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Universidade Federal do ABC

Transformaes Bioqumicas

RELATRIO 04 Extrao e Caracterizao Bioqumica do Amido da Batata

Caroline Delcole Borsolari Diego Rodrigo Henrique de Abreu Piccolo Jucilaine dos Santos Pereira Lidia Furukawa Prof Jiri Borecky

Santo Andr 2009

SUMRIO

PGINA 1 INTRODUO ............................................................................................................. 3 2 OBJETIVO .................................................................................................................... 5 3 MATERIAIS E MTODOS ........................................................................................ 6 3.1 Materiais ................................................................................................................. 6 3.2 Mtodos ................................................................................................................... 7 3.2.1 Parte 1 Extrao do amido de batata .............................................................. 7 3.2.3 Parte 3 Exame microscpico de grnulos de amido........................................ 7 3.2.3 Parte 3 Exame microscpico de grnulos de amido ....................................... 7 3.2.5 Parte 5 Pesquisa de poder redutor .................................................................. 7 4 RESULTADOS ............................................................................................................. 8 4.1 Parte 1 Extrao do amido de batata ................................................................ 7 4.2 Parte 2 Preparo da suspenso de amido ............................................................ 7 4.3 Parte 3 Exame microscpico de grnulos de amido ......................................... 7 4.4 Parte 4 Reao de caracterizao com iodo ...................................................... 7 4.5 Parte 5 Pesquisa de poder redutor ..................................................................... 7 5 DISCUSSO ................................................................................................................. 10 5.1 Parte 1 Extrao do amido de batata ................................................................ 7 5.2 Parte 2 Preparo da suspenso de amido ............................................................ 7 5.3 Parte 3 Exame microscpico de grnulos de amido ......................................... 7 5.4 Parte 4 Reao de caracterizao com iodo ...................................................... 7 5.5 Parte 5 Pesquisa de poder redutor ..................................................................... 7 6 CONCLUSO ................................................................................................................ ? 7 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ......................................................................... ?

1 INTRODUO Os polissacardeos, que tambm so conhecidos como glicanos, consistem de monossacardeos ligados por ligaes glicosdicas. Eles so classificados como homopolissacardeos ou heteropolissacardeos, se forem constitudos por um tipo ou mais de monossardeo. Como exemplos de polissacardeos importantes na natureza, podemos destacar: o glicognio, a celulose e o amido [VOET, 2006]. O amido, polissacardeo de extrema importncia em alimentos, produzido em grande quantidade nas folhas dos vegetais como forma de armazenamento dos produtos da fotossntese e a forma de carboidrato mais comum na alimentao humana, representando cerca de 90% dos carboidratos da dieta. Ele constitudo por dois outros polissacardeos estruturalmente diferentes: -amilose e amilopectina [SOUZA & NEVES, 2009] Amido O amido um alimento de reserva em plantas e um nutriente importante para os animais. Ele uma mistura de glicanos que as plantas sintetizam como principal reserva de alimento, e est depositado no citoplasma das clulas de plantas como grnulos insolveis compostos por -amilose e amilopectina. A -amilose (Figura 1) um polmero linear de milhares de resduos de glicose ligados por ligaes (14). Apesar da -amilose ser um ismero da celulose, ela possui propriedades estruturais muito diferentes. Isso ocorre porque as ligaes -glicosdicas da celulose causam nos resduos sucessivos de glicose uma rotao de 180 em relao ao resduo anterior, fazendo com que o polmero assuma uma conformao completamente distendida e facilmente empilhvel. As ligaes -glicosdicas da -amilose fazem com que ela adote uma conformao helicoidal irregularmente agregada (Figura 2).

FIGURA 1. Frmula Estrutural da -Amilose [SOUZA & NEVES, 2009]

FIGURA 2. Conformao Espacial da -Amilose [SOUZA & NEVES, 2009]

A amilopectina (Figura 3) consiste principalmente dos resduos de glicose ligados por ligaes (14), mas uma molcula ramificada com pontos de ramificao (16) a cada 24 a 30 resduos de glicose, em mdia. As molculas de amilopectina contm at 10 6 resduos de glicose, o que as colocam entre as maiores molculas presentes na natureza.

FIGURA 3. Frmula Estrutural da Amilopectina [SOUZA & NEVES, 2009]

O armazenamento de glicose sob forma de amido reduz muito a presso osmtica intracelular que resultaria do seu armazenamento na forma monomrica, j que a presso osmtica proporcional ao nmero de molculas de soluto em um dado volume [VOET, 2006].

2 OBJETIVO Extrair, purificar e secar o amido da batata para a caracterizao bioqumica, atravs da realizao de caracterizao morfolgica por microscopia ptica, reao de identificao com o iodo e reao qualitativa de identificao de acares redutores no amido utilizando o reagente de Benedict.

3 MATERIAIS E MTODOS

3.1 Materiais Batata gua destilada Lugol Regente de Benedict Soluo Glicose 1% Soluo Sacarose 1% Soluo Amido 1% Liquidificador Bquer 100mL Laborgls Gaze Estufa Funil de Buchner Balana Analtica Bomba de Vcuo Proveta 50mL de vidro Laborgls Proveta 1L de vidro Laborgls 5 tubo de ensaio com tampa Suporte para tubos Bico de Bunsen Banho-maria 100C Conta gotas Pipetador Pipeta Pina de madeira Lmina Lamnula Microscpio Zeiss PrimoStar

3.2 Mtodos 3.2.1 Parte 1 Extrao do amido de batata (realizada pelos tcnicos do laboratrio) Homogeneizou-se 50g de batata descascada no liquidificador com 200mL de gua destilada. Filtro-se em gaze dobrada, recolhendo a suspenso de amido em uma proveta de 1L (Figura 4).

FIGURA 4. Filtragem da soluo de batata homogeneizada com gua.

Esperou-se o amido depositar-se no fundo da proveta por volta de 5 minutos (Figura 5). Desprezou-se o sobrenadante. Adicionou-se 100mL de gua, agitou-se e deixou decantar por 5 minutos. Removeu-se o sobrenadante. Repetiu-se o procedimento por 5 vezes. Juntouse o amido 200mL de gua destilada e filtrou-se em Buchner e deixou secar na estufa.

FIGURA 5. Amido da batata depositado no fundo da proveta.

3.2.2 Parte 2 Preparo da suspenso de amido Pesou-se 0,5g do amido seco e adicionou-se 50mL de gua destilada (1,0%m/v). 3.2.3 Parte 3 Exame microscpico de grnulos de amido Adicionou-se 2mL da soluo de amido do item 3.2.2 em dois tubos de ensaio numerados(1 e 2) sem tampa. Ferveu-se em bico de Bunsen um dos tubos at que a soluo ficasse opalescente, sempre agitando (Figura X). Pingou-se uma gota de cada solues, um em cada lmina e cobriu-se com uma lamnula. Colocou-se no microscpio para observao. Pingou-se uma gota de lugol em cada lmina e observou-se novamente no microscpio.

FIGURA 6. Fervura de tubo de ensaio contendo 2mL de soluo de amido.

3.2.4 Parte 4 Reao de caracterizao com iodo Usou-se 4 tubos de ensaio da seguinte forma: 1. Adicionou-se 1mL de amido no tubo com tampa; 2. Adicionou-se 1mL de amido no tubo sem tampa; 3. Adicionou-se 1mL de gua destilada no tubo sem tampa; 4. Adicionou-se 1mL de glicose no tubo sem tampa; Em seguida adicionou-se 1 gota de lugol cada tubo e observou-se o resultado. Aqueceu-se o tubo 1 tampado direto na chama. Observou-se. Aps resfriar observouse novamente. Repetir para o tubo com amido sem tampa. 3.2.5 Parte 5 Pesquisa de poder redutor Preparou-se 4 tubos de ensaio: 1. 1,5mL de gua e 1,0 mL de Benedict; 2. 1,0 mL da amostra 1, 0,5mL de gua e 1,0 mL de Benedict;

3. 1,0 mL da amostra 2, 0,5mL de gua e 1,0 mL de Benedict; 4. 1,0 mL da amostra 3, 0,5mL de gua e 1,0 mL de Benedict; Colocou-se os tubos em banho-maria por 5 minutos e observou-se. 4 RESULTADOS 4.1 Parte 1 Extrao do amido de batata 4.2 Parte 2 Preparo da suspenso de amido 4.3 Parte 3 Exame microscpico de grnulos de amido 4.4 Parte 4 Reao de caracterizao com iodo Antes de aquecer: Amido - O amido ficou decantado na cor verde-musgo e a gua da soluo ficou verde/amarelada. Glicose Ficou uma soluo amarela homognea. gua Idem Glicose. Depois de aquecer: Aberto Iodo evaporou e a soluo voltou a ser transparente. Fechado A soluo ficou azul escuro com sedimentos na parede do tubo. 4.5 Parte 5 Pesquisa de poder redutor Tubos 1 e 2 ficaram iguais a gua pura. Tubo 3 a glicose ficou marrom (ferrugem). Obs.: Deve-se descobrir as solues dos tubos 1 e 2 atravs do que o professor falou; que o amido tem um maior poder redutor do que a sacarose. 5 DISCUSSO 5.1 Parte 1 Extrao do amido de batata 5.2 Parte 2 Preparo da suspenso de amido 5.3 Parte 3 Exame microscpico de grnulos de amido 5.4 Parte 4 Reao de caracterizao com iodo 5.5 Parte 5 Pesquisa de poder redutor

6 CONCLUSO

7 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS - VOET, Donald; VOET, Judith G.: Bioqumica. 3 Ed. Artmed: Porto Alegre, 2006. pp. 366368. - SOUZA, Karina A. F.D; NEVES, Valdir A.: Reao com iodo. Disponvel em: www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_ch/teste_amido.htm. 20/11/2009. Acesso em: