FISIOLOGIA BACTERIANA

Mgs. T.M. Maria Ester Aliaga Doc. Microbiologa

FISIOLOGIA BACTERIANA
o

El estudio de las funciones realizadas por los microorganismos. La funcin fundamental de todo ser vivo es crecer, esto es : aumentar en forma ordenada el numero y la masa de todos sus componentes celulares y que estn compuestas fundamentalmente por macromolculas de: protenas, polisacridos, lpidos y ac. nucleicos

FISIOLOGIA BACTERIANA
Biosntesis proteica: Es una de las funciones ms importantes, ya que se sintetizan fundamentalmente dos clases de protenas: Estructurales Funcionales (enzimas) Corresponden a protenas especializadas que catalizan las reacciones qumicas del metabolismo bacteriano

FISIOLOGIA BACTERIANA
Las bacterias: Sintetizan en forma rpida todos sus componentes celulares La mayora son autosuficientes, por presencia de genoma con la informacin necesaria para realizar los procesos de: duplicacin del ADN, Transcripcin a ARN m Traduccin a protenas

FISIOLOGIA BACTERIANA

La bacteria incorpora sustancias necesarias para vivir, una vez en el interior del citoplasma se producen una serie de reacciones que en su conjunto se define como metabolismo bacteriano La bacteria adems es capaz de reproducirse, transmitiendo su material gentico a la progenie

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
AGUA: Ms del 80% de la composicin celular bacteriana es agua. Es el solvente universal, cumple una funcin tampn y acta como coenzima de enzimas hidrolasas.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Fuente de Carbono: Todos los compuestos orgnicos poseen carbono. Las fuentes ms simples de carbono son el: CO2 y el CH4.

Fuentes ms complejas son: aminocidos, hidratos de carbono y lpidos

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
De acuerdo a la fuente de carbono utilizada las bacterias se clasifican en:

Auttrofas (littrofas): Utilizan como fuente de carbono sustancias simples : CO2 y CH4 Hetertrofas(organtrofas): Requieren de macromolculas orgnicas ms complejas Ej.: Hidratos de carbono.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
NITROGENO: o Componente principal de protenas y ac. Nucleicos AZUFRE: Es utilizado por la bacteria para sintetizar aminocidos azufrados tales como la cisteina y metionina. Tambin forma parte de vitaminas como la biotina y tiamina.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Dadores y receptores de H2 Las bacterias patgenas para la especie humana, realizan su metabolismo en base a reacciones qumicas, obteniendo energa fundamentalmente por oxido-reduccin. De modo que requieren de sustratos oxidables y aceptores finales de electrones

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Iones inorgnicos: Fsforo Potasio Magnesio

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Oligoelementos: Fierro Cobre Molibdeno Zinc

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Factores de crecimiento: Son aquellas sustancias indispensables, pero, que la bacteria es incapaz de sintetizar: Bases nitrogenadas Aminocidos Colesterol Vitaminas

Transporte de nutrientes
1.- Transporte pasivo. No consume energa, ya que es un proceso de difusin en el que las molculas pasan de un lado al otro de la membrana a favor de un gradiente de concentracin o un gradiente elctrico (cargas inicas). Dentro del transporte pasivo se diferencian:

Transporte de nutrientes

Difusin simple. Las molculas pasan a travs de la bicapa lipdica de la membrana, sin que intervengan las protenas. As se difunden el O2, el CO2, el H2O, la urea, etc.

Transporte de nutrientes
Difusin facilitada. El transporte se lleva cabo gracias a la intervencin de Unas protenas transportadoras, que pueden ser de dos tipos: Protenas de canal, que son pequeos poros que permiten el paso fundamentalmente de iones inorgnicos (Na+, K+, Cl-, Ca2+), por lo que tambin se denominan canales inicos, y se abren o se cierran en respuesta a estmulos elctricos o a molculas transmisoras. Protenas transportadoras (permeasas) que permiten el paso de solutos orgnicos mediante un cambio en la forma de la molcula transportadora.

Transporte de nutrientes

2.- ACTIVO: Existe un gasto de energa Requiere de un sistema enzimtico, para introducirlo contra una gradiente de concentracin. La sustancia que se transporta se combina en el exterior con un transportador unido a la membrana que posteriormente la libera en el interior de la clula, sin que sufra ningn tipo de modificacin qumica

Es el proceso en el que se modifica qumicamente al compuesto que se transporta a travs de la membrana. Los ejemplos mejor conocidos de este tipo de transporte incluyen a la glucosa, manosa, fructosa, Nacetilglucosamina, y -glucsidos; que son fosforilados durante el transporte, mediante un sistema de fosfotransferasas.
Ac. Fosfoenol piruvico

3.-Translocacin de grupos:

Transporte de nutrientes

NUTRICION
La nutricin, tiene por objeto el aporte de sustancias necesarias para el proceso de biosntesis. Este proceso requiere de energa la cul se obtiene de dos fuentes: Solar Bacterias fotosintticas Qumica Bacterias quimiosintticas

FUENTES DE ENERGIA LUZ FOTOTROFIA COMPUESTOS QUMICOS QUIMIOTROFIA

COMPUESTOS REDUCIDOS COMPUESTOS OXIDADOS

FOTOTROFOS

QUIMIOORGANOTROFOS

ATP

QUIMIOLITOTROFOS

Microorganismos de importancia mdica

CLASIFICACION DE LOS ORGANISMOS

(SEGN FUENTE DE OBTENCION DE CARBONO Y ENERGIA) Fuente de Energa Luz Qumica CO2 Comp Orgnicos Luz Luz Qumica Qumica CO2 Comp Orgnicos CO2 Comp Orgnicos Fuente de C Organismos Fototrofos Quimiotrofos Autotrofos Heterotrofos Fotoautotrofos Fotoheterotrofos Quimioautotrofos Quimioheterotrofos

Condiciones fsico - qumicas

Condiciones que proporciona el medio que influyen en el crecimiento bacteriano: Temperatura Presin osmtica pH

Temperatura

Temperatura de crecimiento Celsius

Bacterium Listeria monocytogenes Thiobacillus novellus Escherichia coli Pseudomonas maltophilia Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes Bacillus flavothermus Thermus aquaticus

Minimo 1 4 5 10 10 20 25 30 40 60 70 80

Optimo 30-37 35 25-30 30-37 37 37 37 60 85 70-72 75-85

Maximo 45 41 42 45 45 40 42 72 79 90 90

Streptococcus pneumoniae

Methanococcus jannaschii Sulfolobus acidocaldarius Pyrobacterium brockii

102-105 115

pH:

Acidfilas Neutrfilas Basfilas

Minimo pH 4.0-4.6 4.2 4.4 5.6 6.5

1- 5,5 5,5 - 8 8,5- 11,5

Optimo pH 5.8-6.6 7.0-7.5 6.0-7.0 6.0-7.6 6.6-7.0 7.8 Maximo pH 6.8 9.3 9.0 8.0 8.3 8.5-9.0

Organismo Lactobacillus acidophilus Staphylococcus aureus Escherichia coli

Clostridium sporogenes Pseudomonas aeruginosa Streptococcus pneumoniae

5.0-5.8

Presin osmtica (salinidad)

Halfitas Halfitas leves Halfitas moderadas Halfitas extremas

< 1% NaCl 1-6 % (S aureus) 6-15 % 16-30 % (arqueas)

METABOLISMO BACTERIANO
El metabolismo Es el conjunto de reacciones y procesos fsico-qumicos que ocurren en una clula, son la base de la vida a nivel molecular, y permiten las diversas actividades de las clulas: crecer, reproducirse, mantener sus estructuras, responder a estmulos, etc.

METABOLISMO BACTERIANO

Endoenzimas: Comandan y regulan todas las reacciones de sntesis y degradacin: Oxidasas, reductasas, Transaminasas Exoenzimas: Degradan macromolcula: Hidrolasas

Sntesis de enzimas: Constitutivas: Sntesis independiente del medio externo, se sintetizan siempre Ej. Enzimas que degradan la glucosa.

Inducidas: Sntesis depende de la presencia de o ausencia del sustrato en el medio Ej.: -galactiosidasa solo se sintesiza cuando existe lactosa en el medio.

METABOLISMO BACTERIANO

Las sustancias capaces de acelerar una reaccin qumica se denominan catalizadores En las clulas vivas los catalizadores biolgicos son las enzimas Cada enzima acta sobre un sustrato especfico y cataliza exclusivamente una reaccin La funcin crucial e las enzimas consiste en acelerar las reacciones bioqumicas a una temperatura compatible con el funcionamiento normal de la clula

METABOLISMO BACTERIANO
Clase de enzima Oxidorreductasa Transferasas Tipo de reaccin qumica que cataliza Ox red con ganancia o perdida de oxigeno e hidrgeno Transferencias de grupos funcionales como grupos: aminos, acetilo o fosfatos Hidrlisis agregando agua Ejemplo Citocromo oxidasa Lactato deshidrogenasa

Acetato cinasa Alanina desaminasa Lipasa, sacarasas etc Glucosafosfatoisomerasa

Hidrolasas Isomerasas Ligasas

Reordenamiento de los tomos en el interior de la molcula

Unin de dos molculas Acetil CoA sintetasa, DNA ligasa

Regulacin metablica
La sntesis proteica esta regulada a travs del sistema de operones, que es un grupo de genes estructurales cuya expresin esta regulada por elementos de control o genes (promotor operador ) y genes reguladores los cuales corresponden a unidades regulatorias gnicas

un gen regulador: controla el tiempo y velocidad de trascripcin de otros genes Codifica para una protena que se pega al operador, obstruyendo el promotor

un operador: controla el acceso de la ARN polimerasa al promotor

Un promotor: donde la ARN polimerasa reconoce el sitio de inicio de la transcripcin

un gen estructural: codifican las enzimas relacionadas o las protenas estructurales

METABOLISMO BACTERIANO

El metabolismo se puede dividir en dos clases de reacciones qumicas: las que liberan energa y las que consumen energa

Reacciones de degradacin CATABOLICAS Proceso de degradacin de los sustratos orgnicos (H de C, lpidos y proteinas) y de su conversin en energa utilizable ATP Reacciones de sntesis ANABOLICAS La energa obtenida del catabolismo es empleada en la sntesis de componentes celulares (pared celular, protenas, ac. Grasos, y ac. Nucleico

METABOLISMO BACTERIANO
ANABOLISMO
PEPTIDOGLICANO POLISACARIDOS

Piruvato

PROTEINAS

ACIDOS NUCLEICOS

LIPIDOS

METABOLISMO BACTERIANO
CATABOLISMO Fuentes de energa
ATP

ANABOLISMO macromolculas

ADP Productos metablicos

pool precursores intracelulares

Nutrientes externos

METABOLISMO BACTERIANO

La energa se requiere continuamente para: Catabolismo Anabolismo (Biosntesis). Transporte Activo. Traslocacin de protenas a travs de la membrana citoplasmtica. Movimiento flagelar.

METABOLISMO BACTERIANO
En las bacterias de inters mdico los sistemas de oxido-reduccin que transforman la energa qumica de los nutrientes en una forma biolgicamente til, incluyen : La fermentacin La respiracin.

METABOLISMO BACTERIANO

En la fermentacin tanto la molcula dadora como la aceptora de electrones, son compuestos orgnicos, En la respiracin hay un aceptor final exgeno, que cuando es el oxgeno hablamos de respiracin aerobia, y cuando es un compuesto inorgnico hablamos de respiracin anaerobia

METABOLISMO BACTERIANO

En las bacterias el aceptor final de electrones puede ser: O2, nitratos, sulfatos, o sustancias orgnicas. Esta capacidad de aceptor final de electrones permite clasificar las bacteria en tres grupos:

METABOLISMO BACTERIANO

Aerobio estricto Anaerobio estricto Aerobio facultativo

Receptor final es el O2.

Ej: Mycobacterium tuberculosis

Receptor final es SO4 o NO3.

Ej: Clostridium perfringens)

respiracin aerbica anaerbica fermentacin (Mayora de bacterias

patgenas para le especie humana)

BACTERIAS HETEROTROFAS
RUTAS CATABOLICAS QUE PRODUCEN ENERGIA
FOSFORILACION A NIVEL DE SUSTRATO

* fermentacin

oxidacin parcial molec orgnica

ATP
FOSFORILACION OXIDATIVA
fuerza motriz de protones

* respiracin

FERMENTACION
(Ausencia de oxigeno)

Va Embden Meyerhoff

glucosa -6-P

piruvato

c lctico etanol mixta butanolacetona

butanediol c propionico

FOSFORILACION A NIVEL SUSTRATO

Fase preparatoria

Fase Conservacin de energa

ATP

ATP

Fosforilacin oxidativa

Ciclo de Krebs

Regulacin metablica

En un medio optimo, la clula regula sus vas metablicas tan eficientemente que ningn intermediario es sintetizado en exceso Si existe una fuente de carbn en exceso, se pone en juego toda la maquinaria enzimtico para utilizarla Si un aminocido esta en exceso, se reprime su biosntesis.

Regulacin metablica
La regulacin enzimtica se realiza fundamentalmente en dos niveles: Actividad enzimtica: enzimas alostricas, fosforilacin Sntesis enzimtica : regulacin de la expresin gnica, operones

Multiplicacin Bacteriana
Como resultado del metabolismo bacteriano, el microorganismo crece y se multiplica. La multiplicacin implica el aumento del nmero, pero no del tamao bacteriano. Estas, se reproducen normalmente por fisin binaria.

Divisin Celular
El primer paso es la duplicacin del ADN. Posteriormente, la membrana citoplasmtica y la pared celular se invaginan, separando en dos regiones el ADN cromosmico. Finalmente, las paredes en crecimiento se unen formando dos clulas individuales, cada una de las cuales es esencialmente idntica a la clula parental.

TIEMPO DE GENERACION (G)

Es el intervalo de tiempo que transcurre en que una clula se divide y da origen a la formacin de dos clulas. Ej. Escherichia coli el G = 20 min. Se dice que las bacterias crecen en forma exponencial o logartmica: 1 generacin 2 generaciones 3 generaciones 4 generaciones 5 generaciones 6 generaciones n generaciones 2 clulas 4 clulas 8 clulas 16 clulas 32 clulas 64 clulas 2n

CURVA DE CRECIMIENTO
oSe observa el crecimiento de una bacteria en un medio lquido (Bach), al que no se agregan ni se quitan sustancias, oEst representado por una serie de fases o etapas o El perodo de tiempo que dura cada fase depender de las caractersticas de las bacterias y medio de cultivo.

CURVA DE CRECIMIENTO

Latencia : La fase de latencia dura aproximadamente 4 hrs. No hay crecimiento visible y de hecho puede haber una reduccin en el nmero de bacterias. Es un perodo de adaptacin, en que las bacterias tienen una gran actividad metablica, pero no se dividen

CURVA DE CRECIMIENTO

Logartmica : Despus de 6 hrs., aproximadamente, de haber sembrado las bacterias en un medio ptimo, las bacterias comienzan a dividirse en forma constante y mxima. El nmero de bacterias aumenta en progresin geomtrica y la resultante es una lnea recta ascendente. Este perodo termina ms o menosa las 12 hrs, debido a la disminucin de los nutrientes disponibles

CURVA DE CRECIMIENTO

Estacionaria : Debido a la acumulacin de desechos metablicos y disminucin de los nutrientes, la actividad metablica decae. Las bacterias se dividen con menor frecuencia y el nmero total de bacterias vivas permanece constante, puesto que el nmero de muertes se equilibra con el de multiplicacin. En la mayora de las bacterias esta fase se produce entre las 18 a 24 hrs.

CURVA DE CRECIMIENTO

Regresin : En esta fase, conocida tambin como fase de muerte, las bacterias dejan de multiplicarse y mueren con el tiempo, debido al trmino de nutrientes, acumulacin de material de desecho y disminucin del espacio fsico. No todas las bacterias del cultivo se encuentran en esta fase al mismo tiempo, por lo tanto se representa como una pendiente, que no llega a 0 Esta curva slo se produce en condiciones de laboratorio.

Factores que afectan el crecimiento bacteriano Temperatura

pH Agua

Concentracin de sales Oxgeno

MEDICION CRECIMIENTO BACTERIANO

1. Conteo del nmero de clulas (microscopio). 2. Por la turbidez del cultivo en medio lquido. 3. Medicin del peso seco de la masa celular. 4. Medicin de la concentracin de nitrgeno. 5. Recuento en placa de bacterias viables. 6. Filtracin por membrana 7. Mtodo de los tubos mltiples.

Medicin del Crecimiento (Cmara de Neubauer)

Medicin del Crecimiento (Tubos Mltiples)

Medicin del crecimiento

Espectrofotmetro en medida del crecimiento

GRACIAS

GRACIAS

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