26 a 30 de maio de 2008 Joo Pessoa, PB UFPB/ABZ

ATIVIDADE ANTIBACTERIANA DE EXTRATOS DE PLANTAS DO BIOMA CAATINGA Marielly Cavalcante , Natoniel Franklin de Mello , Adriana Mayumi Yano-Mello , Maria da Conceio 1 3 3 Aquino de S , Cristina da Costa Krewer , Mateus Matiuzzi da Costa
1 2

Acadmica do curso de Graduao em Zootecnia da UNIVASF/ Petrolina PE. E-mail: Pesquisador EMBRAPA/CPATSA, PE. 3 Professores do Colegiado de Zootecnia, UNIVASF, Petrolina, PE, mateus.costa@univasf.edu.br

Resumo: Atualmente, as vantagens que justificam a utilizao de fitoterpicos, so: efeito sinrgico, associao de mecanismos por compostos agindo em alvos moleculares diferentes; menores riscos de efeitos colaterais e menores custos de pesquisa. No presente trabalho foram utilizados extratos etanlicos de seis plantas da flora nordestina - Amburana cearensis, Neoglaziovia variegata, Bromelia laciniosa, Encholirium spectabile, Hymenaea courbaril e Selaginella convoluta - para avaliar sua atividade antimicrobiana sobre diferentes microrganismos. Aps diluio dos extratos estes foram diludos em 200 L (1:2) de Caldo Muller-Hinton (MH). Na preparao do inculo, as colnias desenvolvidas em gar Muller-Hinton, foram utilizadas na obteno de uma suspenso bacteriana com turvao equivalente ao tubo 0,5 da escala de Mac Farland. Desta suspenso, foram inoculados 10 L (1x 104 UFC) de cada microrganismo. Retirou-se uma alquota de 10 l, semeando-se na superfcie de gar MH e incubando por 48h a 37C. Na seqncia, foi determinada a concentrao bactericida mnima (CBM). Os ensaios foram realizados em triplicata. A atividade antimicrobiana dos extratos etanlicos foram observadas para todos os patgenos avaliados, exceto para Proteus spp. Demonstrou-se a atividade antibacteriana de extratos etanlicos de plantas do bioma caatinga, contra patgenos de interesse veterinrio, especialmente Corynebacterium spp., Staphylococcus intermedius, Vibrio spp. e Aermonas spp. Palavras-chave: atividade antibacteriana, veterinria, caatinga, plantas. Antibacterial activity of ethanolic extract of caatinga bioma plants

Abstract: Actually the advantages of phitotherapy are synergic effect, association of different compounds, fewer risks to host health and low coast to research. In the present work ethanoholic extracts of six plants of northeast flora - Amburana cearensis, Neoglaziovia variegata, Bromelia laciniosa, Encholirium spectabile, Hymenaea courbaril and Selaginella convoluta to evaluated its antimicrobial activity to several microrganisms. After, the extracts were diluted in Muller-Hinton (MH) broth 200 L (1:2). In the inocullum preparation we used bacterial colonies on Muller-Hinton Agar, to achieve a bacterial suspension in 0,5 Mac Farland scale. From this suspension we inoculated 10 L 4 (1x 10 UFC) of microorganism suspension. The material was incubate at 37C for 24hours, under aerobic conditions. Na aliquot of 10 l, was streaked on MH agar and incubated for 48hours at 37C. The Minimmun bactericidal concentration (MBC) was determined. The assays were performed in triplicate. Antimicrobial activity of ethanolic extracts were observed to all pathogens with exception of Proteus spp. we demonstrated bactericidal activity of ethanolic extracts of caatinga bioma plants to veterinary pathogens, specially Corynebacterium spp., Staphylococcus intermedius, Vibrio spp. and Aermonas spp. Keywords: antibacterial activity, veterinary, caatinga and plants.

Introduo O histrico da descoberta e utilizao de frmacos originrios de plantas data de vrios sculos, j sendo descrito por Shen-Nung (2838-2698 a.C.) (LIMA, 1994). Estudos envolvendo produtos fitoterpicos para o controle de enfermidades nos animais de produo ainda so escassos.

26 a 30 de maio de 2008 Joo Pessoa, PB UFPB/ABZ

Muitas plantas so tradicionalmente conhecidas como possuidoras de atividade anti-helmntica, necessitando, entretanto, que seja comprovada cientificamente, sua eficcia (VIEIRA, 2007). A busca por tratamentos a base de fitoterpicos intensificou-se nas ltimas dcadas. O Brasil apresenta uma extensa e diversificada flora, sendo grande o nmero de pesquisadores que tm contribudo para o desenvolvimento da qumica de produtos naturais de plantas. No entanto, nosso pas no tem uma atuao destacada no mercado mundial de fitoterpicos, ficando atrs de pases menos desenvolvidos tecnologicamente (YUNIS et al., 2001). Alguns trabalhos vm demonstrando a atividade antimicrobiana de extratos etanlicos de plantas da flora nordestina bioma caatinga (KON et al., 2004; MAIGA et al, 2005). Atualmente, as vantagens que justificam a utilizao dos fitoterpicos, so: o efeito sinrgico, ou seja, as plantas apresentam vrios compostos com efeitos similares; associao de mecanismos por compostos agindo em alvos moleculares diferentes; menores riscos de efeitos colaterais, uma vez que os compostos ativos se apresentam em concentraes reduzidas nas plantas; e, menores custos de pesquisa (YUNIS et al., 2001). relevante o estudo do potencial do extrato etanlico de plantas da flora nordestina para que a produo de fitoterpicos possa ser considerada numa etapa posterior. Este estudo serve ainda como ponto de partida para a obteno de compostos sintticos ou biossintticos. Material e Mtodos O projeto foi desenvolvido no laboratrio de microbiologia da Universidade Federal do Vale do So Francisco. A atividade antibacteriana de extratos de plantas do bioma caatinga foi determinada por meio do ensaio de microdiluio. Foram utilizados os extratos etanlicos de seis plantas da flora nordestina: Amburana cearensis, Matricaria recututa, Neoglaziovia variegata, Bromelia laciniosa, Encholirium spectabile, Hymenaea courbaril e Selaginella convoluta. No teste, A determinao da atividade antimicrobiana in vitro dos extratos da caatinga foi realizada de acordo com as descries de Santurio et al. (2007). Aps diluio dos extratos a concentrao de 25mg/ml estes foram diludos em 200 L (1:2) de Caldo Muller-Hinton (MH). A atividade antibacteriana foi avaliada frente os seguintes patgenos de interesse veterinrio: Escherichia coli, Enterococcus faecelis, Klebsiella pneumoniae, Salmonella enterica, Stapylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Rhodococcus equi, Listeria monocytogenes, Corynebacterium spp., Aeromonas spp., Proteus spp, Yersinia. enterecolitica, Styaphylococcus epidermidis, Staphylococcus intermedius, Streptococcus agalacteae, Streptococcus suis, Nocardia spp. e Vibrio spp. Na preparao do inculo, com colnias desenvolvidas em gar Muller-Hinton, foram utilizadas para obteno de uma suspenso bacteriana com turvao equivalente ao tubo 0,5 da escala de Mac Farland. Desta suspenso, foi inoculado 10 L (1x 104 UFC) em cada microtubo contendo a diluio do extrato de etanlico. Retirou-se uma alquota de 10 l de cada microtubo, semeando-se na superfcie de gar MH e incubando por 48h a 37C. Na seqncia, foi determinada a concentrao bactericida mnima (CBM) como a menor concentrao do extrato etanlico em estudo capaz de causar a morte do inculo. Os ensaios foram realizados em triplicata. Resultados e Discusso A atividade antibacteriana do extrato etanlico de plantas do bioma caatinga sobre microrganismos de importncia para a sanidade animal so apresentados nas tabelas 1 e 2. Com relao aos extratos de Caro a maior atividade antibacteriana mdia foi obtida para Aeromonas spp. (62,5 g/ml), seguido de Staphylococcus intermedius (125 g/ml). Para o extrato de umburana a maior atividade antibacteriana mdia foi observada para Staphylococcus intermedius (125 g/ml) e Vibrio spp. (125 g/ml). Para Macambira de flecha, menores CBM foram observadas para Aeromonas spp. e Corynebacterium spp. (166,7 g/ml). O resultado obtido para Proteus spp. no foi considerado, uma vez que atividade antibacteriana foi observada quando do teste controle realizado somente com etanol (dado no demonstrado).

26 a 30 de maio de 2008 Joo Pessoa, PB UFPB/ABZ

Tabela 1. Valores da Concentrao bactericida mnima de extratos etanlicos de Caro, Umburana e Macambira de Flecha, plantas da caatinga sobre patgenos de interesse veterinrio. Microrganismo
CAROA CBM ( g/ml) INTERVALO Escherichia coli Enterococcus faecalis Klebsiella spp. Salmonella spp. Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Rhodococcus equi Listeria spp. Corynebacterium spp. Aeromonas spp. Proteus spp. Yersinia enterocolitica Staphylococcus epidermidis Staphylococcus intermedius Streptococcus agalactiae Streptococcus suis Nocardia spp. Vibrio spp. NC: No considerado 187,5-375 0-375 187,5-750 187,5-750 187,5-750 375-750 0-375 375-750 375-750 0-187,5 0-750 187,5-375 187,5-375 93,75-187,5 0-1500 375-750 375-375 93,75-93,75 MDIA 250 250 437,5 437,5 437,5 500 187,5 500 500 62,5 500 250 312,5 125 750 500 375 93,75 EXTRATOS UMBURANA CBM ( g/ml) INTERVALO 500-1000 0-1000 250-500 250-1000 500-2000 500-1000 0-1000 500-500 125-250 0-250 0-2000 250-500 500-500 125-125 1000-1000 250-500 500-500 125-125 MDIA 666,66 500 333,33 583,33 583,33 666,66 500 500 166,66 83,33 750 416,66 500 125 1000 333,33 500 125 MAC. FLECHA CBM ( g/ml) INTERVALO 0-500 0-2000 0-500 500-1000 250-1000 0-1000 0-1000 500-1000 125-250 0-500 NC 250-500 250-1000 250-500 0-2000 500-500 500-1000 125-250 MDIA 208,33 1000 250 666,66 583,33 666,66 500 833,33 166,66 166,66 NC 416,66 583,33 333,33 1333,33 500 666,66 208,33

Para os extratos de Macambira de Porco as maiores atividades antibacterianas foram observadas para Corynebacterium spp. (208,3 g/ml ) e Vibrio spp. (291,7 g/ml). Pela mesma razo descrita anteriormente os resultados de Proteus spp. no foram considerados. O extrato etanlico de Jeric tambm apresentou menor CBM para Corynebacterium spp. (208,3 g/ml) e Vibrio spp. (286,45 g/ml). A maior atividade antibacteriana do Jatob foi observada para Aeromonas spp. (104,16 g/ml) e Staphylococcus intermedius (104, 16 g/ml).

26 a 30 de maio de 2008 Joo Pessoa, PB UFPB/ABZ

Tabela 2. Valores da Concentrao bactericida mnima de extratos etanlicos de Macambira de porco, Jeric e Jatob, plantas da caatinga sobre patgenos de interesse veterinrio.

Microrganismo
MAC.PORCO CBM INTERVALO Escherichia coli Enterococcus faecalis Klebsiella spp. Salmonella spp. Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Rhodococcus equi Listeria spp. Corynebacterium spp. Aeromonas spp. Proteus spp. Yersinia enterocolitica Staphylococcus epidermidis Staphylococcus intermedius Streptococcus agalactiae Streptococcus suis Nocardia spp. Vibrio spp. NC: No considerado 0-1000 0-1000 0-1000 500-2000 250-1000 0-1000 0-1000 500-1000 125-250 0-2000 NC 250-1000 250-500 250-250 1000-1000 250-500 500-2000 125-500 MDIA 500 500 500 1000 583,33 500 500 666,66 208,33 666,66 NC 583,33 416,66 250 1000 333,33 1166,66 291,66

EXTRATOS JERIC CBM INTERVALO 312,5-625 0-2500 1250-1250 312,5-625 312,5-2500 0-625 0-625 625-1250 156,25312,5 0-1250 312,5-2500 156,25-625 1250-2500 312,5-312,5 1250-1250 312,5-625 625-1250 78,12-625 MDIA 729,16 1250 1250 520,83 1354,16 416,66 416,66 833,33 208,33 416,66 1354,16 468,75 1666,66 312,5 1250 416,66 833,33 286,45 JATOB CBM INTERVALO 312,5-625 312,5-1250 156,25-1250 312,5-1250 312,5-625 625-625 0-1250 625-2500 156,25312,5 0-312,5 0-2500 312,5-312,5 0-312,5 312,5-3125 625-2500 625-625 312,5-625 78,12-625 MDIA 520,83 937,5 677,08 729,16 520,83 625 520,83 1458,33 260,41 104,16 937,5 312,5 104,16 312,5 1458,33 625 520,83 338,54

As atividades bactericidas dos extratos etanlicos de plantas da caatinga mostram uma grande sensibilidade tanto de patgenos gram positivos como Corynebacterium spp. e Staphylococcus intermedius, bem como patgenos gram negativos, como Aeromonas spp. e Vibrio spp. Estudos envolvendo a atividade antimicrobiana de extratos de plantas do bioma caatinga so necessrios e importantes, pois possuem grandes vantagens em relao aos antimicrobianos, como pouca ou nenhuma resistncia, ausncia de resduos e acessibilidade aos pequenos produtores rurais.

26 a 30 de maio de 2008 Joo Pessoa, PB UFPB/ABZ

Concluses Nosso estudo demonstrou a atividade antibacteriana de extratos etanlicos de plantas do bioma caatinga, contra patgenos de interesse veterinrio, especialmente Corynebacterium spp., Staphylococcus intermedius, Vibrio spp. e Aermonas spp.

Literatura citada KON, W.M.; ATINDEHOU, K.K.; TEREAUX, C.; HOSTETTMANN, K.; TRAOR, D.; DOSSO, M. Traditional medicine in North Cote dIvore: screening of 50 medicinal plants for antibacterial activity. J. Ethnopharmacol, v.93, p.43-49, 2004. LIMA, D.R. Medicamentos: passado, presente e futuro. In: LIMA, D.R. (ed.). Manual de farmacologia clnica, teraputica e toxicologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1994, p.13. MAIGA, A.; DIALLO, D.; FANE, S.; SANOGO, R.; PAULSEN, B.S.; CISSE, B. A survey of toxic plants on the market in the district of Bamako, Mali: traditional knowledge compared with a literature search of modern pharmacology and toxicology. J. Ethnopharmacol, v.96, p.183-193, 2005 . SANTURIO, J.M.; SANTURIO, D.F.; POZZATTI, P.; MORAES, C.; FRANCHIN, P.R.; ALVES, S.H. Atividade antibacteriana dos leos essenciais de organo, tomilho, e canela frente a sorovares de Salmonella enterica de origem avcola. Cincia Rural, v.37, n.3, p.803-808, 2007. VIEIRA, L.S. Fitoterpicos no controle de endoparasitos de caprinos e ovinos. Rev. Brs. Hig. San. Anim. v. 01. n. 02, p. 48 54, 2007. YUNES, R.A.; PEDROSA, R.C.; FILHO, V.C. Frmacos e fitoterpicos: a necessidade do desenvolvimento da indstria de fitoterpicos e fitofrmacos no Brasil. Qumica Nova, v.24, n.1, p.147-152, 2001.