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EXTRACCIN Y CROMATOGRAFA
ANGIE LORENA PACHECO ORTIZ 411533 YERSON SAHIR ZAMBRANO JIMENEZ 311538
INFORME # 1
EXTRACCIN Y CROMATOGRAFA
INTRODUCCIN En el siguiente informe se vern los resultados obtenidos en la prctica de cromatografa, realizada en el laboratorio con hojas de espinaca. La cromatografa, es la tcnica de anlisis qumico utilizada para separar sustancias puras de mezclas complejas. Una de las caractersticas fundamentales en las cromatografas es que los componentes de la mezcla que queremos separar, identificar, cuantificar, se separan cuando sus velocidades de migracin son distintas. La clorofila es un pigmento de las plantas, que les proporciona el color verde y que absorbe la luz necesaria para la fotosntesis. La clorofila absorbe principalmente la luz violeta roja y azul y refleja la luz verde. La abundancia de clorofila en hojas y su ocasional presencia en otros tejidos vegetales es la causa que esas partes de las plantas aparezcan verdes, pero en algunas hojas la clorofila es enmascarada por otros pigmentos. La extraccin y reconocimiento de estos pigmentos es interesante para el estudio y conocimiento de sus propiedades.
OBJETIVO GENERAL
Aprender las tcnicas de separacin y purificacin de compuestos y su identificacin posterior. Separacin de pigmentos como clorofilas, carotenos y xantofilas en plantas usando la cromatografa de capa fina
MATERIALES
Cromatoplaca
Capilares
Mortero
Lana de vidrio
Probeta de 50 ml
Embudo de separacin
Papel filtro
Vaso de precipitados
Bao mara
RESULTADOS Y DATOS
Al filtrar en el embudo con la lana de vidrio y al recoger en el vaso de precipitados, se puede observar que se separan las capas, quedando una gruesa debajo de color verde fuerte y una delgada arriba de color verde claro. Luego de haber vertido el filtrado en un embudo de separacin y haber agregado los 30 ml de agua destilada, las dos sustancias que inicialmente se tenan se separan aun mas, marcando aun ms la tonalidad del color en cada capa. Se agregan otros 30 ml de agua, ya que las capas no estaban totalmente separadas. De esta forma la segunda capa se torna ms clara. En la capa verde gruesa, contena ter de petrleo y pigmentos de la planta. Al agregar el sulfato de sodio anhidro, este encapsula el agua presente en la mezcla, quedando solo el ter de petrleo con los pigmentos de la planta. Se coloca la sustancia final (ter de petrleo y los pigmentos de la planta en la cromatoplaca y se realiza el barrido de las sustancias en la cubeta para la cromatografa.
IMAGEN DEL CROMATOGRAMA Compuesto Verde Gris Amarillo Color Clorofila Feofitina Xantifila
X1 X2 X3 X4
Rf DE CADA UNO DE LOS COMPUESTOS QUE SE SEPARAN DE LA MUESTRA. Empleando la formula: Rf = distancia recorrida por el soluto/distancia recorrida por el solvente Obtenemos la distancia recorridas por cada solvente.
Rf1 Rf2 Rf3 Rf4
ESTRUCTURAS Beta-caroteno
Licopeno
Clorofila
ANALISIS DE RESULTADOS
Luego de haber sacado la placa cromatografica de la cubeta, resaltaban bastante tres colores, verde, gris y amarillo. Pudimos observar que en otras placas se podan observar ms cantidad de colores, esto pudo haber pasado porque colocamos muy poca sustancia en la placa cromatografica.
CUESTIONARIO 1. Qu importancia tienen los pigmentos de la planta? Los pigmentos son compuestos qumicos que slo reflejan ciertas longitudes de onda de la luz visible. Esto hace que aparezca "colorido". Las flores, los corales, y la piel, incluso los animales contienen pigmentos que les dan sus colores. Ms importante que su reflexin de la luz es la capacidad de los pigmentos para absorber ciertas longitudes de onda. Debido a que interacta con la luz para absorber ciertas longitudes de onda slo, los pigmentos son tiles para las plantas y otros auttrofos - organismos que hacen su propio alimento mediante la fotosntesis. En las plantas, algas y cianobacterias, los pigmentos son los medios por los cuales se capta la energa solar para la fotosntesis. Sin embargo, puesto que cada pigmento reacciona con slo una estrecha gama del espectro, hay generalmente una necesidad
de producir varios tipos de pigmentos, cada uno de un color diferente, para capturar ms de la energa solar. Los pigmentos que dan color a las plantas se encuentran en el interior de unos orgnulos celulares llamados cromatforos y vacuolas. Los cromatforos son orgnulos de forma ovoide rodeados por una doble membrana que almacenan pigmentos liposolubles. Pueden ser de distintos tipos:
Cloroplastos: Presentes en las hojas verdes y responsables de la fotosntesis. Contienen varios tipos de pigmentos: clorofilas, de color verde; carotenos, de color rojoanaranjado, y xantofilas, de color amarillo. Cromatforos no fotosintticos: Contienen carotenos y xantofilas, responsables de los colores amarillo, naranja y rojo de muchas flores y frutos. Leucoplastos: Son incoloros, aunque pueden almacenar sustancias, como el almidn, que les dan una coloracin blanquecina. Aparecen en hojas variegadas y en rganos de reserva como races o rizomas, adems de en plantas parsitas.
Las vacuolas son orgnulos rodeados por una membrana simple que ocupan la prctica totalidad de la clula. Son abundantes en los ptalos de las flores y contienen pigmentos hidrosolubles de dos tipos: antocianinas, que dan una coloracin azul, violeta o rojo purpreo, y antoxantinas, que originan colores amarillo plido.
2. Qu clase de compuestos polares extrae el etanol? Con el etanol se extraen los compuestos polares y con el ter se extraer loscomponentes no polares debido a que: componentes polares (etanol) disuelven compuestos polares (aminocidos por ejemplo) y componentes no polares (ter) disuelven compuestos no polares (carotenos y vitaminas liposolubles). 3. Si se necesita evaporar un solvente que contenga un punto de ebullicin mayor que el del agua. Qu medio de calentamiento utilizara? Otro mtodo de separacin conocido es la destilacin, la cual consiste en apartar los componentes de una mezcla basndose en las diferencias en los puntos de ebullicin de dichos componentes. Un compuesto de punto de ebullicin bajo se considera voltil, es decir, que puede convertirse ms fcilmente en vapor, en relacin con otros componentes de punto de ebullicin mayor. Esto queda claro cuando se desea separar el alcohol del agua.
El alcohol es ms voltil que el agua (su punto de ebullicin es cercano a los 78C, mientras que el de agua es ms alto, de 100C); por lo tanto, al destilar una mezcla de partes iguales de estos lquidos, como el alcohol es ms voltil que el agua, al calentar la mezcla se volatilizar (evaporar) ms rpido que el agua, y podr ser recuperado en otro recipiente. Despus de que la temperatura aumente a 100 grados, se detiene el proceso y el agua queda en el recipiente inicial de la mezcla. 4. Explique brevemente otras clases de cromatografa.
Tipos Cromatografa en papel Cromatografa en capa fina Cromatografa de gases Cromatografa lquida en fase inversa Cromatografa lquida en fase normal Cromatografa lquida de intercambio inico Cromatografa lquida de exclusin Cromatografa lquida de absorcin Cromatografa de fluidos supercrticos
Fase estacionaria Lquido (molculas de agua contenidas en la celulosa del papel) Slido Slido o lquido Slido o lquido (menos polar) Slido o lquido (polar) Slido
Lquido Gas Lquido (polar) Lquido (menos polar) Lquido (polar) Lquido
Slido
Lquido
Slido
Lquido
Slido
5. Cuando las separaciones de compuestos en la cromatoplaca no son coloreadas. Qu medios utilizara para reconocer las manchas? Se podran utilizar mtodos como la luz ultravioleta para observar la placa, utilizar reveladores, por ejemplo, vapores de yodo como un reactivo inespecfico o emplear reactivos especficos para desarrollar coloracin en las manchas 6. Hay algunos compuestos que absorben la luz ultravioleta. Cmo se podran identificar en la cromatoplaca? Se podra identificar adicionando un colorante fluorescente al adsorbente, de forma que la placa sea fluorescente en todas partes excepto donde haya una mancha correspondiente a un compuesto orgnico.
CONCLUSIONES
Se aprendieron las tcnicas de separacin de compuestos. Se realizo la separacin de los pigmentos que contiene la espinaca, usando la tcnica de cromatografa en capa fina. De acuerdo a los colores que al final de la cromatografa, resaltaban en la cromatoplaca podemos decir que en la muestra de espinaca estaba presente clorofila, feofitina, y xantifila, que corresponde a los colores verde, gris y amarillo respectivamente.