Survival, growth and feeding in early life stages of European sea bass (Dicentrarchus labrax) intensively cultured under

different stocking densities Abstract Two experiments were conducted in triplicate in order to study the effect of stocking densities on survival (highlighting sibling cannibalism), growth and feeding of intensively cultured sea bass larvae (50, 100, 150 and 200 fish l 1) and post-larvae (5, 10, 15 and 20 fish l 1). Experimental populations were reared under controlled conditions in 50-l cylindroconical tanks. Dead fish were counted daily and classified into cannibalised and non-cannibalised. Total length and weight were measured weekly. Results indicate that stocking density did not affect survival and growth of larvae. No cannibalistic phenomena were observed at this stage. On the other hand, survival of post-larvae was higher at 5 and 10 fish l 1 than at 15 and 20 fish l 1, while growth performance fluctuated between the lowest value recorded in the group of 10 fish l 1 and the highest value in that of 5 fish l 1. Feed intake in post-larvae was independent of stocking density. Cannibalism was the main cause of death in post-larvae. Two types of cannibalism were detected: type I, attack from tail (observed at the beginning of this stage) and type II, attack from head (observed at the end of the stage). D 2002 Elsevier Science B.V. All rights reserved. Keywords: Stocking density; Growth; Feeding; Cannibalism; Survival; Larval stages; European sea bass; Dicentrarchus labrax Supervivencia, crecimiento y alimentacin en etapas iniciales de vida de la corvina marina europea (Dicentrarchus labrax) intensivamente cultivada bajo diferentes densidades de siembra Resumen Dos experimentos fueron conducidos por triplicado para estudiar el efecto de las densidades de siembra sobre la supervivencia (destacando el canibalismo entre hermanos), el crecimiento y la alimentacin de larvas de corvina marina intensivamente cultivadas (50, 100, 150 y 200 peces por L) y poslarvas (5, 10, 15 y 20 peces por L). Poblaciones experimentales fueron cultivadas bajo condiciones controladas en tanques cilindrocnicos de 50 L. Los peces muertos fueron contados diariamente y clasificados en canibalizados y no canibalizados. La longitud y peso total fueron medidos semanalmente. Los resultados indican que la densidad de siembra no afect la supervivencia y crecimiento de las larvas. Ningn fenmeno canibalstico fue observado en esta etapa. Por otra parte, la supervivencia de las poslarvas fue mayor a 5 y 10 peces por L que a 15 y 20 peces por L, mientras que el desempeo de crecimiento fluctu entre el valor ms bajo registrado en el grupo de 10 peces por L y el valor ms alto en 5 peces por L. La toma de alimentos en poslarvas fue independiente de la densidad de siembra. El canibalismo fue la principal causa de muerte en poslarvas. Dos tipos de canibalismo fueron detectados: Tipo I, ataque desde la cola (observado al inicio de esta etapa) y Tipo II, ataque desde la cabeza (observado al final de esta etapa).

Introduccin En las especies de peces intensivamente cultivadas, hay demandas por ms eficientes etapas tempranas de produccin, debido a las bajas tasas de supervivencia. Para encontrar las necesidades actuales, los cultivadores decidieron incrementar la densidad de siembra. La densidad es uno de los factores ms determinantes en larvicultura, afectando las interacciones sociales tales como la agresividad, el fenmeno jerrquico y el canibalismo, resultando en variaciones en tamao, supervivencia y desempeo en crecimiento en poblaciones de peces. El canibalismo es el factor limitante en larvicultura para una variedad de especies de peces. Los fenmenos de canibalismo fraterno estn fuertemente relacionados no slo a la densidad de siembra, como se mencion anteriormente, sino tambin al estado nutricional del pez, a la variacin poblacional del peso, y a parmetros no biolgicos tales como la temperatura del agua y luz, significativamente incrementando la mortalidad de los peces en estados iniciales y contribuyendo a incrementar el costo de produccin. La corvina europea es una de las especies cultivadas ms populares en la regin Mediterrnea. Todas las etapas de crecimiento toman lugar en condiciones intensivas y el cultivo de corvina europea es redituable para la industria acucola. Sin embargo, dificultades principalmente en etapas iniciales de su cultivo relacionadas a deformidades esquelticas, alimentacin y condiciones de cultivo, han restringido el nmero de peces disponibles para desarrollo posterior. Ahora, la mayora de las dificultades han sido superadas. Sin embargo, a nuestro conocimiento, la prctica comn del uso de muy altas densidades y sus efectos sobre la larvicultura de la corvina europea no han sido adecuadamente estudiados, aunque intentos preliminares a bajas densidades han sido realizados y el canibalismo est presente en algunas de estas etapas afectando su supervivencia. En el presente estudio, dos fases crticas del desarrollo de la corvina de mar (etapas larvaria y post-larvaria) fueron examinados bajo condiciones intensivas de cultivo, para determinar los efectos de la densidad de siembra sobre la tasa de supervivencia (alto canibalismo fraterno), desempeo de crecimiento, variacin de peso y status de alimentacin de peces. Materiales y mtodos Los experimentos fueron conducidos en el Instituto de Biologa Marina de Creta, Grecia, en dos fases subsecuentes, el cultivo larvario y post-larvario. Fase 1: Cultivo larvario Los huevos de corvina de mar obtenidos a partir de reproductores capturados, bien aclimatados para las condiciones de cultivo, fueron contados y separados en tanques experimentales para tener 4 densidades finales de siembra: 50, 100, 150 y 200 larvas/L. Todos los tratamientos fueron conducidos en triplicado por 30 das. Las etapas de incubacin, eclosin y pre-larvaria fueron realizadas bajo total oscuridad en tanques cilindrocnicos de 50 L conectados a un sistema abierto de agua. Las larvas fueron criadas en los mismos tanques utilizando la tcnica confiable agua limpia, la cual para esta especie, d los mejores resultados en trminos de supervivencia y calidad. La circulacin del agua a partir del fondo suministrada por un sistema airlift y aereacin aseguraron una homogenizacin moderada. La tasa de circulacin del agua (del da 1 al 30) y de renovacin del agua (del da 10 al 30) fueron gradualmente incrementndose

del 5% al 40% por hora. Durante el periodo experimental, la intensidad de la luz fue incrementndose gradualmente de 5 a 100 lux y la fase luminosa fue regulada al menos 14h (08:00 a 22:00 h). Al mismo tiempo, la temperatura ambiental se increment gradualmente de 16 a 23 C, la salinidad fue 40 0 y el nivel de oxgeno fue mantenido en 6 0,5 mg/L. Larvas fueron alimentadas con presa viva enriquecida con Selco (Artemia Systems, Blgica): Brachionus plicatilis (Br), Nauplios de Artemia (A0) y Artemia de 1 da de edad (A1), de acuerdo al cronograma de alimentacin (del da 1 al 10 de alimentacin exgena, 5-8 Brachionus / mL/ h fueron distribudos; del dia 11 al 20, Brachionus fue decreciendo gradualmente y Artemia A0 y A1 fueron incrementndose hasta 1 2 individuos / mL/ h; del da 21 al 25, Artemia A0 y A1 fueron suministrados; del da 26 al 30 solamente, Artemia A1 fue suministrada). 2.2 Fase 2: Cultivo post-larvario Las post-larvas se originaron del mismo lote de huevos y fueron cultivados en las etapas iniciales bajo condiciones similares a las descritas en la Fase 1. En el da 35, posteclosin (17,05 mm de longitud), fueron transferidas a tanques cilindrocnicos y divididas en 4 grupos de acuerdo a las siguientes densidades de siembra: 5, 10, 15 y 20 post-larvas / L. Cada grupo fue testada por triplicado y el experimento dur 22 das. Durante el experimento, la intensidad de la luz fue 100 lux ( fase de luz diurna de 08:00 a 22:00 h), temperatura y salinidad fueron 23 2 C y 40 0 , respectivamente, y el nivel de oxgeno fue mantenido sobre los 6 mg/L. Al principio del experimento, la circulacin del agua y la renovacin del agua fue 50% y 10% / H, respectivamente, y ambas se incrementaron gradualmente hasta el 80% / h al final. Las postlarvas fueron alimentadas con A1 enriquecida con Selco (1-2 individuos / mL gradualmente disminudas hasta el da 11) y el alimento artificial (Af) (Lansy A2, Lansy W3) gradualmente incrementado y distribudo ad libitum (alcanzando 10% de la biomasa / tanque / da) a lo largo del experimento. 2.3 Parmetros estudiados y anlisis de datos Temperatura, oxgeno disuelto, salinidad, pH e intensidad de luz fueron monitoreados en ambas fases. La longitud total y el peso hmedo individual fueron medidos para determinar el desempeo del crecimiento. Por tanto, muestras consistentes de 30 individuos por tanque fueron tomadas en los das 1, 10, 20 y 30 para la fase larvaria y 5% de la densidad de siembra inicial por poblacin fue muestreada en los das 1, 8, 15 y 22 para la fase post-larvaria. Todas las muestras fueron tomadas a las 08:00 h antes del suministro de alimento y medidos in vivo bajo un estereoscopio y una balanza Mettler AT 201 (certeza de 0,01 mm y 0,01 mg para la larva, y 0,1 mm y 0,1 mg para postlarvas, respectivamente). Para estudiar el consumo individual de alimento para la fase post-larvaria en los mismos das mencionados y 30 minutos despus de la primera racin, 5% de cada densidad de siembra inicial fue muestreada. Las observaciones del comportamiento (eventos de agresividad entre hermanos, la forma de dispersin de la poblacin, ataques debido a canibalismo) fueron hechos inicialmente en la maana antes del primer suministro de alimento y durante la fotofase antes y despus de la alimentacin. En el caso de anormalidades morfolgicas o lesiones evidenciando canibalismo, fotos fueron tomadas a peces vivos y muertos bajo un estereoscopio con una cmara Olympus Om-4. La mortalidad fue estimada diariamente contando todos los peces muertos removidos de los tanques durante la limpieza de superficie y de fondo.

La estimacin de la supervivencia final observada (So) estuvo basada en la frmula de Bergot et al 1986, la cual toma en cuenta el conteo diario de los peces muertos y el nmero de peces removidos para propsitos de muestreo: So (%) = Donde: n0 fue el nmero inicial de peces; d1 fue el nmero de peces muertos durante el primer periodo (entre el primer y segundo muestreo); s1 fue el nmero de peces muestreados en el segundo muestreo; d2 fue el numero de peces muertos durante el segundo periodo (despus del segundo y antes del tercer muestreo); s2 fue el nmero de peces muestreados en el tercer muestreo; y d3 fue el nmero de peces muertos durante el tercer periodo. El canibalismo fue estimado en dos formas; directamente por enumeracin de los peces canibalizados muertos (caracterizados por grave dao a las aletas dorsal, anal y principalmente caudal) removidas a partir de los tanques de cultivo; e indirectamente, por el nmero de peces perdidos al final del experimento, que asuminos fueron victimas completamente ingeridas y digeridas como lo ya reportado por Katavic et al. 1989 y Van Damme et al. 1989. El porcentaje de peces perdidos sobre el nmero final de peces vivos fue evaluado por la siguiente ecuacin: M (%) = Donde nf fue el nmero final de peces contados al final del experimento, s fue el nmero total de peces muestreados y nm fueron los peces perdidos debido al canibalismo. La tasa de crecimiento especfico fue evaluada por la siguiente frmula: SGR (% / da) = Donde Wi y Wf fueron los pesos promedios individuales inicial y final, respectivamente, al tiempo t. La variacin de la poblacin fue estimada utilizando la variacin del peso: CV (%) = Donde S.D. fue la desviacin estndar del peso individual y m fue el peso promedio individual. El consumo de alimento en post-larvas de corvina de mar fue estimado por un mtodo basado en la relacin constante entre el peso de la cabeza (x) y el peso total del cuerpo (y) de los peces sin alimentar. Una curva de calibracin entre estas dos variables fue determinada utilizando datos colectados a partir de post-larvas muestreadas los das 8, 15 y 22. Despus de la alimentacin, las muestras de peces alimentados fueron colectados de cada tanque, los peces fueron pesados individualmente, disectados y el peso de su cabeza utilizado para estimar su peso corporal terico antes de la alimentacin, basado en la curva de calibracin formada por la ecuacin: Y= Para cada pez pesado individualmente, la cabeza fue diseccionada detrs del crneo, perpendicular al eje longitudinal y pesada con precisin de 0,1 mg. La toma individual de alimento fue calculada como la diferencia entre el peso medido y el estimado. Fue expresado en valores absolutos (mg de alimento ingerido) o en valores relativos de peso corporal (% de peso corporal). El coeficiente inter-individual de toma de alimento o de toma relativa de alimento fue calculado. Los datos fueron comparados por un anlisis de varianza de una va (ANOVA de una va) seguido por el test de rangos mltiples de diferencia de mnimos cuadrados (Tukey) cuando las diferencias entre medias fueron significativas ( P< 0,05).