The Van Deemter equation

Harold McNair, Virginia Tech, USA Abstract The efficiency of a column is measured by theoretical plates, Nth, and can be normalized with the length of the column to give the height equivalent theoretical plate, called HETP or H. The Van Deemter equation describes the various factors influencing H, and is divided into eddy diffusion, longitudinal diffusion, and mass transfer terms. The relative importance of these factors varies with mobile phase velocity. Particle size and morphology contribute to H, along with a variety of other factors. Understanding the van Deemter equation allows the determination of the optimum mobile phase velocity. KeywordsVan Deemter equation, A term, B term, C term, Mobile phase velocity, Column, Particle size, Efficiency, Height equivalent theoretical plate, HETP (H), Eddy diffusion, Longitudinal diffusion, Mass transfer, Particle shape, Wall effect, Porosity, Diffusion coefficient, Retention factor, Viscosity, Temperature, Optimal flow LevelBasic The theoretical plate number Nth shows the relation between retention time and peak width and describes column quality and separation power. Factors affecting column efficiency (plate number)

Column length Particle size Packing quality Linear velocity (flow) Instrument quality (dead volume) Retention factor

Stationary phase particle size is one of the most important factors in the van Deemter equation. For a given column length, the plate number (Nth) is inversely related to the particle size of the column packing. The smaller the particles, the higher the plate number and the separation power. The plate number is also dependent on the flow rate (F) of the mobile phase. There is a certain velocity, the so-called optimum flow, at which the plate number is highest (and H is lowest). A lower or a higher flow rate provides less plates (higher H). In routine HPLC, columns are always operated at velocities above the optimum. The reduced column efficiency is less significant than the shorter analysis time at the higher than optimal flow rates. To describe the contribution of the above factors, several so-called plate height equations have been developed. A plate height equation expresses the correlation between plate height and mobile phase velocity. Best known is the van Deemter equation, which describes the various

contributions to plate height (H). In this equation the parameters that influence the overall peak width are expressed in three terms:

H = HETP (plate height) A = eddy diffusion term B = longitudinal diffusion term u = linear velocity C = Resistance to mass transfer coefficient Peak height and peak broadening are governed by kinetic processes in the column such as molecular dispersion, diffusion and slow mass transfer. Identical molecules travel differently in the column due to probability processes. The three processes that contribute to peak broadening described in the van Deemter equation are:

A-term: eddy diffusion: The column packing consists of particles with flow channels in between. Due to the difference in packing and particle shape, the speed of the mobile phase in the various flow channels differs and analyte molecules travel along different flow paths through the channnels. B-term: longitudinal diffusion: Molecules traverse the column under influence of the flowing mobile phase. Due to molecular diffusion, slight dispersions of the mean flow rate will be the result. C-term: resistance against mass transfer. A chromatographic system is in dynamic equilibrium. As the mobile phase is moving continuously, the system has to restore this equilibrium continuously. Since it takes some time to restore equilibrium (resistance to mass transfer), the concentration profiles of sample components between mobile and stationary phase are always slightly shifted. This results in additional peak broadening.

van Deemter H-u curve

The van Deemter equation is graphically expressed in the H-u curve, which is a plot of the plate height as a function of the mobile phase velocity. The H-u curve shows that:

The A-term is independent of u and does not contribute to the shape of the H-u curve.. The contribution of the B-term is negligible at normal operating conditions. This is due to the fact that the molecular diffusion coefficient in a liquid medium is very small. The C- term increases linearily with mobile phase velocity and its contribution to the H-u curve is therefore considerable. A small C-term leads to a fairly flat ascending portion of the H-u curve at higher mobile phase velocities. This means that the separation can be carried out at higher mobile phase velocities without sacrificing separation quality.

van Deemter H/u curve The H-u curve is very useful to determine the optimum mobile phase velocity uopt at which the highest column efficiency wil be attained. Below this velocity the column efficiency will decrease rapidly, whereas above the optimum velocity there is only a slight decrease in efficiency. General rules of thumb:

The smaller the plate height H, the more efficient the column. However, at the optimum flow rate (with the lowest H), the analysis time will in most cases be unacceptably long. Below the optimum flow rate the analysis time is too long and the quality of the separation suffers because of longitudinal diffusion (contribution of the B-term). At extremely high flows, both the separation quality and the pressure drop across the column will become unacceptable. The practical flow is often two or three times the optimum velocity. At these values, the minor loss of efficiency is still acceptable. Small particles (< 5 m) allow an increase in the flow to reduce the analysis time without significantly lowering resolution between the peaks of interest.

Separation and (optimum) velocity

eddy diffusion (A-term)

The A-term in the Van Deemter equation describes the peak broadening due the presence of stationary phase particles in the column. In the literature it is called ' eddy diffusion'. Eddy diffusion occurs as a result of multiple flow paths through a packed column bed. Analyte molecules cannot flow along a straight path through the column. Each analyte molecule follows a different flow path, which causes dispersion (differential path lengths). Some molecules will travel more slowly and will lag behind the zone (peak) centre, others will follow shorter paths and are slightly ahead. This effect results in slight differences in retention. The homogeneity of the packed bed strongly affects the A-term. The probability of differential pathlengths due to radial movements is greater in a colu However, when a column of this size is packed regularly with small, spherical particles with small dispersion in particle size, the contribution from eddy diffusion in the van Deemter equation will be a minimal. Eddy diffusion in the van Deemter equation is independent of the flow velocity of the mobile phase. In reality it appears that this is not entirely true, particularly at low flow rates. This can be seen in the above H-u curve. Factors influencing A-term ('eddy' diffusion)

Particle size dp Particle shape (regular or irregular?) Particle pore structure / shape Quality of the column packing Wall effects (material, roughness, column diameter)

Eddy diffusion is affected by the packing material in the column, specifically:

Particle size: The larger the particles, the stronger the dispersion effect. Particle shape: For regularly shaped particles (spherical) the path length between the particles is smaller than for irregular particles. This is due to the fact that spherical particles can more easily form a regularly packed column bed. Conversely, an irregularly packed bed consists of flow channels of different shapes and diameters, resulting in different mobile phase velocities.

Longitudinal diffusion (B-term)

The B-term in the van Deemter equation, also known as longitudinal diffusion, refers to the diffusion of individual analyte molecules in the mobile phase along the longitudinal direction of a column. Longitudinal diffusion contributes to peak broadening only at very low flow rates below the minimum (optimum) plate heigth. Molecular diffusion takes place independent of the longitudinal (= axial) flow direction. Longitudinal diffusion is the result of concentration differences in the mobile phase. In the center of the peak zone the concentration is at its maximum. The concentration before and after the peak zone is lower. This results in diffusion, both in the direction of the mobile phase flow as well as in the opposite direction. Some molecules move faster and others will move slower relative to the average velocity, resulting in peak broadening. This effect will be relatively great at long residence times in the column, which is the case at low flow rates. As the flow rate increases, this effect will contribute less to the total peak broadening. In practice, it is best to select flow rates that minimise the effect of longitudinal diffusion on column efficiency. Longitudinal diffusion is proportional to the molecular diffusion coefficient. It obeys Ficks law and is therefore affected by viscosity, temperature and molecular size (~ weight). Increased temperature and diffusion coefficient increase the B term, while increased viscosity decreases it. Diffusion coefficients for components in liquids are generally very small. Because the mobile phase velocity is much higher than the diffusion coefficient of the component in solution, the B term is hardly significant in liquid chromatography and is typically neglected. Influences on B-term (longitudinal diffusion):

Linear velocity of the mobile phase Diffusion coefficient of analyte in the mobile phase Dm

Mobile phase viscosity Temperature Type of analyte (molecular mass)

Mass transfer (C-term)

The C-term in the van Deemter equation relates to the mass transfer of sample components between the stationary phase and the mobile phase during separation. The overall Cterm is divided into two separate mass transfer terms:

Cm-term, describing the contributions to peak broadening in the mobile phase. Because the linear velocity of the mobile phase is lower closer to the column wall (or the stationary phase particles) than in the center (or further away from the particles), the analyte molecules experience different velocities. This results in peak broadening in the mobile phase. This phenomenon is described by the Cm term. Cs-term, describing the contributions to peak broadening in the stationary phase. The Cs-term is determined by the amount of stationary phase (low is advantageous for the efficiency) and the extent of interaction of the sample on the phase (represented by the retention factor) and the distances the sample molecules have to travel.

Sample components (analytes) are retained in a chromatographic column due to their interaction with the stationary phase. Analyte molecules present in the flowing mobile phase diffuse towards the mobile/stationary pase interface, and enter into the stationary phase. To maintain partition equilibrium, some molecules will return to the mobile phase. After some time there will be a reverse process as the analytes move from the stationary phase into the mobile phase. This results in a continuous mass transfer taking place between the flowing mobile phase and the stagnant stationary phase during the course of the separation. Resistance to mass transfer is dependent on the speed with which the partition equilibrium between mobile and stationary phase is obtained. Since the resistance to mass transfer in the mobile phase is not the same for all molecules of one type of analyte (it depends on the location in the column at a particular time and the distance they have to travel to partition between phases) this will also result in peak broadening of that analyte in the column.

Resistance against mass transfer in mobile phase

C" is a constant factor, related to the retention factor k of the peak of interest. Omega is related to the solvent volume of the column between and in the particles (pores), accessible for the mobile phase. Another important parameter affecting the Cm-term is particle diameter. Smaller particles will result in narrower flow channels and less contribution to mass transfer in the mobile phase. Influences on Cm-term:

Particle size dp Linear velocity u of the mobile phase Diffusion coefficient in the mobile phase Porosity of the packing particles Viscosity of the mobile phase Retention factor k Temperature

When analyte molecules can move quickly back and forth between mobile and stationary phase, the column efficiency is greatly improved. The speed with which analyte molecules move back and forth between phases is related to the diffusion coefficient of the analyte molecule in a particular mobile phase. Analyte molecules with large diffusion coefficients in the mobile phase will need less time to move to the mobile/stationary phase interface. The same applies for the movement into and out of the stationary phase. The viscosity and temperature also have an effect on diffusion.

Resistance against mass transfer in stationary phase

Equilibrium is reached faster with a larger molecular diffusion coefficient for the mobile phase and with a smaller particle diameter. This means that the contribution of the Cm and Cs to plate height decreases and the separation is more efficient. The contribution of the two C-terms to the overall peak broadening appears to increase with the linear velocity of the mobile phase. As mobile phase velocity increases, the exchange of molecules between mobile phase and stationary phase must be fast enough to keep up if the equilibrium between the phases is to be maintained. If equilibrium is not maintained, the peaks broaden and the efficiency and separation quality decrease. Influences on CS-term:

Quality of stationary phase Diffusion coefficient in stationary phase Retention factor k Temperature Particle size Mobile phase velocity

The k value influences both C terms. The relative band broadening and thus the plate number appears to be dependent on the extent of interaction of a component with the stationary phase. Therefore, it becomes important to consider which peak is used to calculate a column's plate number. This dependence is strongest at the beginning of the chromatogram and decreases at higher retention factors. Thus, Nth is best calculated from a peak somewhere at the end of the chromatogram ( k > 5 ).

http://www.chromedia.org/chromedia?waxtrapp=xqegzCsHqnOxmOlIEcCbC&subNav=wnjedD sHqnOxmOlIEcCzBkF

Van Deemter persamaan Harold McNair, Virginia Tech, Amerika Serikat Abstrak Efisiensi kolom diukur dengan pelat teoritis, N, dan dapat dinormalisasi dengan panjang kolom untuk memberikan pelat tinggi teoritis setara, yang disebut HETP atau H. Persamaan Van Deemter menggambarkan berbagai faktor yang mempengaruhi H, dan dibagi menjadi difusi eddy, difusi longitudinal, dan istilah perpindahan massa. Kepentingan relatif dari faktor-faktor ini bervariasi dengan kecepatan fase gerak. Ukuran partikel dan morfologi berkontribusi H, bersama dengan berbagai faktor lainnya. Memahami persamaan van Deemter memungkinkan penentuan kecepatan fase optimal mobile. KeywordsVan Deemter persamaan, istilah A, B panjang, C panjang, kecepatan fase Mobile, Kolom, Ukuran partikel, Efisiensi, piring Tinggi teoritis setara, HETP (H), difusi Eddy, difusi longitudinal, transfer massa, bentuk partikel, efek Wall, Porositas , koefisien difusi, faktor Retensi, Viskositas, Suhu, aliran Optimal LevelBasic Para N plat teoritis jumlah menunjukkan hubungan antara waktu retensi dan lebar puncak dan menggambarkan kualitas dan daya kolom pemisahan. Faktor yang mempengaruhi efisiensi kolom (nomor polisi) Panjang kolom Ukuran partikel Packing kualitas Linear kecepatan (aliran) Instrumen kualitas (volume mati) Retensi faktor Fase ukuran partikel stasioner adalah salah satu faktor paling penting dalam persamaan van Deemter. Untuk panjang kolom yang diberikan, jumlah plat (N) berbanding terbalik dengan ukuran partikel dari kemasan kolom. Semakin kecil partikel, semakin tinggi jumlah pelat dan kekuatan pemisahan. Jumlah piring juga tergantung pada laju aliran (F) dari fase gerak. Ada kecepatan tertentu, aliran yang disebut optimal, di mana jumlah piring yang tertinggi (dan H adalah terendah). Tingkat yang lebih rendah atau aliran yang lebih tinggi menyediakan piring kurang (lebih tinggi H). Dalam HPLC rutin, kolom selalu dioperasikan pada kecepatan di atas optimal. Efisiensi kolom berkurang adalah kurang berarti dibandingkan dengan waktu analisis singkat pada lebih tinggi dari laju aliran yang optimal. Untuk menggambarkan kontribusi dari faktor di atas, persamaan piring beberapa yang disebut tinggi telah dikembangkan. Sebuah persamaan ketinggian piring mengungkapkan korelasi antara tinggi piring dan kecepatan fase gerak. Paling dikenal adalah van Deemter persamaan, yang menggambarkan kontribusi berbagai ketinggian piring (H). Dalam persamaan ini parameter yang

mempengaruhi lebar puncak keseluruhan dinyatakan dalam tiga istilah: H = HETP (tinggi piring) A = difusi eddy jangka B = panjang membujur difusi u = kecepatan linier C = Resistensi terhadap koefisien perpindahan massa Tinggi puncak dan puncak memperluas diatur oleh proses kinetik pada kolom seperti dispersi molekul, difusi dan transfer massa lambat. Molekul identik merambat secara berbeda dalam kolom karena proses probabilitas. Ketiga proses yang berkontribusi ke puncak memperluas dijelaskan dalam persamaan van Deemter adalah: Sebuah istilah-: eddy difusi: The kemasan kolom terdiri dari partikel dengan saluran aliran di antaranya. Karena perbedaan dalam pengepakan dan bentuk partikel, kecepatan fase gerak dalam berbagai saluran aliran berbeda dan molekul analit perjalanan sepanjang jalur aliran yang berbeda melalui channnels. B panjang: difusi memanjang: Molekul melintasi kolom di bawah pengaruh fase gerak mengalir. Karena difusi molekuler, dispersi sedikit laju aliran rata-rata akan hasilnya. C panjang: perlawanan terhadap perpindahan massa. Sebuah sistem kromatografi berada dalam kesetimbangan dinamis. Sebagai fase gerak bergerak terus menerus, sistem harus mengembalikan keseimbangan ini terus menerus. Karena diperlukan waktu untuk mengembalikan keseimbangan (resistensi terhadap transfer massa), profil konsentrasi komponen sampel antara fase gerak dan diam selalu sedikit bergeser. Hal ini menghasilkan puncak tambahan perluasan. van Deemter H-u kurva Van Deemter persamaan secara grafis dinyatakan dalam kurva Hu, yang merupakan plot dari ketinggian piring sebagai fungsi dari kecepatan fase gerak. Kurva H-u menunjukkan bahwa: Istilah A-adalah independen dari u dan tidak memberikan kontribusi dengan bentuk kurva Hu .. Kontribusi istilah B-diabaikan pada kondisi operasi normal. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa koefisien difusi molekul dalam medium cair sangat kecil. C-istilah meningkat linearily dengan kecepatan fase gerak dan kontribusinya terhadap kurva Hu karena itu cukup besar. Sebuah C jangka-kecil menyebabkan sebagian naik cukup datar dari kurva Hu pada kecepatan yang lebih tinggi fase gerak. Ini berarti bahwa pemisahan dapat dilakukan pada kecepatan yang lebih tinggi fase gerak tanpa mengorbankan kualitas pemisahan. van Deemter H / u curvevan Deemter H / u kurva Kurva Hu sangat berguna untuk menentukan kecepatan fase uopt optimal mobile di mana wil kolom efisiensi tertinggi dicapai. Di bawah kecepatan ini efisiensi kolom akan berkurang dengan

cepat, sedangkan di atas kecepatan optimal hanya ada sedikit penurunan dalam efisiensi. Umum aturan praktis: Para ketinggian lebih kecil plat H, kolom lebih efisien. Namun, pada laju aliran optimum (dengan H terendah), waktu analisis akan dalam banyak kasus tidak dapat diterima panjang. Di bawah laju aliran optimum waktu analisis terlalu panjang dan kualitas pemisahan menderita karena difusi longitudinal (B kontribusi dari panjang). Pada arus yang sangat tinggi, baik kualitas pemisahan dan penurunan tekanan pada kolom akan menjadi tidak dapat diterima. Aliran praktis sering dua atau tiga kali kecepatan yang optimal. Pada nilai-nilai, kehilangan kecil dari efisiensi masih dapat diterima. Partikel kecil (<5 pM) memungkinkan peningkatan aliran untuk mengurangi waktu analisis tanpa secara signifikan menurunkan resolusi antara puncak kepentingan. Pemisahan dan (optimal) velocitySeparation dan (optimal) kecepatan eddy difusi (A-panjang) A-istilah dalam persamaan Van Deemter menggambarkan puncak memperluas karena keberadaan partikel fase diam dalam kolom. Dalam literatur disebut 'eddy difusi. Difusi eddy terjadi sebagai akibat dari jalur aliran beberapa melalui tempat tidur kolom dikemas. Molekul analit tidak dapat mengalir di sepanjang jalan yang lurus melalui kolom. Setiap molekul analit mengikuti jalur aliran yang berbeda, yang menyebabkan dispersi (diferensial panjang jalan). Beberapa molekul akan melakukan perjalanan lebih lambat dan akan tertinggal di belakang pusat (puncak) zona, yang lain akan mengikuti jalur yang lebih pendek dan sedikit ke depan. Efek ini menghasilkan sedikit perbedaan dalam retensi. Homogenitas dari packed bed sangat mempengaruhi A-panjang. Probabilitas pathlengths diferensial karena gerakan radial lebih besar dalam colu 1. +Anda 2. Telusuri 3. Gambar 4. Maps 5. Berita 6. Gmail 7. Documents 8. Kalender 9. Terjemahan 10. Lainnya 1. 2. 3. 4.

5. 1. 2. Masuk Terjemahan
How ever, w hen a column of this size is p particles w ith small dispersion in eddy diffusion in the van Deemt

Namun, ketika kolom ukuran ini dikemas secara teratur dengan kecil, partikel berbentuk bola dengan dispersi kecil dalam ukuran partikel, kontribusi dari difusi eddy dalam persamaan van Deemter akan menjadi minimal. Difusi eddy dalam persamaan van Deemter tidak tergantung pada kecepatan aliran fase gerak. Pada kenyataannya tampak bahwa hal ini tidak sepenuhnya benar, khususnya pada tingkat aliran rendah. Hal ini terlihat dalam kurva H-u atas. Faktor-faktor yang mempengaruhi Sebuah istilah-('eddy' difusi) Ukuran partikel dp Partikel bentuk (teratur atau tidak teratur?) Partikel pori struktur / bentuk Kualitas kemasan kolom Dinding efek (bahan, kekasaran, diameter kolom) Eddy difusi dipengaruhi oleh bahan kemasan dalam kolom, khususnya: Ukuran partikel: Semakin besar partikel, semakin kuat efek dispersi. Bentuk partikel: Untuk partikel berbentuk teratur (bulat) panjang jalan antara partikel lebih kecil dari untuk partikel yang tidak teratur. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa partikel berbentuk bola dapat lebih mudah membentuk tempat tidur kolom dikemas secara teratur. Sebaliknya, tempat tidur tidak teratur dikemas terdiri dari saluran aliran dari berbagai bentuk dan diameter, sehingga berbeda kecepatan fase gerak. Longitudinal difusi (B panjang) B-istilah dalam persamaan van Deemter, juga dikenal sebagai difusi longitudinal, mengacu pada difusi molekul analit individu dalam fase gerak sepanjang arah longitudinal kolom. Difusi longitudinal memberikan kontribusi untuk memperluas puncak hanya pada laju aliran yang sangat rendah di bawah heigth (optimal) plat minimum. Difusi molekuler terjadi independen dari arah (= aksial) aliran longitudinal. Difusi longitudinal adalah hasil dari perbedaan konsentrasi dalam fase gerak. Di tengah zona puncak konsentrasi adalah pada maksimum. Konsentrasi sebelum dan setelah zona puncak yang lebih rendah. Hal ini menghasilkan difusi, baik dalam arah aliran fase gerak serta dalam arah yang berlawanan.

Beberapa molekul bergerak lebih cepat dan orang lain akan bergerak relatif lambat untuk kecepatan rata-rata, sehingga memperluas puncak. Efek ini akan relatif besar pada waktu tinggal yang lama dalam kolom, yang merupakan kasus pada laju alir yang rendah. Sebagai laju aliran meningkat, efek ini akan memberikan kontribusi kurang ke puncak jumlah memperluas. Dalam prakteknya, yang terbaik adalah untuk memilih laju aliran yang meminimalkan pengaruh difusi longitudinal pada efisiensi kolom. Difusi longitudinal sebanding dengan koefisien difusi molekuler. Ini mematuhi hukum Fick dan karena itu dipengaruhi oleh viskositas, suhu dan ukuran molekul (~ berat). Suhu meningkat dan koefisien difusi meningkatkan jangka B, sedangkan viskositas meningkat menurun itu. Difusi koefisien untuk komponen dalam cairan umumnya sangat kecil. Karena kecepatan fase gerak jauh lebih tinggi dari koefisien difusi komponen dalam larutan, istilah B hampir tidak signifikan dalam kromatografi cair dan biasanya diabaikan. Pengaruh pada B panjang (difusi longitudinal): Linear kecepatan fase gerak Koefisien difusi analit dalam fase Dm ponsel Viskositas fase gerak Suhu Jenis analit (massa molekul) Perpindahan massa (C panjang) C-istilah dalam persamaan van Deemter berkaitan dengan perpindahan massa komponen sampel antara fase diam dan fase gerak selama pemisahan. Keseluruhan C jangka dibagi menjadi dua istilah perpindahan massa yang terpisah: Cm panjang, menggambarkan kontribusi ke puncak memperluas dalam fase gerak. Karena kecepatan linier fase gerak lebih rendah lebih dekat ke dinding kolom (atau partikel fase diam) dibandingkan di pusat (atau lebih jauh dari partikel), molekul analit mengalami kecepatan yang berbeda. Hal ini menghasilkan puncak memperluas dalam fase gerak. Fenomena ini dijelaskan dengan istilah Cm. Cs-panjang, menggambarkan kontribusi ke puncak memperluas dalam fase diam. Cs panjang ditentukan oleh jumlah fase stasioner (rendah adalah menguntungkan untuk efisiensi) dan sejauh mana interaksi sampel pada tahap (diwakili dengan faktor retensi) dan jarak molekul sampel harus melakukan perjalanan. Contoh komponen (analit) dipertahankan dalam kolom kromatografi karena interaksi mereka dengan fase diam. Molekul analit hadir dalam difus fase bergerak mengalir menuju antarmuka Pase mobile / stasioner, dan masuk ke dalam fase diam. Untuk menjaga keseimbangan partisi, beberapa molekul akan kembali ke fase gerak. Setelah beberapa waktu akan ada proses sebaliknya sebagai analit bergerak dari fase diam ke dalam fase gerak. Hal ini menghasilkan perpindahan massa terus-menerus terjadi antara fase gerak mengalir dan fase diam stagnan selama pemisahan.

Resistensi terhadap transfer massa tergantung pada kecepatan yang keseimbangan partisi antara fase gerak dan stasioner diperoleh. Karena resistensi terhadap transfer massa dalam fase gerak tidak sama untuk semua molekul dari satu jenis analit (tergantung pada lokasi dalam kolom pada waktu tertentu dan jarak mereka harus melakukan perjalanan ke partisi antara fase) ini juga akan menghasilkan puncak memperluas analit yang dalam kolom. Resistensi terhadap transfer massa di phaseResistance ponsel terhadap perpindahan massa di fasa gerak C "merupakan faktor konstan, terkait dengan k faktor retensi puncak bunga Omega berhubungan dengan volume pelarut dari kolom antara dan dalam partikel (pori-pori), dapat diakses untuk fase gerak.. Parameter lain yang penting yang mempengaruhi Cm panjang adalah diameter partikel. partikel yang lebih kecil akan menghasilkan saluran aliran sempit dan kontribusi kurang untuk perpindahan massa dalam fase gerak. Pengaruh pada Cm panjang: Ukuran partikel dp Kecepatan linear u dari fase gerak Koefisien difusi dalam fasa gerak Porositas partikel kemasan Viskositas fase gerak Retensi faktor k Suhu Ketika molekul analit bisa bergerak cepat bolak-balik antara fase gerak dan diam, efisiensi kolom sangat meningkat. Cepatnya molekul analit bergerak maju mundur antara fase ini terkait dengan koefisien difusi dari molekul analit dalam fase gerak tertentu. Analit molekul dengan koefisien difusi yang besar dalam fase gerak akan perlu sedikit waktu untuk pindah ke antarmuka fase gerak / stasioner. Hal yang sama berlaku untuk gerakan masuk dan keluar dari fase diam. Viskositas dan suhu juga berpengaruh pada difusi. Resistensi terhadap transfer massa di phaseResistance stasioner terhadap perpindahan massa di fasa diam Equilibrium tercapai lebih cepat dengan koefisien difusi yang lebih besar molekuler untuk fase gerak dan dengan diameter partikel yang lebih kecil. Ini berarti bahwa kontribusi dari Cm dan Cs terhadap tinggi plat menurun dan pemisahan yang lebih efisien. Kontribusi dari dua C-istilah ke puncak keseluruhan memperluas tampaknya meningkat dengan kecepatan linier fase gerak. Seiring dengan peningkatan kecepatan fase gerak, pertukaran molekul antara fase gerak dan fase diam harus cukup cepat untuk menjaga jika keseimbangan antara fase adalah untuk dipertahankan. Jika keseimbangan tidak dipertahankan, puncak memperluas dan penurunan kualitas efisiensi dan pemisahan. Pengaruh pada CS-istilah:

Kualitas fase diam Koefisien difusi dalam fasa diam Retensi faktor k Suhu Ukuran partikel Handphone fase kecepatan Nilai k mempengaruhi kedua istilah C. Band yang relatif memperluas dan dengan demikian jumlah piring tampaknya tergantung pada sejauh mana interaksi dari komponen dengan fase diam. Oleh karena itu, menjadi penting untuk mempertimbangkan mana puncak digunakan untuk menghitung jumlah piring kolom. Ketergantungan ini paling kuat di awal kromatogram dan mengurangi faktor-faktor retensi yang lebih tinggi. Dengan demikian, N paling baik dihitung dari puncak di suatu tempat di akhir kromatogram (k> 5).