SISTEMA MNS

Dra. Fabiana Bastos Divisin Inmunohematologa. Departamento de Hemoterapia e Inmunohematologa Hospital de Clnicas Jos de San Martn cbastos@fmed.uba.ar

SISTEMA MNS

El abuelo de los sistemas sanguneos, descubierto en 1927. Los avances tecnolgicos en los laboratorios le han abierto a este callado miembro una nueva carrera como sopln en las pruebas de paternidad.

SISTEMA MNSs
1927 Landsteiner y Levine describen el Anti-M y Anti-N mediante la inmunizacin de conejos con GR humanos 1947 Walsh y Montgomery describen Anti-S 1951 se describe el Anti-s 1953 Wiener reporta el Anti-U Se han incluido al sistema 43 antgenos

GENETICA
Dos genes estrechamente ligados GYPA y GYPB producen sialoglicoprotenas Locus en cromosoma 4 q28-q31 Los alelos GPYA (M/N) y GPYB (S/s) son codominantes GYPE es un gen homologo estrechamente ligado a los anteriores, no codifica para glicoforinas en la superficie globular.

GENETICA
GYPA esta organizado en 7 exones:
A1 inserta la protena que ayuda a la insercin de la estructura en la membrana durante su formacin A2 codifica los primeros 26 aa A3 A4 codifica porcin extracelular A5 codifica protena de transmembrana A6 y 7 codifica porcin citoplasmtica A7 codn de finalizacin

GENETICA
GYPB esta organizado en 5 exones:
B1 inserta la protena que ayuda a la insercin de la estructura en la membrana durante su formacin B2 codifica los primeros 26 aa B3 es anlogo a A4 y codifica porcin de la molcula que porta especificidad S o s B4 es similar a A5 y codifica la porcin transmembrana B5 codifica porcin citoplasmtica y el codn de finalizacin

GENETICA
Cambios de material gentico entre genes homlogos Recprocos:
Desalineamiento de genes durante meiosis Crossing over desigual GYP(A-B) y GYP(B-A) codifican glicoforinas hbridas GP(A-B) y GP(B-A)

No recprocos
Conversin de genes GYP(B-A-B)

GENETICA
Aparicin de nuevos antgenos:
Punto de fusin entre GPA y GPB en los hbridos antgenos de baja frecuencia

Prdida de antgenos
Reemplazo de exones por material gentico insertado

ANTIGENOS MNSsU
En la GPA Glicoforina A se localizan los Ag M N y Ena En la GPB Glicoforina B: se localizan los Ag S, s, U y N Los 26 primeros aa de la GPB son idnticos a la GPA con especificidad N

ANTIGENOS MNSsU
Los Ag se diferencian por sustituciones en al porcin N-terminal M, N, y Ena en GPA S, s, U, N en GPB N en la mayora de los GR U- carecen de GPB son S-, s-, N En(a-) carecen de GPA MkMk carecen de GPA y GPB

ANTIGENOS COMUNES M, N, S, s ANTIGENOS DE ALTA INCIDENCIA U, Ena, N, GR Udbil y U- son raros y se detectan solo en la raza negra ANTIGENOS DE BAJA INCIDENCIA He, Mia, Mc, Vw, Mur, Mg, Vr, Me, Mta, Sta, Ria, Cla, Nya, Hut, Hil, Mv, Far, sD, Mit, Dantu, Hop, Nob, Or, DANE, TSEN, MINY, MUT, SAT, ERIK, Osa, ENKT, ENEP, ENEH, HAG, ENAV, MARS, ENDA, MNTD

FRECUENCIA DE FENOTIPOS
Existe desequilibrio en la expresin de antgenos SsyMN Frecuencia relativa de aparicion de haplotipos:

Ns > Ms > MS > NS

FRECUENCIA DE FENOTIPOS
M+NM+N+ M-N+ M-NS+sS+s+ S-s+ S-sBLANCOS 28% 50% 22% Raro 11% 44% 45% 0% NEGROS 26% 44% 30% Raro 3% 28% 69% <1%

Ser Ser Tre Tre Gly

Le u Ser Tre Tre Glu

Le u Ser Tre Tre Glu

Espacio Extracelular Bicapa lipdica

72

29

s
40 72

13 1

Espacio Intracelular

Glicoforina A

Glicoforina B

GLICOFORINA A
GPA tiene 131 aa en 3 dominios 72 aa extracelular 23 aa intramembranoso hidrofbico 36 aa citoplasmticos en contacto con citoesqueleto M: SER en posicin 1 y GLI en 5 N: LEU en posicin 1 y GLU en 5 300.000 a 1.200.000 copias por GR

GPA

GPB

GLICOFORINA B
GPB tiene 72 aa en 3 dominios 44 aa extracelular 20 aa intramembranoso hidrofbico 8 aa citoplasmticos S: MET en posicin 29 s: TREO en posicin 29 Glicosicalacin de 25, 34 y 35 S y s: LEU en posicin 1 y GLU en 5 tiene actividad N llamada N 30.000 a 250.000 copias por GR

GPA

GPB

DESARROLLO Y DISTRIBUCION
Bien desarrollados al nacimiento Desde las primeras semanas de desarrollo GPA se encuentra en epitelio y endotelio capilar renal No se detectan en linfocitos, monocitos granulocitos y plaquetas

FENOTIPOS NULOS

FENOTIPO En(a-)
Delecin homocigota del gen GYPA En(a-)Fin. Heterocigoto para gen hbrido En(a-)UK. No produce GPA pero si GPB No reaccionan con Anti-Ena Tiene expresin normal o aumentada de Ag S ys Son Wr(a-b-)

FENOTIPO En(a-)
Tienen caractersticas serolgicas inusuales: No son agregadas por Polybrene Son aglutinadas fuertemente por sueros no inmunes de origen animal Pueden ser inespecficamente aglutinadas por sueros Anti-M o Anti-N de conejo Reacciona mas fuertemente con lectinas Sophora japonica, Glycine soja, Bauhinia purpurea, Dolichos biflorus, Phaseolus lunatus y Arachis hypogea. Maclura aurantiaca

FENOTIPO En(a-)
Anti-EnaTS reconoce area sensible a la tripsina entre aa 20 y 39 Anti-EnaFS reconoce area sensible a la fiscina entre aa 46 y 56 Anti-EnaFR reconoce area resistente a la fiscina entre aa 62 y 72

FENOTIPO Mk
1964 Metaxsas describe gen silente Mk Mk es un alelo de M y N Los homocigotos para el Mk carecen de GPA y GPB y Ag relacionados Los heterocigotos para el Mk presentan la mitad de GPA y GPB Disminucin del contenido de cido silico en la membrana y aumento de glicosilacin de las protenas de membrana banda 3 y 4.1

ANTGENOS DE ALTA PREVALENCIA

Antgeno U Expresin depende de la presencia en la GPB de secuencia de aa 33 a 39 y la interaccin con RhAG Fenotipo UAusencia de GPB o formas alteradas de GPB Son S-s- salvo Dantu + o Rhnull/Rhmod S-s- 16% son U+var codificada por un gen hbrido De los U+var 23% son He+

ANTIGENO U
El Ag U se encuentra presente en todos los individuos excepto en el 1% de los negros americanos y 1-35 % de los africanos El dficit de U se produce por delecin parcial o total del gen GPB Usualmente son S-s-UExisten variantes de U

ANTIGENO U y ANTI-U
Todas las clulas U- son S-sNo todas las clulas S-s- son UExisten variantes de U: por sustitucin de aa prdidas parciales del gen alteracin de la expresin del gen Anticuerpo inmune Produce RHPT y EHRN

VARIANTES POR SUSTITUCION REGION N-TERMINAL GPA Y GPB

Sustitucin de aa en pentapptido N-terminal de las GPA y GPB Afecta la expresin de M y N creando nuevos Ag En GPA: Mg y Mc En GPB: He

FENOTIPO Mg
Mg es codificado por un gen que no produce Ag MyN Si no se detecta el alelo en una familia puede resultar en una aparente exclusin de paternidad si M+N- (M/Mg) tiene un hijo M-N+(N/Mg) Anti-Mg es el Ac mas comn del sistema Exposicin a estructuras Mg like por remocin de carbohidratos de la glicoforina durante la destruccin natural de los GR

SERIE MILTENBERGER

Serie de antgenos de baja incidencia relacionados solo serolgicamente Cada fenotipo representa una variante diferente de GP o molculas hbridas

SERIE MILTENBERGER
Vw Mur Hil I II III IV V VI VII VIII IX X XI GP.Vw GP.Hut GP.Mur GP.Hop GP.Hil GP.Bun GP.Nob GP.Joh GP.Dane GP.HF GP.JL + O O O O O O O O O O O O + + O + O O + O O O O + O + + O O O + O Hut O + O O O O O O O O O MUT Hop O + + + O + O O O + NT O O O + O + O + O O O Nob DANE O O O O O O + + O O O O O O O O O O O + O O TSEN MINY O O O + O O O NT O O + O O + + + + O O O + +

EFECTO DE LAS ENZIMAS

M y N son fcilmente desnaturalizas por Enzimas:
Papana Fiscina Bromelina Tripsina Pronasa

ZZAP

EFECTO DE LAS ENZIMAS

No son desnaturalizas por:
DDT AET - quimotripsina Cloroquina EDTA-glicina-cida

Variablemente desnaturalizados por:

Neuraminidasa

EFECTO DE LAS ENZIMAS

TRIPSINA Cliva regin N-terminal de GPA en posicin 139 pierde actividad M y N No desnaturaliza la regin N-terminal de GPB resiste la actividad S, s y N QUIMIOTRIPSINA M y N parcialmente resistentes S, s y N sensible

EFECTO DE LAS ENZIMAS

PAPAINA, FICINA Y BROMELINA La mayora de los Ag en GPA y GPB son sensibles al tratamiento con enzimas Pronasa bacteriana acta de igual forma Papana y fiscina destruyen actividad M, N, N ys Actividad S es mas resistente

ANTI-M
Anticuerpo relativamente comn Son aglutininas fras, reaccionan por debajo de 37C, generalmente a 4C, ocasionalmente a TA Considerado de ocurrencia natural, algunos ejemplos pueden ser estimulados por la transfusin o infecciones bacterianas en nios Mas frecuente en nios que en adultos

ANTI-M
Sensibles al tratamiento con enzimas Muestran EFECTO DOSIS La mayora son IgM, aunque el 78% tienen componente IgG capaz de aglutinar GR en salino No fijan C Algunos ejemplos solo reaccionan en medio acidificado, a pH 6.5 Anti-M like

ANTI-N
Anticuerpo raro debido a la presencia de Ag N en la GPB. Es relativamente raro De ocurrencia natural IgM reactiva por debajo e 25C Muestran EFECTO DOSIS Son sensibles al tratamiento con enzimas

SIGNIFICADO CLINICO Aloanticuerpos Anti-M y Anti-N

La mayora de los Anti-M y Anti-N no son clnicamente significativos Pueden ser ignorados en la prctica transfusional si se omiten pruebas TA Si los Ac reaccionan a 37C deben ser tenidos en cuenta Implicados en RHPT aguda y tarda Pocos casos reportados de EHRN debida a AntiM

SIGNIFICADO CLINICO Autoanticuerpos Anti-M y Anti-N

15 casos reportados de Anti-M 11 fueran considerados inocuos 4 asociados con sndrome de aglutininas fras Anemia leve y fcilmente controlable 2 ejemplos anti-M hemolticos in vitro Un reporte de IgG Anti-N responsable de AHAI

ANTI-N Y DIALISIS RENAL

1972 Howell y Perkins identifican 12 ejemplos de Ac con especificidad aparente Anti-N en el suero de 416 pacientes hemodializados. El Ac desapareci despus del transplante Produccin de Anti-N-like (anti-Nf) se debe a la sensibilizacin del paciente con GR residuales con el determinante N alterado debido al formaldehdo

ANTI-N Y DIALISIS RENAL

21 al 27% de los pacientes dializados que utilizan membranas esterilizadas con formaldehdo. Anti-Nf muestra un aumento de la reactividad si se enfrenta a GR tratados con formaldehdo Anti-Nf o Anti-formaldehdo Rechazo de rion fro en un paciente con una crioaglutinina Anti-Nf

LECTINAS

Viscia graminea Anti-N Iberis amara Anti-M

ANTI-S
Son Ac inmunes Se describen ejemplos de ocurrencia natural IgG que no fijan C Usualmente reaccionan a 37C Reaccin ptima en SAGH previa incubacin entre 10-22C Muestran EFECTO DOSIS

ANTI-S
Tienen importancia clnica RHPT EHRN severa y fatal Responsable de AHAI Ac mimtico

ANTI-s
Puede ser IgM o IgG (IgG3) Es raro Reacciona por debajo de 22C No muestran ocurrencia natural Tienen importancia clnica RHPT EHRN severa y fatal

ANTI-U
IgG que no fina C Inmune. No se describe como natural Puede mostrar mayor reactividad por debajo de 22C Clnicamente significativos producen EHRN y RHPT AutoAc AHAI y AHDI

ROL BIOLOGICO
GPA receptor de Escherichia Coli productora de pielonefritis Plasmodium Falsiparun utiliza GPA; GPB; GPC y cido neuramnico como receptores para invasin celular:
Reducida en En(a-), MkMk y UGR normales tratados con neuraminidasa y tripsina

Muchas Gracias