TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL

FB9N1

"Ao del Centenario Nacimiento de Jos Mara Arguedas

UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA EAP DE FARMACIA Y BIOQUMICA CURSO:

TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL

DOCENTE:
Dr. Jess Vctor Lizano Gutirrez

PRCTICA N 04
MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS ORGANICOS DE FIJOS SEPARACION TOXICOS ORGANICOS FIJOS ALUMNO:
Quispe Lujano Marleny Soledad.

SECCIN: FB9-N1 LIMA PER 2011-II

MARLENY SOLEDAD QUISPE LUJANO

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PRACTICA N 04 MARCHA ANALITICA DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS SEPARACION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

TOXICOLOGIA ANALITICA El anlisis toxicolgico se define como el conjunto de medios tcnicos y humanos donde se identifican, cuantifican y controlan los efectos de los txicos, teniendo en cuenta las propiedades qumicas, fsicas y biolgicas de la sustancia estudiada. La atencin tiene como prioridad la identificacin del txico durante los primeros minutos de la demanda del servicio, para realizar el manejo clnico adecuado del paciente, buscando disminuir el riesgo de morir y evitar las secuelas que puedan generar las sustancias qumicas. Despus de absorcin a partir del tubo digestivo, los frmacos o venenos se transportan hacia el hgado antes de entrar a la circulacin sistmica general; por ende, el primer anlisis de un rgano interno se realiza en el hgado. IMPORTANCIA DEL ANLISIS TOXICOLGICO. El anlisis toxicolgico es de gran importancia en clnica no slo como ayuda al mdico en el diagnstico y pronstico de una intoxicacin sino en la evolucin del tratamiento, ya que con anlisis de control subsiguientes dar idea al mdico si el txico permanece en el organismo o ha desaparecido. Los laboratorios de toxicologa se han especializado al igual que las reas que cubre la Toxicologa, por lo tanto existen varias clases de laboratorio toxicolgico como son.

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TOMA DE MUESTRAS
Coleccin, conservacin y envi de muestras para anlisis toxicolgico

Las muestras para anlisis toxicolgico pueden variar de acuerdo a la naturaleza de los txicos, as para la mayora de los txicos gaseosos la muestra selectiva ser la sangre, ya que stos por inhalacin pasan a la sangre, desapareciendo de sta rpidamente por aireacin, as que en estos casos, seran inoficiosas las muestras de orina o contenido gstrico. Para que una muestra biolgica sirva para ser analizada, debe cumplir ciertas condiciones que pueden ser diferentes en cada caso, dependiendo del tipo de txico que se va a investigar. TOXICO ORGANICOS FIJOS Los txicos orgnicos fijos son txicos slidos o lquidos que forman sales y que pueden separarse de acuerdo a su solubilidad en solventes orgnicos y en el agua y a diferente pH. Se van a encontrar al ser ingeridos por el hombre en los medios biolgicos que se solubilizan en la circulacin bajo la forma de albuminados. Ahora bien estas combinaciones de sustancias orgnicas de los tejidos con los venenos metlicos estn enmascaradas y para llegar a descubrirlas, es necesario ante todo destruir la materia orgnica. El objetivo del toxicolgico en la bsqueda de los venenos minerales es, por tanto aislar de los rganos no la sustancia qumica exacta que ha provocado los accidente, sino el elemento toxico que es el principio activo de los mismos. El aislamiento de este en ciertos casos puede efectuarse de acuerdo con diversas tcnicas basadas en la volatilidad relativa. Pero en la mayor parte de los txicos minerales la separacin se efecta despus de la destruccin de la materia orgnica de forma que se simplifique el problema en el que se encontraran los elemento buscados en forma ionizada que es la que se presta a

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TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL FB9N1 su identificacin por los mtodos analticos clsicos. Su va de ingreso ms importante (BOCA).

CLASIFICACION DE TOXICOS ORGANICOS:

A. ACIDOS: Dentro de estos tenemos lo cidos dbiles como por ejemplo los

barbitricos o tambin tenemos los cidos fuertes por ejemplo los salicilatos, unos y otros extrables con disolventes orgnicos en medio acido. B. BASICOS: Extrables con disolventes orgnicos en medio bsico como los alcaloides, antidepresivos triciclicos C. .NEUTRO: Extrables con disolventes orgnicos en medio acido o bsico SEPARACION Y EXTRACION Cuando los solutos se distribuyen libremente entre dos solventes inmiscibles se establece una diferencia entre las relaciones de concentracin en el equilibrio. La Distribucin de un soluto entre dos solventes inmiscibles est gobernada por la "Ley de Distribucin". Supngase que la especie del soluto A se deja distribuir entre una fase acuosa y otra orgnica. La relacin de concentraciones de A entre las fases acuosa y orgnica ser constante e independiente de la cantidad total de A. Para un sistema en donde no se consideran equilibrios alternos la cantidad que queda remanente despus de la extraccin (xn) se representa por la ecuacin: xn = gramos remanentes del soluto x Vw = mL de fase acuosa Vo = mL de Fase Orgnica K = Constante de Reparto a = gramos iniciales del soluto x n = nmero consecutivo de extracciones (Nota: esta ecuacin es vlida solamente si las porciones son iguales. MARLENY SOLEDAD QUISPE LUJANO Donde K es el coeficiente de Reparto K = [Ao]/[Aw]

TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL EXTRACION SLIDO-LQUIDO

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Para obtener un soluto lo ms puro posible, a continuacin de la extraccin se aade un paso ms de separacin, generalmente en forma de rectificacin, en el que el disolvente se separa del soluto. El disolvente se puede reciclar, estando as disponible de nuevo para la extraccin. Un ejemplo de la vida cotidiana es la preparacin de la infusin de caf. En este proceso, la sustancia aromtica del caf (soluto) se extrae con agua (disolvente) del caf molido (material de extraccin, formado por la fase portadora slida y el soluto). En el caso ideal se obtiene la infusin de caf (disolvente con la sustancia aromtica disuelta) y en el filtro de la cafetera queda el caf molido totalmente lixiviado (fase portadora slida). En la prctica, al trmino de la extraccin la fase portadora slida siempre contendr todava una parte del soluto en el slido. Adems, una parte del disolvente permanecer tambin ligada de forma adsorbato a la fase portadora slida Con la extraccin slido-lquido se puede extraer componentes solubles de slidos con ayuda de un disolvente. Campos de aplicacin de esta operacin bsica son, por ejemplo, la obtencin de aceite de frutos oleaginosos o la lixiviacin de minerales.

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RECOMENDACIN: Para conseguir una extraccin lo ms rpida y completa posible del slido, se tiene que ofrecer al disolvente superficies de intercambio grandes y recorridos de difusin cortos. Esto se puede lograr triturando el slido a extraer. Un tamao de grano demasiado pequeo puede causar, por el contrario, apelmazamiento que dificulta el paso del disolvente. En la forma ms sencilla de esta operacin bsica se mezclan bien el material de extraccin y el disolvente. A continuacin se separa y se regenera el disolvente junto con el soluto en l disuelto. El material de extraccin puede estar presente tambin como lecho fijo, que es atravesado por el disolvente. En otra forma de aplicacin, el material de extraccin percola a travs del disolvente. La regeneracin del disolvente consiste, generalmente, en un proceso de evaporacin / destilacin. En l se elimina parte del disolvente y queda una solucin concentrada de extracto como producto. El disolvente se condensa y se puede reutilizar.

EXTRACCIN LQUIDO-LIQUIDO En la extraccin lquido-lquido se separa un componente de una mezcla lquida, con ayuda de un disolvente, que preferentemente lo disuelve. Campos de aplicacin son, por ejemplo, la separacin de vitaminas de soluciones acuosas o la separacin de aromticos de fracciones de petrleo.

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Extraccin ideal: al mezclar la mezcla de partida (A+C) y el disolvente (B), el soluto (A) pasa al disolvente. Tras la decantacin se obtienen dos fases: fase extracto (A+B) y el lquido portador (C). En el caso ms sencillo participan tres componentes: El soluto A El disolvente B El lquido portador C

El soluto A forma parte de la mezcla de partida junto con el lquido portador C (alimento). Si la mezcla de partida y el disolvente B se mezclan entre s, el soluto A pasa al disolvente B. Ha de cumplirse la condicin de que la solubilidad del componente A en el disolvente B sea mayor que la del lquido portador C. A su vez, el lquido portador C debera ser prcticamente insoluble en el disolvente B. Esquema de la extraccin; antes de la extraccin (izquierda) y despus de la extraccin (derecha): Disolvente, Material de extraccin (fase portadora slida con soluto), Soluto, Fase portadora slida lixiviada, Disolvente con el soluto de transicin en l disuelto.

METODOS DE EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS a) CON DISOLVENTE POLAR (ETANOL): TECNICA DE STAS-OTTO b) CON DISOLVENTES APOLAR: ETER ETILICO, CLORFORMO DICLOROMETANO. DIRECTA: solo aplicable a muestra biolgicas limpias como la orina. Previa purificacin de la muestra (eliminacin de protenas).

OTROS MTODOS DE AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE TOXICOS ORGANICOS Y FIJOS

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TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL FB9N1 Existen otros mtodos de aislamiento e identificacin de txicos organicos fijo, siendo los ms importantes las mencionadas anteriormente. Cada uno de ellos tendr una aplicacin ptima segn el txico que se quiera investigar y la matriz desde la que se quiera separar. Pero tambin tenemos los siguientes mtodos: METODO DE ELECTRODIALISIS: se basa en la propiedad que tiene la corriente elctrica de descomponer las sales de los toxicos organicos, yendo la base hacia el polo negativo y el resto al polo positivo. COLUMNAS CON RELLENO DE RESINA: Las drogas orgnicas son absorbidas por la resina luego son fluidos con solventes apropiados.

VARIABLES TOXICOLGICAS

- Edad: los nios son ms susceptibles a la toxicidad por exposicin a ciertos niveles de metales que los adultos. Los ancianos tienen sus mecanismos de detoxificacin deteriorados.

- Dieta: los factores dietticos influyen en el nivel de absorcin en el tracto gastrointestinal. Por ejemplo, existe una relacin inversa entre el contenido proteico de la dieta y la toxicidad de Cadmio y Plomo probablemente porque aumenta la absorcin de Hierro.

- Hbitos: el tabaquismo y el alcoholismo influyen indirectamente en la toxicidad. El humo del cigarrillo contiene algunos txicos metlicos como Cadmio que interviene en el dao pulmonar. El alcohol reduce, al alterar los hbitos alimenticios, el ingreso de minerales esenciales como el Calcio, cuyo dficit lleva a una mayor toxicidad metlica por aumento de la absorcin de Cadmio y Plomo.

Estado inmune del individuo: cobra importancia en el caso de metales que producen reacciones de hipersensibilidad como Mercurio, Oro, Platino, Berilio, Cromo y Nquel.

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Forma qumica del metal: es un factor muy importante, no slo para la absorcin pulmonar y gastrointestinal, sino tambin en trminos de distribucin corporal y efectos txicos. Por ejemplo, los alquil-compuestos son liposolubles y atraviesan las membranas biolgicas. Slo algunos son desalquilados y transformados en sales inorgnicas. Los metales afines por tejido seo como el Plomo, permanecen retenidos largo tiempo y tienden a acumularse con la edad. Otros metales son retenidos en los tejidos a causa se la afinidad por protenas intracelulares, como el Cadmio unido a metalotionenas

MECANISMOS DE DETOXIFICACIN

Algunas clulas poseen mecanismos de proteccin, tales como formacin de complejos proteicos que permiten la acumulacin intracelular de metales potencialmente txicos sin causar injuria celular. Estos complejos metal-protena se presentan por exposicin a Plomo, Bismuto y mezclas de Mercurio / Selenio. Las metalotionenas forman complejos con Cadmio, Zinc, Cobre u otros metales y la ferritina y hemosiderina son complejos de Hierro-protena intracelular.

TIPOS DE MUESTRAS: Sangre y orina reflejan exposiciones recientes y se

correlacionan muy bien con efectos agudos. Una excepcin es el cadmio en orina: su presencia en alta cantidad en orina implica un dao renal relacionado con la acumulacin de Cd en el rin. Los pelos pueden usarse en asociacin a variaciones en la exposicin a los metales durante largo tiempo. Los anlisis pueden realizarse sobre distintos segmentos del cabello de modo tal que el contenido del metal del nuevo crecimiento puede compararse con exposiciones pasadas. Se debe tener la precaucin de lavar el pelo previamente al anlisis para remover el depsito de metal por la contaminacin externa. Otro tipo importante de muestras es el agua. Las aguas de bebidas, libres de materia en suspensin, pueden ser analizadas directamente mientras que, las que presentan materia orgnica requieren un procedimiento para solubilizar el material suspendido. Los barros, MARLENY SOLEDAD QUISPE LUJANO

TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL FB9N1 sedimentos y otros tipos de muestras slidas pueden ser analizadas despus de un tratamiento adecuado.

TRATAMIENTO PRELIMINAR DE LAS MUESTRAS

Los metales pesados se encuentran frecuentemente en el material a analizar formando complejos con molculas orgnicas y deben ser liberados de los mismos previamente a su cuantificacin. El tratamiento a efectuar depende de varios factores: Material biolgico ( orina, suero, sangre, vsceras) Metal en cuestin (volatilidad y uniones que forma el metal en el organismo) Procedimiento utilizado para la determinacin final (colorimtrico, absorcin atmica, activacin neutrnica). Entre los mtodos ms frecuentemente empleados para el tratamiento preliminar de las muestras, pueden mencionarse: Destruccin oxidativa por va hmeda de la materia orgnica empleando cido ntrico o mezclas de c. ntrico-agua oxigenada, c. Ntrico- c. Sulfrico, c. ntrico- c. Sulfrico- c. Perclrico, o bien permanganato de potasio- c. Clorhdrico. Destruccin de materia orgnica por va seca. Formacin de complejos y extraccin con solventes. Precipitacin de las protenas y determinacin de los metales en el sobrenadante. Tcnicas de volatilizacin (arsnico como AsH3 , antimonio como SbH3 y mercurio como vapor del elemento). A veces pueden efectuarse combinaciones entre los distintos mtodos, de manera de obtener una muestra apropiada para las posteriores determinaciones. El mtodo ms empleado y sensible para la determinacin de metales es la espectrometra de absorcin atmica. Dicho mtodo se fundamenta en la atomizacin de una solucin de MARLENY SOLEDAD QUISPE LUJANO

TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL FB9N1 la muestra a altas temperaturas para luego pasar a travs del camino de la luz emitida por una lmpara de ctodo hueco es del metal a investigar. Los tomos del metal presentes en la muestra, que se encuentran en su estado fundamental, absorben la luz y son detectados por un espectrofotmetro.

PROTOCOLO DE ANALISIS TOXICOLOGICO

I.- DESCRIPCION DE LA MUESTRA PROBLEMA: Muestra Problema: cerebro - Envase: Tipo de Material: Vidrio. Forma: alargada. Color: Transparente. Caractersticas Particulares del envase: - Presenta en el cuerpo una ranura en la parte inferior y superior. Tapa: Material: Metal. Forma: Redonda. Caractersticas Particulares de la Tapa: - Presenta en la parte superior una ranura en forma circular.. - Presenta una lnea en el centro. Rotulado: Nombre de la autoridad toxicolgico Nombre del medico legista : Dr. Jess Lizano : Dr. Espinal karen

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TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL Nombre qumico quien tomo la muestra : Dr. Alvarado carlos Fecha de Toma de muestra Fecha de envo de la muestra Peso del frasco vacio Peso del frasco vacio + M.P. Anlisis solicitado Hora de la toma de muestra La muestra Presenta: Cantidad de la Muestra La cantidad de Muestra tomada y pesada fue de 250ml. II.- ANALISIS ORGANOLEPTICO: Conservacin: En buen estado. Color: rosado Estado: espeso Aspecto: consistente 2.-MATERIALES : :

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: 09 de Setiembre de 2011 : 09 de Setiembre de 2011

: Anlisis completo : 10:30 a.m de Descripcin de la Muestra:

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3.-TECNICA OPERATORIA

Toxicos organicos fijos PROCEDIMIENTO DESTILACION. Preparar un equipo de destilacion TCNICA OPERATORIA MTODO DE CURRY A.S:

Agregar a un matras 10g de muestra homogenato de viscera + 100ml de cristal de sodio al 10 %+ 20 ml de NaoH 10% homogenizar + 12mL de H2SO4 maria por 15 min

Filtrar en caliente Evaporar hasta liquido ciruposo (consistencia a glicerina) separacion de proteinas y los toxicos.

10 ml de ter Agitar x 4 mint

Dejar reposar hasta QUISPE LUJANO MARLENY SOLEDAD formar dos fases

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a) Txicos

Ac. Fuertes Ac. Dbiles Ac. Neutros

b) Txicos alcalinos NH4OH p H 9.5 50m L ter etlico Agitar x4 separar TOXICO ACIDO DEBIL NEUTRO

NaOH 2.5%

TOXICO ACIDO DEBIL NEUTRO separar Agitar y

a) 50m l CO3HNa50% Agitar por 3 y Separar

ter bato

CO3HNa

HCl pH3 50ml eter Agitar y separar TOXICO ACIDO FUERTE

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ACIDO FUERTE Evaporar ter

R1 toxico acido fuerte

ACIDO DEBIL NEUTRO

ter

evaporar

R3 toxico acido neutro

Cl pH3 ter 50 mL separar ACIDO DEBIL Evaporar ter

R2 toxico acido dbil MARLENY SOLEDAD QUISPE LUJANO

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REACCIONES DE LA PRCTICA

+ NaOH

cido tartarico + NaOH

Tartrato de sodio

+ H 2O

NH4OH +

HCl

NH4Cl + H2O

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RESUMEN

Sol. acuosa

500mL eter etilico Agitar + Agitar x 4-5

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Toxicos Neutros Evaporar

R3
Toxicos neutros

Plaguicidas Cardiotnicos Carbonatos sulfas

A
Eter

Toxicos ac. Dbil

5 mL NaOH 2.5% Agitar x 4

Eter

Gts HCl [ ] pH 3 + 50mL eter etilico Agitar x 4 Eliminar Evaporar 40C

Barbitricos doriden

R2
Toxicos acidos debiles

Bicarbonato

Gts HCl [ ] pH 3 + 50mL eter etilico Agitar x 4

Eliminar Evaporar

Ac. Acetil saliclico 2-4 dicloro fenol Ac. P amino acetico

R4
Residuos toxicos de ac. Fuertes

Toxicos bsicos

NH4OH pH95 + 50mL eter etilico

Eliminar Evaporar 40C

R
Toxicos basicos

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Sistema para extraccin lquido-lquido

Destilacin fraccionada

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CONCLUSION La extraccin de txicos orgnicos fijos se realiza por mtodos donde la solucin est relacionado con el medio que se trabaj, pudiendo ser medio polar o apolar. El PH y la solubilidad son una variante donde se puede obtener los productos que se desea. RECOMENDACIONES: Se debe fraccionar el extracto antes de su anlisis debido a la gran variedad de txicos orgnicos conocidos. IMPORTANCIA DE LA PRCTICA La importancia de la prctica se basa en la toxicologa analtica. Identifica la sustancia toxicas a travs del anlisis de los lquidos corporales, el contenido estomacal, los excrementos, la piel o envases dudosos.

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CUESTIONARIO
1) Txicos que se pueden hallar en el residuo cido

cidos:
Los cidos, las bases, o las mezclas que tienen un pH menor o igual a 2 o mayor o igual a 12.5, son considerados corrosivos (para una descripcin completa de los residuos corrosivos, vea el 40 CFR 261.22). Todos los materiales y las soluciones corrosivas tienen el cdigo de residuo D002. Los siguientes son algunos de los corrosivos comnmente utilizados: cido actico cido sulfrico fumante de hidrxido amnico cido crmico cido bromhdrico cido clorhdrico cido fluorhdrico cido ntrico cido perclrico cido fosfrico Hidrxido de potasio Hidrxido de sodio cido sulfrico

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TRATAMIENTO DE RESIDUO ACIDOS

Bateras de cido y Plomo: Las bateras de cido y plomo deben ser documentadas en el formulario de notificacin slo si no son recicladas. Las bateras usadas de cido y plomo que son recicladas no tienen que ser contadas para determinar la cantidad de residuos que genera al mes. Requisitos especiales aplican si recicle sus bateras en su propio establecimiento (vea el 40 CFR Parte 266). Escoria de plomo D008 cidos usados D002 Bateras de cido y plomo D008

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2) Txicos que se pueden hallar en el residuo alcalino

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3) Precauciones en la desproteinizacin y separacin en residuos

RESIDUO TOXICOS:

Referentes al uso de envases de polietileno para el almacenamiento de residuos Bromoformo No utilizar. Cloroformo Sulfuro de Carbono cido Butrico No utilizar en perodos de almacenaje superior a un mes. cido Benzico Bromo Bromobenceno Diclorobencenos Cloruro de amilo No utilizar con el producto a temperaturas superiores a 40 teres C. Haluros de cido Nitrobenceno Percloroetileno Tricloroetano Tricloroetileno Para ciertos disolventes orgnicos, como cloroformo, bromoformo, dietilter, etc, consultar la Ficha de Datos de Seguridad, recomendndose reutilizar los envases originales que los han contenido.

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BIBLIOGRAFIA
MEDICINA LEGAL Y TOXICOLOGIA. Autor(es): Gisbert ,Juan Antonio Edicin: 5 ed. Ao de Publicacin: 2001 - Barcelona

http://www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/toxicos_volatiles.ht ml http://www.ucm.es/info/medlegal/departamento/12octubre/clases/06toxicolo gia.pdf http://www.geocities.com/academiaquimicaorg/practica2-

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