Determinacin fluoromtrica de aluminio Un experimento cuantitativo para el laboratorio de anlisis instrumental.

La amplia gama de analitos que puede determinarse cuantitativamente fluoromtricamente es impresionante y ha sido de particular importancia para la qumica bioanaltica, donde los acontecimientos recientes continan siendo revisados peridicamente. El uso de fluorometra en sangre en el manejo clnico de la intoxicacin por plomo y la ictericia neonatal es un buen ejemplo de una medida de forma generalizada y sistemtica aplicada de medidas fluoromtricas, con mayor frecuencia en bajos costos basados en filtros instrumentos. Sin embargo, la utilidad ms amplia de los procedimientos fluoromtricos, es decir, en ensayos de muestras no biolgicas, no debera pasarse por alto. Un reciente simposio de la American Chemical Society se dedic exclusivamente a presentaciones sobre sensores qumicos fluorescentes para el reconocimiento de iones y molculas. Aunque la aplicacin de fluorometra para la cuantificacin de una gama muy amplia de tanto inorgnicos como orgnicos analitos a menudo se observ en los textos sobre instrumentales ejemplos bien ensayados de experimentos cuantitativos para el laboratorio de enseanza se limita principalmente a mtodos para especies orgnicas, como la determinacin de quinina en agua tnica y la riboflavina en tabletas de vitaminas. Parece ser que los procedimientos de laboratorio son muy pocos publicados describiendo la determinacin cuantitativa de especies inorgnicas por mtodos fluoromtricos que son adecuados para su uso en un curso de anlisis instrumental pregrado. Un enfoque fluoromtrico razonablemente sensible a la determinacin de aluminio (como Al+3) se basa en la formacin de su complejo con 8hidroxiquinolina (8-quinolinol) y posterior extraccin del neutro Al3+ -tris(8quinolinolato) en disolventes tales como cloruro de metileno. El rango lineal de trabajo para el mtodo es de ~ 4 ppb a 240 ppb, con una desviacin negativa a concentraciones ms altas, presumiblemente debido a un efecto de filtro interno. La fluorescencia observada no vara crticamente con la temperatura, tiempo, pH de extraccin, o la cantidad de fluorforo utilizado. Significativamente, la presencia de hierro en cantidades equivalentes a la concentracin de aluminio no interferir seriamente con el anlisis. La siguiente adaptacin de este mtodo ha demostrado ser un experimento muy adecuado para la parte de laboratorio del curso anlisis instrumental en la Universidad de Alabama. Esta determinacin puede ser rutinaria y realizado con xito en unas pocas horas utilizando cualquier tipo de fluormetro, de un instrumento de tipo simple de doble filtro a un espectrofluormetro exploracin. Ciertamente, hay otros procedimientos fluoromtricos ms sensibles disponibles para el aluminio, pero tienden a ser ms susceptibles a diversos tipos de interferencia. La manipulacin de la muestra asociado con este mtodo implica procesos que son slo cinticamente fcil a temperatura ambiente y no emplean reactivos que pueden tienden a deteriorarse apreciablemente durante el almacenamiento. En general, nuestra experiencia es que la implementacin exitosa del experimento en un curso de laboratorio de grado, tanto en trminos de la facilidad con que los estudiantes pueden completar la tarea y la fiabilidad de los resultados obtenidos, es menos problemtico que muchos de los

procedimientos comunes colorimtricos o fluoromtricos aplicado a otros cationes metlicos. El experimento ACS certificados por los reactivos se utilizan en todo. Cubetas no necesita ser de cuarzo. Vidrio ser suficiente. Es innecesario para excluir el oxgeno. Las advertencias deben ser emitidos sobre las propiedades irritantes de las sales de aluminio y de la naturaleza peligrosa de los hidrocarburos clorados como el cloruro de metileno. Se debe prestar atencin a un recipiente adecuado reservados para el almacenamiento de los residuos de cloruro de metileno antes de su eliminacin. En la universidad de Alabama, los estudiantes tienen que preparar su propia norma de aluminio y las soluciones de los reactivos, pero algunos profesores pueden preferir proporcionar estas soluciones ya preparadas. Las cantidades de tampn de acetato amnico y una solucin de 8-quinolinol se describen a continuacin, de hecho, es suficiente para seis a ocho estudiantes para completar el experimento. Las siguientes instrucciones se ponen a disposicin de los estudiantes. Reactivos cuantitativamente preparan una solucin madre de aproximadamente 100 ppm en aluminio (masa atmica 27 0,0) luego disolviendo en agua aproximadamente 0.44 g (exactamente pesados) de aluminio dodecahidratado sulfato dipotsico (peso frmula 474.4) a un volumen final de 250 0,0 ml. Adems diluir esta solucin en agua para obtener 1,00 L de una solucin patrn de trabajo ~1 ppm en aluminio. Preparar 100 ml de 8-quinolinol de solucin mediante la adicin de 6,0 ml de cido actico glacial a aproximadamente 60 mL de agua en un matraz aforado de 100 ml, a continuacin, disolviendo 2 g de 8-quinolinol en esta solucin y haciendo hasta l marcador con agua (nominalmente 2% 8-quinolinol en 1 M de cido actico). Hacer 100 ml de tampn de acetato de amonio mediante la adicin de 4,5 g de acetato de amonio y 1,5 ml de 28% (p/p), solucin de amonaco a 100 ml de una matraz aforado y superando a la marca con agua. Dependiendo del nmero de puntos de datos repetidos, entre 400 ml y 600 ml. cloruro de metileno (diclorometano) se requiere para los pasos de extraccin con disolventes. Procedimiento Para aproximadamente 100 mL de agua en un embudo de decantacin de 250 ml, aadir 2,0 ml de la solucin de 8-quinolinol y 2,0 ml de la solucin tampn de acetato amnico. El pH debe ser 8,0 + - 1.5. Extraer dos porciones de 15,0 ml de cloruro de metileno, transfiriendo stos a un matraz aforado de 50 ml y completando hasta la marca con cloruro de metileno. Esto constituye el blanco para las mediciones fluoromtricos. Ahora prepara una serie o cuatro estndares que contienen ~ 1,5, 3, 4,5 y 6,0 g de aluminio mediante la adicin de, respectivamente, 1,50 ml, 3,00, 4,50 y 6,00 del aluminio estndar de trabajo para el 100 ml de agua inicialmente en el embudo de separacin, seguido por 2,0 ml de la solucin de 8-quinolinol y 2,0 ml del tampn de acetato de amonio en la misma manera que anteriormente. En cada caso, se extrae con dos porciones de 15,0 ml de cloruro de metileno y despus de transferir a un matraz aforado de 50 ml, superior hasta la marca con cloruro de metileno. Medir la fluorescencia de las cuatro soluciones resultantes cloruro de metileno a 520 nm, utilizando una longitud de onda de excitacin de 365 nm y construir una curva de calibracin. Por lo menos, repetir los puntos que

son, obviamente, en el error y vuelva a medir todas las soluciones de calibracin, si tienes tiempo. Posteriormente, en el Libro mejor se adapten a estos datos debe ser determinado por un anlisis de regresin por mnimos cuadrados. Obtener una solucin acuosa de aluminio de concentracin desconocida de su instructor. Pipetear una alcuota de 10,0 ml de esta en un embudo de separacin de 250 ml que contena aproximadamente 100 ml de agua, a continuacin, proceder como para los estndares de calibracin. Medir la fluorescencia de la muestra y determinar la concentracin de aluminio en el desconocido de la curva de calibracin. Reporte sus resultados utilizando unidades de partes por mil millones y en trminos de lmites de confianza del 95%, citando a la concentracin de aluminio encontrado, tanto para el extracto de cloruro de metileno que en realidad se mide y la muestra como se le ha suministrado. Resultados de los estudiantes En la figura 1 se muestra un ejemplo de la curva de calibracin, adems de la lectura de lo desconocido, que se obtiene por una gran qumica (un estudiante) con las habilidades correctas de laboratorio. Este estudiante se suministra con una muestra desconocida que contiene Al+3 a 90 ppb (es decir, 450 ppb antes de la extraccin) la concentracin encontrada fue de 92 (+ - 5) ppb en el nivel de confianza del 95%; un buen resultado, pero utilizando slo un sola lectura de lo desconocido. Tener primeros t inform que los estudiantes de la cercana de este resultado y el valor real, que era entonces posible para instruir a los estudiantes en la importancia de realizar el anlisis por duplicado, o triplicado, lo que podra haber reducido sustancialmente la incertidumbre en el mismo nivel de confianza.

La curva de calibracin para el estudiante A: puntos de datos, ajuste de mnimos cuadrados a las normas. Las muestras de 90 ppb de aluminio de concentracin suministrado al estudiante como un desconocido. La escala del eje x es g/ml (ppb). La escala del eje y es en unidades arbitrarias de intensidad de fluorescencia (lectura del medidor) a 520 nm (365 nm de excitacin)

La curva de calibracin para el estudiante B: puntos de datos, ajuste de mnimos cuadrados a las normas. Excluyendo los datos entre corchetes. Muestra de aluminio de 82 ppb de concentracin suministrada al estudiante como un desconocido. (o, duplicado) La escala del eje x es g/mL (ppb). La escala del eje y es en unidades arbitrarias de intensidad de fluorescencia (lectura del medidor) a 520 nm (365 nm de excitacin) En la figura 2 se muestra un ejemplo de la curva de calibracin, adems de la lectura de lo desconocido, que se obtiene por un incumplimiento grave de la qumica (estudiante b) con las tcnicas de laboratorio promedio. Es evidente que hay un problema con el la solucin estndar ms concentrada en los puntos entre corchetes (dos superpuestas), obviamente, no encajan fcilmente con la misma lnea recta que los otros puntos de calibracin. El estudiante se sinti alentado por el instructor para repetir la curva de calibracin, debido a estas irregularidades. El descarte de muchos de estos datos y utilizando nicamente los cuatro puntos de calibracin ms prximos al par duplicado de lecturas desconocidas la concentracin se encontr 80 (+ -2) ppb en el nivel de confianza del 95%, este estudiante fue, de hecho, se suministra con un muestra desconocida que contiene Al+3 a 82 ppb (es decir, 410 ppb antes de la extraccin) y, por consiguiente, un buen resultado finalmente se obtuvo a pesar de los problemas. En la actualidad, la mayora de nuestros estudiantes no analizar sus datos de forma adecuada, a pesar de esto se han cubierto ya la ONU parte terica del curso antes de realizar el experimento. Sin embargo, siempre tenemos mucho cuidado para que les suministren las concentraciones s desconocidos que se encuentran cerca de la mitad del rango de calibracin, es casi siempre posible para que el instructor para demostrar que describe los datos de la figura 2. Al hacer esto, el estudiante recibe una leccin instructiva en el rechazo de puntos de datos malos y tambin, la importancia de trazar una curva de calibracin en bruto en el momento de las mediciones se realiza a fin de identificar errores. Preguntas para los estudiantes 1. Cul es la estructura de 8-quinoilinol y cul es la estequiometra y la estructura de su complejo con el aluminio? 2. Por qu tiene la intensidad de la fluorescencia del 8 quinolnolincrementa despus de su formacin de complejos con el aluminio?

3. Cules son las principales interferencias en la determinacin de la especie? 4. El hombre no tiene requisito de dieta para el aluminio, as que por qu podran estar interesado los qumicos clnicos en el anlisis de aluminio? Recibir respuestas razonables a estas preguntas se puede esperar que se incluyan los siguientes puntos 1. [Nota: la estructura de 8 - quinolinol se puede encontrar en la libros de texto de qumica analtica, inorgnica y orgnica] el ligando forma una mezcla racmica o neutra, tris octadrica, (8-quinolinolato) complejos con Al+3 2. Fluorescencia se ha mejorado en molculas con estructuras rgidas. La rigidez aumentada o el complejo de 8-quinolinolato en comparacin con el no complejado 8-quinolinol es por lo tanto, se espera que conduzca a un aumento de la eficiencia cuntica de fluorescencia en el caso de las especies anteriores 3. El mtodo est libre de la interferencia de variables fsicas y el oxgeno, pero est sujeto a la interferencia de algunas especies aninicas y catinicas. Aniones complejantes tales como citrato y tartrato de interferir con la extraccin, que conduce a la recuperacin de aluminio disminuy. La presencia de cationes paramagnticos a niveles en exceso de la concentracin de aluminio da como resultado extincin de fluorescencia. 4. La cuestin tiene por objeto llamar la atencin sobre el hecho de que el aluminio es txico y tiene un papel mal definido en los pacientes con encefalopata de dilisis y la enfermedad de Alzheimer. Esto es claramente de cierta preocupacin, dada la gran cantidad de aluminio a la que estamos expuestos y pueden ingerir, especialmente de los utensilios de cocina y envases de alimentos.

Attention has been called to an error in the historical part of the article, fluorometric determination of aluminum.

Two sentences beginning with line 3 are erroneous and should be replaced by the following davydov and devekki (1) using quercetin, an isomer of morin, developed a fluorescent method for the quantitative determination of aluminum. actually Davydov and Devekki were unsuccessful in attempting to use pontachrome blue black R as a reagent for aluminum, and not being able to obtain morin used by white and lowe. Developed a method using its isomer, quercetin.