transducteur lectrochimique
EM (H2O2), ESI (pH) ou ESG (Clark, CO2, NH3) Retour au sommaire biocapteur
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Anticorps mono- ou multi-clonal: trs/peu slective Transducteur associ: trs / peu slectif
sans enzyme
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Stabilit au stockage
Diffrent biocapteurs issus d un mme lot (homogne) de production: diverses dures stockage
Dpend de: membrane, enzyme, immobilisation Dure de vie: modes d expression vie
Dure (quelques heures quelques mois)
50 % de dcroissance de la sensibilit : t1/2 soit en fonctionnement soit au stockage
2. Amlioration de la slectivit
Montage diffrentiel Membrane permslective
3. Sensibilit leve
Intgration spatiale du dtecteur et transducteur
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I (nA) T (min) 3 mM
3 mM
3 mM 3 mM
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domaine de linarit
[glucose]max. indicateur de
9 12 15 18 [glucose total]
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Ici diffusion du glucose vers le site ractionnel (membrane GOx) Car [glucose]max > KM,glu
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Injection 12 g Glu
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amin et
mtabolites
Mesure de matire oxydable Mesure dinhibiteurs enzymatiques
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4.5.6.2. Toxicit des pesticides en relation avec leur inhibition de l AChE 4.5.6.3. Dveloppement de biocapteur miniaturis AChE pour leur mesure dans chantillons aqueux ou organiques (G. Turdean, Univ. Cluj, Roumanie)
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Paraoxon :
O C H5 O 2 P - O - C H -NO 6 5 2 C H5 O 2 Type 1: Inhibition AChE par [pesticide] = 0.1-10 M avec [ASCh] = 200 M Moyenne de 4 capteurs 10% inhib. = 0,4 M
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I/I (%) o
60 40 20 0
0,1
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Electrode Pt, Electrode Pt, C Au ou capteur pH, ou capt. pH O2 ou CO2 Membrane Sans Verre, cris- Hydrophobe, Enzyme(s) ou taux, orga- permable aux Ab immobilinique gaz s(s) Rponse : E lg C Istat C Ip C Istat C calibration E lg C E lg C E lg C Rponse : TransiEquilibre Stationnaire, Stationnaire, type toire, staquilibre transitoire tionnaire, quilibre
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Rduc- Ions minteur, oxyraux dant Pt, Au, 2 lectrodes TransducHg, C de rfrence teur
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