Bioconversin de biomasa lignocelulsica

Dr. Renato Chvez

Laboratorio de Microbiologa Bsica y Aplicada Facultad de Qumica y Biologa, Universidad de Santiago de Chile. renato.chavez@usach.cl

Qu es la masa lignocelulsica?
Es la fuente de E renovable ms abundante que existe en el planeta: La E solar almacenada como carbono por la fotosntesis es 10 veces ms que la que usa el mundo actualmente Las plantas producen 1x1010 toneladas mtricas de peso seco al ao (2/3 de la E requerida) Al ao hay 180 millones de toneladas disponibles de deshechos lignocelulsicos. Chile es un gran productor.

-El 21% de la superficie de Chile son bosques, el 18% de son protegidos y el 3% restante son para explotacin. Esto equivale a 24.000 Km2 de potenciales deshechos de la industria de la celulosa (media Holanda o media Costa Rica). -Otro dato: En Chile hay unas 270.000 Hs de trigo. Se estima que de una H. Se producen 10 toneladas de deshecho lignocelulsico (paja de trigo).

Produccin de lignocelulosa

-Los procesos anablicos de fijacin de C y biosntesis de masa lignocelulsica vegetal han sido ampliamente estudiados y conocidos por los alumnos de gracias a esplndidos cursos de biologa celular, gentica y fisiologa vegetal. -Sin embargo, el proceso catablico inverso es menos estudiado y conocido y es el que nos ocupar (en parte).

Proceso de descomposicin de lignocelulosa por M.O.

Lignocelulosa

glucosa (1-4)

xilosa (1-4) con sustituyentes

fenilpropanoides

Degradacin de lignocelulosa por microorganismos

celulosa
CELULASAS

BACTERIAS Y/O HONGOS

XILANASAS

LIGNINASAS

xilano

Produccin de un grupo de enzimas hidrolticas (glicanasas y esterasas) o con actividad redox. lignina

Principales actividades enzimticas en la degradacin de lignocelulosa

Mn peroxidasa; lignina peroxidasa

Principales actividades enzimticas en la degradacin de celulosa

ENZIMAS LLAMADAS GENRICAMENTE CELULASAS

Principales actividades enzimticas en la degradacin de hemicelulosa

1- ENDOXILANASAS 2- ARABINOFURANOSIDASAS 3- GLUCORONIDASAS 4- FERULOIL/CUMAROIL ESTERASAS 5- ACETIL XILANO ESTERASAS

Genricamente denominadas XILANASAS

Aspecto interesante de la biologa en estos sistemas: Cada organismo tiene ms de una actividad enzimtica para cada enzima:

No se sabe con certeza cual es la razn de esta multiplicidad de isoenzimas, que corresponden a genes distintos. Hiptesis??????????????

APLICACIONES BIOTECNOLGICAS

Blanqueamiento de la pulpa de celulosa

Blanqueamiento de la pulpa de celulosa

-ES EL USO DE COMPUESTOS CLORADOS (ClO2) ES PARTICULARMENTE CARO Y CONTAMINANTE.

Cmo mejorar este proceso usando la biotecnologa?

Biopulpaje de la celulosa: lignocelulasas puras.

Biopulpaje de la celulosa: lignocelulasas puras.

Biopulpaje de la celulosa: agregar directamente los MO que las producen

- Proceso ms econmico y de mayor productividad - Proceso ms limpio (ms ecolgico) - Vanguardia tecnolgica - Procesos con mejores caractersticas en papeles derivados - Aplicables a varios tipos de madera

OTRAS MEJORAS: INDUSTRIA DE ALIMENTOS, PRXIMO CAPTULO.

Produccin de bioetanol
De todos los procesos biotecnolgicos en los que est involucrada la masa lignocelulsica, el ms interesante es lograr producir etanol.

Fermentacin alcohlica

Produccin de bioetanol

Fuente: Worldwatch Institute

Produccin (millones de lts) Brasil Estados Unidos China Unin Europea India 16.500 16.230 2.000 950 300

Cul es el problema con el bioetanol?

- El 90% del bioetanol se obtiene de caa de azcar y MAIZ!!!! -Esto sube los precios de los granos: Entre Sept- 2006 y marzo- 2007 (6 meses) el precio del maz subi 14%!!!!!!!! RESULTADO?????

Cul es el problema con el bioetanol?

Otros problemas asociados: -En USA, entre 2001 y 2006 el consumo de maz por parte de las destiladoras de etanol se ha triplicado (18 millones de toneladas a 55 millones de toneladas), lo que equivale a la sexta parte de la produccin total de maz del pas. A este paso, se espera que cuando todas las destiladoras proyectadas funcionen a plena capacidad, la mitad del maz de los estados maiceros de ese pas se usar para bioetanol.

-EN RESUMEN La produccin de etanol usando granos no se sustenta a largo plazo.

Alternativa: uso de material lignocelulsico

Ejemplo sobre el potencial en Chile: -Se estima que una hectrea de trigo produce cerca de 10 toneladas de paja de trigo. -La superficie cultivada en el pas son 400.000 Has. aprox. Hay disponibles 4.000.000 de toneladas de paja de trigo anuales. -Se estima que desde 1 tonelada de paja de trigo se pueden obtener entre 250 y 300 litros de etanol. -Asumiendo valor $408 por litro, entonces 1 tonelada de paja de trigo, cuyo valor agregado actual es cero, pasara a producir entre $100.000 y $123.000 en etanol. -Tomando en cuenta el total de material disponible en el pas, potencialmente se podran producir entre 1.000 y 1.200 millones de litros de etanol slo desde rastrojos de paja de trigo, por un valor de entre 740 y 890 millones de dlares.

Problemas tcnico 1 del uso de material lignocelulsico

-Se requiere, de alguna forma, transformar la masa lignocelulsica a azcares simples fermentables, principalmente glucosa. -Fuente ms evidente de glucosa de la lignocelulosa??? -EL MO fermentador por excelencia, S. cerevisiae, es incapaz de degradar la masa lignocelulsica. -Qu hacemos???......
-Hay levaduras que son capaces de sacarificar y fermentar (Pichia stipitis, otras) pero de manera menos eficiente. -Hay organismos sacarificadores eficientes que pueden ser usados simultneamente con el fermentador (S. cerevisiae) se pueden mezclar propiedades de ambos.

Ingeniera gentica para producir etanol desde celulosa usando levaduras

Fujita et al. (2004) Appl. Environ. Microbiol. 70: 1207-1212. Levadura que expresa en su superficie un gen de -glucosidasa de Aspergillus aculeatus y los genes de endoglucanasa II y celobiohidrolasa II de Trichoderma reesei

CEPA EXPRESANDO LAS 3 PROTENAS

CONTROL

CONTROL Celulosa residual a 72 hrs.

CEPA EXPRESANDO

Problemas tcnico 2 del uso de material lignocelulsico

Las levaduras no son capaces de aprovechar las pentosas de manera eficiente.

-CELULOSA ------- GLUCOSA -HEMICELULOSA -------XILOSA Y ARABINOSA (PENTOSAS)

Etanol desde pentosas

Ingeniera gentica para producir etanol desde hemicelulosa (xilano) usando levaduras
Katahira et al. (2004) Appl. Environ. Microbiol. 70: 5407-5414. 1) Levadura que expresa en su superficie un gen de -xilosidasa de Aspergillus oryzae y los genes de xilanasa II de Trichoderma reesei

CEPA EXPRESANDO LAS 2 PROTENAS

CONTROL

2) A esta levadura introducen los genes de xilosa reductasa (XYL1) y xilitol reductasa (XYL2) de P. stipitis, y el gen de xiluloquinasa (XKS1) de S. cerevisiae.

CONTROL