Hidrlise enzimtica do leo de pescado

Enzymatic hydrolysis of the fish oil

Mrcia Elisa da Silva PADILHA1, Walter AUGUSTO-RUIZ1* Resumo
O leo de pescado tem sido alvo de vrias pesquisas em funo dos benefcios nutricionais dos cidos graxos poliinsaturados. Esse fato pode ser comprovado pelos estudos epidemiolgicos que relacionam a baixa incidncia de doenas cardiovasculares com o consumo de cidos graxos n-3 (EPA-eicosapentaenico e DHA-docosahexaenico) provenientes de peixes marinhos. A obteno de cidos graxos poliinsaturados n-3 pode ser realizada por hidrlise enzimtica. A hidrlise enzimtica de leos e gorduras, ou liplise, bem conhecida e vem sendo estudada para produzir cidos graxos e modificar as gorduras por esterificao, transesterificao e interesterificao. O objetivo deste trabalho foi a obteno de cidos graxos poliinsaturados por hidrlise enzimtica do leo de pescado industrial. A hidrlise de 1262,81 moles de leo de pescado com lipase pancretica porcina (concentrao de extrato enzimtico de 7,647 mg.mL-1), 60 minutos, 38 C, pH 8, tampo NH4Cl-NH4OH. Os produtos da hidrlise foram separados por cromatografia em coluna e caracterizados por cromatografia em camada delgada (TLC) e gasosa (GLC). A enzima apresentou uma atividade especfica de 10,14 0,15 UE.mg de protenas1 e com 60 minutos de reao se obteve 44,45% de hidrlise com 1865,76 41,15 mols de cidos graxos. Foram identificados cidos graxos livres, mono-acilgliceris, di-acilgliceris e tri-acilgliceris. Na frao dos tri-acilgliceris verificou-se um aumento de 46,14% e 40,23% de cido araquidnico e eicosapentaenico (EPA) respectivamente, enquanto que na frao monoacilglicerol um acrscimo de 96,96% e 52,55% de DPA e DHA. Palavras-chave: enzimas; hidrlise enzimtica; leo de pescado; lipase; EPA; DHA; DPA.

Abstract
The fish oil has been the purpose of many researches due to the nutritional benefits of its polyunsatured fatty acids and it is confirmed by epidemic studies that relate the low incidence of cardiovascular diseases to the consumption of n-3 fatty acids (EPA - eicosapentaenico, DHA - docosahexaenico) deriving from the sea fish. N-3 polyunsatured fatty acids can be obtained from the fish by enzymatic hydrolysis. The enzymatic hydrolysis of fats and oils, or lipolysis, is known to produce fatty acids to alter the fats by esterification, transesterification and interesterification. The main objective of this work was to obtain poliinsaturated fatty acids (PUFA) by enzymatic hydrolysis of the industrial fish oil. It was used 1262,81 mols of substrate, porcine lipase (7,647 mg.mL-1 of enzymatic extract), 60-minute of hydrolysis, 38 C, pH 8 and NH4CI-NH4OH buffer. The hydrolysis products were separated by column chromatography and characterized by TLC GLC. The specific activity of lipase was 10,14 0,15 UE.mg proteins-1. After 60-minute of reaction was obtained 44,45% of hydrolysis and 1865,76 41,15 mols of fatty acids. Were identified PUFA, monoacylglycerol, diacylglycerol and triacylglycerol. There was an increase of 46,14 and 40,23%, respectively, of araquidonico and eicosapentaenoic (EPA) acids in the triacylglycerols fraction while the monoacylglycerol fraction showed an increase of 96,96 and 52,55% of DPA and DHA. Keywords: enzymes; enzymatic hydrolysis; fish oil; lipase; EPA; DHA; DPA.

1 Introduo
Do total de captura mundial de pescado, cerca de 72% so utilizados como pescado fresco, congelado, enlatado e salgado, os 28% restantes seguem para o preparo de rao animal18. A produo de farinha e leo de pescado uma alternativa para o aproveitamento do pescado que no utilizado diretamente para o consumo humano, bem como dos resduos procedentes das plantas de processamento de pescado17,23. O material residual geralmente constitudo de aparas do toilete antes do enlatamento, carne escura, camaro fora do tamanho de descasque manual ou mecnico, cabeas e carcaas18. A importncia dos leos marinhos na dieta sustentada nos benefcios sade que traz o consumo de leos poliinsaturados. Estudos epidemiolgicos correlacionam a baixa incidncia de doenas cardiovasculares com o consumo de cidos graxos poliinsaturados provenientes de pescados marinhos. As algas marinhas so capazes de sintetizar cidos graxos n-3 (EPAeicosapentaenico C20:5 n-3 e DHA-docosahexaenico C22:6 n-3), os quais entram na cadeia alimentar marinha, estando disponveis no leo de pescado9,10,12,13,19, podendo observar-se que no leo de sardinha (Sardinella brasiliensis), estes dois cidos somam entre 20 e 40% dos cidos graxos totais6,20. Os efeitos benficos dos cidos graxos poliinsaturados dos leos de pescado foram especialmente enfocados em alguns eventos cientficos internacionais, sendo pioneiro o realizado nos Estados Unidos, em 1985, seguido de outros ocorridos no Canad e na Itlia, em 1988. Os efeitos benficos esto associados ao seu papel na integridade das membranas biolgicas, sua capacidade de reduzir o teor de lipdios sricos e sua converso de compostos chamados eicosanides, que apresentam uma ao direta sobre a fisiologia do sistema vascular20. Os efeitos tm sido mais evidentes em populaes cujas dietas tm baixo teor de gordura, apresentando baixa incidncia de problemas cardacos. Cabe destacar que os casos de esclerose mltipla so raros em reas litorneas, onde h consumo de pescado. O interesse cientfico, pelo presumvel potencial hipolipmico e anti-aterognico, surgiu de um estudo com esquims20. Os processos comumente empregados para produzir cidos graxos so o qumico e o enzimtico. O processo de

Recebido para publicao em 10/5/2006 Aceito para publicao em 23/4/2007 (001749) 1 Laboratrio de Anlise Instrumental, Departamento de Qumica, Fundao Universidade Federal do Rio Grande FURG, CP 474, CEP 96201-900, Rio Grande - RS, Brasil, E-mail: dqmwar@furg.br *A quem a correspondncia deve ser enviada

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hidrlise qumica se caracteriza por ser homogneo e utiliza catalisadores qumicos, temperaturas altas, tempos de residncia variveis e altas presses. Os produtos assim obtidos so muito variados na sua natureza e pureza. A hidrlise enzimtica utiliza baixas temperaturas, lipases, meios reacionais especficos e variveis controladas, e os cidos graxos sofrem pouca modificao3,22. A obteno de cidos graxos poliinsaturados n-3 pode ser feita a partir da hidrlise seletiva do leo de pescado, ou atravs da utilizao de enzimas que apresentem baixa atividade para os cidos EPA e DHA, como a lipase pancretica porcina, que possui especificidade para as posies 1 e 3. Estes cidos graxos podem apresentar um efeito inibitrio ao desta enzima, devido ao alto grau de dobra das suas cadeias, o que ocasiona um obstculo espacial para a ao da lipase5. A hidrlise enzimtica das gorduras, ou liplise, bem conhecida e vem sendo estudada para produzir cidos graxos e modificar as gorduras por esterificao, transesterificao e interesterificao20. O objetivo deste trabalho foi obter cidos graxos poliinsaturados por hidrlise enzimtica do leo de pescado industrial.

Caracterizao fsico-qumica

leo de pescado

Hidrlise enzimtica

Enzima

Fraes obtidas

Separao dos produtos da hidrlise

Separao Lquido-lquido

Separao Cromatografia em coluna

Separao Cromatografia em fase gasosa Figura 1. Diagrama do fluxo operacional da hidrlise enzimtica e anlise das fraes derivadas do leo de pescado.

2 Material e mtodos
2.1 Substrato
Foi utilizado leo de pescado proveniente de uma indstria da regio do Rio Grande, RS. As amostras foram estocadas em garrafas plsticas ao abrigo da luz e sob refrigerao, at sua utilizao. O leo de pescado foi caracterizado quanto ao teor de umidade, impurezas, matria saponificvel e insaponificvel, acidez, ndices de iodo e perxidos, utilizando metodologia oficial2 e perfil de cidos graxos, segundo14. As operaes do processo de hidrlise do leo de pescado encontram-se diagramadas na Figura 1.

0,050 N. Foi preparada uma emulso 25% p.p -1 de gua destilada em leo de pescado, acrescida de acetato de polivinila e detergente aninico como sugerido na literatura20,21. A mistura foi agitada em agitador magntico durante 15 minutos. Uma alquota de 2 mL do extrato enzimtico a 38 C foi transferida para o reator, e o tempo de hidrlise foi controlado com cronmetro digital. No teste em branco foram utilizados 2 mL de gua.

2.4 Atividade enzimtica

Uma unidade enzimtica (UE) definida como a quantidade de enzima que hidrolisa 1 mol de ligao ster do triacilglicerol por minuto (1 UE = 1 mol.min-1). A produo de cidos graxos e a atividade enzimtica com o tempo foram calculadas com as Equaes 1 e 2: RCOOH(t) = (V VB) x N AE = (1) (2)

2.2 Soluo da enzima

Foi preparada uma soluo da enzima lipase (lipase pancretica porcina EC 3.1.1.3, SIGMA) adicionando lentamente 25 mL de soluo tampo NH4Cl-NH4OH, pH 8,0 a 1,0 g de enzima11,12. Depois de homogeneizada, a soluo foi centrifugada a 3000 g por 10 minutos (centrfuga FANEM modelo 206R). O sobrenadante foi utilizado imediatamente aps seu preparo. A concentrao de protenas da soluo enzimtica foi determinada pelo mtodo de Biureto, utilizando uma curvaanaltica de soro albumina bovina SAB20,21.

(V

RCOOH (t) E Tempo

2.3 Sistema reacional

Foram utilizados reatores de 250 mL com jaqueta para circulao de gua e a temperatura foi controlada atravs do termostato de um banho-maria de gua circulante. O pH foi monitorado e ajustado a 8,0 durante a hidrlise, utilizando pH-metro com eletrodo duplo combinado e soluo de NaOH

em que RCOOH(t) = produo de cidos graxos em funo do tempo; AE = atividade especfica [UE (mg de protena solvel)1]; V e VB = mL de NaOH gastos na titulao da amostra e branco, respectivamente; N = 0,05 N; VE = mL do extrato enzimtico; e [E] = a concentrao do extrato enzimtico (mg de protenas.mL-1). O rendimento da reao foi calculado e expresso como percentual de hidrlise utilizando a Equao 311:

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Hidrlise (%)

V VB IS IA

N 56,1 100 Peso da amostra(g)

(3)

de perxidos e material insaponificvel sugerem que um leo no purificado6, e o perfil de cidos graxos mostra presena de cidos graxos poliinsaturados, como era esperado (Figura 2).

em que IS e IA = ndice de saponificao e ndice de acidez, respectivamente. A enzima foi inativada pela adio de 90 mL de clorofrmio e 25 mL de cido actico glacial e agitao por 10 minutos temperatura do processo.
0,3000 0,2000 0,1000 0,0000 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 35,0 40,0 45,0 50,0 Figura 2. Perfil gs-cromatogrfico do leo de pescado. C 16:0 C 18:1 C 20:4 EPA DHA

2.5 Separao lquido-lquido e identificao de componentes

A mistura resultante da hidrlise foi levada a volume de 1000 mL com gua destilada e imediatamente transferida para funil de separao. Aps repouso, temperatura ambiente, separaram-se as fases e na fase aquosa foi determinado o teor de glicerol pelo mtodo Ca 14 56 AOAC2. A fase clorofrmica foi fracionada por cromatografia em coluna, segundo21. As fraes coletadas foram separadas por cromatografia em camada delgada e a quantificao das fraes foi realizada por gravimetria21.

2.6 Separao e identificao por cromatografia em fase gasosa

Os cidos graxos das fraes foram separados e identificados por cromatografia em fase gasosa, em cromatgrafo equipado com detector de ionizao de chama (FID) e coluna de 30 m de comprimento e 0,545 mm de dimetro e com fase estacionria de cido nitrotereftlico modificado por polietileno glicol. O gs de arraste foi o nitrognio a 2 mL.min-1. As temperaturas do injetor e do detector foram de 250 e 270 C, respectivamente. A temperatura inicial da coluna foi de 160 C, permanecendo nesta temperatura por 1 minuto, seguido de aumento a 2 C.min-1 at 200 C, permanecendo por 2 minutos, e novo aumento a 20 C.min-1 at 220 C, na qual permanece durante 40 minutos. O tempo total da programao foi de 64 minutos. A quantidade de amostra injetada foi de 1 L. Os cidos graxos foram identificados pela comparao direta dos tempos de reteno com padres (Sigma Supelco) e quantificados por normalizao de reas, atravs do software Varian Star 4.51. O preparo das amostras na forma de steres metlicos seguiu a metodologia utilizada por MAIA14. A concentrao de cidos graxos, expressa em mols, foi calculada de acordo com outros autores3,20-22.

Tradicionalmente os leos de origem animal so obtidos por processo hidrotrmico, o que permite a separao de protenas e de outros materiais, como: cidos graxos livres e gua, considerados impurezas, que devem ser eliminadas atravs de processos como: degomagem, refino, branqueamento ou descolorao, desodorizao e fracionamento15,16,26. O leo de pescado industrial geralmente obtido por processo hidrotrmico a partir de espcies pelgicas, portanto sua composio varia segundo as espcies e inclusive, segundo a estao do ano, sexo, ciclo reprodutor, dentre outros fatores4,7,8,23,26. Os peixes pelgicos, por sua condio de habitao e por formarem grandes cardumes, so de grande importncia industrial6. Segundo alguns autores7,8 as espcies pelgicas parecem ser as melhores fontes de EPA e DHA.

3.2 Concentrao protica do extrato enzimtico

A concentrao de protenas do extrato enzimtico foi de 7,647 0,065 mg.mL-1. calculada atravs de curva-analtica de SAB, que apresentou a seguinte funo A = 0,05030*C (A = absorbncia, C = mg protenas.mL-1) (r = 0,9995).

3.3 Liberao de cidos graxos em funo do tempo

A concentrao de cidos graxos aumentou em funo do tempo da hidrlise, como era esperado (Tabela 1 e Figura 3), utilizando 1262,81 1,95 moles de substrato (leo de pescado) a 38 C, pH 8,0 em tampo NH4Cl-NH4OH e extrato enzimtico de 7,647 0,065 mg.mL-1. Verifica-se na Figura 3, que a produo de cidos graxos tende a se estabilizar a partir de 10 minutos aproximadamente, evidenciando provavelmente uma cintica de reao de primeira ordem e uma cintica de reao de ordem zero depois de 10 minutos. Com 14 minutos de hidrlise atingiu-se aproximadamente 86% do total produzido em 60 minutos. Esses resultados esto de acordo com os resultados encontrados por outros autores5,11,21,22. STAUFER20 relata que a concentrao de cidos graxos atinge 80% nos primeiros 20 minutos de hidrlise enzimtica do leo de pescado.

3 Resultados e discusso
3.1 Caracterizao do leo de pescado
O leo de pescado apresentou um teor umidade de 0,59%, 1,45% de impurezas, acidez livre de 1,44% (ndice de acidez de 2,59 mgKOH.g-1 de leo), glicerol 9,31%, ndice de iodo de 168,56 cgI2.g-1 de leo, matria saponificvel 170,31 mgKOH.g-1 de leo, matria insaponificvel 1,39% e um ndice de perxidos de 7,08 meqO2.Kg-1 de leo. O teor de impurezas, ndice

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2000 1800 1600 RCOOH ( mol) 1200 1000 800 600 400 200 0 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Tempo (minutos) Figura 3. Concentrao de cidos graxos em funo do tempo de hidrlise. 50 55 60 RCOOH ( mol) 1400

2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 0 10 20 30 40 50

Hidrlise (%) Figura 4. Produo de cidos graxos em funo do percentual de hidrlise.

Na Figura 4, pode-se observar que existe uma relao linear entre a produo de cidos graxos (concentrao em moles) e o rendimento da reao (em percentual de hidrlise) antes dos 14 minutos iniciais, calculado atravs da frmula de proposta por IKEMOTO e OTA, 199611. Resultados semelhantes foram encontrados por STAUFFERT, 200020 e por TORALLES, 199821, na hidrlise enzimtica de leo de pescado e leo de oliva, respectivamente.

cial muito alta, com cintica de reao de primeira ordem at atingir velocidade mxima, e aps, sua velocidade diminui at estabilizar a reao em ordem zero21.

3.5 Composio das fraes da hidrlise enzimtica

A hidrlise enzimtica do leo de pescado (1262,81 1,95 moles) a 38 C, pH 8,0 tampo NH4Cl-NH4OH, 7,647 0,065 mg.mL-1 de extrato enzimtico, com 60 minutos de reao produziu 44,55% 1,03 de hidrlise. E como era esperado a frao de cidos graxos livres a de maior concentrao (Tabela 2), resultados semelhantes foram encontrados por TORALLES12 na hidrlise do leo de oliva utilizando lipase pancretica porcina.

3.4 Atividade especfica

Pode-se observar na Figura 5, que a atividade especfica da enzima decresce rapidamente de um mximo 10,14 0,15 UE. mg protena-1 em 8 minutos de hidrlise, chegando a aproximadamente 50% desse valor nos primeiros 20 minutos de hidrlise. Para tempos superiores a 20 minutos, a diminuio lenta e gradual, ou seja, com menor variao na atividade especfica, indicando a tendncia de uma reao de cintica de ordem zero. Esse comportamento caracterstico de reaes de hidrlise enzimtica que apresentam uma velocidade iniTabela 1. Porcentagem de hidrlise e concentrao de cidos graxos.
Tempo (minutos) 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 Hidrlise (%)* 0,00 3,01 0,38 9,52 0,77 20,48 0,65 29,81 0,45 36,09 1,16 37,73 0,94 38,53 1,02 38,99 0,89 39,48 0,93 39,98 0,98 40,20 0,93 40,62 0,98 40,93 0,98 41,31 0,98 41,65 0,98 Concentrao de cidos graxos (mols)* 0,00 125,98 15,79 398,67 32,52 857,93 27,44 1248,62 17,90 1511,74 46,87 1580,31 37,53 1613,80 41,03 1632,94 35,23 1653,67 37,13 1674,40 39,06 1683,97 37,26 1701,51 39,13 1714,27 39,32 1730,21 39,13 1744,57 39,13

3.6 Identificao dos cidos graxos

Verifica-se na Tabela 3, que o substrato leo de pescado apresenta uma alta concentrao de cidos graxos poliinsaturados, que encontram-se concentrados na frao mono-acilglicerol (MAG).

Tempo (minutos) 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 32

Hidrlise (%) 41,65 0,98 41,92 1,03 42,22 1,03 42,49 1,03 42,76 0,98 42,79 0,98 43,10 0,98 43,29 1,03 43,52 1,03 43,71 1,03 43,71 1,03 43,94 1,03 44,20 0,99 44,35 0,99 44,55 1,03 41,65 0,98

Concentrao de cidos graxos (moles)* 1744,57 39,13 1755,73 41,15 1768,49 41,40 1779,65 41,15 1790,81 39,32 1792,41 39,13 1805,16 39,32 1813,14 41,15 1822,70 41,15 1830,68 41,40 1830,68 41,40 1840,25 41,40 1851,41 39,64 1857,79 39,32 1865,76 41,15 1744,57 39,13

*Mdia de trs repeties

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12 10 8 6 4 2 0

AE (UE/mg de protenas)

ao enzimtica. TORALLES21 verificou maior concentrao de cido palmtico na frao de mono-acilgliceris aps hidrlise de 180 minutos, sendo a preferncia da lipase pancretica porcina, por mono-olena a mono-palmitina. Quanto aos cidos graxos poliinsaturados como o EPA (20:5n3), DPA (22:5n3) e DHA (22:6n3), BOTTINO, 19675 relata que estes cidos graxos em leo de sardinha apresentam-se preferencialmente nas posies 1 e 3, sendo que se concentram na forma de tri-acilgliceris, ou seja, apresentam uma resistncia ao da enzima devido ao efeito inibitrio que a localizao das duplas ligaes em seus grupos metil terminais causam, pois as duplas ligaes ocasionam dobras na cadeia carbonada, causando uma aproximao e um fechamento em relao extremidade carboxlica, produzindo assim um efeito de obstculo espacial. Isso explica a maior concentrao do cido eicosapentaenico (EPA) na frao tri-acilglicerol. Outros autores1,24,25 relatam a preferncia deste cido na posio 2 e 3, sendo maior na posio 3 em outros leos de pescado. Estes mesmos autores relatam a preferncia de outros dois cidos graxos DPA e DHA pela posio 2, o que explica as suas concentraes na frao mono-acilglicerol, chegando a dobrar a concentrao de DPA e a aumentar mais de 50% a concentrao de DHA, mostrando ser a hidrlise enzimtica com a lipase pancretica porcina um mtodo eficiente para a concentrao destes cidos graxos.

20

40

60

Tempo (minutos) Figura 5. Atividade especfica da lipase pancretica porcina ao longo do tempo de hidrlise.

Os resultados na Tabela 3 permitem verificar a preferncia da lipase pelo cido olico, uma vez que este apresenta um acrscimo na frao di-acilgliceris mais cidos graxos livres e um decrscimo nas demais fraes. Comportamento similar foi relatado por outros autores4,11. A atividade da lipase mostra preferncia pelas posies 1 e 3, mas pode atuar tambm na posio 2, porm em proporo 22% menor que nas outras posies1,24,25. A frao MAG apresenta maior concentrao de cido palmtico comparado com o substrato, provavelmente devido ao da enzima sobre mono-acilgliceris, di-acilgliceris, tri-acilgliceris, ou por prvia acilmigrao interna e posterior

4 Concluso
O substrato foi caracterizado como um leo de pescado industrial com um potencial muito interessante para a produo de cidos graxos poliinsaturados, utilizando um processo de hidrlise enzimtica.

Tabela 2. Composio das fraes MAG, DAG, TAG e AGL produzidas na hidrlise enzimtica do leo de pescadoa.
Frao Monoacilgliceris (MAG) Diacilgliceris (DAG) Triacilgliceris (TAG) cidos graxos livres (AGL)
a

mg 257,72 4,10 233,62 1,98 189,53 12,60 453,57 10,60

% 22,72 0,38 20,59 0,18 16,71 1,09 39,98 0,88

moles* 722,92 11,50 376,20 3,18 214,06 14,29 1608,41 30,85

% 24,74 0,16 12,88 0,24 7,33 0,56 55,05 0,65

Mdia de trs repeties ; e *calculados com base nos pesos moleculares de MAG = 356,6 (monoolena), DAG = 621 (diolena), TAG = 885,40 (triolena), AGL = 282 (cido olico).

Tabela 3. Composio percentual de cidos graxos do leo natural (original) e das fraes TAG, DAG mais AGL e MAGa.
AG 14:0 16:0 16:1 18:0 18:1 18:2 18:3 20:0 20:1 20:3 20:4 20:5 22:5 22:6 leo 4,60 0,16 16,89 0,10 7,11 0,19 2,23 0,04 19,28 0,11 3,55 0,06 1,22 0,00 2,87 0,03 5,36 0,02 0,99 0,01 6,87 0,01 4,82 0,01 0,99 0,01 16,27 0,22 TAG 3,33 0,14 13,14 0,14 5,24 0,13 2,14 0,04 15,65 0,09 2,46 0,10 3,78 0,10 5,38 0,00 1,11 0,02 10,04 0,10 6,76 0,08 1,11 0,00 20,6 0,62 % 38,14 28,54 35,68 4,20 23,19 44,31 +210,0 +0,37 +12,12 +46,14 +40,23 +12,12 +26,61 DAG + AGL 5,05 0,01 15,96 0,03 8,93 0,03 24,65 0,24 3,95 0,03 1,40 0,01 2,52 0,03 6,14 0,04 1,02 0,01 5,38 0,03 5,08 0,05 0,69 0,03 11,18 0,11 % +9,78 5,83 +25,59 +27,85 +11,26 +14,75 -13,89 +14,55 +3,03 27,69 +5,39 46,48 46,97 MAG 6,38 0,30 21,97 0,32 4,57 0,33 2,24 0,01 13,21 0,30 3,26 0,07 2,05 0,06 2,30 0,11 4,67 0,35 2,30 0,15 1,95 0,01 24,82 0,32 % +38,69 +0,08 55,58 +0,45 45,95 8,89 +68,03 24,78 47,11 109,56 +96,96 +52,55

AG = cido graxo; e aMdia de trs repeties .

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Hidrlise enzimtica do leo de pescado

A lipase pancretica apresentou uma boa atividade enzimtica, que permitiu nos primeiros 10 minutos uma liberao linear de cidos graxos at se estabilizar em aproximadamente 60 minutos. A maior frao nos produtos da hidrlise foi a de cidos graxos livres, seguida da frao mono-, di- e tri-acilgliceris. Nos produtos da hidrlise verifica-se que a concentrao dos cidos graxos poliinsaturados EPA, DPA e DHA teve um acrscimo substancial em relao ao leo de pescado, o que permite concluir que o processo de hidrlise enzimtica um meio eficaz para a obteno desses cidos.

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Agradecimentos
Os autores agradecem ao CNPq, CAPES, ao PET/DEPEM/ SESU/MEC e equipe do laboratrio: Sra. Dulce Stauffert, Karen Daiane Tolotti e Mayane Colpo Teixeira.

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Reerncias bibliogrcas
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