La transgnesis se puede definir como la introduccin de ADN extrao en un genoma, de modo que se mantenga estable de forma hereditaria y afecte

a todas las clulas en los organismos multicelulares. Generalmente, en animales, el ADN extrao, llamado transgen, se introduce en zigotos, y los embriones que hayan integrado el ADN extrao en su genoma, previamente a la primera divisin , producirn un organismo transgnico; de modo que el transgn pasar a las siguientes generaciones a travs de la linea germinal (gametos). Entre las aplicaciones de los animales transgnicos se pueden destacar:

La posibilidad de estudiar a nivel molecular el desarrollo embrionario y su regulacin. Manipular de forma especfica la expresin gnica in vivo. Estudiar la funcin de genes especficos. Poder utilizar a mamferos como biorreactores para la produccin de proteinas humanas. La correccin de errores innatos de metabolismo mediante terapia gnica.

La transgnesis puede efectuarse siguiendo dos estrategias distintas: 1. Transgnesis por microinyeccin de zigotos Desde que en 1982 se obtuviera un ratn transgnico, la produccin de animales transgnicas es cada vez ms cotidiana, existiendo ya animales transgnicos de las siguientes especies: ratn, rata, conejo, cerdo, vaca, cabra y oveja. La tcnica se realiza, fundamentalmente por microinyeccin y se realiza de la siguiente forma:

En la primera fase, se aislan un nmero grande de vulos fertilizados. Se consigue sometiendo a las hembras a un tratamiento hormonal para provocar una superovulacin. La fertilizacin puede hacerse in vitro o in vivo. En la segunda fase, los zigotos obtenidos se manipulan uno a uno y con una micropipeta a modo de aguja, se introduce una solucin que contiene ADN. En la tercera fase, estos vulos son reimplantados en hembras que actuarn como nodrizas permitiendo la gestacin hasta trmino.

Por ltimo, tras el destete de los recin nacidos, stos se chequean, para ver si ha ocurrido la incorporacin del transgn. 2. Transgnesis por manipulacin de clulas embrionarias. Una estrategia ms poderosa para la transgnesis implica la introduccin de ADN extrao en clulas embrionarias totipotentes(clulas ES) o clulas embrionarias madres (clulas EM). Estas clulas se toman del interior de la blstula en desarrollo y se pasan a un medio donde se tratan con distintos productos con lo que se conseguir que las clulas no se diferencien, y se mantiene su estado embrionario.

El ADN extrao se introduce en las clulas ES mediante diversas tcnicas,posteriormente las clulas transfectadas son reintroducidas en una blstula y sta reimplantada en una hembra. Con esta tcnica los neonatos son quimeras ; pero mediante el cruce de stas se consiguen animales transgnicos con aquellas quimeras que hayan incorporado el transgn en su linea germinal
Cuando la integracin del transgn ocurre despus de la primera divisin celular, el animal esquimrico, lo que quiere decir que las clulas de su cuerpo tienen diferentes caractersticas, segn tengan o no el transgn, as en la "ovecabra" quimera entre oveja y cabra, las clulas de su piel, unas producan lana y otras pelo

CLONACIN DE ANIMALES El principio de la clonacin est en la obtencin de organismos idnticos genticamente, y por tanto morfolgic y fisiolgicamente, como lo son dos gemelos univitelinos. Esto ha sido el sueo de muchos ganaderos, que han deseado que todo su ganado tuviera las cualidades de algn ejemplar especialmente bueno. Se pueden utilizar dos mtodos para conseguir clones de animales: 1. Por DISGREGACIN DE CLULAS EMBRIONARIAS.Se basa en el mismo principio por el que nacen gemelos de forma natural.Se pueden separar las clulas de un embrin en diferentes estados de desarrollo, desde el estado de 2 clulas hasta el estado de mrula. Cada clula separada puede funcionar como un zigoto que puede desarrollarse para dar un individuo completo. 2. Por TRANSFERENCIA NUCLEAR. Se toman clulas embrionarias en fase de mrula o blstula, obtenidas por disgregacin, se cultivan in vitro,y despus se transfieren a ovocitos a los que se les ha quitado el ncleo. Se provoca la fusin de las dos clulas animales de modo que el ncleo de la clula embrionaria quede en el interior del ovocito, pudiendo ste empezar a funcionar como un zigoto. As se han obtenido 470 embriones clnicos de terneros de un nico embrin donante de clulas.

Cuanto ms diferenciadas estn las clulas donantes de material gentico, ms difcil es conseguir la reprogramacin de dicho material gentico para que pueda iniciar la diferenciacin de la clula receptora. Actualmente es posible obtener clones de clulas totalmente diferenciadas de un animal adulto que actan

como donantes de su material gentico, como ocurri en el caso de la famosa oveja Dolly.

Obtencin de una cerda transgnica Un gen hbrido que contiene el gen humano que codifica la sntesis de una protena de inters biolgico junto con el promotor del gen que codifica una protena de la leche de rata, se introducen por microinyeccin en un vulo de cerda fecundado. El desarrollo de ese vulo da lugar a un animal transgnico que tiene en todas sus clulas el gen hbrido. Debido al promotor elegido, ese gen solamente se expresa en la glndula mamaria de la cerda induciendo la produccin de la proteina humana en la leche.

El ganado transgnico que se emplea para producir proteinas terapeticas, debe contener en el ADN extrao de sus clulas, adems del gen codificante de la proteina, una secuencia o promotor que haga que se exprese dicho gen en unas determinadas clulas solamente. Por ejemplo, si se quiere que la proteina se produzca junto con la leche, el transgn se fusiona con una secuencia reguladora de una proteina de la leche, con lo que la proteina slo se formar en las clulas de glndulas mamarias. Esto es lo que se hizo con la oveja Tracy en 1992, la primera oveja que produjo una proteina humana, laalfa-antitripsina bajo la direccin del promotor ovino de la beta-lactoglobulina. Dicha proteina se produce en una cantidad de 35 g/l, la cual se emplea para curar el edema pulmonar. Lo mismo se ha hecho para la famosa cerda Genie, que fabrica en su leche la proteina C humana que controla la coagulacin sanguinea y es necesaria para los hemoflicos.