LABORATORIO QUMICA ANALTICA E INSTRUMENTAL 502503 GUIA No 6.1-Espectrofotometra determinacin de hierro I. EL PROBLEMA.

. Determinar la concentracin de hierro por medio de un mtodo espectrofotomtrico (complejo hierro Orto fenantrolina) II. FUNDAMENTO TEORICO. Uno de los primeros anlisis colorimtricos fue el mtodo Nessler para el amoniaco en 1856, Nessler observ que cuando se aada una solucin alcalina de HgI2 a una disolucin diluida de amoniaco, se produca un coloide amarillo o pardo rojizo, dependiendo de la concentracin de amoniaco. Para determinar la concentracin, se utiliz la comparacin del color de la muestra con la de una serie de patrones , los colores se comparaban mirando los tubos que los contena desde arriba, y estos estaban colocados en una gradilla con base iluminada. La colorimetra en que una muestra absorbe luz visible, es una ejemplo del anlisis espectrofotomtrico. A finales del siglo XIX la espectrofotometra se limitaba a ala absorcin, emisin y dispersin de la radiacin electromagntica visible, ultravioleta e infrarroja. Durante el siglo XX, el mtodo se fue ampliando para incluir otras formas de radiacin electromagntica como los rayos X, las microondas y las ondas de radio, as como partculas de energa tales como los electrones y los iones. Espectrofotometra se refiere al uso de la luz para medir las concentraciones de sustancias qumicas; cuando una molcula absorbe un fotn para de un estado basal o fundamental, a un estado excitado (la energa de la molcula se incrementa), as, la intensidad de los fotones que pasan a travs de una muestra que contiene el analito, se atena debido a la absorcin, la medida de esta atenuacin, que recibe el nombre de absorbancia, es la que sirve de seal. III. BSQUEDA DE INFORMACIN.: Establezca el fundamento terico del mtodo de determinacin de hierro por medio de la formacin de un complejo coloreado con Orto-fenantrolina Cual es la funcin de la hidroxilamina en el mtodo de determinacin de hierro por formacin de complejos con O-fenantrolina. Elabore la ficha tcnica de los siguientes reactivos: O-fenatrolina, Clorhidrato de hidroxilamina, acetato de sodio, cido actico.

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IV. MATERIALES Y REACTIVOS. Materiales por grupo de laboratorio Cuatro balones aforados de 100ml Dos vaso de precipitados de 150ml Un frasco lavador Un mortero con mano Pipeta de 1,0ml

Material y reactivos generales. (volmenes calculados para 10 grupos de laboratorio). Solucin de orto-fenantrolina al 0,1% en envase ambar (1 litro) Solucin patrn de hierro (0,04 mgFe/mL (0,2807 g Fe(NH4)2(SO4)2 . 6H2O en 1L)) Solucin de clorhidrato de hidroxilamina al 10% (100ml) Solucin buffer 0,1 M de acetato-actico pH 3,5 (1 L) Solucin problema Espectrofotmetro Celdas de cuarzo Tres buretas de 25ml Tres pinzas para bureta Tres pipetas aforadas de 10ml Tres pipetas aforadas de 1ml 12 vasos de precipitados de 150ml Cinta de enmascarar Papel secante o de cocina, Propipetas.

V. PROCEDIMIENTO. 1. Espectro de absorcin de varias sustancias: En vasos de precipitados de 100ml coloque de 20ml a 50ml de solucin de las siguientes sustancias y segn las indicaciones del profesor, tmeles el espectro de absorcin en el rango de longitud de onda deseado. Observe las partes del espectrofotmetro y los espectros. fenolftaleina en medio bsico fenolftaleina en medio neutro verde de bromocresol en medio bsico verde de bromo cresol en medio cido gelatina o BSA permanganato de potasio Complejo hierro- Orto-fenantrolina

2. Preparacin de la curva de calibracin para la determinacin de hierro: En matraces aforados de 100ml adicionar las cantidades correspondientes de los reactivos a utilizar segn la tabla No 1, despus completar con agua destilada hasta el volumen correspondiente, homogenizar y dejar reposar por 5 minutos para el desarrollo del color.

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Tubo Blanco 1 2 3 4 5 6 7 8 9

PPM (Fe) 0 0,6 1 2 4 6 8 10 14 20

ml Sln patrn ( Fe) 0,0 1,5 2,5 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 35,0 50,0

ml Hidroxilamina 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 TABLA No 1.

ml Buffer pH 3,5 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10

ml O-fenantrolina 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10

Lavar muy bien las celdas de medicin y para calibrar el equipo al 100% de transmitancia coloque la longitud de onda en a cual se va a medir la absorbancia (510nm) y se usa como referencia el blanco de la reaccin. Cuide que sobre las paredes de la celda no queden huellas digitales, manchas, rayones muy fuertes, o otros que impidan el paso adecuado de la luz. Mida la absorbancia de las soluciones patrn de hierro a 510 nm, entre cada medida lave la celda con suficiente agua destilada y limpie cuidadosamente las paredes externas. Haga una grfica de absorbancia vs concentracin de hierro en ppm y linealcela. 3. Determinacin de la cantidad de Fe presente en una gragea de sulfato ferroso: (solucin problema) Pese una gragea de sulfato ferroso y luego colquela en un mortero con mano, adicione 20ml de agua destilada y realice la extraccin. Filtre la solucin obtenida a travs del papel de filtro y lave el residuo con 30 ml de agua destilada. Transvase el filtrado a un baln aforado de 100ml ( solucin No 1). De la solucin anterior tome 1,0ml y colquelo en un baln aforado de100ml, adicione luego 1ml de hidroxilamina, 10,0ml de solucin buffer y 10,0 ml de orto-fenantrolina; lleve a volumen con agua destilada y deje en reposo por 15min.Lee la absorbancia de la solucin a 510nm. Calule la concentracin de sulfato ferroso y la concentracin de hierro elemental, por gragea. VI. TABLA DE DATOS. Disee una tabla de datos adecuada, la cual debe estar en el cuaderno de laboratorio antes de iniciar la prctica. VII. PARA EL ANLISIS DE LA PRACTICA. Datos y observaciones de los experimentos realizados Curva de calibracin de absorbancia (510nm) vs concentracin de hierro (ppm) Calculo de la concentracin de hierro de la solucin problema Analice las observaciones y resultados obtenidos

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VIII. BIBLIOGRAFIA. Skoog D.A, West D.M. 2001. Qumica analtica, sptima edicin, Mc Graw Hill. Mxico. Skoog D.A, Holler J.F, Nieman T.A.2001. Principios de anlisis instrumental, quinta edicin, Mc Graw Hill/ Interamericana. Willar H, Merritt L, Dean J y Settle F. 1991. Mtodos instrumentales de anlisis, Grupo Editorial Iberoamrica, Mxico. Official methods of analysis of AOAC International editado por Patricia Conniff. 1998. th Publicado por AOAC International, 16 edicin, volumen 1 y 2, U.S.A. Estndar Methods for the examination of water and wastewater editado por Arnold E. Greenbers y otros.1992.Publicado por Publication office American Public Health th Association,18 edicin, U.S.A. The Merck Index: an encyclopedia of chemical. Drugs and Biologicals. Budavari S. Guide for safety in the Chemical Laboratory.

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