Farmacognosia 2.

aula prtica Anlise de Mel __________________________________________________________________________________________________

ANLISE DO MEL

O mel natural um produto aucarado fornecido pela abelha Apis mellifera L., APIDAE. O produto uma soluo aquosa concentrada de acares, geralmente com predominncia de frutose e glucose, e de pequenas quantidades de dextrinas, enzimas, ceras, leos volteis, cidos orgnicos, teres, substncias gomosas, albuminides e minerais. A principal forma de falsificao do mel pela adio de acar comercial, glucose e dextrinas. Alm disso, pode ocorrer no comrcio mel artificial, que constitudo por acar com adio de substncias aromticas e/ou de mel natural. A anlise do mel tem por finalidade descobrir se o produto genuno, artificial ou falsificado.

PRTICA

Tomada de amostra A amostra deve ser tomada de diferentes partes do lote antes de se proceder mistura. Misturar bem cerca de 250 g do mel em anlise e colocar em frasco fechado. Amostra denominadas A , B e C

1. Caracteres Organolpticos Observar e anotar a cor, sabor, odor e consistncia. O mel pode ser branco (provavelmente centrifugado), pardo (provavelmente de conferas) ou com colorao intermediria de amarelo claro a amarelo esverdeado. O sabor, se mais ou menos doce, com ligeira sensao acre, devido presena de pequenas quantidades de cidos frmico e mlico. O aroma, se agradvel, caracterstico de mel normal.

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2. Avaliao Microscpica Colocar 1 gota de mel e 1 gota de soluo de glicerina iodada entre lmina e lamnula; Pesquisar a presena de gros de plen, gros de amido, resduo de rgos de abelha, elementos vegetais, cera e cristais de acar. Desenhar as estruturas observadas

Cristais de acar

Gros de plen

Resduos de abelha

Gros de amido

3. Determinao da densidade por Picnmetro (segundo a Farm. Bras. Il). Dissolver 1 parte de mel em 2 partes de gua destilada; Mtodo do Picinmetro ( 10 ou 25 mL) Densidade, que deve ser igual ou superior a 1,099 a 25 C.

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4. Reaes cromticas Essas reaes tm por finalidade identificar a presena de hidroximetilfurfuraldeido (HMF) encontrado no mel. O HMF usado como um indicador de aquecimento e modificaes decorrentes de armazenamento incorreto do mel. formado pela quebra da frutose em presena de cido e o aquecimento aumenta a velocidade da reao. O HMF ocorre naturalmente no mel (normalmente na faixa de 1 mg/kg) e no uma substncia txica. Apenas indica que, quando detectado em quantidade superior a 80 mg/kg demonstra a presena de adulterao por acar comercial ou aquecimento indevido. O mel, quando estocado 20C, aumenta em cerca de 1 mg/kg/ms a quantidade de HMF.
CHO OH HO OH OH CH2OH frutose HO HO HO HO OH OH CH2OH CHOH OH HO OH OH CH2OH HOH2C HO O CH2OH O HO OH CH2OH

- H 2O

- H2 O
CHO HOH2C O HOH2C O CHO

- H2O
HO HOH2C O CHOH

OH CHO HOH2C O HMF H+ / - 3H2O HO HO frutose O OH OH

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4.1 Reao de Jagerschmidt

Triturar em gral de porcelana cerca de 10 g de mel com 10 ml de acetona; Decantar o solvente e transferir cerca de 2 ml para um tubo de ensaio. Adicionar cuidadosamente 3 ml de HCI conc. Ateno ocorrer uma reao exotrmica (liberao de calor) Leitura 10 minutos O aparecimento de forte colorao violeta indica presena de acar comercial. Se o mel natural, pode surgir uma leve colorao mbar que se torna violcea depois de algum tempo.

4.1 Reao de Fiehe Verifica a presena de acar comercial ou o aquecimento acima de 40% do produto, o que pode eliminar algumas de suas propriedades. Pesar 10 g de mel em um clice de 30 ml Adicionar 10 mL de ter etlico Misturar e homogeneizar com auxilio de um basto de vidro Deixar o em repouso por 5 minutos e transferir 3 ml da camada etrea para um tubo de ensaio Adicionar 5 gotas de soluo clordrica de resorcina a 1%* Leitura aps 5 10 min O aparecimento de colorao vermelha indica a presena de HMF (reao do HMF com a resorcina), possivelmente em quantidade maior que 200 mg/kg. O vermelho cereja indica mel de pssima qualidade e a intensidade do vermelho est relacionada quantidade de HMF presente no mel.

5. Reao de Lund Baseia-se na determinao de substncias albuminides precipitveis na presena de cido tnico. Determina tambm se houve adio de gua ou outro diluidor no mel. A reao indica a pureza da amostra. Dissolver 2 g de mel em 20 ml de gua e transferir para uma proveta graduada de 50 ml; Adicionar 5 ml de soluo de cido tnico a 5% e completar o volume com gua destilada at a marca de 40 ml;

Dissolver 1 g de resorcina em 100 ml de cido clordrico concentrado.

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Agitar com cuidado e aps 24hs ler o volume de precipitado no fundo da proveta.

Se o mel puro, o precipitado oscila entre 0,6 a 3 ml. Em mel artificial ou diludo, no se produz precipitado ou aparece apenas vestgios. Essa pesquisa no tem valor se o mel foi submetido a temperaturas elevadas.

6. Pesquisa de enzimas diastsicas Dissolver 1 g de mel em 20 ml de gua destilada previamente fervida e resfriada a 45 C; Em um tubo de ensaio, previamente lavado com gua fervida, adicionar 10 ml da soluo de mel (no filtrada) e em seguida 1ml de soluo de amido solvel a 1% recm preparada e lmpida; guardar os 10 ml restantes em outro tubo para prova em branco a ser feita no final do experimento; Agitar bem o tubo que contm a mistura com soluo de amido e deixar em banho-maria a 45 C exatamente 1h; Tomar os dois tubos (branco e ensaio) e adicionar em ambos algumas gotas de soluo de lugol e observar a cor que o lquido desenvolve. Se, aps a adio do lugol, a cor do lquido no tubo-ensaio mais escura que a da soluo original do mel, isto , de amarelo a amarelo esverdeado ou pardo, todo o amido foi sacarificado pela presena, no mel, de enzimas diastsicas; se, porm, o lquido torna-se azul, a sacarificao no foi realizada, pela ausncia ou destruio das enzimas diastsicas. Finalmente, se a cor do lquido vai do violeta forte ao violeta pardo, pode indicar uma diminuio do poder diastsico que transforma o amido somente em dextrinas. Isso acontece em mel centrifugado onde ocorrem um certo aquecimento durante o processo e nas misturas de mel natural com mel artificial. Se os resultados so duvidosos, repetir o ensaio.

7. Pesquisa de corantes Pesar 1g de mel e dissolver em 10 ml de gua destilada; Adicionar cerca de 2 ml de soluo de cido sulfrico a 5%.

O mel deve permanecer com a colorao inalterada. Se existem substncias corantes adicionadas ao mel, a cor passa gradualmente de violeta a rosa.

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8. Determinao de acares O mel constitudo por quantidades variveis de sacarose e acares redutores, com predominncia de frutose e glucose.

Presena de dextrinas Dissolver 5 g de mel em 10 ml de gua destilada; Juntar 0,5 ml de uma soluo de cido tnico a 5%; Filtrar por papel de filtro aps clarificao do lquido; Adicionar a uma poro do filtrado (cerca de 5 ml) 2 gotas de HCl conc para cada mililitro do filtrado tomado e dez vezes e seu volume de EtOH absoluto.

Se o lquido turvar a leitoso (pode-se tolerar um ligeiro turvamento) h um indcio de presena de dextrinas e, portanto, glucose comercial. Para confirmar o ensaio, em caso de dvida, pode-se repetir empregando maior quantidade de mel. Pesar 40 g do mel em anlise em um erlenmeyer de 250 ml; Dissolver a tomada de amostra em 50 ml de gua destilada e adicionar em seguida EtOH absoluto at a marca; Deixar em repouso por 2-3 dias; Recolher o precipitado, executar sobre este as reaes especficas para dextrina e determinar o poder rotatrio para a identificao.