INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA CARRILLO DEL ANGEL JOSE DE JESUS 4IM2

SECCION III 2011500079 SEPARACION E IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS EN JUGOS DE FRUTOS POR CROMATOGRAFIA BIDIMENSIONAL EN CAPA FINA OBJETIVO Separar e identificar los aminocidos presentes en jugo de frutos por cromatografa bidimensional en capa fina a partir de comparar los RF de los aminocidos estndar. RESULTADOS Tabla 1. Cromatogramas unidimensionales tipo desarrollados en las 2 fases mviles. Primera Fase Mvil Aminocido Frente del Soluto 1.8 2.7 4.7 5 5 5.3 5.3 5.3 6.3 6.7 Frente del Solvente 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 RF 0.225 0.3375 0.5875 0.625 0.625 0.6625 0.6625 0.6625 0.7875 0.8375 Frente del Soluto 0 0 2.5 2 3.7 0 2.2 4.5 3.9 4.1 Frente del Solvente 7.4 7.4 7.4 7.4 7.4 7.4 7.4 7.4 7.4 7.4 RF 0 0 0.3378 0.2702 0.5 0 0.2972 0.6081 0.5270 0.5540 Segunda Fase Mvil

Arginina Lisina Prolina Glicina Acido Glutamico Histidina Triptofano Tirosina Metionina Fenilalanina

Tabla 2. Cromatograma bidimensional tipo desarrollado en las 2 fases mviles. Primera Fase Mvil Numero de Mancha Frente del Soluto 1.8 2.4 3.8 4 4 5.3 5.3 5.3 5.7 6.5 Frente del Solvente 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 RF Segunda Fase Mvil Frente del Soluto 0 0 0 1.2 2.2 2.3 4.5 5.3 3.9 4.3 Frente del Solvente 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 RF Aminocido correspondiente

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

0.24 0.32 0.5066 0.533 0.5330 0.7066 0.7066 0.7066 0.76 0.8666

0 0 0 0.16 0.2933 0.3066 0.6 0.7066 0.52 0.5733

Arginina Lisina Histidina Glicina Prolina Triptfano Metionina Tirosina Acido Glutamico Fenilalanina

Tabla 3. Cromatograma bidimensional problema desarrollado en las 2 fases mviles. Primera Fase Mvil Numero de Mancha Segunda Fase Mvil RF 0 0 0 0.1066 0.08 0.2533 0.2 0.3066 0.44 0.6 0.4666

Frente del Frente del RF Frente del Frente del Soluto Solvente Soluto Solvente 1 0.3 7.9 0.0379 0 7.5 2 1.6 7.9 0.2025 0 7.5 3 2.3 7.9 0.2911 0 7.5 4 2.9 7.9 0.3670 0.8 7.5 5 3.7 7.9 0.4683 0.6 7.5 6 3.7 7.9 0.4683 1.9 7.5 7 5.5 7.9 0.6962 1.5 7.5 8 5.3 7.9 0.6708 2.3 7.5 9 3 7.9 0.3797 3.3 7.5 10 4.6 7.9 0.5822 4.5 7.5 11 6.4 7.9 0.8101 3.5 7.5 Tabla 4. Cromatograma bidimensional problema desarrollado en las 2 fases mviles. Numero de Mancha 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 RF creciente en la RF en la Aminocido correspondiente Primera fase Mvil Segunda Fase Mvil 0.0379 0 -----------0.2025 0 Arginina 0.2911 0 Lisina 0.3670 0.1066 ------------0.4683 0.08 ------------0.4683 0.2533 -----------0.6962 0.2 Histidina 0.6708 0.3066 Triptfano 0.3797 0.44 ------------0.5822 0.6 Metionina 0.8101 0.4666 Fenilalanina

FENILALANINA METIONINA TRIPTOFANO HISTIDINA LISINA ARGININA

Que aminocidos contiene el Jitomate. Por cada 100 g de peso neto de Jitomate contiene: Isoleucina 20 mg Leucina 30 mg Lisina 32 mg Metionina 7 mg Fenilalanina 20 mg Treonina 25 mg Triptfano 9 mg Valina 24 mg Arginina 24 mg Histidina 17 mg Reaccin completa y con nombres de la Ninhidrina con un aminocido.

Por que la Prolina no adquiere un color morado al reaccionar con la Ninhidrina, mas bien adquiere un color amarillo.

Esto se debe a que el grupo amino, enlazado al carbono en posicin con el grupo carboxlico forma parte de un anillo lo que hace que no reaccione con la Ninhidrina, ya que esta lo hace con grupos amino libres.

Es posible cambiar el orden de las fases mviles. Si. Pero tenemos que tener en cuenta que al desarrollar el Cromatograma en la segunda fase mvil debe estar libre de la primera fase mvil , entonces el requisito es que la fase mvil sea fcil de eliminar. DISCUSIONES Los resultados que obtuvimos corresponden a algunos aminocidos que contiene el Jitomate, aunque algunos no se pudieron identificar, ya que algunos aminocidos no formaban parte de los estndares como la Valina y la Leucina, entonces no se podan identificar, otra razn es que debido a que se adiciono muestra en exceso, los estndares de aminocidos no corrieron en la fase estacionaria uniformemente por lo que se recomienda agregar menos muestra para tener un Cromatograma donde podamos identificar mas fcilmente a los aminocidos. CONCLUSIONES Podemos obervar con mayor nitidez los aminocidos que conforman el jugo del Jitomate ya que al utilizar al menos dos solventes, tenemos mayor separacin de los analitos y es mas fcil poderlos identificar. BIBLIOGRAFIA Tablas mexicanas de valor nutritivo de alimentos. Edicin internacional 100 gramos peso neto L.C. Wade. Jr, Qumica Orgnica, Quinta Edicin, Pearson Prentice Hall,2004, 1131