SEGUNDO PARCIAL DE ANLISIS INSTRUMENTAL

PARTE TERICA
1) Indique Verdadero o Falso. Solo en las que se indica, justifique. En absorcin o emisin atmica: a) La atomizacin a partir de una sc de analito incluye la solvatacin de los iones del mismo b) la poblacin de tomos en el nivel fundamental depende fuertemente de la manera en que se atomiza la muestra c) las bandas espectrales son mucho ms estrechas comparadas con las obtenidas en espectrofotometra molecular. Justifique d) Las bandas son en la prctica, ms anchas que las esperadas tericamente e) los espectros consisten en lneas finas, ya que los estados electrnicos incluyen los subniveles de energa vibracionales y rotacionales f) no pueden utilizarse fuentes continuas con un monocromador. Justifique g) Pueden utilizarse fuentes de ctodo hueco de aleaciones que dan lneas para varios metales En espectrofotometra de fluorescencia molecular: h) Se mide la absorcin de radiacin, luego de que se produjo la excitacin con una energa correspondiente a una transicin * en una molcula. Justifique i) La energa de los fotones de excitacin puede inducir transiciones o diferentes niveles vibracionales dentro del nivel electrnico excitado, dando lugar a un proceso no radiativo en fase lquida como consecuencia de la relajacin vibracional por colisiones con molculas del solvente j) La radiacin de excitacin es de menor frecuencia que la emisin fluorescente k) La intensidad de la radiacin fluorescente es proporcional a la poblacin de molculas presentes en el nivel vibracional ms bajo del estado electrnico excitado luego de producida la excitacin l) El fenmeno de fluorescencia persiste en cuanto persiste la excitacin m) Se utiliza una fuente de arco de xenn que emite radiacin en la regin UV-V n) El proceso de conversin interna es importante en determinar la intensidad de la radiacin fluorescente. Justifique 2) Seale la opcin correcta, demostrando en cada caso: a) Un compuesto A tiene un coeficiente de particin entre una fase acuosa y una fase orgnica, igual a 9. Suponiendo que este comp se encuentra en un volumen V de disolucin acuosa, Cuntas extracciones seran necesarias para asegurar una recuperacin del 99,9% del componente a partir de la fase acuosa, utilizando en c/u, volmenes V de solvente orgnico) i. 3 ii) 2 iii) 10 iv) 30 v) Otro nmero b) Dos solutos A y B eluyen en una cromatografa a 155 seg y a 5 minutos, respectiva//, a partir de la inyeccin. sabiendo que el frente del solvente aparece a los 10 seg, se puede deducir que la constante de reparto de B, e/ la fe y la fm, es mayor que A en un factor de: i) 5 veces ii) 2 veces iii) 2,5 veces iv) Otro valor c) Cuando se consigue duplicar la resolucin e/ los picos cromatogrficos que eluyen consecutiva//, sin modificar otros parmetros, la diferencia en los tiempos de retencin de ambos solutos resulta: i. el doble ii. inalterada iii. cuatriplicada iv. otra opcin

d) A es un soluto que eluye a la mitad de tiempo que B. Asumiendo que para ambos solutos la eficiencia cromatogrfica es la misma, se puede demostrar que el ancho de la base del pico con respecto al de A, resulta: i. igual ii. 4 veces mayor iii. 2 veces mayor iv. 2 veces menor v. Otra opc e) En una separacin de 2 analitos mediante TLC, en la que el frente del solvente alcnz los 10 cm, X recorri una distancia de 2,5 cm, mientras que Y recorri el doble. Con estos resultados se puede afirmar que la retencin relativa de ambos solutos es: i. 4 ii.3 iii. 0,33 iv. Otra opcin 3) Complete el siguiente texto utilizando como gua la lista de palabras que se brinda: Teniendo en cuenta que la gran mayora de los componentes orgnicos son de polaridad a , la cromatografa de fase resulta la modalidad cromatogrfica con mayor nmero de aplicaciones. En este tipo de cromatografa, la fe es polar que la fm, siendo la fe ms ampliamente utilizada la llamada Como fm se pueden usar mezclas de tipo metanol:agua, siendo que a contenido de metanol en la mezcla, mayor la fuerza de elucin. En el caso de la separacin de una mezcla compleja de analitos podra ser conveniente el uso de la modalidad de elucin de tal manera que en la medida que aumenta la concentracin de metanol en la fm, eluyan los st de k` en tiempos convenientes. En el caso de de que la separacin no resultara satisfactoria, puede reemplazarse el metanol de la fm por otro solvente como acetonitrilo. De esta manera se modifica la Una cromatografa de fase puede utilizar como fe una columna de junto con una fm de polaridad tal como hexano:acetona. Este tipo de cromatografa es til para separar compuestos de polaridad a .. A mayor proporcin de acetona, fuerza del solvente, por lo que los compuestos eludos exhibirn k` Palabras: fuerza del solvente, mayor, normal, alta, menores, selectividad, C18, slica gel, media, isocrtica, baja, reversa, menos, ms, menor, en gradiente, eficiencia, C8, mayores. 4) Los compuestos A y B se separan en una columna de 25 cm de longuitud con 8,5 y 9,73 minutos, respectiva//. Una sustancia no retenida eluye de la misma columna a 1,22 minutos. Los anchos del pico de la base para A y B resultan de 1,01 y 1,12 minutos respectiva//; calcule: a) Resolucin de la columna b) Nmero promedio de platos tericos c) Altura del plato terico d) La longuitud de la columna que sera necesaria para conseguir una resolucin de 1,6 e) El tiempo necesario para eluir el compuesto B en la columna de longuitud calculada en d) f) la altura del plato terico necesaria para lograr una buena resolucin de 1,6, utilizando la columna original de 25 cm y en el tiempo dado original//

PARTE PRACTICA
1) Se desea determinar el contenido de calcio de un alimento mediante espectrofotometra de absorcin atmica. Para ello, se pesan 50 mg de muestra seca en un tubo y se el agregan 0,5 mL de HNO3 concentrado, el que se incuba 6hs a T ambiente, y 6hs ms a 60C. Posterior// se lleva a un volumen final de 5mL con agua bidestilada para final// centrifugar durante 15 minutos a 3500 rpm. Obtiene as el extracto de la muestra. Suponiendo que se dispone de un matraz aforado de 10 mL para preparar la sc que sera introducida en el equipo. a) Que volumen de extracto de la muestra tomara para que la lectura se encuentre en el centro del rango de linealidad del equipo de 1 a 4 g/mL? Humedad del producto = 25%. El rtulo del mismo declara aportar 75 mg de Ca por cada 100 gr de peso fresco b) Cul es la funcin del HNO3 y de la incubacin realizada? 2) Se realiza la siguiente corrida cromatogrfica Condiciones del sistema: HPLC Columna: ODS, 150 mm, id, 3,9 mm Temp columna: 30C Fm: CH3OH:H2O 78:22 en modo isocrtico Flujo: 1 mL/min Volumen de inyeccin (loop): 25L Detector UV-V,

Area A = 34285 Area B = 38128 Area C = 42216

trA = 6,5 min trB = 9,2 min trC = 17,2 min

a) Que condiciones modificara para aumentar la selectividad e/ B y C? (sin afectar la selectividad e/ A y B) b) Si aumenta la T de la columna a 40C, Cmo se modificaran para A, B y C: a. tr b. k`? c) Si se cambia el loop por uno de 100 L, Cmo se modificara para A, B y C: a. area b. tr c. concentracin? d) Como explica que C tenga menor concentracin que A? e) Diga cual/es de las siguientes razones podran explicar que no sera posible conocer la concentracin del analito A: i. la absorbancia medida x el detector no se encuentra dentro del rg lineal ii. los resultados obtenidos presentan un coeficiente de variacin muy alto (> 20%) para este nivel de concentracin iii. La concentracin del analito se encuentra x debajo del lmite de cuantificacin del mtodo iv. El mtodo presenta alta repetibilidad pero baja reproductibilidad v. El mtodo presenta alto nivel de incertidumbre vi. El mtodo presenta baja especificidad para este compuesto 3) Se realiza una cromatografa en capa delgada para separar los componentes A, B y C utilziando slica gel como fe. Cuando se eluye con una mezcla de hexano: etanol 70:30, se obtiene el siguiente cromatograma: a) Que tipo de cromatografa se est realizando? b) Indique el orden de polaridad de los comp sabiendo que RfA =0,1; RfB =0,5 y RfC =0,8 c) Como varan los valores de Rf si se disminuyera la polaridad de la fm y como lo realizara con esos solventes? d) Indique 3 factores experimentales que deben controlarse con el fin de obtener resultados reproducibles e) Cite 2 vas mediante las cuales sera posible visualizar un compuesto que no sea percibido con luz visible.