Introduccin a la seccin

n las secciones precedentes que tratan del metabolismo de los diferentes grupos de compuestos, se estudian aquellos procesos ms generales. No obstante, en los distintos tipos de clulas tienen lugar reacciones qumicas y procesos metablicos completos que pueden ser exclusivos de un tipo celular. Estas especificidades bioqumicas son las que le confieren la especializacin a los diversos rganos y tejidos del cuerpo. En la presente seccin se agrupan en 7 captulos los aspectos bioqumicos especiales por tejidos. Se incluyen aqullos ms relevantes, toda vez que el total de particularidades bioqumicas que encontramos en nuestro organismo es en extremo extenso y, adems, no siempre de justificado inters. Lasangre es el primero de loscampos tratados en la seccin. A pesar de su especificidad, y debido a las funciones que cumple este medio, sus peculiaridades son de inters general. La sangre desempea, sobre todo, una funcin de transporte, ya sea de nutrientes, productos de excrecin, hormonas y otras sustancias reguladoras. Como consecuencia, los procesos bioqumicos que le son privativos y que le confieren la capacidad funcional que le es propia van a repercutir en muchos de los fenmenos biolgicos de todo el organismo. De ah que dentro de las cspecificidadesbioqumicas de los tejidos, las de este medio fluidosean de las que ms necesita conocer el profesional en el campo de lasalud humana. La seccin contina con un captulo sobre la bioqumica del tejido nervioso. Si en las neuronas yacen las bases materiales de la funcin biolgica ms elevada: el pensamiento humano, es razonable esperar que en estas clulas exista una enorme cantidad de transformaciones bioqumicas y de biomolculas especficas.

Tornado de Biacherniatry. Liibcrt Stryel: Cuarta ediein,J995

Desgraciadamente, queda mucho por investigar y esclarecer en cuanto a la base bioqumica de las mltiples y complejasfuncionesdeltejido nervioso. A pesar deello, las bases moleculares de la trasmisin nerviosa, la naturaleza y el modo en que realizan su funcin los diversos neurotrasmisores y las peculiaridadesdel metabolismo cerebral son algunos de los hechos conocidos en buena parte y de indiscutible inters que se exponen aqu. El fenmeno de la visin y el rgano receptor encargadode ella, el ojo, se han incluido en esta seccin por ser ricos en particularidades bioqumicas y. adems, por ser el marco apropiado para el estudio de la fotoqumicade la visin, la cual -por sus rasgos esenciales-constituye un aspecto fundamental en la comprensin de una de las formas en quese estahlecela transicin entre el mundo fisico (la energa luminosa) y el mundo vivo y consciente (el impulso nervioso originado en la retina). Si la visin, por su propia naturaleza, reclama un espacio en este marco de especificidades, lgica, otro tanto sucede con el movimiento. En nuestro organismo por ocurren diversos tipos de movimiento en relacin con protenas especiales. En el tejido muscular encontramos la expresin ms acabada de este dispositivomotriz. En el captulo dedicado a este tejido se describe la base bioqumica del movimiento musnUar. Los 3 captulos que completan la seccin tienen que ver con los tejidos aparentemente inertes. En una aproximacin superficial se puede considerar al tejido adiposo como un simple receptculo de sustancia de reserva energtica,al tejido conectivo como un esttico medio de soporte y a los tejidos dentarios, limitados de igual modo, a una funcin meramente mecnica. Por el contrario, la bioqnimica especka de estos tejidos es rica y su conocimientocontribuyemuchoa tener una visin ms real y completa de su complejidad. Los adipocitos son clulas mucho ms activas de lo que se supona al principio y el recambio metablico que constantemente se lleva a cabo en ellas es mantenido por una alta actividad de enzimas especficas. La lipognesis y la liplisis son 2 vertientes metabficas de significacin general para el organismo, que tienen su expresin cuantitativamentems significativaen el tejido adiposo. En el tejido conectivo, los proteoglicanos y las protenas estructurales que en l se encuentran no cumplen una funcin pasiva. En el captulo correspondientese expone cmo las biomolculas de la sustancia intercelular del tejido conectivo le confieren a sta sus particularidades bioqumicas funcionales. En la seccin se incluye un captulo de Bioqumica Dental, de inters especial para el estudiante de Estomatologa, en el que adems de exponer las caractersticas hioqunicas de la saliva y los tejidos del diente, se hacen consideraciones acerca de la patogenia y las posibilidades de prevencin de la caries dental, fundamentadasdesde el punto de vista molenilar.

La evolucin de los organismos unicelulares hacia la complejidad creciente de 10s pluricelulares trajo consigo el establecimiento de medios apropiados para el intercambio de sustancias de los diferentes rganos y tejidos con el medio exterior y entre ellos mismos. La sangre es el ms importante de estos medios. El plasma es el sobrenadante que resulta de la centrifugacin de la sangre, a la cual se le ha impedido coagular. En el precipitado se recolectan las clulas sanguneas. Por otra parte, un lquido amarillento se separa de la sangre coagulada: el suero sanguneo.Se diferencia del plasma en que no contiene fibringeno, protena precursora de la fibrina, que es la que constituye la estructura reticular del cogulo (Fig. 63.1). El color amarillo del suero y del plasma proviene de la bilirrubina, as como de otros pigmentos biliares y de los carotenoides. La sangre cumple, sobre todo, una funcin de transporte, ya sea de los nutnentes, los productos de excrecin,lashormonasy otras sustancias reguladoras. En muchos de estos casos dispone de molculas y basta de clulas muy especialmente evolucionadas parael transporte especficode determinado elemento. La hemoglobina y los eritrocitos son losejemplos ms evidentes en el transporte del oxgeno, pero en este captulo y en otras secciones encontraremos muchos ejemplos de transporte especializado por componentes sanguneos. Otras funciones de la sangre son la de defensa, y la regulacin trmica y de los equilibrios hdrico y cido-bsico. El volumen total de la sangre se aproxima al 8 % del peso corporal, lo que en el adultorepresenta alrededor de 5 L. En la tabla 63.1 se presentan otras caractersticasde este lquido. Son mltiples los dispositivos orgnicos que contribuyen al mantenimiento de la composicin sangunea dentro de determinados lmites compatibles con la vida. E1 sistema digestivo y los pulmones permiten incorporar las sustanciasque el organismo consume constantementepara su provisin de energa y otras necesidades. Los riones, el intestino, la piel y los pulmones aseguran los distintos modos de depurar la sangre de las sustanciasde desecho. Las clulas y las mltiples protenas sanguneas, as como las hormonas que en ella se encuentran, son producidas por diferentes rganos del cuerpo, los cuales contribuyen a mantener su composicin caracterstica. Se comprendefcilmente que de ordinario la ms sutil anormalidad en algn sitio del organismose refleja en alguna alteracin de la composicin habitual de la sangre. No en vano una muestra de ella es el medio ms socorrido en la medicina actual, para eldiagnstico y seguimiento de la mayor parte de las enfermedades.

&

Anticoagulante

Elementos Centrifugacin

b)

Centrifugacin
SUCIO.

Suero Elementos

Fig. 63.1. Separacin de los elementos formes de la sangre: a) obtencin del plasmo; b) obtencin del

lhbla 65.1. Algunas caractersticas fsicas de la sangm

Sangre

6-8 % del peso corporal 66-78 mL.kg-' peso 2 000-2 900 mL.(m"-' Densidad: 1,060 Viscosidad: 3,643
pH: 7,4

Punto de congelacin: -035 "C 40-45 7 delvolumen 0

50-60 70del volumen Slidos: 8-9 % Densidad: 1,026 Viscosidad: l,7- 2 (aguazl) Punto de congelacin: -03.5 'C Presin osmticaa37 "C:7.6 an pH: 7 4

Composian
Las clulas constituyen del 40 al 45 % del volumen total de la sangre; el volumen restante comesponde al plasma, en el que est presente una amplia gama decompuestos qumicos, cuyas concentraciones normales varan de acuerdo con el estado en que se encuentre el organismo. Naturalmente, no va a existir igual concentracin de cido

lctico, por ejemplo, en la muestra de sangre proveniente de un sujeto en reposo, que en la de uno sometido a un ejercicio intenso y prolongado. Las concenh-aciones de muchos constituyentesse afectan grandemente durante el perodo absortivo. Debido a esas variaciones, y para que los resultados tengan sipifcado vlido al establecer comparaciones, la toma de muestras de sangre debe realizarseen determinadas condiciones denidas. Lo ms comn es obtener la muestra entre las 12 y 14 h posteriores a la ltima comida y con el sujeto en reposo. En la maana,antes del desayuno, es el momento apropiado para quese den esta condiciones. Los slidos presentes en el plasma ocupan del 8 al 9 % de su volumen. La mayor Y parte corresponde a I ~ protenas,pero aparecen decenas de otroscompuestosorgnicos. En la tabla 63.2 se relacionan estos constituyentesy los rangos de sus valores normales.
mbla 63.2.

Algunos componentes orgnicos del plasma mz.dL-'

0,3-2,0 0,2-1,o 5,0-20 2,7-78 (varones) 2,0-6,4(hembras) 300-480 35-65 40-80 OJ-1,2 150-250 65-75 % del tohl 0,6-1,2 0,4-4,0 70-110 0-200 400-800 0,3-0,9 20-30 2,s-73 0,8-5,O 0,4-4,4 4,s-10,O

Sustancia
Acetona

ado acetilactico ado lctico ado rico cidos grasos libres Aminocidos Amonacn
Bilumbina

Colesterol total steres de colesterol CreaonOia k 6 h h i ~ Glucosa G m neu* Lpidostotales cido pinvieo U m
Alanina Cisona

cidoglutmiu,
GIubmb

Protenas plasmticas
Al separar las protenas del suero por electroforesisen papel o acetato de celulosa se obtienen 5 fracciones bien diferenciadas, que en el orden de mayor migracin hacia elnodo corresponden a la albmina, alfa globulinas (ala, y alfa,), beta globulinas y gamma globulinas. Una vez revelado el electroferograma se visualizan las fracciones en bandas coloreadas (Fig. 63.2b). De ste se puede obtener un grfico con la ayuda de un densitmetro. El soporte utilizado se transparenta con aceite mineral u otros medios y se coloca en el equipo, de modo seme,jante a un colormetro. La intensidad de la luz que atraviesa la muestra (en este caso, en vez de una solucin se trata de una capa delgada del soporte que se utiliz) es proporcional a la intensidad del color en cada banda y el equipo est diseado para trazar una curva correspondiente a cada banda, segn el ancho y la densidad ptica de ella (Fig. 63.2a). Con la excepcin de la fraccin de albmina, en las distintas bandas se hallan mezclas de decenas de protenas. Procedimientos ms especficos permiten separar e

Fig. 63.2. Elertroforesis de las proteinas del suero: a) grfico obtenido por densitornetria: la dirwci6n de la migracin es dc izquierda a dereelia (hacia el nodo); b) bandas de las 5 fracciones v i s i h l e ~ en electroforesis sobre papel, de la cual se obtuvo el grfico por densitornetria.

identificar las protenas individuales que componen cada fraccin. La inmunoelectroforesis aprovecha las propiedades inmunolgicas de las protenas, lo cual le confiere gran especificidad. Por este mtodo se ha identificado la mayor parte de las protenas plasmticas. En el adulto normal, el total de las protenas del plasma se encuentra en un rango de 5,7 a 8 g .dL1.A contiuuacinconsideramos, por separado,cadauna de las fracciones priucipales.

Albmina
Constituye algo ms de la mitad del total, pues su concentracin uormal vara entre 35 y 4,s g.dL-l. Est compuesta por una solacadenapolipeptdica y numerosos puentes disulfuros intracatenarios. Con un peso molecular de 66 000 D y de aproximadamente 580 residuos de aminocidos,la albmina est entre las ms pequeas de todas las protenas plasmticas y es dc las pocas que no es glicoprotenas. Sus principales funciones son 2: la relacionada con el efecto osmtico y su papel como protena transportadora de diversas sustancias.Por ser la protena m& abundante, por su pequeo peso molecular y por el hecho de poseer un total de 18cargas negativas por molcula, a pH fisiolgico de 7,4,le confieren la propiedad de ser el factor determinante en la presin onctica del plasma. El trmino se refiere precisamente al efecto osmtico que se deriva de la presencia de protenas. La albmina contribuye al efecto osmtico del plasma sanguneo con casi el 80%. Es por ello que una de las primeras manifestaciones, por sus concentraciones anormalmente bajas, es el edema que se produce como consecueucia de un incremento en el lquido intersticial, al disminuir la capacidad de retencin de agua en el lecho vascular. La causa fsica es la disminucin de la presin onctica, debida a la hipoalbuminemia. En cuanto a su funcibn de transporte, muchas sustaucias escasamente solubles en agua viajan por la sangre unidas a la molcula de albmina. Es relevante el caso de los cidos grasos que se movilizan desde el tejido adiposo hacia los tejidos perifricos, unidos fuertemente a ella; la bilirrubina, las hormona^ tiroideas y los esteroides tambin se transportan de este modo. Asmisnio lo hacen medicamentos como la penicilina y la aspirina, entre otros.

A la fraccin de las alfa, globulinas pertenecen la protena transportadora de retinol la (RBP [iptinolI>vndingproteinl), globulina transportadora de tiroxina (TBG [ tiroxin byndingglobuliii]) y la transcortina, entre otras. La RBP, que tiene afinidad por el retinol, forma un complejo con otra protena plasmtica. Se cree que ello evita la excrecin renal de la RBP libre, cuyo peso molecular es solamente de 22 000 D. La alfa-feto globulina, la protena ms abundante en el plasma del feto, se halla tambin en el lquido amnitico. Al nacimientosu concentracin cae,al tiempo que se eleva la de la albmina. En el adulto se encuentra en concentraciones muy bajas, aproximadamentede 1mg .dI?. En lasangre deembarazadas aparecen niveles elevados de esta protena, en el curso de malformaciones congnitas por defecto del cierre del tubo neural. En los casos oositivos. en los cuales se confirme la sos~echa ultrasonido, iior se determinar la alfa-feto protena en el lquido amnitico, para evitar las graves consecuencias, mediante la prctica del conse,jo gentico. En Cuba la determinacin sangunea se le realiza a todas las gestantes. La TBG y la transcortina se tratan en el captulo 60.

Con la fraccin de las alfa, globulinas migran la ceruloplasnuna, la Iiaptoglobina y variosinhibidores de proteasas. Idaceruloplasrnina transporta iones de Cu y posee 8 zonas, capaces de unirse al Cu'o al Cu2+. deficiencia de esta proteua se observa La en la enfermedad de Wilson, al acumularse cantidades elevadas de Cu2+ el hgado y en el cerebro, con el consecuente dao heptico y neurolgico. La haptoglobina, que constituye la cuarta parte de las alfa, glohulinas, forma complejos con la hemoglobina proveniente de la lisis de los eritrocitos. En el ser humanoesta protena se presentaen 3 tipos; su estructura lacomponen 2 paresdiferentes decadenas (alfa,, betaJ. Los3 tipos existentessedeben a variaciones en lassecuencias de las cadenas alfa. La alfa, macroglobulina inhibe a toda claie de proteasas y est compuesta por 2 subunidades idnticas. Al combinarse con la proteasa se hidrolizan enlaces peptdicos, lo que trae como consecuencia un cambio en la conformacin de la protena; se forma entonces un complejo proteasa-inhibidor inactivo, que ulteriorniente es incorporado por los macrfagos.

Beta globulinas
La transferrina es su principal componente. Su funcin es el transporte de Fe". Capta2 tomos por molcula y en los sujetos normales suele estar saturada en la tercera parte de su capacidad, aproximadamente. La hemopexina, otra beta globulina,se liga al hemo y evita su eliminacin por la orina l.a protena C reactiva y la B, microglohulinatambinmigraiien esta fraccin. La funcin dela primera es desconocida; la segunda est relacionada con los fenmenos de histocompatibilidad, que regulan el mecanismo de rechazo a los trasplantes de tejido.

En estafi-accin plasmtica se hallan las inmunoglobulinas y entre ellas algunas

c~oglobulinas, se denominan as porque se precipitan al enfriar el suero. que

Se distinguen 5 grupos de inmunoglobulinas: lgM, lgG,IgA,IgD eIgE. LasIgM son las que se producen primero, en respuesta a los autgenos. Las IgG se producen despus y constituyen las principales inmunoglobulinas de la sangre. Este grupo es, adems, el nico tipo que traspasa la barrera feto-placentaria y provee de inmunidad al feto. Las IgA, que tambin se producen despus de las IgM, actan contra los microorganismos en sitios de entrada, como pueden ser los tractos respiratorio y digestivo. Las de los tipos IgD e IgE se hallan en la sangre, en concentraciones muy pequeas, y la funcin de las primeras no est del todo clara. Las IgE se unen a los basfilos y a las clulas cebadas,productores de histamina y heparina. Las IgE estn vinculadas a las reacciones de alergia. En el captulo 82 "Produccin de anticuerpos", perteneciente a la seccin XIV, se tratacon mayor amplitud la estructura y funcin de las inmunoglobulinas.

El fibringeno es una protena soluble, con peso molecular de 340 000, que se polimeriza como resultado de un proceso de protelisis parcial. La fibrina resultante de esta transformacin es uno de los principales componentes del cogulo sanguneo. Posteriormente, en este captulo se tratar la coagulacin y la funcin que realiza esta protena en ese delicado proceso.

Bioqumica de los elementos formes

Entrocitos Los glbulos rojos son de las pocas clulas cuyo tiempo de vida se conoce con certeza. Circulan en la sangre 120 dias, como promedio. Estos eritrocitosson el prodncto altamente especialirado de un rgano que existe temporalmente, conformado en un sitio del organismo, el cual recibe el nonlbre de entrn. El trmino se refiere tanto a los eritrocitos circulantes, como a la masa total de clulas eritropoyticas en la mdula sea, de las cuales se derivan aqullos. La clula pluripotencial, de la cual pueden derivarse las plaquetas, los leucocitos y los propios glbulos rojos, en un momento determinado se torna sensible a la eritropoyetina, hormona sintetizada por los riones y el hgado, y se convierte en el proiiormoblasto,clula con un enorme ncleo que abarca e1 80 % del espacio celular. Despus se diferencia por divisiones sucesivas, en diversos tipos de normoblastos. El ltimo tipo, el ortocromtico, al perder el ncleo queda convertido en el precursor inmediato de los eritrocitos: el reticulocito. Esta clula se encuentra en la sangre circulante y en 24 a 48 h va madurando. Se completa la sntesis de hemoglobina, que durante las fases previas al reticulocito ya llegaba al 80 %,y los organelos subcelulares van disminuyendo en tamao, hasta que finalmente son expulsados de la clula. Este sistema tiene capacidad en el adulto normal para producir 2,3 millones de glbulos rojos por segundo. De todo cnanto queda dicho, se comprende que el eritrocito carece de ncleo, initocondria~, lisosomas, ribosoinas, retculo endoplasmticoy aparato de Golgi. Tiene forma de disco bicncavo, de 7 micras de dimetro, con un espesor que en el centro es de 1 micra, pero en fa periferia alcanzalas 2 3 micra. Esta formaes importante parala snpervivencia de la clula, conio veremos posteriorinente.

Composicin qunica Al igual que en el resto delas clulas, el principal catibn es el K+y estn presentes el Na', el Ca" y el Mg2+; principales aniones son el Cl; el HCO;, la hemoglobina los y los fosfatos orgnicos. De estos ltiinos, el componente ms relevante es el cido 2,3 bisfosfoglicrico. La menlbrana y el citoesqueletosnbyacenteson determinantes en el inantenimiento de la forma funcional de los eritrocitos. Las diferentes proporciones de los tipidos de la membrana eritrocitaria se representan en la fignra 63.3. De ellos, el colesterol y los glicolpidos se encuentran hacia el lado externo de la hicapa lipdica, as como la mayor parte de la fosfatidilcolina y la esfingomielina, mientras que hacia el lado interno se localiza mas del 80 O/, de los fosftidos de etanolamina y de serina. Las protenas de las membranas de los eritrocitos se han separado mediante electroforesis en gel de dodecilsulfato. Hay bandas correspondientes a las proteinas integrales de la membrana y otras que son las protenas extrnsecas, las cuales se mantienen miidas no covalentemenlea las protenas integrales. Varias de estas protenas extrnsecas forman el citoesqueletosubyacente de la bicapa lipdica, determinante eii la forma que adopta el eritrocito. Las protenas extrnsecas mejor conocidas son la espectrina, de estructura y propiedades muy semejantes a la miosina del msculo; la actina, indistinguible de la actina muscular, y la ancrina. Estas protenas se disponen en un entrecruzamiento que va nnido a una protena integral de la membrana, que es la que corresponde con la banda 3 de la electroforesis en dodecilsulfato. La actina forma unos oligmeros de 10 monnieros, que se unen entre si por tetrmeros de espectrina. Estos complejos de actina y espectrina se unen a la ancrina (banda 2.1), que es la que establece la iinin a la protena iutegral de la inenihrana (banda 3) (Fig. 63.4).

Fif. 63.3. Composicin lipdica de la nicmhraiia eritrocitaria: a) (Ir<:) fosfoarilfiicerolei, (C) rule~terol,( G l ~ ) glieolipidos, (O) otros que incluye steres d c clesterul, Beidos graaos libres, sulfGtidos y triacilgliceroles; h) proporei6n de las diferentes clases de fosfoaeiigiiceroles: esfirigornielina (EM), fosfalidileuliria (FC). fosfatidiletaia,larnina(FE) y fosf;itidiiscrina(FS).

Banda 3
Fig. 63.1. Modelo del citoesquclcto y su uni6ii a la membrana plasmtiea del eritrocito. Arriba, una vista del citaesqueleto, paralela al plano de la memhrana. hhajri, vista de un curte traiisrersal que muestra la oricntaei6n de la anerina (hsnda 2.1) y la proteha integral de la memhrana (banda 3).

Tetrmero de espectnna

t
Oligmcro de

La funcin deesta armazn protenica,intimamente asociada a la membrana,no slo determina la forma del glbulo rojo, sino que permite su necesaria deformacin al pasar por capilaresniuy fmos, en los que el eritrocito adopta conformacioneselipsoidales y otras variedades. Precisamente la prdida de esta capacidad de deformacin desenipea una funcin importante en el retiro, por las clulas reticuloendoteliales del bazo y del hgado, de los hemates envejecidos. Por su parte, las protenas integrales con sectores de residuos hidrofbicos establecen uniones slidas con los hsfolpidos de la bicapa y fijan la protena a la membrana. La banda 3, a la que hicimos referencia eii su unin a la ancrina, representa el 25 % de estas protena9 integrales y es una glicoprotena. Otra glicoprotena integral es la glicoforina, que contiene 15 tetrasacridos, unidos mediante el oxgeno, y un oligosacrido por enlace N-glicosdico. Mientras la protena de la banda3 se dispone con susector NH, terminal haciaellado citoplasmtico y laporcindel COOH terminal, quecontiene los oligosacridos hacia el exterior,la glicoforina lo hace con su extremo en a COOH terminal,rico adein~ residuos cidos, hacia la porciii interna de k membrana.

Aniigemenicidad los eritroci'tos. Gmpossanguneos de

Los diferentes grupos sanguneos estn determinados por la presencia -en la superficie de los eritrocitos- de diferentes antgenos. Los grupos sanguneos se reconocen por la capacidad que tienen los anticuerpos especficospara un antgeno dado, de aglutinar las clulas que lo contienen. Aunque existen 14 grupos sanguneos bieu definidos, que abarcan un aproxiniado de 100 antgenos diferentes, nos referiremos detalladamente al sistema A B O, el cual est relacionado con 3 sustancias, cuyos determinantes antignicos se representan en la columna derecha. Se puede observar que la diferencia entre estos 3 antgenos radica en la presencia delagalactosa ode la N-acetgalactosamina en el enlace alfa 1-3,unida a la penltima galactosa, o en su ausencia como ocurre con el antgeno O, de modo que los individuos con el antgeno A poseen la correspondiente enzima N-acetilgalactosamina transferasa; los del tipo B, la galactosil transferasa y los del tipo O carecen de ambas enzimas. Como los individuos reconocen sus propios antgenos, producen anticuerpos para los antgenos extraos, de suerte que los individuos tipo O producen anticuerpos para los 2 antgenos A y B; los del tipo B producen anti-A y los del tipo A, anti-B. El tipo heterocigtico AB no produce ni anti-A, ni anti-B.

Fuc a1+2

\Cal D I -w 3 Gal NAc a

/
al N A ~ a1+3

Antgeno A Fucnl-r2 \ Gal [iI+.? Gal NAc u

Gal u1

+3
Antgeno B

Fuc u1 + 2 GI DI +3 Cal NAc a

Antgciio O

Otros antigenos bien caracteri~ados los de I,ewis, los cuales se hallan asociados son con las lipoprotenas en forma de glicoesfingolpidos. Los grupos MN estin presentes en la glicoforina, mencionada anteriormente, y difieren tanto cri un aniiiiocido del sector NH, terminal, como en el glcido asociado a ese extremo. El conocido antigeno Rh an no se ha caracterizado, en cuanto a su determinante qumico especifico.

Es ohvio que el metal>olismodel glbulo ro,jo maduro se halla muy limitado, si tetiernos en cuenta que carwe de organelos intracelulares. Si bien es cierto que requiere una cantidad inenor dc energa que otras clulas, necesita de ella y de su capacidad redoctora para diferentes procesos. La niayur parte del ATPse consume para mantener las coiicentraciones de R'a+y Ca" relativamente bajas, y las de K+ elevadas eii el interior celular, en contra del gradieiite de concentracin. Por otra parte, el potencial reductor se requiere para mantener el Fe" de la hemoglobina en su estado funcional, los grupos SH eu la ben~oglohina otras protenas al estado reducido, impresciudible para mantener la y integridad de la membrana celular y del citoesqueleto. Idadegradacin anaerohia de la glucosa y la via de uxidaciii directa satisfacen tanto las necesidades ener~ticas. como el uotencial reductor. La glucosa penetra en el eritrocito por difusin facilitada, que no depende de la insulina. Adems, la iiiembrana cuenta con la actividad de ATPasas dependientes de Na' y la dependiente de Caz*. El 0,s la del total de la heinoglobiiia se convierte por autooxidaciiii en metahemoglohina (Fe3+) en determinadas condiciones puede ser considerablemeote y n i q o r por factores ambientales, entre ellos el humo de los fumadores. El NADH', producto de la etapa oxidativa de la gluclisis, es un cofactor de la metahemoglohina reductasa, eiizima que cataliza la reaccin que se contrapone al proceso referido y regeuera la desoxihemoglobina funcional. Eii la reacciii interviene, adems, el citocromo b,.

Se ha ideiitificado otra rnetaheinoglobina reductasa que trabaja coi1el NADPH', peri! su funciii tisiolgica no est clara, debido a que acta solamente en presencia de coloraiites artificiales, como el aiul de inetileno. Sin embargo, el NADPHi producido cantidades apropiadaide d u t a t i h en la \iadcoid.d~K>ndirectaseutilizaparaniantener reducido. La enzima es una flavoproteina que cataliza la reaccin siguiente:

Esta redi:ctasa constituye una proteccin contra los perxidos que se forman cuando la hemoglohina se transforma en metahemoglohina. El perxido oxida al glutatin bajo la catlisis de la gliitaiiri peroxidasa. Ya se refiri la funciii del Bcilo 2,3 hisfusfoglic6rico como modulador de la afinidad de la hemoglobiiia por ci oxgeno, y cmo se produce este metabolito en una derivacin especial de la gluclisi en el eritrocito (captulo 12).

leucocitos conforman varias lneas celulares, con caractersticas especficas que los diferencian morfolgica y funcionalmente. No obstante, en este ltimo aspecto se distinguen 2 grupos: unos con actividad fagoctica frente a organismos extraos y sustancias txicas (neutrfilos y monocitos) y los linfocitos que utilizan tanto los ,ticuerpos humorales, como otras reacciones mediadas por clulas, en contra no slo de microorganismos y sustancias extraas, sino tambin frente a las alteraciones que ocurren en clulas propias del organismo. Por lo dems, todos los tipos de leucocitos poseenlas vas metablicas comunes ala mayor parte de las clulas del organismo. LOS leucocitos con actividad fagoctica se caracterizan por detectar y seguir pdientes mnimos demolculasproducidas en los sitios de inflamacin; esta propiedad se conoce como quimiotaxis. El potencial quimiotxico de los fagocitos les permite desplazarse del torrente sanguneo a los sitios de inflamacin localizados. Otras que les permiten participar en la reaccin inflamatona son la fagocitosis, la produccin de radicales de oxgeno y la digestin intracelular. La quimiotaxis se puede definir como el movimiento dirigido de una clula, en respuesta a un gradiente qumico de concentracin. Su estimulacin da inicio a la secuencia de eventos, por los cuales las clulas fagocticas ingieren y destruyen finalmente a materias extraas. Una gama amplia de sustancias relacionadas estructuralmente estimula la quimiotaxis de los fagocitos. De estos factores quimiotxicos, los mejor caracterizados son el C5 del sistema del complemento, el factor quimiotxico inducido por cristal o CCF (crystal-induced chemostacticfactor) y el denominadofactor quimiotxico derivado de Linfocito (LDCF [lyinphocyte-derived chemotacticfactor]). El CCF, con un peso molecular de 8 400 D, es un pptido producido por los polimorfonucleares en la fagocitosisde materias cristalinas, como el urato monosdico. Estoscristales aparecen en el lquido sinovial de pacientes con hiperuricemia y gota, lo que contribuye, probablemente, a la reaccin intlamatoria en sus articulaciones. El LDCF, con un peso molecular de 12 000D, es un pptido producido por los linfocitos, una vez que han tropezado con antgenos. Un nmero de otras sustancias posee actividad quimiotxica para los leucocitos, entre ellas varios pptidos que se derivan de la fibrina. Otra clase adicional est compuesta por determinados cidos grasos, derivados del metabolismo del cido araquidnico, por ejemplo, el cido 5-hidroxi-6,8,11,14-eicosatetranoico (S-HETE), (HHT) y los leucotrienos, derivados -junto el 12-hidroxi-5,8,10-heptadecatrienoico con las prostaglandinas y los tromhoxanos- de los cidos grasos insaturados de 20 carbonos (captulos 13 y 59). Algunos leucotrienos participan en los procesos de anafilaxis, como el LTD,, que es un componente del mediador de la anafilaxis, denominado sustancia anailctica de reaccin lenta SRS-A (slow reactingsirbstance of anaphylaxis); otros como el LTB, Conducen a una pequea liberacin de las enzimas lisosomales. Poco se sabe del proceso de quimiotaxis despus de la interaccin con los receptores especficos. Sin embargo, un aumento en el flujo de Ca" hacia el interior de los fagocitos podra ser un eslabn importante. El AMPc inhibe generalmente las respuestas quimiotxicas, al igual que los agentes que incrementan sus niveles intracelulares, como las catecolaminas beta adreurgicas y las prostaglandinas de la serieE. Aparte de estimular la quimiotaxis, las sustancias efectoras, al interactuar con sus receptores,emiten otras respuestas. De estamanera,estimulan a los leucocitos a secretar enzimas lisosomales e inician la produccin de iones superxidos. Los leucocitos con actividad fagoctica tambin se caracterizan por poseer un incremento en la actividad de algunas enzimas. As, las peroxidasas leucocitarias CatdiZan la reaccin siguiente:

Aqu R es cualquier sustrato oxidable. Esta enzima es importanteen el proceso de destruccin de muchas bacterias y algunos hongos. Tambin son capaces de llevar a cabo reacciones que generan perxido de hidrgeno y el superxido (O,*) al que aludamos anteriormente,aunque estas enzimas no se han caracterizadodel todo. La produccin de energa depende de la glucliis anaembia, pero con el fenmeno de la fagocitosis se asocia un mayor consumo de oxgeno, el cual se convierte principalmente en H,O,. Paralelo a ello, se metaboliza ms glucosa por la va de oxidacin directa. Por esta razn algunos consideran que el NADPH as generado interviene en la sntesis de H,O,. Otros atribuyen el origen de este ltimo a la actividad de una oxidasa del NADH, que utiliza el producido en la gluclisis anaerobia. De cualquier manera, se conoce que la accin metablica del leucocito sobre el microorganismo patgeno vara, debido a las particularidades de ste. Algunos microorganismos requieren de O,, mientras que otros prescinden de este gas. Los hay que son sensiblesa los cidos y los hay que son acidfilos. Igualmente, no es constante la sensibilidad a la lisozima y otras enzimas entre las diferentes variedades de microorganismos.

Las plaquetas se derivan de los megacariocitos de la mdula sea y carecen de pigmentos y ncleo. Si separamos las plaquetas de la sangre, sta puede conservarse por perodos prolongados en envases siliconados; tan pronto le aadimos un extracto de plaquetas, se produce rpidamentela coagulacin. Por lo regular, las plaquetas tienen que ser activadas antes de participar en la coagulacin. La trombina, la adrenalina, elcolgeno, el ADP y algunosfactores hsticos, pueden desencadenar la activacin, la cual trae consigo cambios estructurales que permiten la liberacin de constituyentes intraplaquetarios. En la membrana plasmtica de las plaquetas existen receptores especficos para varios de los factores de la coagulacin, como el factor V y el VIII. Tambin poseen sitios de unin al fibringeno, los que por accin del ADP y de la adrenalina son expuestosdurante la agregacin plaquetaria. Las plaquetas intervienen en el fenmeno de la coagulacin sangunea que trataremos a continuacin.

Coagulacin sangunea
La hemostasis es la accin de detener un sangramiento. La aplicacin de un torniquete,el pinzamientode un vaso -que rraliza el cirujano durante una intervencin quirrgica- y la simple compresin que aplicamos en una pequea cortadura son ejemplos de esta accin. Sin embargo,el propio organismo estdotadode su mecanismo de hemostasia,elcual se desencadena por sustanciaspresentes en la sangre; este proceso se conoce como coagulacin sangunea y consiste en la conversin de la protena fibringeno en fibrina, la cual al polimerizarse conforma una malla reticular que constituye la armazn bsica del cogulo sanguneo. Es obvio que la formacinespontnea de cogulos constituira un serio problema para la supervivencia y, por el contrario,la demora o la incapacidad para su oportuna aparicin,en condiciones de hemorragia, tambin dara al traste con la vida en cuestin de minutos. De ahque el fenmeno de la coagulacin sanguneaest sujeto a influencias reguladoras de diversa ndole. Antes de producirse la transformacincmcial que da origen a la fibrina, se sucede una serie complicada de reacciones de activacin,en las cuales intervienen numerosos factores. La mayora de ellos son euzimas proteolticas en forma de sus precursores inactivos, los zimgenos, pero tambin participan iones de Caz+ algunos fosftidos y

d e glicerina. El proceso es similar a otros ya estudiados, que tienen lugar como una d e acciones enzimticas, en las que se va produciendo un fenbmeno d e amplificacin, susceptible adems d e ser regulado en muy diversos niveles. En la tabla 63.3 se resumen los diversos factores que intervienen en la coagulacin. AI exponer las distintas etapas d e este proceso, el lector podr disponer d e una fuente expedita donde identificar los participantes en cualquiera d e las fases.
~ ~ b633. Factores d e la coagulacin: caracterizacin l a

Nombre trivial (factor)

Plasma Peso molecular (mdd1,)

-

Sinopsis fnncional

Pmtenasoluble. lapmtelisis portrombinaluplieriw Zimgenodetmmbina Con fosfolpidos presentes extnnieca Iones de calcio
Unefacturedependientesdc

(N)

Pmconvertina Fadoranohemolicu (vonWiUebrand) Fador Stuart (X) Antecendenteen plasmade tmmboplastina (XI) Factor Hageman (XII)

wn)

(vnu

Quiningenode eleva. do pesomolecul~r Plasmingenu

vitamina Da fosfolpidos de lamcmbrana Protena en plasma que acelera la activacin del factor X enlaviaintnnseca Zimgenoplasmtici>del factor W a Protenaen plama que acelera laactivacin del factor IX en la va intrnseca Precursor del factor Xa que mnviertelaprotmmhinaen bvmh'ina Zimgenodd plasma que activado nor W a . activaal factor IX Zimgeno del plasma de la va introscuiiquese activa por contacto Zimgcnodctrms~utami~ queactivadoprtmmhinaenIrecrnza cnlaccsde fihrinay endureceel cogulo Zimgeno que activado y<ir trombina, inactivaa los factores V y VI11 Zimgenodecalicrcno que activa al factor XIl en la va intnnwca Protena accesoria en la activacin de factores XII g XI Zimgeno de plaimina que
dep;rdaalafibriua,yafum-

do el cw&wIn *Contenido glucidieu expresado en tanto por ciento Las primeras etapas de la coagulacin se suelen separar en 2 componentes: las vas

intraseea y extriseea. E n ambas, la activacin sucesiva d e los diferentes zimgenos

es relativamente lenta sin el concurso de los factores accesorios,los cuales multiplican la velocidad del proceso en mas de 10 000 veces. Son factores accesorios los iones de Ca", los fosfolpidos cidos que se derivan de la membrana de las plaquetas y de los tejidos daados, y los cofactores proteriicos que participan en la activacin de los ziingenos (sin ser ellos proteasas), como los factores V y V111. Para facilitar el estudio de este proceso presentamos primeramente una visin general con las transformaciones centrales, antes de describir todas las etapas con mayor detalle (Figs. 63.5 y 63.6).

Sihtema intrnseco
L---__--_i
7

Sistema

Fig. 63.5. ELapa inicial de la coagulacin: visin general. La a de los dilerenfes factores indica su hrmn activa.

A coiitinuacin analizaremos cada una de estas 3 fases con mayor detenimiento.

, ,

Va intrwra
La iniciacin de esta va parece deberse a un fenmeno de contacto. El factor XII, glicoproteina plasmtica de una sola cadena polipeptdica, manifiesta una actividad catalitica in vitrocuando se adsorhe en superficies como el cristal, o in vivo, al colgeno o las membranas plaquetarias. El factor adsor-bido convierte la precalicrena en calicren'a y sta, que es tambin una proteasa,cataliza asn vez la activacin del factor X libre. El factor Xlla puede activar cantidades adicionales de precalicrena, en lo que constituye un proceso de activacin recproca, pero es, adems, la protcasa activadora del siguieute elementode la seciiencia: el factor XI. En este paso participa como factor accesorio el quiningeno de elevado peso molecular (HMWK [high nioleciilar weght kininogenl). Estos 2 pasos se resumen en la figura 63.7. El factor Xla, producido como hemos visto en el proceso de contacto, activa al componentesiguientede la secuencia: el factor lX, una glicoprotena de cadena simple, igual que el factor XII, pero que contiene Y-carhoxirlutmicoen su reein amino -. terminal. Este factor IX puede activado, ademjs, por el factor VIlaproducido en la va extrnseca. A diferencia dc las activaciones de los factores XII y XI, consideradas

Fihnngcno -+Fibnna

' A

L'ig. 63.6. Etapa final (comn) de la coagirlacin.

~*r

anteriormente, en el caio de la conversin del factor 1X en IXa los fosfolipidos cidos y el Cab son factores accesorios que aceleran el procew de activacin.

Va ex&nsec

Activaci6n del factor X en el sistema intrnseco El factor iXa es la proteasa encargaaa de la conversin del factor X en Xa. Participan como fadores accesorios el Caz', los fosfnpid<rs el factor Vla. Este ltimo es una y gocoproteia plaantica que est ausente en la liemolia cl&ica. Su accin accmria es esamulada por la trombina, de modo que alguna trnnibina se Iu formado antes de I activarse el factor X, lo c d facilita la funcin del fador w . En la fikwra 63.8 se ilusha esta parte de la coagidacin.

0
MMWK
Fig. 63.7. Sktenia intriiireci,. Activacin dr los factores XII y X1. HhlM K : quininVgcno de elevado peso n niolrciilsr (Iiigh rziol<~iilar eiglzl kininogm).

Va eKtriseea
El factor VI1 es una glicoproteina plasmtica que posee residuos de carboxiglutmico en su regin amino terminal. La activacin de este factor puede ser el resultado de la accin cataltica de cualquiera de los 3 factores siguientes: Xa, Xlla o trombina (IIa). El factor Vlla es un zimgeno con determinada actividad cataltica; esa actividad reducida se incrementa algo, por la liberacin del factor hstico y de los fosfolpidos, despus de un dao en los tejidos. Como consecuencia, el factor VI1 puede generar pequea5 cantidades de factor Xa o de tromhina, que ya proporcionan la activacin de cantidades significativas del propio factor VII. Este factor calaliza, como vimos en el esquema general, la activacin del factor X en el sistema extrnseco. Las diversas interacciones descritas se resumen en la f i p r a 63.9.

Fc~sfolpidos
Vig. 63.8. ctivnciiin del factor X en el sistenia intrnseco.

Sistema intnnseco

Fig. 63.9. Sistema extrinsecn. Acfiraci<in del factor \'U. FI.: fi,sfolipidos; FH: factor Iiisticm

Etapa comn
Formacin de trombina
La protrombina consiste en una sola cadena polipeptidica, con un contenido glucdico de aproximadamente un 11 % de oligosacridos. La protena, la cual se

Fig. 63.10. Cainma-carboxigli~ti. mico eri la protrombina. Diez de 10s residuos del 6 al 33 eii la protrornbina humana son cidos gltarniciis carboxilados en cl carbono earnma.

sintetiza en el hgado, experimenta la formacin de una decena de y-carboxiglutmicos en la regin comprendida entre los residuos del 6 al 33. La carhoxilasa que cataliza esta reaccin se halla en la luz del retculo endoplasmatico rugoso y requiere de vitamina K como factor imprescindible.La vitamina K lahiliza el tomo de hidrgeno en el carbono gamma del cido glutmico, lo que pemiite la formacin del derivado de carboxiglutmico por ataque del CO, (Fig. 63.10). Otras protenas tambin semodificandelmismo modo,incluyendootrocfactores de la coagulacin. La activacin de la protromhina se produce en una superficie cargada negativamente y brmada por derivados lipdicos de las membranas plaquetarias o de clulas hsticas daadas. Estos lpidos,como la fosfatidil serinii, se hallan hacia el lado interno de las membranas plasmticas y es por eso que no se exponen, si no existe un dao celular. Esta localizacin del proceso de activacin en la supericic cargada negativamente es comn a todos los pasos de conversin de zimgenos. La protromhimase une alosfosfolpidos cargados negativamente,una vez que son expuestos. En la unin intervienen los residuos de y-carhoxiglutmico, con la imprescindible participacin de Caz+. factor Xa tambin se liga a los fosfolpidos El por un proceso dependiente de Caa, y mediante sus propios residuos del derivado carboxilado del glutmico. Ahora bien, la activacin acelerada de la protrombina se alcanza realmente cuando el factor Va se incorpora al complejo protrombina-Xa-Caz' (Fig. 63.11).

2
Protrombina

Fig. 63.11. Activacin de la protrornbiiia FL: fosfolpidos.

Tronibina

Pkptido amino terminal

El factor V es una cadena polipeptdica que contiene un Caz*firmemente unido, el cual es esencial en la accin del factor Va. ste no tiene actividad proteoltica y es ms bien un factor accesorio en la activacin de la protrombina. Es curioso, pero el Va es el resultado de la accin de la trombina sobre el factor V, al hidrolizar, por lo menos, 2 enlaces peptdicos. Se considera que la tromhinase vafonnando lentamente en ausencia del factor Va, y una vez que esto ocurre, ella convierte el factor V en Va, lo cual incrementa de manera notable el ntmo de su propia produccin. La activacin de la protrombina in vitro, que es catalizada por el factor Xa, se y acelera unas S0 veces por el Ca2+ los fosfolpidos, y por el factor Va unas 350, pero multiplican el ntmo de todos los componentes del complejo Caz+-fosfolpid'os-Xa-Va conversin que puede catalizar in vitro el factor Xa solo, nada menos que 20 000 veces. En resumen, el complejo produce en 1min la misma tromhina que tardara 2 semanas en Formarse por la accin del factor Xa.

El fibringeno consiste en 3 cadenas polipeptdicas diferentes, designadas alfa(a), beta(I3) y gamma(y). Latransformaanocurre en 3 pasos: primero se producela hidrlisk de un enlace peptdico en el sector amino terminal de las cadenas alfa y beta, catalizado . por la trombina. En la segunda etapa la hidrlisis de esos enlaces peptidicos hace que se expongan sitios de unin complementarios, los cuales permiten a los monmeros de fibiina almeane longitndinaimente,agregarse y precipitar en formade cogulo blando. quedalugpraicogninduro. poritimo,seformanenlawentrelasmolkulasdefibrina,lo Es la propia trombina la que activa al factor XIII, presente en el plasma y las plaquetas. Se trata de una transglutaminasa,conocidatambin como factor estabilizai~te dela fibrina FSF, la cual cataliza la formacin de enlaces covalentes entre las cadenas polipeptdicas de fibrina. Los enlaces se establecen entre diferentes molculas y participan las cadenas alfa y gamma, no aslas beta. En la figura 63.12 se muestran los 3 pasos. Fibrinyeno Fibiina

3 -

FSF

Fig. 63. 12. Actiraci6n del fihringeno. FSF: factor eslabilizante de la fihrina.

Aunque tanto el factor XIII, de origen plaquetario, como el plasmtico, son zimgenos que se activan por la accin proteoltica de la tronihina, existen diferencias en ese proceso. Mientras el FSE' plaquetario se activa directamente tras la accin peptidsica de la trombina, el plasmtico precisa de la separacin de 2 polipptidos adicionales, en un paso que depende del Caz+. ello, la activacin del factor VI11 Por plaquetario es ms rpida que la del plaimtico. En cualquier caso, FSFa es una enzima de tipo transglutaminasa que cataliza la formacin de enlaces covalentes entre las cadenas polipeptdicas de las subunidades de fibrina, como se representa a continuacin:

Enlace cniZad0

E - ( y glutamil ) lisina

Trastornos de la coagulacin
Los trastornos hemorrgicos pueden originarse por problemas de las plaquetas, fragilidad capilar, alteraciones en el mecanisnio de la coagnlacin, o por la accin de anticoagulantes. De los anticoagulantes qne actan in vivo, la heparina es el ms signitcativo y desempeauna funcin cn el control dela hemostasis; adems, es una glicoprotena de elevado peso molecular, r b a en un glicosaminoglicano particular (captulo 10); ella inhibe varias proteasas de la coagulacin y se encnentra en miichos tejidos, principalnlente en las clulas cebadas del endotelio capilar. La heparina liberada se comhina con la protena aiititrombina 111,la cual se torna activa y puede unirse e inhibir a muchos de los factores de la coagulacin: IIa, 1x8, Xa, XIa. XUa v calicrena. La accin de la heparina es cataltica, ya que despus que un comple,joantitromhina II-heparina se une e inhibe a una de las proteasas, ella sesepara y es capaz de activar otras molGculas del inhihidor. El dicumarol es un anticoagulante que se utiliza como veneno de ratas, y de manera teraputica para contrarrestar la tendencia a la formacin de tromhos; su estructura quinica es similar a la de la vitamina K.

Vitamina K,

El dicumarol bloquea la reoxidacin de la vitamina K por la enzima epxido reductasa y paraliza as el ciclo de accin de la vitamina como cofactor en la formacin de los residuos de gamnia-carho~glu~mico,varios de los factores de lacoagulacin, en incluidala protromhina. En relacin con las alteraciones en el mecanismo dela coagulacin, stas pneden ser congnitas o adquiridas. Las primeras suelen afectar nicamente a un factor de la coagulacin; las segundas pueden afectar a varios. Los trastornos adquiridos con mayor frecuencia son los secundarios a enfermedades hepticas, los cuales traen consigo una disminucin en la sntesis de los factores dela coagulacin qnedependen de la ~ t a m i n K (n,VII,M,y X), as como del a factor V y del fibringeno. En cuanto a las congnitas, su gravedad depende del grado de deficiencia del factor de la coaeulacin afectado. La hemofilia clsica. en lacual el factor \'III est ausente, puede originar sangramientos muy graves en los pacientes con menos del 1 % dela actividad normal del factor; en camhio, los pacientes que tienen el 10 % dedicha actividad no padecen hemorragias, a no ser que sufran traumas de consideracin. La hemofilia tiene una frecuencia aproximada de 1 por cada 10 O00 varones. Otros errores congnitos que afectan a diferentes factores se presentan poco.

1134

Wtornos de la coagulacin
Los trastornos hemorrgicos pueden originarse por problemas de las plaquetas, fragilidad capilar, alteraciones en el mecanismo de la coagulacin, o por la accin de anticoagulantes. De los anticoagulantes que actan in vivo, la heparina es el ms significativo y desempea una funcin en el control de la hemostasia; adems, es una glicoprotena de elevado peso molecular, rica en un glicosaminoglicano particular (captulo 10): ella inhibe varias proteasas de la coagulacin y se encuentra en muchos tejidos, principalmente en las clulas cehadas del endotelio capilar. La heparina liberada se combina con la protena antitromhina 111, la cual se torna activa y puedeunirse e inhibir a muchos de los factores dela coagulacin: IIa, IXa, Xa. Xla,Xlla y calicreua. La accin de la heparina es cataltica, ya que despus que un complejoantitrombina 11-heparina se une e inhihe a una de las proteasas, ellase separa y es capaz de activar otras molculas del inhihidor. El dicumarol es un aiiticoagulante que se utiliza como veneno de ratas, y de manera teraputica para contrarrestar la tendencia a la formacin de trombos: si1 estructura qumica es similar a la de la vitamina K.

Dicumarol

o
Vitamina K, El dicumarol hloquea la reoxidacin de la vitamina K por la enzima epxido reductasa y paraliza as el ciclo de accin de la ntaniina como cofactor en la formacin de los residuos de gamma-carbuxigluimico,en vanos de los Pactores de la coagulacin, incluida la protrombina. En relacin con las alteraciones en el mecanismode la coagulacin, stas pueden ser congnitas o adquiridas. Las primeras suelen afectar nicamente a un factor de la coagulacin; las segundas pueden afectar a varios. Los trastornos adquiridos con mayor frecuencia son los secundarios a enfermedades hepticas, los cuales traen consigo una disminucin en la sntesis de los factores dela coapulacin que dependen de la vitamina K (ll,VII,M, y X), as como del factor V y del fibringeno. En cuanto a las congnitas, su gravedad depende del grado de deficiencia del factor de la coagulacin afectado. La hemofilia clsica, en la cual el factor VIIIest ausente, puede originar sangramientos muy graves en los pacientes con menos del 1 % de laactindad normal del factor; en cambio, los pacientes que tienen el 10 % de dicha actividad no padecen hemorragias, a no ser que sufran traumas de consideracin. La hemofilia tiene una frecuencia aproximada de 1por cada 10 000 varones. Otros errores congnitos que afectan a diferentes factores se presentan poco.

Regulacin del pH sanguneo

Los sistemas amortiguadores sanguneos se hallan en el plasma y los eritrocitos. En el plasma existen 3 importantes: HCO;'/H,CO,; HPO,IIH,PO;' y proteinatlprotena. El sistema del bicarbonatolcidocarbnico es el ms esencial en el mantenimiento del pH de la sangre dentro de lmites normales. La relacin HCO;'/H,CO, del plasma es normalmente de 2011,lo cual representa un pH de 7,4. De acuerdo con la ecuacin de Handerson-Haselbach:

pH = pK

+ log

HCO;' "ZCOS 0,025 0,00125 20 + log 1

= 6,1

+ lag

= 6,1

= 6,l + log20 - log 1

= 6,l

1,3 - O = 7,4

Los sistemas del fosfato y las protenas del plasma son menos importantes, en comparacin con el buffer del bicarbonato. En los glbulos rojos hay una gran capacidad amortiguadora de los cambios de pH, en parte por las grandes cantidades de hemoglobina que contienen y en parte por el sistema del bicarbonato, tambin presente en cantidades considerables en los eritrocitos. El sistema del bicarbonato es muy eficientepara amortiguar los cambios de pH que se produciran con la constante formacin de cidos en el cuerpo, como el sulfrico, fosfrico, lctico, acetoactico, beta- hidroxibutrico y otros. Por e,jemplo, consideremoslo que sucede cuando el cido acetoactico reacciona con el bicarbonato:

o
ll

CH,- C- CH, COOH

+ HCV,

O
ll

CH,- C- CH, COO-+ H,CO,

El acetoacticohace que disminuya la concentracin de bicarbonato y aumente la de cido carbnico. El pH caera, de acuerdo con el cambio, en la proporcin HCO;M2C0,. En la realidad no ocurre as porque el H,CO, formado se elimina como C0,cuando la sangre que lo contiene llega a los pulmones: H,CO,

--

CO, + H,O

Los otros sistemasamortiguadores del organismo tienen componentes cidos que no pueden ser eliminados de esta forma. La funcin de la hemoglobina intraeritrocitaria se ejerce en conjuncin con el sistema del bicarbonato. Cuando aumenta la presin parcial de CO, en el plasma, difunde en mayor medida hacia el interior de 10seritrocitos. All la reaccin de formacin de cido carbnico es catalizada por la anhidrasa carbnica. La ecuacin qumica que vimos en el ejemplo delos pulmones, ahora se produce en sentido inverso. Con la concentracin creciente de H,CO,, la accin amortiguadora de la desempea su funcin:

El bicarbonato sale hacia el plasma, lo que favorece la relacin HCO;H,CO,. La disociacin cida de la hemoglobina presenta un pK de 73.Por ser ste el ms cercano al pH fisiolgicode 74,entre todas los sistemas amortiguadoressanguneos, le confiere as su funcin significativa en estos mecanismos de amortiguacin intrasanguneas. Los grupos imidazoles de la histidina son los determinantes, por ser el pK de este grupo el ms cercano al pH fisiolgico entre todos los grupos de los aminocidos presentes en las protenas. Adems, el pK del grupo imidazol de un residuo de histidina de las cadenas de globina, que se halla en las proximidades del sitio de unin con el oxgeno, cambia su constante de disociacin cuando la hemoglobina pasa a oxibemoglobina. El pK de ese grupo es de 6,6 en la oxihemoglobina y de 7,9 cuando la molcula se desoxigena. Como el paso a la sangre del CO, producido en los tejidos coincide con la liberacin del oxgeno por la hemoglobina, la capacidad amortiguadora de la forma desoxigenada del pigmento es tan elevada que en la sangre slo se produce una disminucin de pHequivalente aO,O3 deunidad. Por el contrario,enlasangre oxigenada de los pulmones la concentracinde CO, disminuye, y con ella la del cido carbnico, por lo que el pH tendera a subir. Estasituacin coincide con el mximo de oxigenacin de la hemoglobina, que como se ha explicado la hace ms cida y se acrecienta de nuevo su eficacia amortiguadora del pH. No es despreciable, como elemento que determina la significacin del sistema de la hemoglobina, la elevada concentracin de la mencionada protena en los eritrocitos, la cual puede llegar a1 34 % de los slidos presentes en estas clulas. Se e s h a que la capacidad amortiguadoraconjunta del sistema bicarbonato/cido carbnico y la de los eritrocitosrepresentan el 85 % del totaL

Hemoglobinay metabolsmo eritrocitario

La funcin bsica de la hemoglobina es transportar oxgenodesdelos pulmones; donde la presin de este gas es elevada, hasta la intimidad delos tejidos. All,debido al consumo celular, la presin de O, es menor y la molcula de hemoglobina lo cede, de modo que en los pulmones se verificala reaccin siguiente: Hemoglobina + O,

mientras que en los capilares histicos ocurre la reaccin inversa: Oxihemoglobina Hemoglobina

Oxihemoglobina

+ O,

Fuente: Stryer L.: Bioqumiea, 2da. edicin, Editorial Revert, S.A., 1982. Fig. 63.13. Tetrmera de la molcula de hemoglobina. En este modelo a baja resolucin de la hemoglobi"a, las cadenas alfa se presentan en verde, las heta en morado y las grupos hemo en rojo.

La molcula de hemoglobina es un tetrmero constituido por 2 cadenas alfa, 2 cadenas beta y el grupo prosttico hemo, cuyasntesis se trat en el captulo 58. Las 2 cadenas alfa (de 141 aminocidos cada una) q las 2 beta (con 146 aminocidos) se asocian y cada una de las 4 cadenas posee un &upo hemo, alojado en un bolsn interno de su estructura. La totalidad de la molcula adopta una forma globular, como se puede apreciar en el modelo de la figura 63.13. En cada bolsn el anillo porfirnico coplanar queda orientado con los grupos vi~10,dispuestos demanera que interactencon los grnpos apolaresde los aminocidos circundantes. Adems de esta interaccin apolar, el otro medio de fijacin entre el hemo y las globinas est constituidopor el enlace covalente coordinado que se establece entre el hierro del hemo y el nitrgeno de un anillo imidazlico de una histidina. Los grupos de cido propinico quedarn expuestos hacia la superficie de la molcula. La conversin de la hemoglobina en oxihemoglobina se debe a la fijacin reversible de la molcula de O,, especficamentepor el tomo de hierro en forma de Fe2+, que ocupa el centro del hemo. Este hierro central establece 6 enlaces de coordinacin: 4 de ellos con los nitrgenos de los anillos pirrlicos del propio hemo,

uno ya referido que se establece con un residuo de histina prxima a este y la sexta valencia de coordinacin, que es ocupada por una molcula de H,O. El O, penetra en el bolsn donde se halla colocado el grupo hemo y desplaza la molcula de H,O de la sexta valencia de coordinacin del ion ferroso. El ambiente hidrfobo, con una baja constante dielctrica que prevalece en el bolsn, impide que el oxgeno oxide al ion. Lametahemoglobina es una ferriprotoporfirina idntica a la hemoglobina, pero poseesu toniude hierro en un estado deoxidacin deFeu(frrico). En estar condiciones no es capaz de intercambiar 0,y se anula su funcin.La conversin espontnea de una determinada cantidad de hemoglobina en metahemoglobina origina la necesidad de que el eritrocito disponga de mecanismosenzimticos, referidosanteriormente, capaces de reducir a la metahem@obina. Existen agentes qnmicos que propician la formacin de la metahenioglohina, entre ellos los nitritos, las sulfonamidas y los salicilatos. Veamos la relacin que existe entre el metabolismo del eritrocito y la funcin de la hemoglobina. La afinidad de la hemoglobina pura en disolucin por el oxgeno es tal, que lo cedera a los tejidos con mucha dificultad.La hemoglobina intraeritrocitaria no se comporta as, pues tiene una menor afinidad por el oxgeno, lo suficiente como para quecontinesaturndoseenel parnquima pulmonar,perono tanta quelo retenp al pasar por los tejidos perifricos. Esto se debe al efecto de un metaholito, el cido 2,3 bisfosfoglicrico (DPG), lo cual se puede apreciar en la figura 63.14. Se conoca como peculiaridad del metabolismo eritrocitario la presencia de grandes cantidades del cido 2,3 bisfosfoglicrico, del qne en otras clulas slo se hallaban a cantidades mnimas. I enzima bisfosfo@ceromutasa resulta muy activa en el eritrocito y convierte considerables cantidades del cido 1,3 bisfosfoglicrico, metabolito intermediario de la gluclisis (captulo 44), en cido 2,3 bisfosfoglicrico. Actualmente se sabe que el DPG provoca cambios conformacionales en la hemoglobina, que determinan su influencia en la anidad por el oxigeno. Estos camhios sonde naturaleza alostrica y se ha podido localizar el sitio y la forma en que el DPG interacta, como modificador alostrico, en la molcula de hemoglobina (Fig. 63.15). Un DPG interactha con una molcula de hemoglobina, de manera que su sitio alostricose conformapor el tetrmero completo. Este metabolito refuerza la estmctura cuaternaria de la hemoglobina por enlaces cruzados ( travs de l mismo) entre las a cadenas beta. En la oxigenacin el DPG se desplaza porque la cavidad central es demasiado pequea; como consecuencia, para pasar de desoxihemoglobina a oxihemoglobina, en presencia de DPC, deben romperse los enlaces cruzados adicionales y en su ausencia no; es por ello que el DPG disminuye la afinidad de la hemoglobina por el oxgeno. El significado clnico del DPG no es despreciable. La sangre almacenada en los medios convencionales, como el de cido ctrico-dextrosa, tiene una afinidad mayor por el oxgeno. Ahora sabemos que la afinidad aumenta con el tiempo de almacenamiento, porque van disminuyendo las existencias de DPG desde 4 3 mM a menos de 0,s mM en slo 10 das. Si se le da a un paciente un gran volumen de esta sangre,la cantidad de oxgeno desprendida en sus tejidos puede quedar comprometida. Es cierto que los glbulos rojos, una vez transfnndidos, pueden recuperar sus niveles de DPG en unas 24 h, pero ste puede ser demasiado tiempo para un enfermo crtico. No es posible restituir el nivel de DPG al aadirloa la sangre, porque el compuesto noatranesalamembrana del eritrocito; sin embargo,sse puede evitar que los erihocitos almacenados experimenten la deplecin de sus existencias de DPC. Si al medio se le adiciona inosina, es decir, el nuclesido de la hipoxantina, esta molcula no cargada puede atravesar la membrana de los hemates. En el interior de la clula la inosina queda convertida en DPG por una seriede reacciones. De hecho, el nnclesidose ha utilizado para preservar la integridad funcional de la sangre almacenada. En diversos estudios se ha comprobado la funcin del DPG en la adaptacin a grandes alturas. Si una persona asciende hasta una altitud de miles de metros, su afinidad por el 0,decrece, al tiempo que aumentan los niveles deDPG enlos eritrocitos.

Fig. 63.14. E s t r u c t u r a del DPG. Este metaholito disminuye la afinidad de la Iicmoglohina por cl ouigeno.

Centro de unin del DPG

Fuente: Slryer L.: Hioquniiea, Zda. edicin. l<ditorial Rerrrt, S.A., 1982. Fig. 63.15. Sitio de unibri para el DPG en la Iicmoglebina. El I i i p r de unin sc halla en la cavidad central de la ilesoxihcmoglohina.

Hemoglobina y transporte de xido ntrico

El xido ntrico (ON) intervieneen la regulacin de la presin y el flujo sanguneos, y relaja la musculatora lisa de los vasos sanguneos, entre otras muchas funciones, como son las siguientes:
1.Relaja la musculatura lisa de los vasos sanguneos. 2. lnhibe la agregacin y adhesin plaquetarias. 3. Interviene en la relajacin del cuerpo cavernoso y el fondus gstrico. 4. Mecanismo de defensa en macrfagos. 5. Implicado en mecanismos de memoria y aprendizaje. 6. Modnlador del estado de vigilia en el sistema nervioso central (SNC). 7. Como mediador en la percepcin del dolor. 8. Mediador intracelular de agentes orexignicos en el SNC.

En estudios experimentalesen ratas se hacomprobado que la hemoglobina de la sangre arterial contiene ON, unido a sus residuos de cistena (ON-S),en mucha mayor proporcin que la sangre venosa. Se ha sugeridoun ciclo de transporte de ON para la hemoglobina,semejanteal de CO, y O, y basado tambin en cambios conformacionales de la protena.

Resumen
La sangre es el medio ms importante que result de la evolucin en el intercambio de sustancias entre los diferentes rganos y tejidos de los organismos mulocelulares con el medio exterior y entre ellos mismos. La fase lquida es el suero o plasma, segn baya coagulado o no. En la fase slida se encuentran las clulas sanguneas. La sangre cnmple una funcin de transporte, de defensa, de regulacin trmica y de los equilibrios bdrico y cido-bsico. En la composicin del plasma hay de 6 a 8 g de protena por 100 mL (o de 6 a S gldL). EUas se separan por electroforesis en las fraccionesde albmina, alfa,, alfa,, beta globulinas, fibringeno y gamma globulinas. La albmina cumple una funcin de transnorte de diversas sustancias v. adems. contribuve mucho a la ", presin coloidosmiica En las otras &acciones estn presentesmezelas demltiples protenas con diferentes propiedades y funciones espeecas. Los elementos formes son los eritrdtos, los leueocitos y las plaquetas. Los primeros son clulas especializadas en el transporte de oxgeno y cuentan con altas concentraciones de hemoglobina en su interior. La integridad de la membrana y la forma de estos corpsculos es bsica para que cumplan su funcin de manera eficaz. La especificidadde los grupos sanguneos radira en componentes glucdicos de la membrana eritrocitaria. El metabolismo de los eritrocitos tiene numerosas peculiaridades, ya que son clulas m n t e s de ncleo, mitocondrias, ribosoma y den& organelos. La gluclisis anaerobia y la va de oxidacin directa de la glucosa son sus fuentes de energa y potencial reductor; este ltimo es vital para mantener la integridad de su membrana. Los leucoeitos se espeeialwan en la funcin de defensa y su metabolismo, en parte, responde a esta capacidad. Destaca la alta actividad de enzima que generan pemado y O;-. Las plaquetas se derivan de los megacariocitos, en cuyas membranas existen receptores especficos para varios de los factores de la coagulacin. La coagulacin consiste en una serie complicada de reacciones de activacin, mayormente de emhmw proteolticas en forma de sus precursom inactivos, que cubnhmmn laconversin del fibringeno enfibrina Tambin participan iones Caz*

y algunos fosftidos de glicerina. Comprende una va intrnseca, una extrnseca y la etapa comn, en la cuai se activa la pmtrombina y se origina la trombina, que es la determinante en la transformacin del fibringeuo en el cogulo de fibrina. En la regulacin del pH sanguneo participan varios sistemas amorgnadores. De ellos, el sistema del bicarbnnato/cido carbnico es el ms importante en el mantenimiento del pH de la sangre, dentro de Lmites normales. La funcin de la hemoglobina intraeritrocitaria se ejerce en conjuncin con el sistema del bicarbonato. La molcula de hemoglobina cede en los tejidos el 0,que ha captado en los pulmones. El O, se une a la sexta valencia de coordinacin del F e del hemo; por tanto, cada molcula de hemoglobina es capaz de transportar 4 molculas de O,. La metahemoglobina es la hemoglobina no funcional con el hierro en forma fmca Ve). El cido 23 bisfosfogcrico se forma en la gluclisis eritroeitaria en grandes cantidades,por la accin de una bisfasfogiiceromutasa;su unin con la hemoglobina favorece la conformacin esiable de la desoxihemoglobiua, mediante enlaces cruzados entre las cadenas beta. Como consecuencia, disminuye la anidad de la hemoglobina por el oxgeno y contribuye as a que el gas sea cedido a los tejidos. La hemoglobina parece liberar en los tejidos extrapulmonares xido ntrico, que contribuye a modular la presin y el flujo sanguneos.

Eecco jriis
1.Si en el sndrome nefrtico se producen cuantiosas prdidas de albmina por la orina, ;cul ser unamanifestacion visiblede este trastorno y por qu? 2. ;Cuntas y cules son l ?protena?plasmticai que transportanhierro en una u otra a forma? 3. Considere si las necesidades metablicas de un fumador son iguales o no a las de los no fumadores. Fundamente su respuesta. 4. Analice comparativamentelas consecuencias de la hipoxia en el metabolismo del eritrocito y del leucocito (granulocito). 5. ;Existen puntos de contacto o interaccin entre la? va? extrnseca e intrnseca de la coagulacin? ;Cules son? 6. Hemos visto que en la conversin de la protrombina en trombina existe una gran diferencia en la velocidad, si la activacin se lleva a cabo por el factor Xa slo o si se trata del complejo Ca"-Fosfolpido-Xa-Va. Postule 2 mecanismos que justifiquen la mayor eficiencia del comple,jo. 7. ;Intervienen los glbulos rojos en la capacidad amortiguadora de los cambios de pH? En caso afirmativo, explique cmo lo hacen y en caso de que su respuesta sea negativa, analice los sistemas plasmticos.