Ministre de lEnseignement Suprieur, de la Recherche Scientifique et de le Technolologie *** * *** Universit du 7 Novembre Carthage *** * *** Institut National

l des Sciences Appliques et de Technologie

Projet de fin dtude Pour lobtention du Diplme universitaire technologique Filire : Chimie Industrielle

Sujet

Synthse de Nouveaux Radiotraceurs Base dAniline

Ralis par : Issra AYARI

Entreprise dacceuil : CNSTN

Soutenu le 27/06/2008

Le responsable lentreprise :
Madame : Malek Saied Nadia
Cachet et signature

Le responsable lINSAT :
Monsieur : Saied Okba
signature

Anne universitaire:2007/2008
1

Remerciements
Je tiens adresser mes respectueux et sincres remerciements mes encadreurs Mr Saied Okba et madame Malek Saied Nadia qui ont gnreusement enrichi notre formation travers leurs prcieux conseils et recommandations.

Je

remercie

vivement

toute

lquipe

de

lunit

des

radiopharmaceutiques pour leur collaboration et lagrable ambiance de travail tout le long de notre travail.

Je remercie toute personne ayant de prs ou de loin contribu ce que ce travail se droule dans les meilleures conditions.

Mes profonds remerciements sont adresss tous les membres de ma famille pour leur comprhension et leur soutien continu.

Liste des abrviations

CCM : Chromatographie sur couche mince DMSO : Dimthylsulfoxyde DMF : Dimthylformamide ECD : Ethylne cystine dimre FSCR : flux sanguin crbral HMPAO : Hxamthylpropylne amino oxyne HPLC : Chromatographie liquide haute performance KeV : Mga lectron volt LCR : Liquide cphalo-rachidien MeV : Mga lectron volt Rf : Rapport frontal RMN : Rsonance magntique nuclaire SNC : Systme nerveux central SPECT: single photo mission computed tomography THF: Tetrahydrofurane Tc : Techntium TEP : Tomographie par mission des photons TEMP : Tomographie par mission monophotonique UV : ultraviolet

Liste des figures et des tableaux

Les figures
Fig 1 : Schma de la dsintgration du Molybdne 99.23 Fig 2 : Reprsentation schmatique des composants histologiques de la barrire hmato encphalique..28 Fig 3: Diffrents types dchanges intervenant travers les cellules endothliales du systme nerveux central (SNC).28 Fig 4 : cellule blinde35 Fig5 : Contrleur mains et pieds...36 Fig 6 : Chromatographie liquide haute performance.38 Fig 7 : Compteur gamma puits39 Fig 8 : Radiochromatographe.40

Les tableaux
Tableau I : Les radiolments potentiellement utilisables en mdecine nuclaire21 Tableau II : Comportement de certains traceurs crbraux...30 Tableau III : Rendement du radiochromatogramme selon la mthode de chauffage49

Table des matires

Introduction Gnrale8 Prsentation du CNSTN Introduction.10 1.Prsentation du de la CNSTN .....10 2. Les diffrentes units du de la CNSTN...10 2.1-Lunit dhydrologie isotopique10 2.2-Lunit pilote de traitement par rayonnement ionisants...........11 2.3-Lunit dlectronique et dinstrument nuclaire..........11 2.4-Lunit de radioanalyse.11 2.5-Lunit de radioprotection.12 2.6-Lunit de radiochimie..12 2.7-Lunit de radiopharmaceutiques..12 2.7.1-Missions..12 2.7.2-Projets.12 2.7.3-Les diffrentes techniques utilises........13 Conclusion...13 Aperu bibliographique Introduction.15 1.Notion dun radio pharmaceutique.......15 1.1- Lactivit diagnostique.....15 1.2- Lactivit thrapeutique16 1.3-aspect chimique des radiotraceurs.16 2.Notion de radioisotopes .. ....16 2.1-Les isotopes ..17 2.2-Les radio-isotopes..17 3.Notion de radioactivit .........18 3.1-Les principaux modes dmission radioactive ......18 3.1.1-La radioactivit ...18 3.1.2-La radioactivit 18 3.1.3-La radioactivit X...18 3.1.4-La radioactivit .......19 3.2-La dcroissance radioactive. .20

3.3-Energie et dure de vie .. 20 4.Les radiolments potentiellement utilisables en mdecine nuclaire...21 5.Le marquage au techntium .. 22 5.1-Proprits physicochimiques du techntium ...22 5.2-Obtention du techntium..23 5.3-les complexes organomtallique techntis 24 5.3.1-Stabilit dans le complexe ....24 5.3.2-Les liaisons dans le complexe...24 5.3.3-Le degr doxydation du complexe ..24 5.3.4-La charge globale du complexe .25 5.4-La synthse du complexe......22 5.4.1-La rduction du pertechnate ........22 5.4.2-Les voies de synthse.....23 6.Les radiotraceurs crbraux et leurs applications.....24 6.1-La barrire hmato encphalique..24 6.2-Comportement de certains traceurs crbraux..26 6.3-Caractristiques des traceurs crbraux....27 6.4-Exploration du systme nerveux central...27 6.4.1-La neuroimagerie fonctionelle.......27 6.4.2 -Utilit dans le diagnostic..28 6.4.3 -Utilit dans la conduite thrapeutique .28 6.4.4-Utilit dans la recherche clinique..29 Conclusion..29 Matriel et mthodes de synthse 1.Appareillage et techniques31 1.1-Radioprotection..31 1.1.1-La cellule blinde....32 1.1.2 Le dosimtre....32 1.1.3-Les briques de plomb..33 1.1.4-Le contrleur des mains et pieds.33 1.2-La chromatographie sur couche mince (CCM).33 1.3-Chromatographie prparative 34 1.4-Chromatographie liquide haute performance (HPLC)..34 1.5-rsonnance magntique nuclaire (RMN). 35 1.6-Mesure de la radioactivit...35 6

1.6.1-Compteur gamma puits.35 1.6.2-Activimtre..36 1.6.3-Radiochromatographe..36 2.Synthse du chlorure ferrocnique.37 3.Synthse de lamide ferrocnique..39 4.Marquage radioactif du produit synthtis ........41 5.Contrle et purification du produit marqu42 6.biodistribution42 Conclusion....43 Rsultats et interprtation Introduction..45 1-Rsultats des ractions de synthse.. 45 1.1-Synthse du chlorure ferrocnique 45 1.2-Synthse de lamide ferrocnique..45 2.Rsultats de la raction de marquage...46 2.1-Linfluence du mode de chauffage....46 2.2-Linfluence du choix du solvant..46 2.3-Rsultats du marquage...46 Conclusion...47 Conclusion Gnrale.48 Rfrences bibliographiques49 Annexes..5

Introduction Gnrale
La radioactivit naturelle est une dcouverte ingnieuse (Henri becquerel) qui a tendrement couv la plus grande rvolution humaine qui a vu le jour grce aux travaux fructueux de Frdric et Irne Joliot-Curie avec la dcouverte de la radioactivit artificielle. Limportance de cette dcouverte rside essentiellement dans la prise de conscience partout dans le monde de la multiplicit et de limportance des applications pratiques des radiolments.

Cest dans ce cadre quon a assist lapparition de ce quon appelle les radiotraceurs .Le nom de traceurs vient du fait que la substance marqu un radiolment ne contient que des traces de ce dernier (le plus souvent indcelables lanalyse chimique) et que au cours de son dplacement, les dtecteurs peuvent suivre son mouvement, littralement la trace . En effet la notion de radiotraceur est beaucoup plus spcifique car elle souligne la fois son caractre artificiel ainsi que la technique approprie pour le reprer, lidentifier et le suivre.

De nos jours, la fabrication industrielle des radio-isotopes se fait grande chelle dans un grand nombre de pays. Paralllement, lindustrie lectronique a pu mettre la disposition des utilisateurs des appareils de contrle, de mesure et de dtection toujours plus performants. Ces dveloppements expliquent lintrt croissant port aux utilisations biologiques et mdicales des radioisotopes. Cest ainsi quapparut la notion de radiopharmaceutiques qui ne sont que des radiotraceurs destins un usage purement mdical quil soit dordre diagnostique ou bien thrapeutique. Toutefois, vu la sensibilit et la spcificit du domaine dapplication des radiopharmaceutiques on est constamment hant par le besoin de la synthse de nouvelles molcules marques offrant plus de possibilits et assurant moins de contraintes et de risques pour lhomme. Ces molcules sont le plus souvent marques avec du techntium 99m qui est le radio-isotope le plus communment utilis en mdecine nuclaire mais uniquement vise diagnostique. Ce projet de fin dtude visant obtenir le diplme de technicien suprieur en chimie industrielle sest droul au sein du Centre National des Sciences et Technologies Nuclaires dans le cadre de lunit des radiopharmaceutiques (URP). Il uvre dans le sens synthtiser de nouveaux radiopharmaceutiques marqus au techntium 99m capables dassurer la fois 8

lexploration des fonctions et des mtabolismes crbraux et le diagnostic des pathologies crbrales. Ce rapport se rsume en quatre grandes parties :

La premire partie portera sur la prsentation du centre daccueil du stage du PFE. La deuxime partie renferme un aperu bibliographique qui va tenter dlucider la plupart des notions troitement lies au domaine de la radioactivit ainsi que les termes un peu plus spcifique notre sujet (les radiotraceurs, marquage). Cet aperu numrera galement les radiolments les plus utiliss en mdecine nuclaire et stalera sur les proprits du techntium 99m et les voies de synthse. Finalement, il abordera quelques applications des traceurs crbraux. La troisime partie va principalement expliciter les diffrents modes opratoires des oprations de synthse et de marquage qui ont eu lieu tout en dcrivant les techniques employes et lappareillage utilis. La dernire partie sera consacre voquer les rsultats des travaux effectus ainsi que leurs interprtations.

Prsentation du CNSTN

10

Introduction

La radioactivit na le plus souvent pas t labri des prjuges et on a plutt tendance la considrer comme une source redoutable de danger et de nuisance pour lhomme et pour lenvironnement. Pourtant, aussi bien dans le domaine de dtection de fume quen mdecine la radioactivit en a sauv des vies. Cest ainsi que les centres de recherches spcialiss travaillent sans rpit afin de proposer constamment de nouvelles techniques bases sur la radioactivit. Dans ce qui suit on propose une prsentation du centre national des sciences et technologies nuclaires (CNSTN) tout en numrant ses diffrentes units et leurs missions.

1. Prsentation du CNSTN :
Ce centre a t cre le 22 novembre 1992. Il a pour mission de raliser les tudes et recherche nuclaire caractre pacifique dans diffrents domaines (agriculture, industrie, nergie, environnement et mdecine), ainsi que la matrise des technologies nuclaire, leur dveloppement et leur utilisation pour des fins conomiques et sociales.

11

2. Les diffrentes units du CNSTN

2.1-Lunit dhydrologie isotopique

Cette unit a principalement pour missions : La datation au carbone 14 des eaux souterraines et des uvres archologiques. La spectromtrie bta et le comptage par scintillation liquide. Les analyses par spectromtrie dabsorption atomique. Les analyses par la chromatographie ionique. La mesure de la radioactivit dans lenvironnement.

2.2-Lunit pilote de traitement par rayonnement ionisants

Cette unit a pour mission dutiliser les rayonnements ionisants pour la conservation, la strilisation ou encore la modification des proprits physicochimiques des produits industriels.

2.3-Lunit dlectronique et dinstrument nuclaire

La principale mission de cette unit consiste rassembler sous une mme direction les activits dinstrumentation et lectronique indispensables au fonctionnement du centre.

2.4-Lunit de radioanalyse

La mission de cette unit est de mener des travaux de recherche au moyen de mthodes analytiques nuclaires telle que la spectromtrie gamma, alpha et bta, la scintillation liquide, lactivation neutronique, lanalyse par fluorescence X et lhydrologie isotopique. Ces techniques radioanalytiques permettent danalyser des chantillons dorigine

environnementale et industrielle par la dtection ultra-fine dlment de traces (radioactifs ou non) ainsi le suivi du taux de la radioactivit autour des installations nuclaires.

12

II-5-Lunit pilote de production des mles striles de la cratites Cette unit uvre dans le but lancer un programme de lutte par la technique du mle strile en Tunisie contre la Cratite, il ya eu cration et installation dune unit pilote de production des males striles au ple technologique de Sidi Thabet en coopration avec le dpartement de la coopration technique de lAIEA et de la division mixte FAO/AIEA des techniques nuclaires dans lalimentation et lagriculture. II-6-Lunit de microbiologie Les missions de cette unit consiste : Lusage des techniques molculaires dans le domaine de dtection des pathognes dorigine alimentaire et autres par PCR conventionnelle et PCR temps rel. Ltude dimpact du rayonnement ionisant sur les bactries et tude de Radiorsistance bactrienne. Lusage des techniques Nuclaires et typage molculaire des bactries pathognes et dorigine environnementale. La synthse de biomolcules actives : antibiotique, endonuleax.

2.5-Lunit de radioprotection

Elle doit assurer : Les actions de prvention La surveillance en radioprotection Les interventions en radioprotection

2.6-Lunit de radiochimie

Cette unit assure les missions suivantes : La prparation dchantillons et sparation des radionuclides pour lunit de radioanalyse. La mise en place de la dosimtrie chimique liquide et le dveloppement de nouveaux dosimtres La dtermination des lments traces La dtection des produits irradis

2.7-Lunit de radiopharmaceutiques 2.7.1-Missions 13

La mission principale de lunit consiste matriser les techniques nuclaires utilisant les isotopes radioactifs pour le dveloppement de nouveaux radiotraceurs destins ltude prcoce des pathologies crbrales. Ainsi la production des kits radiopharmaceutiques actuellement imports et qui sont trs utiliss dans les services de mdecine nuclaire en Tunisie fait lobjet des principales activits de lunit.

2.7.2-Projets

Lunit dveloppe au sein du CNSTN des techniques de radiomarquage de nouvelles molcules chimiques ou biologiques. Le devenir de ces molcules marques dans les diffrents organes est suivi chez lanimal par des tudes pharmacocintiques. Leurs

biotransformation dans le foie et dans le plasma sont tudis par HPLC. Ces recherches pluridisciplinaires sont menes en collaboration avec le laboratoire de Rossendorf/Allemagne, lAgence Internationale lEnergie Atomique (IAEA), les services de mdecine nuclaire de Tunisie et la socit de production de mdicaments striles Mdis.

2.7.3-Les diffrentes techniques utilises

Les diffrentes techniques utilises dans cette unit sont : La synthse chimique et radiochimique. La radiochromatographie Lanalyse par chromatographie liquide haute performance Lautoradiographie

Conclusion

Lunit des radiopharmaceutiques va accueillir notre projet qui envisage de synthtiser une nouvelle molcule radiomarque dont les rsultats serviront promouvoir les travaux de recherche au sein de cette unit. Certes, les diffrentes tapes relatives la synthse ne se drouleront pas dans les meilleures conditions si on ne sarme pas de quelques notions thoriques sur lesquels on stalera dans la partie qui suit.

14

Aperu Bibliographique

15

Introduction

Dans cette partie, on va tenter dlucider lintrt mdical de marquer une molcule organique laide dun lment radioactif. Cest dans ce but quon a dfinit la notion de radiopharmaceutique ainsi que quelques notions lies au phnomne de la radioactivit ensuite on a numr les radiodiolments les plus utilises en mdecine nuclaire et on sest tal sur le Techntium, llment sur lequel porte ce projet et finalement on a prsent quelques applications des traceurs crbraux.

1. Notion dun radio pharmaceutique

Depuis 1992 (loi du 8 dcembre, dcret du 26 dcembre 2000), le radio pharmaceutique rpond la lgislation du mdicament. Il sagit donc dun mdicament contenant un isotope radiactif destin un usage diagnostique ou thrapeutique. Il peut tre constitu par lisotope seul sous forme dion qui joue le rle de traceur et de vecteur (ode 131(NaI) pour la scintigraphie des glandes thyrodienne, techntium 99m (NaTcO4) pour la scintigraphie des glandes thyrodiennes et salivaires) mais le plus souvent un radio pharmaceutique est constitu dun traceur (radio-isotope) qui dtermine la rpartition spatiale de la molcule, lui mme fix ou complex un vecteur ayant un tropisme particulier pour un organe ou une fonction. Il nous rvle ainsi la biodistribution de cette molcule et permet dapprcier la fonctionnalit de lorgane cible. Au dpart la mdecine nuclaire sest intresse la synthse

16

de petits complexes techntis ayant les proprits physicochimiques responsables de laffinit particulire pour un organe. Depuis une dizaines dannes, les radiopharmaceutiques sont des molcules de complexit et de spcificit croissantes: peptides, anticorps ou oligonuclotides antisens dans lesquels la molcule marquer est spcifique dune activit biologique ou dun rcepteur et lisotope ne sert que de traceur dans ce cas il doit interfrer le moins possible avec la molcule active[1].

1.1- Lactivit diagnostique :

Lusage diagnostique des radiopharmaceutiques reprsente 80% 90% de lactivit dun service de mdecine nuclaire .Ce sont donc les metteurs gamma ( ) ou bta (+) qui sont administrs l tat de trace et dont on suit la biodistribution dans lorganisme par dtection externe (imagerie TEMP ou TEP respectivement). On distingue les molcules marques utilises lchelle macroscopique, quelques milligrammes de compos (10-6M),

administres pour tracer une fonction ou tudier la morphologie dun organe, et les molcules marques lchelle de traces (10-9 10-12 M) pour ltude des rcepteurs (ligand du rcepteur la somatostatine (octrosam10 g/18 Bq) ou ligand des rcepteurs dopaminergiques) [1].

1.2- Lactivit thrapeutique

Lactivit thrapeutique se dveloppe essentiellement dans le traitement des cancers et elle est essentiellement reprsente par liode 131 metteur et + administr dans le traitement des hyperthyrodies et des cancers thyrodiens. Cet isotope est utilis galement en recherche clinique dans les traitements base danticorps marqus. Le traitement des cancers ncessite aussi lutilisation dmetteur - tel que lyttrium 90, le luttium 1777 ou le rhnium 186/188 [1]. 1.3-Aspect chimique des radiotraceurs

La mdecine nuclaire utilise une large gamme de radiopharmaceutiques de structure chimique trs diffrentes: des ions, des complexes mtalliques, des traceurs biologiques, des protines ou des collodes except pour les isotopes utiliss tels quels. Les metteurs gamma (traceur TEMP (tomographie par mission monophotonique)) utiliss en clinique se rattachent deux classes chimiques : -Les halognes fixs au substrat organique par une liaison covalente : iode.

17

-Les mtaux de transition et de post-transition plycoordonns lis aux ligands sous forme de complexes et qui forment plusieurs liaisons mtal-ligand : techntium, indium, rhnium et samarium. [1]

2. Notion de radioisotopes
A Z

On reprsente le noyau dun atome ou nuclide par la notation :

X : symbole chimique de llment A : nombre de masse = nombre de proton +nombre de neutron. Z : numro atomique = nombre de protons. Parmi les 1525 nuclides, certains sont stables (274), dautre sont instables (1251), cest dire radioactifs. La stabilit ou instabilit dun nuclide est lie au rapport du nombre de protons. Pour lensemble des 90 lments naturels et des 13 lments artificiels, il existe environs 1525 isotopes dont 325 sont dorigine naturelle et 1200 sont artificiels.[3]

2.1-Les isotopes

Chimiquement, un lment simple est dtermin par son numro dordre dans la classification priodique de Mendleff (nombre atomique, symbole Z) et par son poids atomique (symbole P).Ce dernier est tabli en fonction de celui de latome doxygne (P=16), pris comme base par convention. Or, frquemment, les poids atomiques mettent en vidence des nombres avec dcimale. Cest le cas par exemple, pour le chlore et le cuivre, pour lesquels P = 35,457 et 63.57 respectivement. Cette anomalie sexplique par le fait que la composition des noyaux des atomes de tels lments nest pas identique. Si tous les noyaux ont bien le mme nombre de protons (gal au nombre atomique Z), le nombre de leurs neutrons varie et cest la proportion relative des diffrentes sortes de noyaux, pour un mme lment, qui dtermine finalement le poids atomique de celui-ci. On est arriv rapidement, en physique atomique, ne plus considrer la notation chimique et diffrencier les noyaux, outre le nombre Z, par le nombre de masse (symbole A), reprsentant le nombre total de particules (proton et neutrons) des noyaux de chaque sorte. Pour un mme lment, de tels noyaux sont dits isotopes. Le nombre des neutrons est videmment gal A-Z. Prcisons encore que lanalyse chimique peut parfaitement dceler un lment simple, mme en micro quantits, mais il lui est impossible de dissocier et mme de dceler ses diffrents isotopes. 18

Cest dailleurs lune des raisons pour les quelles les radio-isotopes, dont nous allons parler sont si utiles. Mlangs dautres atomes stables du mme lment ils ne peuvent tre dcels, suivis la trace (dou leur nom de traceurs) que par des appareils lectroniques spciaux ; on a pu dire plaisamment quils se comportaient comme de vritables espions dissimuls parmi leurs semblables [2].

2.2-Les radio-isotopes

Dans leur grande majorit, les radio-isotopes sont crs artificiellement. Les moyens techniques puisant de la science moderne ont permis den crer environs un millier, Pour un total de 103 lments simples connus (y compris les artificiels). Cependant, on ne les obtient pas toujours en quantits pondrables, de sorte quen pratique, il nen reste que 150 environs qui soient utilisables [3]. Leur naissance a lieu en soumettant des prparations stables aux radiations ou aux bombardements corpusculaires qui ont lieu dans des appareils de physique nuclaire (acclrateurs linaires, synchrocyclotrons, synchrotrons) ou dans des chambres dirradiation des piles atomiques. Certains radio-isotopes sont forms naturellement dans les barreaux du combustible des piles au fur et mesure du fonctionnement de celles-ci [2].

3. Notion de radioactivit
3.1-Les principaux modes dmission radioactive 3.1.1-La radioactivit

Les particules ( ) ne sont pratiquement mises que par les radio-lments naturels .Ce sont en fait des noyaux dHlium
4 2

He, appels aussi pour cette raison hlions. Chargs

positivement (Z = 2), leur nergie est gnralement comprise entre 4 et 9 MeV, ce qui leur confre des proprits ionisantes (dissociations atomiques) marques dans des substances traverses ; leur vitesse lors de leur mission est de lordre de 20 000 Km/s. Leurs

applications sont surtout du domaine biologique, car leur parcours dans lair nest que de quelques centimtres ; une paroi mtallique, mme mince, voire une feuille de papier, les absorbe en totalit [2].

3.1.2-La radioactivit

19

Le rayonnement est constitu par des lectrons. Certains lments (la majorit) mettent des lectrons ngatifs ou ngatons -, dautres surtout parmi les lgers, des lectrons positifs ou des positons + . Leurs nergies couvrent un assez larges ventail allant de 18 KeV ( 3 H ) 1 4.81 MeV ( 38 CI ). Du fait de leur faible masse, leur vitesse est trs leve (de 90% 98% de celle de la lumire) et leur pntration est plus grande que pour les particules . Cependant, les ngatons sont assez rapidement absorb par la matire, o ils donnent naissance des rayons X, pendant que la plus grande partie de leur nergie se dgrade en chaleur. Quand aux positons, ceux-ci se recombinent trs vite avec les ngatons (lectrons libres), les deux lectrons sannihilent mutuellement et leur nergie prenant la forme de deux photons de 0.51 MeV sloignent en sens inverse. Ces deux phnomnes accompagnent toujours les missions +. On doit remarquer que lmission est le rsultat dun phnomne nuclaire. Dans certain cas ( 51 Cr, 60 Co, 85 Kr, etc...), lnergie de la particule mise ou du photon est utilise en partie pour extraire un ou plusieurs lectrons des couches lectroniques de latome ; ces lectrons constituent le rayonnement e-. Leur nergie stend de quelques KeV 1 MeV environs (leur mission peut aussi tre due leffet photolectrique rsultant de la production des rayons X). IL faut noter que contrairement au rayonnement qui a un spectre de raies, valeurs discrtes dnergie, un rayonnement prsente un spectre continu. Une partie de lnergie de chaque lectron se trouve transmise un neutrino, particule neutre de masse pratiquement nulle et sans interaction avec la matire [2].

3.1.3-La radioactivit X

Les rayons X mis par des atomes radioactifs constituent un phnomne secondaire, prenant naissance aux couches lectroniques extrieures au noyau. Toute perturbation survenant dans lquilibre des couches, quelle soit dorigine interne ou externe, peut en extraire un ou plusieurs lectrons. Supposons quun lectron (a) soit extrait la lacune ainsi introduite dans sa couche tend se combler, un lectron (b) de la couche suivante venant prendre la place vacante. Lnergie dpense par (b) se traduit alors par lmission dun photon (rayon X). Gnralement, lquilibre se rtablit dans la dernire couche par la capture par celle-ci de nombreux lectrons vagabonds (c) qui existent toujours dans la matire. Ce phnomne peut parfois se rpter entre couches successives donnant ainsi naissance des rayons X dnergies, donc de longueurs dondes diffrentes ; cest le cas par exemple du
197

Hg qui

met des rayons X de 0.07 et 0.01 MeV. Dune faon gnrale, les diffrents niveaux dnergie entre les couches procdant de tels changes sont trs faibles. Il en rsulte que les

20

rayons X de radioactivit qui nont pas de trs grandes nergies ; cest ainsi quon peut citer parmi les extrmes 2.6 KeV pour
37

Ar et 73 KeV pour

203

Hg. Ils ne sont donc pas trs nocifs,

ce qui nest pas le cas, comme nous lavons dj signal, lorsque les rayons X sont dues linteraction des missions - et avec la matire [2].

3.1.4-La radioactivit

Les rayons sont mis par les noyaux de la plupart des radiolments artificiels, et presque toujours simultanment avec des missions dautre nature. Leurs nergies sont trs dissemblables de lordre de 2 KeV ( 99 Tc) 2.76 MeV ( 24 Na et
88

Y) ; pour certains lments,

75

on observe des missions dnergie diffrentes, par exemple

Se dont on connat 11

comprise entre 25 KeV et 405 KeV. Dans certains cas, leur nergie nest pas suffisante pour

quils puissent traverser les couches lectroniques de latome, o elle se trouvent absorbe ; il en rsulte un effet photolectrique, donnant lieu une mission e-, accompagn le plus souvent de rayons X dus aux rayonnements des couches [2].

3.2. La dcroissance radioactive

La dcroissance radioactive de llment ne doit pas, de manire gnrale aboutir la formation dun autre lment radioactif, ceci afin de limiter les irradiations non dsires. La dcroissance radioactive doit conduire un isotope stable ou un isotope de demi vie longue et peu nergtique [1].

3.3-Energie et dure de vie

Quil sagisse dmission matrielle ou de radiation, lutilisation pratique nest rendue possible que par lnergie plus ou moins leve dont sont porteurs les particules ou les photons, cintique dans le premier cas magntique dans le second. Cette nergie se mesure en mgalectron-volt (symbole MeV) ou en kilolectron-volt (KeV). La radioactivit dun lment donn se manifeste avec une dure de vie prcise. Tous les tableaux caractristiques des radiolments donnent en ralit la demi-dure de vie, ou priode, c'est--dire la dure au bout de laquelle 50% des atomes considrs ont t actifs. Aprs une priode quivalente il ne reste plus que 25% datomes susceptibles de se manifester et ainsi de suite. Cest la croissance

21

de cette caractristique qui permet, en faisant des mesures sur une matire donne den dterminer lanciennet. Cest le cas par exemple des roches contenant du plomb. En effet les radiolments naturels subissent des transmutations successives (familles radioactives), se terminant par un lment stable, isotope du plomb, pour celle de lactinium et
208 206 207

Pb pour la famille de luranium,

Pb

Pb pur celle du thorium. Connaissant les priodes de chaque

membre dune famille et la proportion du plomb dans une roche radioactive, le calcul de lge de celle-ci est ais (cest ainsi quon a dtermin lge de la terre 3 4 milliard dannes). De mme, le radiocarbone
14

C, d aux rayons cosmiques, existant dans toute substance 50 000 ans (La priode de 14C est de 5568

vivante, il est possible de dater avec une assez grande prcision lge des squelettes ou des matires carbones dans les limites de 40 ou

ans). Il est vident que la dure relle de la radioactivit dun lment donn dpasse largement la priode indique. On tient toutefois compte de la dure de vie moyenne qui sobtient en divisant par le facteur 0.6931 (pour
32

P, par exemple, de priode 14.2 j, on a

14.2/0.6931=20.4 j).Toutefois, et notamment en ce qui concerne les mesures de protection, on considre quaprs une dure gale a 10 fois la priode, les risques de contamination deviennent presque ngligeable. Les priodes sont trs dissemblables pouvant aller de 135 secondes pour le radioaluminium 27 310000 ans pour le radiochlore 36Cl (les extrmes sont encore plus marqus pour les radiolment naturels, puisquil vont de 3 10-7 s pour le polonium 212Po aprs de 14 milliards dannes pour le thorium 232Th). Ce sont les nergies et la priode, concurremment avec le prix de revient de la fabrication et la nature des rayonnements, qui dterminent le choix dun radio-isotope pour une utilisation dtermine [2].

4. Les radiolments potentiellement utilisables en mdecine nuclaire :

Tableau I : Les radiolments potentiellement utilisables en mdecine nuclaire

Radionuclide Iode 123 Iode 131 Techntium 99m Indium 111 Thallium 201 Yttrium 90

Emission , -

Priode 13.3 h 8.02 j 6.02 h 67.3 h 3.05 j 64.1 h

Radionuclide Emission Rhnium 186 Rhnium 188 Erbium 169 Luttium 177 Carbone 11 Fluor 18 Iode 124 -, + + + ,

Priode 3.77 j 16.19 h 9.4 j 6.71 j 20.4 mn 108 mn 4.18 j

22

En mdecine nuclaire, dans le cadre dune indication diagnostique, lisotope de choix est le techntium 99m (99mTc) de part ses proprits chimiques et physique. Les isotopes de liode sont galement utiliss, iode 131 (I) et 123 (I), mais liode 131 possde une composante nergtique leve ce qui implique des contraintes de radioprotection, et liode 123 prsente des cots de production et dachat levs ; ces deux facteurs limitent leurs utilisation. Lindium 111 (In) est utilis pour marquer les vecteurs dont la biodistribution vers lorgane cible est lente ou lorsque le rapport signal/bruit augmente lentement au cours du temps. Le Thallium 201 (Tl), de part ses proprits biologiques, est essentiellement indiqu dans les scintigraphies myocardiques .Enfin les metteurs de positons se dveloppent, en relation avec laugmentation des sites de reproduction (cyclotron)et des camras TEP en France avec un isotopes prpondrant, le fluor 18 (F). Dans le domaine de radiothrapie mtabolique, liode 131 est couramment prescrit pour le traitement des cancers thyrodiens alors que lyttrium 90, le rhnium 186 et lErbium 169 sont indiqus dans les traitements des lymphomes. Enfin les isotopes du rhnium et notamment le rhnium 188, voient leur utilisation en recherche progresser. De nombreuses recherches sont en cours pour tudier dautres isotopes metteurs + ou . Les tudes se dveloppent aussi autour des chlates organomtalliques comme les chlates du techntium, yttrium ou luttium. Toutes ces mthodes font appel la chimie des traces. Cependant, mme si les proprits des isotopes et des chlates sont assimiles, la recherche pour la production de nouveaux radiopharmaceutiques ne pourra se dvelopper qu la condition de trouver un ligand sensible et spcifique dune pathologie ou dun organe.[1]

5. Le marquage au techntium
La slection dun radionuclide but diagnostic rsulte dun compromis entre ses caractristiques nuclaires (mission comprise entre 100 et 200 Kev compatible avec la gamma camra, demi vie courte, absence dmission et )et sa disponibilit (mthode de production et cot).

23

5.1-Proprits physicochimiques du techntium

Le techntium (Tc, Z = 43) est un mtal de transition artificiel dcouvert par Perrier et Sgr en 1937. Parmi les 41 isotopes actuellement identifis, tous radioactifs, allant de lisotopes 85 lisotope 115, seul le techntium 99m (99mTc) est utilis en clinique. Le techntium prsente un intrt mdical pour lanalyse scintigraphique car cest un metteur pur de 140 Kev parfaitement adapt aux -camras avec une demi vie de 6.023 heures, permettant

dadministrer aux patients une forte activit, avec pour consquence de bonnes images scintigraphiques sans risque dirradiation excessive. Ses proprits chimiques lui permettent de former facilement des complexes organiques. Lensemble de ces caractristiques fait que les molcules tchnties reprsente plus de 70% des radiopharmaceutiques utiliss en mdecine nuclaire et que le techntium 99m reste le radiolment de choix pour la synthse de nouveaux traceurs usage diagnostique.

5.2-Obtention du techntium : Le techntium est produit par un gnrateur de molybdne (99Mo/

99m

Tc).Le techntium

99m provient de la dsintgration du molybdne 99 radioactif. Il sisomrise par mission pure en techntium 99 lui-mme metteur - (E max=300 Kev) de priode longue (2.1 105 ans). Le
99m 99m

Tc est obtenu partir du molybdne par voie directe (13%) et partir du

Tc

(87%) par voie indirecte.[1]

99m

Tc

87% T1/2 : 6.02 h

99

Mo

13% 99

T1/2 : 67 h Tc
99

Ru

T1/2 : 2.5 105 ans

Fig 1 : Schma de la dsintgration du Molybdne 99

24

En pratique le techntium est obtenu par dcroissance de molybdne-99 fix sur une colonne dalumine contenue dans une petite colonne de verre. Lensemble, plac dans une protection plombe constitue le gnrateur
99

Mo/99mTc. Le molybdne polymris [99Mo7

O24]6- fortement adsorb sur la colonne changeuse dions dcrot continuellement en techntium [99mTc] et [99Tc].Cette colonne est lue par une solution strile de NaCL 0.9% qui va entraner slectivement les ions techntium pertechnate (Na sur lalumine [1].
99m 99m

Tc et

99

Tc, prsents sous forme de

TcO4 ou Na 99TcO4) faiblement fixs, alors que le molybdne est retenu

5.3-les complexes organomtallique techntis 5.3.1-Stabilit dans le complexe

La stabilit des complexes dpend de lquilibre cintique et thermodynamique, c'est--dire de la vitesse laquelle le complexe se forme et se dissocie et de lnergie ncessaire la liaison mtal-ligand. -La stabilit du complexe est augmente avec le nombre de cycle autour du mtal. -La stabilit augmente avec les systmes rigides (macrocycle). Thorie de Pearson La raction entre le mtal et ses ligands est potentiellement rversible et est caractrise par une constante de stabilit thermodynamique. La stabilit du complexe est conditionne par le nombre datomes donneurs (denticit) et la nature de latome donneur (duret). Cependant, la consistance des ligands et centres mtalliques peut tre influence par la prsence de substituants. Ainsi, la mollesse dun compos peut tre rduite par la prsence de substituants durs. Ce complexe permet dorienter le choix des atomes donneurs introduire dans le ligand en fonction du radionuclides. Ainsi, pour le techntium 99m, les atomes le plus souvent utiliss sont N, S, P, O, ou Cl et Br, et un deuxime choix est ensuite effectu en fonction du degr doxydation du mtal. Effet strique La stabilit est augmente avec la basicit des groupes donneurs augmente la basicit, il augmente lencombrement strique en reliant les atomes donneurs par la chane alkyle, gnralement un groupe thylne. Ces deux paramtres, basicit et chane alkyle, que lon rencontre dans la structure thylne-diamine permettant dobtenir des complexes stables.[1]

25

5. 3.2-Les liaisons dans le complexe

La liaison entre le mtal et le ligand fait intervenir les orbitales d , linteraction est soit de type covalent avec mise en commun des doublets lectroniques, soit ionique.

5.3.3-Le degr doxydation du complexe

Dans un complexe, le techntium peut se prsenter tous les degrs doxydation, de Tc (+VII) [Tc O] Tc (-I). Les tats doxydation qui dominent sont (+I), (+III) et (+V).Le

degr doxydation obtenu va dpendre de nombreux paramtres de la raction : nature du rducteur, nature des ligands et coligands et des conditions de raction : pH et temprature. Par exemple, le rduction du pertechnate par ltain stanneux en prsence dun ligand ttradentate type cyclam produit un complexe technti ltat (+V) alors quen prsence dun alkyl isonitrile (MBI) un complexe est form avec le techntium ltat (+I).Le

complexe Tc (+V), pH acide et temprature leve un complexe Tc (+III), pH basique et temprature leve un complexe Tc (+I). Cependant, le facteur le plus important est la nature de latome donneur. Les ligands durs stabilisent les formes acide durs du mtal
de degr doxydation levs ; linverse les ligands mous se complexent prfrentiellement au mtal de degr doxydation infrieur. Dautre part, les ligands -donneurs stabilisent les complexes avec

un degr doxydation lev alors que les complexes avec un techntium faible degr doxydation (+I +III) sont stabiliss par lintroduction de ligands -accepteurs (phosphine, isonitrile, alcne). Le 99mTc ltat doxydation (+V) donne prfrentiellement des complexes dans lesquels le mtal est li un ou deux atomes doxygne, avec quatre ou cinq sites de coordination libre permettant de se lier aux atomes donneurs des ligands. Les complexes cur dioxo se lient aux ligands durs tandis que le cur mono-oxo se lie aux ligands durs tandis que le cur mono-oxo se lie aux ligands mous [1].

5.3.4-La charge globale du complexe

La charge du complexe varie en fonction de la nature du cur ; ainsi un ligand dianionique donne avec le cur oxo un complexe cationique et avec le cur nitruro un complexe neutre. Elle varie en fonction des ligands, les ligands neutres comme les amines produisent des complexes cationiques et les ligands anioniques comme les carboxylates et les thiols. Elle dpend galement du pKa du complexe et ventuellement du pH de la solution dans le cas des complexes susceptibles dexister ltat acide/base. 26

Les complexes neutres ou chargs ngativement sont essentiellement des complexes de type [Tc=O] de structure bipyramidale .Ceux chargs positivement sont essentiellement de type [O=Tc=O] avec 4 ligands neutres ; ils sont de structures octadrique. La charge du complexe dtermine sa nature physico-chimique, elle est importante pour le devenir du complexe. Les complexes neutres lipophiles, les complexes anioniques sont basiques et les complexes cationiques acides.[1]

5.4-La synthse du complexe 5.4-1-La rduction du pertechnate

De nombreux rducteurs peuvent thoriquement tre utilis : Fe(II), Cu(II), thiols, phosphines (ligand et rducteur), borohydrure de sodium ou bisulfite de chlorure dtain (stable, soluble dans leau, peu toxique). Le choix du rducteur va dpendre de la molcule marquer. Ainsi, le borohydrure de sodium et les thiols sont prjudiciables aux peptides cycliques contenant un pont disulfure, le cuivre forme des complexes stables avec les ligands N2S2 , ltain donne par hydrolyse , essentiellement en milieu ractionnel, on ajoute parfois des agent auxiliaires :des antioxydants comme lacide ascorbique qui vite la radiolyse, des ligands intermdiaires gluconate et tartrate, ce dernier stabilisant les ions Sn2+ et les empchant de prcipiter, des stabiliseurs type tricine, des molcules doxalate ou de citrate qui favorisent la raction de complexation, et des solutions tampons [1].

5.4.2-Les voies de synthse

La chimie des complexes utilise en mdecine utilise en mdecine nuclaire est une chimie ltat de trace (10-11 10-12 M). Deux mthodes sont utilises, le marquage direct o le pertechnate est rduit en prsence du ligand et la mthode de synthse dite indirecte lorsque le ligand actif est un ligand faible. Le choix de la mthode sera fonction de des proprits thermodynamiques et cintiques du complexe actif avec pour contrainte la ncessit de complexer rapidement le techntium afin dviter son oxydation par oxydation par loxygne de lair et les interactions avec les molcules deau.

Marquage direct : complexation rapide :

TcO+Rducteur +ligand

TcXL

27

Le solvant est gnralement de leau si le ligand est hydrophile, ou un mlange alcool/eau. Le rducteur est frquemment du chlorure dtain en milieu acide ou tartrate dtain en milieu basique. On aboutit la formation de [TcO2]+ ou [TcO]3+ ltat (+V) capable de se lier 4 coordinats.

Marquage indirect : complexe intermdiaire :

Tc+L1+Red
L2/solvant

TcXL1

TcXL2

Le marquage est ralis par change de ligands en deux tapes. Au cours de la premire tape,
99m

TcO4- est rduit en prsence de L1 en excs afin de synthtiser, par une raction

rapide, un complexe peu stable. Puis dans un deuxime temps, le ligand biologiquement actif L2 est ajout ce qui donne un complexe plus stable avec une meilleure affinit mais qui se forme plus lentement. Cette technique vite la raction rapide de leau sur le techntium et donc la formation de lespce TcO2.[1]

6. Les radiotraceurs crbraux et leurs applications

6.1-La barrire hmato encphalique Le concept d'une barrire anatomique isolant chimiquement le cerveau de la circulation sanguine s'est progressivement impos au tournant du XXe sicle, lorsque diffrents physiologistes (Ehrlich, Biedl, Kraus, Lewandowsky, Goldmann) dcouvrirent que les colorants vitaux administrs par voie intraveineuse des animaux d'exprience pargnaient le tissu crbral, alors que celui-ci fixait les mmes pigments injects par voie sousarachnodienne. Par la suite, les travaux de plus en plus prcis des neuro-anatomistes dmontrrent l'existence d'une srie de feuillets sparant rigoureusement le cerveau du flux sanguin, tout au long de l'arborescence vasculaire (figure 2) : le plasma sanguin irrigant le systme nerveux central est ainsi confin l'intrieur d'un endothlium continu, dpourvu des fenestrations qu'on trouve dans d'autres organes, et dont les cellules sont troitement soudes entre elles par des jonctions serres. Cet endothlium est lui-mme enserr entre les prolongements des astrocytes qui s'appliquent tout le long de sa membrane basale, assurant la fois l'isolation et le soutien tant mcanique que mtabolique des neurones, considrs comme cellules nobles du tissu crbral. La construction est encore renforce par des 28

pricytes pris entre les couches de la membrane basale qu'ils contribuent scrter. Le cerveau et la moelle pinire baignent dans le liquide cphalo-rachidien (LCR), dont ils sont toutefois spars par le feuillet des cellules pendymaires. La barrire hmato-encphalique se relche dans certaines rgions telles que l'area postrema du quatrime ventricule (centre du vomissement), la neuro-hypophyse ou l'piphyse.

Fig 2 : Reprsentation schmatique des composants histologiques de la barrire hmato encphalique

Certaines molcules de grandes dimensions sont capables de passer travers la barrire hmato-crbrale, telles que l'insuline, la transferrine ou les lipoprotines. On a dmontr que la liaison de ces peptides des rcepteurs spcifiques prsents la surface des cellules endothliales tait suivie d'une internalisation sous la forme de vsicules de pinocytose, d'un transfert en direction de la base et d'une expulsion sur le versant crbral. Ces systmes font actuellement l'objet d'investigations visant les utiliser la manire d'un cheval de Troie pour transporter des mdicaments en direction du tissu crbral, et pourraient reprsenter un nouveau paradigme pour l'administration d'anticancreux ou d'anti-infectieux appropris au traitement des affections neurologiques. Les agents thrapeutiques candidats ce type d'administration incluent des anticorps antitumoraux, des peptides neurotropes susceptibles de stimuler la rgnrescence des tissus nerveux lss, des liposomes ou mme des constructions biochimiques associant des gnes des vecteurs cibls [4].

29

Fig 3: Diffrents types dchanges intervenant travers les cellules endothliales du systme nerveux central (SNC)
A : permation des petites molcules lipophiles ; B : arrt des molcules hydrophile ou de grande taille ; C : captage par transport facilit ; D : expulsion par transport actif ; E : endocytose mdie par des rcepteurs.

6.2-Comportement de certains traceurs crbraux

Les traceurs de perfusion crbrale les plus utiliss actuellement en SPECT (Single Photo Emission Computed Tomography ou tomographie par mission de photons) sont lHMPO (hexamthylpropylne amino oxyne) et lECD (thylne cystine dimre), tous deux marqus avec du
99m

Tc. Il sagit de composs lipophiles qui aprs leur injection intraveineuse,

traversent la barrire hmato encphalique et atteignent les neurones en quantits proportionnelles au FSCR (flux sanguin crbral). Les principales proprits

pharmacocintiques de ces deux radiotraceurs sont schmatises dans le tableau qui suit. Leurs principales diffrences sont lies leur stabilit in vitro et leur dosimtrie. Le mcanisme de leur incorporation cellulaire est identique. Tous deux pntrent dans les cellules crbrales en raison de leur caractre lipophile, et se maintiennent dans celle ci par suite de leur conversion en composs hydrophiles. Cette conversion de la lipophilie lhydrophilie est lie un processus mtabolique de D-estrification dans le cas de lECD, alors que pour lHMPAO il sagit principalement dun phnomne dinstabilit de la molcule aprs son passage travers de la membrane cellulaire, qui la rend hydrophile. Il est important de connatre la cintique dincorporation de ces traceurs dans le cerveau. Aprs son injection intraveineuse, la majeure partie du radiotraceur pntre dans le cerveau au cours du premier passage, son incorporation se compltant ensuite proportionnellement au flux sanguin (et donc lactivit neuronale) dans les deux minutes suivant linjection. Aprs une priode de lavage du traceur dans les tissus environnant qui est de 15 25 minutes pour lHMPAO et de dure plus longue pour lECD (30 45 minutes), le traceur demeure fix dans les neurones pendant un nombre dheures proportionnel au flux sanguin crbral existant au moment de 30

linjection. Les variations possibles du flux sanguin qui peuvent survenir aprs les deux ou trois minutes qui suivent linjection ne modifient pas la distribution initiale du traceur. Cette cintique permet dobtenir des images congeles de ltat du flux sanguin crbral au moment de linjection, bien que lacquisition des images ne soit faite que plus tard. Ces images, appeles images du tir ( shool image ) sont dune grande utilit dans les tudes de neuroactivation et dintervention pharmacologique [5].

Tableau II : Comportement de certains traceurs crbraux

99m

Tc-HMPAO 2 min 2-3%

99m

Tc-ECD

Captation maximale dans le cerveau Captation crbrale

2 min 4-7%

(% de la dose injecte)
Temps optimal pour la ralisation des images Excrtion biliaire Excrtion rnale

partir de 15 min post injection 50% 40%

partir de 30-45 min post injection 15% 75%

(% la 48me heure post injection)

6.3 -Caractristiques des traceurs crbraux

Les radiotraceurs utiliss pour la SPECT de neurotransmission sont appels radioligands. Les caractristiques souhaitables dun radioligand pour la SPECT sont les suivantes :

Traverser la barrire hmato encphalique intacte. Prsenter une faible absorption tissulaire non spcifique. Avoir une affinit leve pour le rcepteur ou le transporteur. Avoir une lente dissociation de ce mme rcepteur ou transporteur (temps suffisant pour lacquisition des images).

La plupart des radioligands synthtiss pour la SPECT

font partie du systme

dopaminergique. Ce systme a t le plus amplement tudi dans le but de pouvoir dvelopper des radioligands commercialement disponibles en Europe. Ceci a t la

31

consquence de limplication de ce systme neurotransmetteur dans la physiopathologiques, comme la maladie de parkinson, en psychiatrie, comme la schizophrnie.[5]

6.4-Exploration du systme nerveux central 6.4-1-La neuroimagerie fonctionnelle

Lapport doxygne et de glucose est rgul par les ncessits mtaboliques de chaque rgion crbrale, lesquelles sont dtermines par lintensit de lactivit neuronale. Le flux sanguin, de mme que le mtabolisme et lactivit des neurones, sont des paramtres impliqus aussi bien dans des conditions normales et pathologiques. Les images obtenues en SPECT de perfusion et en TEP (Tomographie par mission de positons) de perfusion ou de mtabolisme refltent indirectement lactivit neuronale de chaque rgion crbrale et elles ont t utilises pour approfondir la connaissance dans plusieurs domaines : le fonctionnement crbral normal et pathologique de plusieurs entits psychiatriques et de leurs symptmes, de mme que leffet de travaux de neuro-activation (sensorielle, motrice et cognitive) et de diffrentes thrapeutiques (pharmacologiques ou non ) sur le systmes nerveux central.[5]

6.4.2-Utilit dans le diagnostic

La SPECT peut tre utilise pour diffrencier ltat pathologique du patient lorsque les symptmes neurologique ou psychiatriques ne peuvent pas tre expliqus partir des rsultats de la neuro-imagerie structurale. Un bon exemple est constitu par lutilit de la SPECT de perfusion dans le diagnostic diffrentiel des dmences. Une diminution de la perfusion temporo-paritales du cerveau est associe la dmence postrieure, comme par exemple la dmence de type Alzheimer, alors quune perfusion diminue dans les rgions frontales ou fronto-temporales suggre une dmence du lobe frontal, telle que la maladie de pick. La SPECT a un impact sur les dcisions thrapeutiques, en diffrenciant la dmence de type Alzheimer de la pseudo-dmence dpressive, qui peut tre traite efficacement et donne lieu une dtrioration de la perfusion frontale. La grande sensibilit de la dtection de la dtrioration fonctionnelle soppose sa faible spcificit, puisque le mme modle de SPECT peut tre observ dans diffrentes pathologies. Dans certains cas les rgions crbrales recevant peu de signaux affrents deviennent hypofonctionnelles, diminuent leur mtabolisme et apparaissent comme des aires de faibles captation sur les images SPECT, ce

32

qui permet une connaissance plus approfondie de la physiopathologie des symptmes cliniques lis des lsions crbrales anatomiquement prserves [5].

6.4.3-Utilit dans la conduite thrapeutique

Linformation drive dans la SPECT de perfusion crbrale peut influencer la conduite thrapeutique. Un exemple bien document est constitu par la dtection pr-chirurigicale du foyer pileptique chez les patients prsentant des crises partielles complexes et rfractaires au traitement mdical. Une simple aire dhyperactivit dans une rgion crbrale observe sur les image de perfusion ictale tmoigne dun foyer pileptique avec de forte sensibilit et spcificit (>95%). A loppos les images de SPECT interictal peuvent montrer une hypoactivit du foyer pileptique ou savrer incapable didentifier quelques anomalies de perfusion. Le potentiel de la SPECT crbrale dans linfluence des dcisions thrapeutiques apparat clairement lors de la planification de la thrapie fibrinolytique dans linfarctus. La thrapeutique fibrinolytique dans linfarctus. Dans cette situation, les modles de SPECT crbrale de perfusion semblent prdire linfarctus et par consquent aider dans la slection des patients candidats une thrapeutique fibrinolytique. La SPECT est la technique de choix pour monitorer le dveloppement danomalies fonctionnelles dans les aires crbrales anatomiquement prserves. Elle est aussi utile dans le monitorage des changements induits par les interventions mdicales, chirurgicales ou neuroradiologiques [5].

6.4.4-Utilit dans la recherche clinique

La SPECT de perfusion crbrale contribue la connaissance de la base physiopathologique des maladies neurologiques et psychiatriques. Le potentiel de la SPECT dans la dtection des variations du flux crbral rgional dans diffrentes situations, a facilit la recherche de lactivit sensorielle, motrice et cognitive (tude de neuroactivation) et des effets centraux des drogues et des mdicaments actifs sur le systme nerveux central, aussi bien sur un cerveau normal que pathologique [5].

Conclusion

La sensibilit du cerveau ainsi que la limitation et la slectivit rigoureuse des changes ayant lieu au niveau de la barrire hmato encphalique nous a pouss affronter le besoin

33

grandissant de synthtiser des molcules marques spcifiques capables de traverser cette barrire et pouvant ainsi accomplir aussi bien leur rle diagnostique que thrapeutique. Le techntium est llment radioactif artificiel prsentant les caractristiques les plus sduisantes pour une ventuelle perfusion crbrale la fois efficace et sans risque pour le patient. Les tapes de synthse de notre molcule organique ainsi que le droulement du marquage laide du techntium seront explicitement lucids dans la partie qui suit.

34

Matriels et mthodes de synthse

35

Introduction

Cette partie sera consacre la description rigoureuse dun ct de lensemble du matriel et des dispositifs utiliss tout le long de ce projet et de lautre ct des diffrentes tapes de synthses de notre compos organique ainsi que du droulement du marquage de ce compos.

1. Appareillage et techniques

1.1-Radioprotection :

La radioprotection est un ensemble de mesures destines assurer la protection sanitaire de la population et des travailleurs. Trois rgles de protection contre toutes les sources de rayonnements sont : Sloigner de la source de rayonnements, car leur intensit diminue avec la distance Mettre un ou plusieurs crans entre la source de rayonnements et les personnes (par exemple, dans les industries nuclaires, de multiples crans protgent les travailleurs. Ce sont des murs de bton, des parois en plomb et des verres spciaux chargs en plomb) Diminuer au maximum la dure de lexposition aux rayonnements. Ces mesures de radioprotection peuvent tre compares celles que lon prend contre les ultraviolets : utilisation dune crme solaire qui agit comme un cran et limitation de lexposition au Soleil. Pour les sources radioactives mettant des rayonnements, deux autres recommandations sont ajouter aux prcdentes : Attendre, quand cela est possible, la dcroissance naturelle radioactive des lments Utiliser la dilution lorsque lon a affaire des gaz radioactifs. La prise de conscience du danger potentiel dune exposition excessive aux rayonnements ionisants a amen les autorits fixer des normes rglementaires pour les limites de doses. Ces limites correspondent un risque supplmentaire minime par rapport au risque naturel, ce qui le rend donc acceptable : -une limite de dose efficace de 1 mSv/an pour la population et de 20 mSv/an en moyenne sur 5 ans pour les personnes directement affectes aux travaux sous rayonnements ionisants (industrie nuclaire, radiologie mdicale). 36

- une limite de dose quivalente (organe) de 150 mSv pour le cristallin (il) et 500 mSv pour la peau et les mains.

1.1.1-La cellule blinde

La cellule blinde est une sorte de boite gants construite par un alliage de fer et de plomb. Elle est dote d'un cran de verre trait par du plomb et de quatre fentres permettant la manipulation l'intrieur de la cellule.

Fig 4 : cellule blinde

La cellule est aussi dote d'un systme d'aspiration, qui en maintenant la pression ngative au cours des manipulations empche la fuite de la radioactivit. L'air vacu est filtr travers un filtre de charbon actif. La cellule utilise est de type Medi2000 de MEDISYSTEM. 1.1.2 Le dosimtre

Les travailleurs pouvant tre soumis des rayonnements ionisants lors de leur activit (industries nuclaires, mdecins, radiologues) portent un dosimtre qui mesure la quantit de rayonnements auxquels ils ont t soumis. Ces dispositifs permettent de sassurer que la personne na pas reu une dose suprieure la norme tolre ou den mesurer limportance. Le systme de dosimtrie personnel utilis est de type : - Dosimtres thermo-luminescents type FLi. - Lecteur TLD.

37

1.1.3-Les briques de plomb

Les endroits o on est amen travailler en prsence de la radioactivit en dehors de la cellule blinde (prparation des CCM ou chauffage au micro-onde) sont quips avec des briques e plomb situes entre le manipulateur et la zone radioactive afin dassurer sa protection et limiter son exposition aux rayonnements ionisants.

1.4-L contrleur des mains et pieds

C'est un appareil muni de quatre dtecteurs de radioactivit. Il est assist par ordinateur. Il permet de dtecter la contamination du manipulateur par la radioactivit afin dviter que celui-ci ne contamine lenvironnement extrieur. L'appareil utilis est de type APTEC.

Fig5 : Contrleur mains et pieds

1.2 La chromatographie sur couche mince (CCM)

La chromatographie sur couche mince peut tre employe aussi bien pour suivre la progression dune raction comme pour contrler la puret dun produit organique. Dans notre cas on a eu recours ces deux applications de la CCM et on utilisera des plaques de CCM dont ladsorbant est le gel de silice.

Calcul du rapport frontal : Il sagit dun calcul rapide qui aide caractriser un produit dans un luant donn.

38

di : distance parcourue par le compos par rapport la ligne de base (les mesures sont considres partir du centre de la tche). ds : distance parcourue par le front du solvant. 1.3-Chromatographie prparative

La chromatographie prparative est utilise pour purifier assez de produit pour d'autres utilisations. Son but est d'obtenir de la substance ; c'est pourquoi, toute chelle, elle implique de collecter des fractions.

1.4-Chromatographie liquide haute performance (HPLC)

On a eu recours cette technique au des tapes de synthse dans le but de sassurer de la puret du produit et ceci en obtenant un seul pic fin. On injecte laide dune microseringue 5 25 L. lchantillon inject sera entran dans la colonne par la phase mobile sous haute pression (jusqu 300 bars). Lappareil utilis possde les caractristiques suivantes : HPLC SHIMADZU quipe de : -deux pompes -Un dgazeur -un mixeur -Un dtecteur UV-visible -Un four -Un contrleur. -La colonne utilise est de type : Shim-pack VP-ODS C18 (250*4.6 mm) de chez SHIMADZU.Elle est remplie dune phase stationnaire greffe (chane alkyle linaire 18 atomes de carbones) apolaire.La granulomtrie est de lordre de 4.6 m. -Un garde colonne : Shim-pack GVP-ODS (5*2 mm).Elle a la mme composition que celle de la colonne. -Un logiciel dexploitation : Classe Vp version 6.0

39

Fig 6 : Chromatographie liquide haute performance

1.5-rsonnance magntique nuclaire (RMN)

Cette tape a eu lieu dans La facult des sciences de Tunis. Cest une technique qui nous permet de vrifier la structure dun produit donn, elle se base sur leffet du champ magntique intense sur certains noyaux qui peuvent ds lors interagir avec les ondes radios dans le but dmettre des signaux nous permettant ainsi didentifier la structure des diffrent composs organiques ou inorganiques.

1.6-Mesure de la radioactivit 1.6-1-Compteur gamma puits

Les rayons ont une nergie si importante qu'ils quittent l'chantillon sans tre freins de faon importante. On met l'chantillon dans un cristal NaI dop au thallium qui transforme les rayons en rayons qui provoquent ensuite l'mission de trs nombreux photons. De plus, on utilise plusieurs photomultiplicateurs pour augmenter la sensibilit de dtection. Pour le comptage des faibles valeurs de radioactivit (dans les tissus et les organes) on a utilis un compteur gamma puits qu'on a talonn au pralable avec des sources standard de Cobalt 57 et Amricium 241. Le compteur est de type CANBERRA (U.S.A.) assist par ordinateur et pilot par un logiciel d'exploitation Gamma Vision NaI MCB1 (Version 2001).

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Fig 7 : Compteur gamma puits

1.6-2-Activimtre

L'activimtre est un appareil permettant la mesure de l'activit des radioisotopes ou produits radiomarqus (mdicaments radiopharmaceutiques). On L'utilis pour la mesure des grandes valeurs de radioactivit (de l'ordre de MBq). L'activimtre est de type CAPINTEC, INC. CRC_ 35R.

1.6.3-Radiochromatographe

Il est destin au contrle de qualit du marquage des produits radiopharmaceutiques. Le systme est form d'un moteur pas pas ; ce dernier est utilis pour assurer la translation linaire, vis vis du dtecteur, d'une plaque gradue sur laquelle le support chromatographique est fix. Une partie lectronique analogique est conue pour la mise en forme et le fentrage des signaux issus de la sonde. Une carte numrique est destine pour la commande du dplacement, l'acquisition et le transfert des donnes vers un microordinateur compatible PC via le port parallle. Sur cet ordinateur un logiciel est install permettant l'utilisateur de fixer les conditions d'acquisition, de tracer point par point la courbe donnant le nombre de coups par temps de pause en fonction de la position, de calculer les coefficients de rtention, de traiter et de visualiser les informations reues. Ce systme nous a permis de quantifier la puret radiochimique de la majorit des radiopharmaceutiques d'une faon fiable et faible cot. Lappareil utilis est de type mini-GITA de RayTest menu dun dtecteur cristal dNAI(Tl) Crismatec assist par ordinateur et pilot par un logiciel dexploitation GITA (version 1.5).

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Fig 8 : Radiochromatographe

2. Synthse du chlorure ferrocnique

O O OH

Fe

Cl

O Cl

+
O

CH2Cl2 (solvant) Fe

Cl

Chlorure d'oxalyle

Acide ferrocnique

Chlorure ferrocnique

Synthse :

On a attach un ballon rod une ampoule brome en prenant soin de faire une entre et une sortie dazote, le ballon doit tre enveloppe dans du papier aluminium pour viter que le chlorure ferrocnique ne se dgrade la lumire. Par la suite on a flash le montage (ballon+ampoule) laide dune flamme afin de pouvoir liminer toute trace dhumidit pouvant provoquer la dgradation du chlorure doxalyle qui est trs ractif. Une fois lhumidit est limine on procde alors verser (3 g, 2 mmole) de lacide ferrocnique solide travers un entonnoir dans 25 ml de dichloromthane (CH2 Cl2 ) quon a dj inject laide dune seringue (lors de linjection on ajoute une sortie permettant le dgagement du CO
2

). Finalement 10 ml de chlorure doxalyle (CO Cl2) sont verss

goutte goutte par le biais de lampoule brome tant donn que la raction est

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exothermique. Une agitation est maintenue la temprature de la pice pendant 2 heures. Aprs deux heures, la coloration de la solution vire du marron clair au marron trs fonc. Dans le but de suivre lavancement de la raction on ralise des CCM au fur et mesure que la raction se droule. Chaque plaque va contenir deux spots le premier correspondant au mlange ractionnel et le deuxime correspond au ractif de dpart et lluant utilis est le dichlorure de mthane. Cest ainsi quon a pu dterminer que le maximum de rendement pour cette raction est obtenu aprs environs deux heures. Extraction :

Afin dextraire le produit obtenu on commence par mettre le mlange obtenu dans un vaporateur rotatif le ballon doit tre moiti rempli, on fixe la temprature 60C et on limine ainsi les solvants en excs dont les tempratures dbullition sont 63 64 C pour le chlorure doxalyle et 40 C pour le dichloromthane cest donc le dichloromthane qui svapore en premier. La deuxime tape dextraction se fait par filtration sous vide il sagit en premier lieu de procder une filtration chaud laide du pentane chaud (temprature dbullition=30 C) dans lequel le chlorure ferrocnique est soluble et on liminera ainsi presque toutes les impurets insolubles chaud, en second lieu on aura recours une filtration froid afin de pouvoir se dbarrasser des impurets solubles froid et on rcuprera par la suite notre produit qui restera pig dans le verre fritt.

Cristallisation :

Afin de cristalliser notre produit on commence par le purger avec de lazote dans le but dliminer toute trace dair ensuite on referme le ballon laide dun bouchon et de la paraffine, on lenveloppe dans du papier aluminium et on le place dans un rfrigrateur pendant une nuit tant donn que le chlorure ferrocnique est trs sensible la lumire et la chaleur. Le lendemain on obtient de petits cristaux de couleur marron fonce quon rcupre dans des petits flacons en verre. Pour contrler la puret du produit obtenu on a eu recours une analyse par HPLC et on a obtenu un seul pic correspondant ce qui rvle la puret de notre produit.

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3. Synthse de lamide ferrocnique

O O H2N Cl N , THF NH

Fe

Fe

3 heures d'agitation

Chlorure ferrocnique

Amide ferrocnique

Synthse :

Dans un ballon sous entre et sortie dazote (celui-ci sert desscher car il ya toujours formation deau donc un risque doxydation), quon a dj flash laide dune flamme et quon a laiss refroidir on verse (250 mg, 1.006 mmol) de chlorure ferrocnique laide dun entonnoir, 10 ml de THF (anhydre, distill sous sodium et azote) qui servira de solvant,. On laisse le mlange ractionnel sous agitation et temprature ambiante et on suit la raction par CCM : *Choix de lluant : le choix doit tre fait de faon ce que lluant nentrane pas tous les produits ou ne les empche pas carrment de migrer. En dautres termes le choix est dict par la polarit de ces produits .Cest pour cette raison quon a du faire plusieurs essais avant de pouvoir faire le choix dfinitif de lluant : Aprs plusieurs essais de diffrentes proportions de lluant on a finit par opter pour une proportion (7 hexane, 3 actate dthyle) *Dpt de lchantillon : On prpare notre plaque CCM en traant lgrement au crayon une ligne de base o seront dposs nos chantillons et une ligne de fond qui ne doit pas tre dpasse par lluant. On dpose: lamide et le chlorure ferrocnique. Le dpt se fait linairement de faon ponctuelle l'aide d'une pipette capillaire usage unique. Celle-ci doit tre place perpendiculairement (pour qu'elle ne se vide pas seule) et prudemment sur la plaque (pour ne pas l'endommager). Il est parfois ncessaire (problme de concentration) de faire plusieurs dpts du mme chantillon au mme endroit. Il faut alors faire scher entre chaque dpt. *Dveloppement de la plaque : La plaque est place dans une cuve contenant (7 hexane, 3 actate dthyle). La plaque trempe dans le solvant du ct de la ligne de base, en prenant soin d'viter tout contact entre le dpt ponctuel de l'chantillon et le solvant afin que les

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produits ne se dissolvent pas dans lluant. Ce dernier migre alors par capillarit vers le haut de la plaque. On retire la plaque ds que le solvant atteint la ligne de fond. *Rvlation : Dans notre cas on a eu recours aux radiations UV. Il sagit dexposer notre plaque une source de radiation UV et les produits vont donc apparatre sous forme de tches sombres. Aprs avoir t rvles, les tches sont marques au crayon de faon pouvoir se rappeler de leur position mme aprs qu'elles se soient estompes. Lorsque la raction touche sa fin on obtient une seule tche pour le ractif et deux tches pour le produit de la raction. On a obtenu deux tches dont lune est peu sombre et elle prsente le mme Rf que celui du ractif de dpart alors que lautre apparat plus sombre et elle correspond donc notre nouveau produit. La technique de CCM nous a permis de suivre la progression de notre raction et de conclure quil faut laisser la raction pendant une heure afin de maximiser le rendement. Extraction:

On verse le produit dans une ampoule dcanter, on la rince avec leau distille pour dissoudre les traces et on ajoute du THF qui peut ne pas tre anhydre. Leau distille et le THF sont miscibles on ajoute alors lactate dthyle pour assister la formation de deux phases. On laisse le mlange se reposer dans lampoule maintenue verticalement laide dun support. Ds quon observe la formation de deux phases nettement distinctes et bien spares on rcupre alors la phase organique laquelle on rajoute lactate dthyle et on refait deux trois autres extractions dans le but dobtenir le meilleur rendement c'est-dire dextraire le maximum du produit. Par la suite la phase organique obtenue au final subit une opration de relargage qui consiste ajouter un sel le Mg SO4 qui va saturer la phase aqueuse et la phase organique en est ainsi libre. Le Mg SO4 anhydre servira alors liminer leau et la quantit ajoute nest suffisante que lorsquon commence voir une suspension cest partir de ce moment quon sait que leau a t totalement limine et quon peut ds lors passer lopration suivante qui consiste en une filtration sous vide qui servira sparer le Mg SO4. La dernire tape dextraction consiste liminer lexcs du THF et du dichloromthane aprs vaporation laide de lvaporateur rotatif. Purification :

On prpare une colonne chromatographique dont la phase stationnaire est du gel de silice (Si(OH)n) et la phase mobile (7 hexane, 3 actate dthyle). Etant donn que notre produit est solide on la mlang avec de la silice et du solvant et on a vapor. La prparation de la colonne consiste raliser une suspension de gel de silice dans lluant, remplir la colonne avec la suspension et rcuprer lexcs de lluant jusqu ce que le niveau de celui-ci atteint celui de la silice qui doit elle-mme tre entasse et ne plus descendre. Une 45

fois la colonne est prte on ouvre le robinet faible dbit et on commence la sparation dans des erlenmeyers numrots. On doit chaque fois raliser un test sur une plaque CCM pour vrifier si le produit commence tre lu. Les plaques CCM seront compares avec ceux ralises prcdemment pour pouvoir identifier le produit. Ds quon dtecte le produit on diminue le dbit et on ralise alors de nouvelles plaques CCM sur lesquelles on dpose uniquement partir des erlenmeyers o on a dtect notre produit. Dans notre cas on a obtenu 20 erlenmeyers et seulement ceux numrots de 9 20 contiennent notre produit pur. Ces erlenmeyers (9 20) seront tous rcuprs dans un ballon qui va tre concentr dans lvaporateur rotatif afin dliminer lactate dthyle. Le contrle final de la puret de notre produit est assur grce au HPLC qui nous a donn un seul pic fin confirmant la puret du produit.

4. Marquage radioactif du produit synthtis

O O NH NH

Fe

Tc O4Na Tc
CO CO CO

Amide ferrocnique

Amide marque

En travaillant sous cellule blinde, on verse dans un petit flacon en verre 1 mg de lamide ferrocnique synthtise on dissout le tout dans 150 L de DMSO et on ajoute 150 L de la solution saline de pertechnate de sodium. On prend un deuxime flacon qui va contenir exactement la mme composition sauf quon va remplacer le DMSO par le DMF. La raction ncessite un chauffage cest pour cela quon a essayer diffrent modes de chauffage (le bain dhuile, le bain de silicone) avant dopter pour le chauffage au micro-onde puisque il offre le meilleur rendement pour un minimum de temps. La solution est chauffe progressivement par intervalles successifs de 40s secondes chaque fois pour viter que le flacon nexplose dans le micro-onde. On vrifie chaque fois la coloration de la solution et on narrte le chauffage que lorsquelle noircit totalement.

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Cette opration est ralise de la mme manire avec le deuxime flacon sauf que le rendement na pas t assez satisfaisant.

5. Contrle et purification du produit marqu

*Contrle : Il sagit de raliser une CCM sur laquelle on dpose notre produit pur ainsi que le techntium libre (TcO4 Na), lluant utilis est le (7 hexane, 3 actate dthyle). Aprs migration on obtient deux tches celle qui ne sest pas trop loigne de la ligne de base correspond au techntium libre alors que celle qui a migr plus haut correspond notre molcule marque. Par la suite on aura recours au radiochromatographe qui nous confirmera plus concrtement ces rsultats : on fait alors un balayage sur tout le long de la plaque CCM et on observe lapparition de deux pics distincts le premier correspond au techntium libre et le deuxime est celui de notre molcule marque. *Purification : Afin dassurer la puret du produit marqu obtenu on ralise une chromatographie prparative de la manire suivante : On a dpos plusieurs fois le produit sur la plaque prparative afin de le concentrer ensuite on a tremp la plaque dans un solvant 100% dichloromthane dans une grande cuve lution. Aprs lution on gratte la plaque et on ralise une microcolonne ( laide dune seringue bouch avec un petit bout de coton) et en versant le produit gratt la silice sera retenue par le coton alors que le produit va descendre avec la molcule marque. Pour vrifier que la molcule marque a t presque totalement lue on effectue des mesures avec lactivimtre.Le produit obtenu sera concentr laide de lvaporateur rotatif afin dliminer le solvant en excs.

6. biodistribution
Ltape de biodistribution consiste raliser une injection de 300 L (prlev partir de 400 L contenant notre produit marque dissout dans : 20% thanol +80% solution physiologique et quelques gouttes danticoagulant : lhparine) cette injection sera reu par des rats anesthsis qui seront par la suite sacrifis et partir desquels on prlvera du sang et des organes (poumon, cur, foie, rein et cerveau) dont la radioactivit sera mesur laide du compteur gamma puit.

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Conclusion
On a synthtis notre molcule organique et on a ralis son marquage laide du techntium. Les rendements des ractions de synthse ainsi que les rsultats du marquage seront prsents dans la dernire partie.

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Rsultats et Interprtations

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Introduction

Linterprtation consistera voquer les rendements des diffrentes ractions de synthse ainsi que des rsultats du marquage.

1. Rsultats des ractions de synthse

1.1-Synthse du chlorure ferrocnique
O O OH

Fe

Cl

O Cl

+
O

CH2Cl2 (solvant) Fe

Cl

Chlorure d'oxalyle

Acide ferrocnique

Chlorure ferrocnique

La raction de synthse du chlorure ferrocnique est une raction exothermique relativement lente qui a dur peu prs 2 heures pour un rendement de 97%. La plupart des produits la raction sont de nature gazeuse (sauf le chlorure dacide) et ils sont donc facilement limins au fur et mesure que la raction se droule grce aux trois sorties.

1.2-Synthse de lamide ferrocnique

O O H2N Cl N , THF NH

Fe

Fe

3 heures d'agitation

Chlorure ferrocnique

Amide ferrocnique

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La raction de synthse de lamide ferrocnique sest droule dans de bonnes conditions et le produit pur obtenu rvle un rendement valu 98%.

2. Rsultats de la raction de marquage

Tableau III : Rendement du radiochromatogramme selon la mthode de chauffage

Solvant
DMSO DMF DMSO

Mode de chauffage
Bain dhuile Bain dhuile Micro- ondes

Rendement en %
57 50.43 68.14

2.1-Linfluence du mode de chauffage

En effet, on a constat que le mode de chauffage influence profondment le rendement de la raction du marquage. Le meilleur rendement est obtenu avec un chauffage laide du microondes. Dautant plus que le chauffage au bain dhuile est trs lent.

2.2-Linfluence du choix du solvant

Deux solvants peuvent tre utiliss pour une raction de marquage : le DMSO ou le DMF. Le choix du solvant utilis dans la raction du marquage influence remarquablement le rendement. En effet, contrairement au DMF le DMSO offre un meilleur rendement.

2.3-Rsultat du marquage
O O NH NH

Fe

Tc O4Na Tc
CO CO CO

Amide ferrocnique

Amide marque

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La raction de marquage de lamide ferrocnique laide du techntium sest droule avec succs et le radiochromatogramme a confirm que notre molcule a t effectivement marque et elle est dsormais susceptible dtre injecte, suivie et dtecte.

Conclusion
Le marquage de notre molcule a t russi avec un bon rendement en utilisant le DMSO comme solvant et le micro-ondes comme mode de chauffage.

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Conclusion Gnrale

La mdecine nuclaire apparat comme le domaine le plus sollicit, le plus dynamique et le plus vital parmi les diffrentes applications de la radioactivit. Il sagit en effet doffrir des diagnostics prcis permettant de dtecter prcocement les signes de certaines maladies (lAlzheimer), de prvoir leur volution et de ce fait pouvoir agir dans le bon sens pour tenter de retarder ou mme arrter cette volution. Lactivit thrapeutique se dveloppe essentiellement dans le traitement des cancers.

Certes, le cerveau reprsente une cible la fois exigeante (plusieurs paramtres doivent tre pris en compte) et intressante pour les radiotraceurs. Cest dans ce but quon a synthtis au cours de ce projet une nouvelle molcule organique marque laide du techntium 99m et destine une ventuelle perfusion crbrale vise diagnostique. La synthse sest droule dans de bonnes conditions et sans imposer de vritables contraintes ou de considrables difficults. Dautant plus que le rendement a t assez satisfaisant. Notre molcule a t marque avec succs ce qui nous a permis de raliser une ventuelle biodistribution et de ce fait envisager dutiliser cette molcule pour dtecter certaines pathologies crbrales.

La radiostabilit de cette nouvelle molcule ouvre de nouvelles perspectives et proposent plus de possibilits aussi bien pour ltude des aspects fonctionnels et neurochimiques du cerveau humain que pour le radiodiagnostic crbral. On peut ventuellement envisager de pousser notre tude plus loin afin de pouvoir dterminer exactement les cibles (rcepteurs) vises par la molcule marque synthtise comme on peut se baser sur cette tude pour synthtiser dautres molcules encore plus performantes.

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Rfrences Bibliographiques
[1]Valrie.A, Evaluation de nouveaux radiopharmaceutiques, Thse de doctorat luniversit joseph fourrier-GrenobleI [2]H.Piraux.Les radioisotopes et leurs applications industrielles.1962.p 3, 4, 7, 8, 9,10. [3]G.Simonnet. Les radioisotopes en recherche biologique.1994.p 3, 5. [4] T. Buclin.J. Biollaz. Regards rcents sur la barrire hmato-encphalique. Revue Mdicale Suisse n14. [5]Ana .Catafau. Exploration du systme nerveux central en mdecine nuclaire. Mdecine nuclaire-imagerie fonctionelle et mtabolisme- 2002 - vol.26 - n11.

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Annexes

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