Fosforilao oxidativa:

Converso do potencial de reduo em ATP

Oxidao de coenzimas

Reduo de oxignio

A clula precisa trabalhar

Portanto, precisa de energia

Respirao celular Uso de oxignio

Catabolismo

Fermentao

Sem oxignio

Ganha enrgia com ATP

Repete

A Base do Catabolismo
Reagentes Produtos

Transferncia de eltrons

Reaes redox
Transferncia de eltrons

Oxidao: perda de eltrons Reduo: ganho de eltrons

Agente redutor

Xe- + Y

X + YeAgente oxidante

Respirao celular
REAGENTES
Glicose + oxignio

PRODUTOS
Dixido + gua de carbono

C6H12O6 + 6 O2

6 CO2 + 6 H2O

Reduo Oxidao

Ganho de enrgia

Eletronegatividade baixa

Glicose

NADH
Cadeia de transporte de eltrons

Eletronegatividade alta

Oxignio

Fosforilao do ATP

Receptores de eltrons
Substrato reduzido + NAD+ Substrado oxidado + NADH + H+

As desidrogenases ligados a NAD removem dois tomos de hdrognio dos seus substratos. Um tomo de hidrognio transferido para como um on hidreto (:H-) e o outro liberado com H+ para o meio.

Respirao celular
Gliclise
Glicose 2 piruvato Reaes redox produzam NADH Citossol

Ciclo de Krebs
Piruvato CO2
Reaes redox produzam NADH Matriz mitocondrial

Transporte de eltrons
Aceita eltrons (do NADH) Gera ATP Membrana interna

A mitocndria: Onde acontece a fosforilao oxidativa (transporte de eltrons e sntese de ATP) -Membrana externa -Espao intermembrnico
-Membrana interna (impermevel a ins e vrios metablitos): Transportadores de eltrons; ATP sintase; ADP/ATP translocases -Matriz contm complexo de piruvato desidrogenase, enzimas do ciclo de Krebs

O mecanismo da fosforilao oxidativa

1.
2.

3.

Fluxo de eltrons atravs de uma cadeia de transportadores ligados membrana. Energia livre disponibilizada, atravs desse fluxo de eltrons montanha abaixo (exergnico) est acoplada ao transporte de prtons montanha acima, atravs de membrana impermeavel a prtons. A energia livre da oxidao dos combustiveis conservada como potencial eletroqumico. O fluxo transmembrana de prtons no sentido do seu gradiente de concentrao atravs de canais proticos especficos fornece energia livre para sntese de ATP. A ATP sntase acopla o fluxo de prtons a sntese de ATP (fosforilao de ADP).

Esquema geral de fosforilao oxidativa pela cadeia repiratria (Fosforilao de ADP, oxidao de NADH e FADH2 ). Oxidao de coenzimas leva o bombeamento de prtons para espao intermembranar da mitocndria. O potencial eletroqumico fornece a energia para sntese de ATP

Potenciais de reduo de meia reaes da cadeia respira

Eo: Medida de afinidade para e- da molcula/ion sendo re DEo = Eo (aceitor de e-) Eo (doador de e-) Se DE > 0, reao tende ir para frente DG = -n x F x DE F = 96,5 kJ/V.mol

Separao dos complexos funcionais da cadeia respiratria

Reaes catalizados por fraes isolados in vitro

Mtodo para determinao da seqncia de carregadoras de

>------------------------Eo --------------

reduzida

oxidada

Complexo I - NADH:ubiquinona oxidoreductase

Uma bomba de protons utiliza a energia de transferncia de eltrons para criar um gradiente de H+ atravs da membrana. A energia de transferncia de e- est momentariamente guardada na forma desta gradie

42 subunidades

Inibida por amytal (barbitura Rotenona (insecticida), e Piericidina A (antibitico)

Complexo I: recebe e- de NADH e transfere para citQ

Complexo II: Recebe e- de FADH2

(em succinato desidrogenase no ciclo de Krebs)

e transfere para cytQ.

Dmero de Complexo III

Oscila entre cytb e cytc1

Q N e Q P: stios para ligao de citQ

Receba e- de QH2 e transfere para citc e bombeia 4 H+ per citQH2 para fora da
mitocndria, aumentando o gradiente de H+.

Complexo IV - Citocromo oxidase: transfere e- de citc para O2, formando H

(4e-) 4 citc 4 CuA 4 heme a 4 cita3/CuB O2 2 H2O

NADH + H+ + O2 NAD+ + H2O DEo = +1,14 volts, DGo = 220 kJ/mol

Energia liberado pela oxidao guardado na forma de um gradiente de H+.

NADH + 11 H+in + O2 NAD+ + 10 H+ex + H2O Fora protomotiva = DG = RTln(Cp/Cn) + ZFDy = 200 kJ pe Energia da gradiente de
Energia de differena de H+ (DpH=0,75) carga (Dy=0,2 V)

FORA PROTOMOTIVA

A oxidao do NADH leva o transporte de prtons para espao intermembranar: Aumento do eo e Go

eo= eo(aceptor de e-) - eo(doador de e-)

Go= -nF eo
Variao

Como funciona o bombeamento de prtons ?

O mecanismo de redox loop:

A regenerao da coenzima: Transferncia de eltrons para o prximo membro da cadeia, que fica reduzido. A primeira coenzima se torna oxidada e se regenera.
2X

2X

FMN e coenzima Q transportam prtons e eltrons As citocromos e as protenas Fe-S (ferro-enxofre) funcionam somente como transportadores de eltrons.

O complexo I: NADH-coenzima Q redutase

Transferncia de eltrons para coenzima Q (ubiquinona) NAD+/NADH FMN/FMNH2 Centros Fe-S (7 protenas FeS) -0,32 V -0,30 V -0,38 0,27 V

Coenzimas CoQ

0,05 V

A reduo do mononucleotideo de flavina

NADH + H+ + FMN

NAD+ + FMNH2

Complexo II: Succinato-coenzima Q redutase

FAD/ FADH2 Centros Fe-S ox/red

-0,04 V -0,03 0,06 V

Citocromo B562 ox/red

Coenzima Q CoQ / CoQH2

-0,08 V

+0,05 V

Coenzima Q ou Ubiquinona

ou
Q

Complexo III: coenzima Q-citocromo C redutase

Os complexos I e II assim como a Glicerol 3Fostfato desidrogenase, reduzem incialmente a Ubiquinona (Q ou Coenzima Q) a QH2 A reduo ocorre com a adio de dois H+ vindos da matriz mitocondrial.

Primeiro Ciclo QH2 Q

Complexo III: coenzima Q-citocromo C redutase QH2, perde 1 eltron e 1 prton, formando QH, o eltron segue a rota QH2 Fe-S cit c1 c, enquanto o H+ liberado no espao intramembranar. QH Passa para o passo seguinte.

Complexo III: coenzima Q-citocromo C redutase

H+

No segundo passo do primeiro ciclo, QH (Semiquinona), convertese na forma oxidada Q, por transferncia de seu eltron aos citocromos b e por extruso do prton ao espao intramembranar.

O eltro doado por QH segue a rota: QH - cit b566 cit b562 - Q Saldo Lquido do Primeiro Ciclo: A transferncia de um dos eltrons de QH2 para o citocromo c resulta na extruso de 2H+ no espao intramembranar e no consumo de um H+ da matriz mitocondrial que ir reconstituir o QH para a prxima etapa.

Complexo III: coenzima Q-citocromo C redutase

QH recebe mais um H+ da matriz mitocondrial recuperando o QH2, que passa a refazer o ciclo, liberando mais 2 H+ para o espao intramembranar.

Segundo ciclo Q QH.

QH2

Complexo III: coenzima Q-citocromo C redutase

Citocromo b562 ox/red + 0,03 V Citocromo b566 ox/red - 0,03 V Centros Fe-S ox/red Citocromo c1 ox/red +0,22 V Citocromo c ox/red +0,24 V

O complexo IV: citocromo c oxidase transfere os eltrons para o oxignio Citocromo a ox/red +0,29 V Cu2+/ Cu1+ +0,34V Citrocromo a3 ox/red +0,55V

2H+

ATP sintase bombeadora de prtons

F0: Canal de prtons (protena transmembrnica) F1: Protena da membrana periferica
1. 2. Translocao de prtons pela F0 Acoplamento da dissipao do gradiente com a sntese de ATP (interao entre F1 e Fo)

O mecanismo de alterao de ligao para ATP-sintase

open

loose

tight

open

Inibio na cadeia respiratria e desacoplamento da Fosforilao oxidativa

Inibio na cadeia respiratria:

Na sintase, cada 3 H+ produz 1 ATP

Mas precisa 1 H+ para transportar Pi

Logo , 4 H+/ATP

Logo: NADH desloca 10 H+ e produz 2,5 ATP FADH2 desloca 6 H+ e produz 1,5 ATP

Lanadeira malato-aspartato: transferncia de NADHcit para mitocndria

Lanadeira glicerol - fosfato

Desacoplamento de mitocndria em tecido adiposo marrom de mamferos recm-nascidos produz calor

Regulao das vias de produo de ATP