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DeterminacindeFsforoReactivo suspendidoodisueltoenaguas naturalesytratadas,aguas residualesdomsticaseindustriales

MtodoEspectofotromtrico
Elaborado Modificado Revisado Aprobado A.DeNigris AnalistaQumico E.Rod AnalistaQumico P.Simone JefadeSeccinFsicoQumico S.CastroScarone JefadeLaboratorio

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FsforoReactivo SECCION4

1
1.1

APLICACIN
Se denomina fsforo reactivo al fsforo que reacciona al test colorimtrico sin digestin preliminar. La mayor parte del fsforo reactivo es medido como ortofosfato, existiendo una pequea porcin de fosfatos condensados, los cuales usualmente se encuentran presentes de forma hidrolizada y por tanto, no estn disponibles para la determinacin. Este mtodo es adecuado para la determinacin de fsforo reactivo suspendido o disuelto en aguas naturales y tratadas, as como en aguas residuales domsticas e industriales. Para la determinacin del fsforo reactivo disuelto, se filtra la muestra a travs de membrana 0.45m de tamao de poro. Mediante este procedimiento se puede determinar fsforo reactivo en un rango de 10 6000 g P/L.

1.2 1.3 1.4

2
2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8

REFERENCIAS
Manual de Calidad Laboratorio Ambiental DINAMA. Manual de Gestin de Calidad Laboratorio Ambiental DINAMA. Manual de Control de Calidad Analtico Laboratorio Ambiental DINAMA. Carpeta de Mantenimiento y Control de equipos Laboratorio Ambiental DINAMA. Instructivo de uso Balanza Analtica Instructivo de uso Balanza de precisin Instructivo de uso espectrofotmetro Ruta de anlisis (RFQ 11)

3
3.1

RESUMENDELMTODO
El molibdato de amonio y el tartrato de antimonio y potasio, en medio cido, reaccionan con el ortofosfato para formar cido fosfomolbdico, el cual es reducido por el cido ascrbico a un complejo de molibdeno de color azul intenso. La intensidad del color azul es proporcional a la concentracin de fsforo reactivo, que se mide en un espectrofotmetro a 880 nm. La concentracin se determina a partir de una curva de calibracin.

4
4.1 4.2 4.3

PRECAUCIONESDESEGURIDAD
Se requieren tnica, guantes y anteojos de proteccin. Cada reactivo debe ser considerado como un peligro potencial para la salud, la exposicin a los mismos debe ser minimizada. En particular el tartrato de antimonio y potasio es sumamente txico por lo que se aconseja leer la hoja que acompaa las especificaciones de dicho reactivo.

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5
5.1

INTERFERENCIAS
Interferencia positiva: el arseniato reacciona con el reactivo de molibdeno produciendo color azul intenso. Concentraciones tan bajas como 0.1 mg As/L interfieren con la determinacin de fosfatos. Interferencias negativas: el Cromo hexavalente y los nitritos interfieren dando resultados 3% ms bajos a concentraciones de 1 ppm y entre 10% y 15% ms bajos en concentraciones de 10 ppm. El sulfuro de sodio (Na2S) y el Ion Silicato no interfieren en la determinacin si se encuentran en concentraciones de 1.0 mg/L y 10 mg/L respectivamente.

5.2

5.3

6
6.1 6.2 6.3

MUESTREOYPRESERVACIN
Recolectar en frasco de vidrio, enjuagado previamente con cido clorhdrico (HCl) 1+1. Mantener la muestra refrigerada a 4C. Realizar la determinacin antes de las 48hs

7
7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9

INSTRUMENTALYMATERIALES
Espectrofotmetro, longitud de onda 880 nm, con paso ptico de 2.5cm o mayor. Celda: Tubos de 25 50 mL de capacidad y 2.5 cm de dimetro con tapa Balanza analtica con precisin de 0.01 g. Balanza analtica con precisin de 0.001 g. Pipetas automticas de volumen variable de rango de 1.00 a 10.00 mL. Pipetas automticas de volumen variable de rango de 100 a 1000 L. Matraz aforado de 1000 mL. Material de vidrio graduado de capacidad entre 100 y 500 mL Equipo de filtracin compuesto por: embudo Bchner, con portafiltro de 47 mm de dimetro y frasco de succin de 1000 mL.

7.10 Bomba de vaco 7.11 Filtros de membrana de 47 mm de dimetro y 0.45 m de dimetro de poro.

REACTIVOS

Nota: Se deben utilizar reactivos de grado analtico o superior, que cumplan las normas internacionales de calidad (ACS, ISO). 8.1 8.2 8.3 Solucin acuosa de fenoftalena. Disolver 0.5 g de Sal disdica de fenoftalena en 100 mL de agua destilada. Solucin estable por 6 meses. cido sulfrico (H2SO4), 5N: diluir 70 mL de H2SO4 conc. en 430 mL de agua destilada. Reactivo de Molibdato de Amonio: disolver 20 g de (NH4)6Mo7O24 4H2O en 500 mL de agua destilada. Almacenar en botellas de vidrio. Solucin estable por 6 meses.

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FsforoReactivo SECCION4 8.4 Solucin de cido Ascrbico 0.1M: disolver 1.76 g de cido ascrbico en 100 mL de agua destilada. La solucin es estable por una semana a 4C, almacenar en recipiente de vidrio color mbar. Solucin stock de fosfato, 50 mg P/L: disolver en agua destilada 219,5 mg de fosfato dicido de potasio (KH2PO4) anhidro y llevar a 1000 mL en matraz aforado. Esta solucin es estable por 6 meses. Solucin de trabajo, 1 mg P/L : Diluir la solucin stock 50 veces, 10.00mL en un frasco de vidrio graduado de 500mL, la toma y el volumen final deben ser realizados por peso con precisin de 0.01 g. Esta solucin es estable por 1mes. Solucin de tartrato de antimonio y potasio: disolver 1.3715 g de K(SbO)C4H4O6.1/2 H2O 1.47 g de K(SbO)C4H4O6.3 H2O en 400 mL de agua destilada en un matraz de 500 mL y llevar al aforo. Solucin estable por 6 meses. Reactivo Combinado: Preparar inmediatamente antes del desarrollo de color 100 mL de reactivo combinado (o la cantidad que se vaya a necesitar), mezclando en el orden dado los siguientes reactivos: 50 mL de H2SO4 5 N, 5 mL de tartrato de antimonio y potasio, 15 mL de molibdato de amonio 30 mL de cido ascrbico. Importante: Los reactivos deben estar a temperatura ambiente previo al mezclado. Mezclar despus de la adicin de cada reactivo. Si la solucin presenta turbidez agitar y dejar reposar por unos minutos hasta que la turbidez desaparezca. En caso que la turbidez no desaparezca debe reiterarse la preparacin de este reactivo. El mismo es estable por 4 horas.

8.5

8.6

8.7

8.8

9
9.1 9.2

PRECAUCIONESPARALAOPERACIN
El material utilizado debe ser de vidrio. Todo el material de vidrio, tanto frascos de muestreo como de anlisis, deben tener un tratamiento de lavado especial, sin detergente. Se realiza el lavado de todo el material con agua caliente, luego un enjuague con cido Clorhdrico 1:1 y finalmente tres enjuagues con agua destilada. Todo el material de vidrio utilizado inclusive el de almacenamiento de reactivos deben tener el tratamiento anterior. El material se almacena lavado, enjuagado y seco. Realizar el anlisis dentro de las 48 horas posteriores a la toma de muestra.

9.3 9.4 9.5

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10 CALIBRACINDELMTODO
10.1 A partir de la solucin de trabajo 1mg P/L, preparar la curva de calibracin con las concentraciones sugeridas en la tabla adjunta. Los volmenes indicados deben ser tomados con pipeta automtica de volumen variable 1-10 mL, material aforado o por pesada con precisin 0.01g registrando toma y volumen final, considerando la densidad del agua 1g/mL

Volumen de Solucin Trabajo 0 0.2 1 2 3 4 5

Volumen final 20 20 20 20 20 20 20

Concentracin en g P/L 0 10 50 100 150 200 300

10.2 Medir un punto de solucin control junto con la curva de calibracin. 10.3 Realizar el ajuste de cero del instrumento con una celda de lectura conteniendo agua destilada. 10.4 Medir la absorbancia de cada solucin antes de agregar el reactivo combinado. A esta medida le llamaremos Abs Blanco . 10.5 Agregar una gota de solucin de fenoftalena. Si la solucin vira a color rosado, agregar H2SO4 5N en gotas hasta que vire a incoloro. Tomar en cuenta la dilucin que estos agregados genera al estndar. 10.6 Agregar 3.2 mL del reactivo combinado. Agitar vigorosamente manteniendo el tubo en posicin vertical. 10.7 Medir la absorbancia de las soluciones a 880 nm de longitud de onda, entre 10 y 30 minutos luego de agregado del reactivo combinado. A esta medida le llamaremos Abs estandar. 10.8 Realizar la grfica de (Abs. g P/L.
estndar

- Abs.

Blanco

) en funcin de concentracin del estndar en

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11 ANLISISDELAMUESTRA
11.1 Preparacin de los filtros
11.1.1 Utilizar filtros de membrana comerciales preparados, en caso contrario, deben ser lavados antes de ser usados, ya que podran contribuir con cantidades significativas de fsforo a muestras de bajas concentraciones. 11.1.2 Existen dos formas de preparacin de filtros: A) B) empapar 50 filtros en 2L de agua destilada durante 1hora, luego cambiar el agua y dejarlos por tres horas ms. empapar 50 filtros en 2L de agua destilada durante 24horas.

11.2 Filtrar la muestra en caso de determinar fsforo reactivo disuelto. 11.3 Pipetear en los tubos o celda de lectura, 20.00 mL de la muestra previamente filtrada o una alcuota de la misma diluida a 20.00 mL. Realizar la toma con pipetas aforadas en peso con precisin 0.01g. Agregar una gota de solucin de fenoftalena. Si la muestra vira a color rosado, agregar H2SO4 5N en gotas hasta que vire a incoloro. Tomar en cuenta la dilucin que estos agregados genera a la muestra. 11.4 Medir la absorbancia a 880 nm, previo agregado del reactivo combinado. Esta medida corresponde a la Abscero 11.5 Agregar 3.2 mL del reactivo combinado. Agitar vigorosamente manteniendo el tubo en posicin vertical. 11.6 Medir la absorbancia a 880 nm, (corresponde a Absmuestra), entre 10 y no ms de 30 minutos luego del agregado del reactivo combinado.

12 ANLISISDEDATOS
12.1 La curva de calibracin es una recta representada por la siguiente ecuacin: ( Abs.estndar Abs.blanco ) = a x (g P/L) + b siendo a y b la pendiente y la ordenada en el origen de la recta respectivamente. 12.2 La concentracin de fosfato en la muestra se calcula segn: Fosfato, g P/L = ( Abs.muestra Abs.cero b ) x FD a FD (factor de dilucin de la muestra) = Volumen final / Toma de la muestra Abscero = es la absorbancia de la muestra previo al agregado del reactivo combinado, si no se lee la Abscero sustituir esta por la Absblanco.

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13 CONTROLDECALIDADANALTICO
13.1 Control de la exactitud: Tomar la cantidad necesaria de la solucin de "Control de Fsforo" (elaborada por el Responsable de Calidad o quien indique) en un tubo o celda de lectura, realizar la toma de forma tal que la concentracin final resulte en el medio de los valores de la curva de calibracin. Analizar esta solucin simultneamente con las muestras. Comparar el resultado con su valor de referencia y lmites de aceptacin. Cuando el resultado no se encuentre dentro del rango de los lmites, se debe revisar el procedimiento y repetir el anlisis. (Segn Manual de Control de Calidad Analtico) 13.2 Control de la precisin: Se debe realizar el anlisis por duplicado de todas las muestras. Verificar que la dispersin de los duplicados est dentro de los lmites de control de Rangos correspondientes. (Segn Manual de Control de Calidad Analtico). La precisin puede ser evaluada tanto por desviacin estndar relativa como por rangos. 13.3 Fortificacin: fortificar todas las muestras de matriz efluente industrial y 1 de cada 5 de las muestras cuya matriz es agua. Se compara el resultado con su valor de referencia y lmites de aceptacin. Cuando el resultado no se encuentre dentro del rango de los lmites, se debe revisar el procedimiento y repetir el anlisis (Segn Manual de Control de Calidad Analtico).

14 BIBLIOGRAFA
14.1 AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION Standard Methods for the examination of water and wastewater, 21th Edition 2005, 4500 PA, B y E, pp 4-146 - 4-151, 4-153 - 4-155 .

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