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ANIMALES MODIFICADOS GENTICAMENTE:

(II): APLICACIONES
MA DE LOS NGELES PEARANDA1, FERNANDO ASENSIO2 Doctora en Veterinaria Doctor en Veterinaria Hospital General Universitario Gregorio Maran, Madrid
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La biotecnologa incluye cualquier tcnica que utilice organismos vivos o parte de esos organismos para fabricar o modificar productos, mejorar plantas o animales o para desarrollar microorganismos para usos especficos (Rodrguez-Villanueva, 1986). La aplicacin de metodologas de ingeniera gentica en biotecnologa para la cra y produccin de animales tiene como finalidad la obtencin de animales modificados genticamente con caractersticas singulares que mejoran, complementan o perfeccionan las condiciones de los ancestros originales, denominados wild-type, de los que parten las lneas transgnicas. Hay mltiples razones que respaldan la necesidad de criar y producir animales transgnicos, entre ellas podemos destacar: 1. Avanzar en el conocimiento y descifrar el cdigo gentico. 2. Estudiar el control gentico de los procesos fisiolgicos. 3. Construir modelos genticos de enfermedades. 4. Mejorar la produccin animal, enriqueciendo sus rasgos y consiguiendo nuevos productos Dentro de este contexto general, la biotecnologa ha incorporado la modificacin gentica en animales como una herramienta ms, utilizada en: a) Ciencia bsica b) Biomedicina (modelos animales de enfermedades humanas, donacin de rganos para xenotrasplantes) c) Industria farmacutica (animales transgnicos como biorreactores para la sntesis de protenas de alto valor y como biosensores)

d) Zootecnia (mejora de los caracteres productivos; resistencia a enfermedades, etc.) Desde que aparecieron publicados los primeros trabajos sobre animales transgnicos, hace casi cuarenta aos, se han sugerido una gran variedad de aplicaciones. Muchas de estas posibles aplicaciones estn todava pendientes de que los cientficos y los empresarios resuelvan los desafos tcnicos y quiz algunas de ellas nunca se llegarn a materializar. Sin embargo, varias lnea de investigacin si han tenido xito y, de hecho, ya se comercializan animales que son producto de la utilizacin de tecnologas transgnicas.

1. ESTRATEGIAS DE PRODUCCIN DE ANIMALES TRANSGNICOS

Antes de describir las principales aplicaciones de los organismos modificados genticamente debemos recordar que hay dos estrategias bsicas en la produccin de animales transgnicos: las estrategias que persiguen conseguir un animal que tendr una funcin que no tena su predecesor y las que producen animales que han perdido alguna de las funciones propias de los wild type. La primera se basa en que el cambio de funcin se consigue aadiendo un fragmento clonado de ADN al genoma de un animal. La segunda estrategia, consiste en disear animales transgnicos a los que se les inducen prdidas de funcin, eliminando algn gen en concreto.

Conejo albino transgnico, con un gen de medusa que sintetiza protena verde fluorescente GFP).

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Ambas tienen objetivos similares: 1. La expresin de productos genticos que anteriormente no existan 2. La sobre-expresin de genes que si que se encontraban previamente en el genoma 3. La sntesis de protenas en clulas, tejidos u rganos diferentes a los habituales 4. La alteracin de la regulacin de sistemas enzimticos o rutas metablicas determinadas. Tanto en una estrategia como en la otra, es fundamental asegurar la habilidad para romper las cadenas e introducir, o extraer, los genes en lugares diana especficos ya que la eficacia del procedimiento depende de la posibilidad de reproducir las modificaciones que se persiguen y esto no se podr conseguir si no somos capaces de garantizar la fiabilidad de la transferencia.

Terneras clnicas que producen inmunoglobulinas humanas

2. APLICACIONES DE LOS ANIMALES MODIFICADOS GENTICAMENTE

Con la pretensin de estructurar este artculo de manera didctica y anticipando que la clasificacin que proponemos puede resultar artificiosa, vamos a distribuir las aplicaciones de los OMGs en cuatro grupos: Aplicaciones orientadas a la investigacin en ciencia bsica Aplicaciones con inters en salud humana y biomedicina Aplicaciones que est desarrollando la industria farmacutica Aplicaciones en produccin ganadera

"Las tecnologas transgnicas han evolucionado desde sus inicios para aumentar en eficacia y eficiencia, mejorando la precisin de sus intervenciones"

2.1. APLICACIONES EN CIENCIA BSICA

La produccin de organismos transgnicos ha supuesto un gran avance tcnico en el estudio de la Biologa ya que permite cambiar la composicin gentica de un animal proporcionando una mutacin inmediata, inducida y dirigida, y de esta manera el investigador puede interpretar las funciones especficas de cada gen y conocer la maquinaria celular que interviene en su expresin. La participacin de los animales transgnicos en la investigacin en biotecnologa, est siendo fundamental para entender los mecanismos de regulacin gentica y la biologa del desarrollo. La tecnologa transgnica ha proporcionado avances significativos y ofrece enormes posibilidades de futuro en otras reas: estudio de la funcin de los genes involucrados en el desarrollo del cncer (oncogenes) y de los virus oncognicos, investigacin

de los mecanismos de regulacin y de la interaccin de las clulas en el sistema inmunitario y estudio de los mecanismos de control del crecimiento. Tambin son de gran utilidad los animales transgnicos para el avance de la biologa del desarrollo, porque permiten conocer las interacciones ncleo-citoplasma y que efecto tiene la ubicacin de los genes, dentro del cromosoma, en su expresin. Se pueden disear animales modificados genticamente para estudiar genes concretos. Esto lo podemos conseguir observando en el animal transgnico las consecuencias in vivo de la modificacin de su genoma: Con la introduccin de un nuevo gen, creando un transgnico. Con la eliminacin de un gen, creando un Knockout. Con la regulacin de ese gen, ya sea aumentando su expresin, disminuyndola o, incluso, suprimindola, mediante transgnicos, Knockouts y Knockins inducibles. El estudio de los efectos biolgicos derivados de estas manipulaciones genticas, permite obtener informacin sobre el papel biolgico del gen en el organismo. En conclusin, la creacin de animales modificados genticamente en ciencia bsica permite: La identificacin de genes, el conocimiento de su estructura, funcin y regulacin. La manipulacin de la expresin de gnica in vivo. El estudio de los procesos involucrados en la sntesis proteica. El estudio de procesos fisiolgicos especficos. El estudio, a nivel molecular, del desarrollo embrionario y su regulacin.

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2.2. APLICACIONES EN BIOMEDICINA

CARACTERSTICAS DE UN MODELO ANIMAL IDEAL PARA BIOMEDICINA El Diccionario de la Real Academia Espaola de la Lengua defi FACILIDAD DE CRA EN CAUTIVIDAD ne la biomedicina como la medi TIEMPOS DE REPRODUCCIN CORTOS cina clnica basada en los principios de las ciencias natura DESCENDENCIA NUMEROSA les, como la biologa, la biofsica, DISPONIBILIDAD DE MTODOS DE MANIPULACIN GENTICA Y EXPERIMENTAL la bioqumica, etc. ELEVADO NMERO DE GENES CONSERVADOS RESPECTO AL SER HUMANO Podramos definir el concepto de biomedicina de una manera menos formal diciendo que es una parte de la medicina que integra, gar nuevos tratamientos. Existen modelos transgnicos de manera interdisciplinar, los conocimientos de las animales para el estudio de una amplia variedad de ciencias bsicas para aplicarlos en el desarrollo de la enfermedades humanas. investigacin en todos los campos de la medicina. Las caractersticas de un modelo animal ideal En este contexto, la creacin de animales modifison: cados genticamente en biomedicina permite: Facilidad de cra en cautividad. El desarrollo de modelos animales para el estu Tiempos de reproduccin cortos. dio de enfermedades humanas. Descendencia numerosa. La utilizacin de animales modificados genti Disponibilidad de mtodos de manipulacin camente como donantes de rganos para humanos: gentica y experimental. xenotrasplantes. Elevado nmero de genes conservados respecto La utilizacin de animales transgnicos en teraal ser humano. pia gnica. La aplicacin de la tecnologa transgnica ha sido 2.2.1. Desarrollo de modelos animales para el particularmente til para el examen de la importanestudio de enfermedades humanas. cia de la expresin de determinados genes en la etiopatogenia de gran nmero de enfermedades. Con freEl genoma humano, secuenciado en 2004, tiene cuencia aparecen en los medios de comunicacin entre 20.000 y 25.000 genes responsables de la fornoticias que recogen nuevos descubrimientos en los macin y del mantenimiento del cuerpo humano. Gran que estn implicados animales transgnicos, es bien parte de las enfermedades humanas tienen una base conocido que el desarrollo de modelos animales ha hereditaria y estn causadas por mutaciones de genes. sido bsico para el avance en el conocimiento de los Por otra parte, existe una gran concordancia entre el oncogenes y los virus oncognicos, pero hay otros genoma de las diferentes especies de mamferos por muchos ejemplos de avances cientficos en los que lo que, los modelos animales transgnicos, son de gran los ratones transgnicos son tambin herramientas ayuda para comprender el papel de los genes en el importantes. desarrollo de una enfermedad o para reproducir enferPara algunas enfermedades, los ratones Knockout medades humanas en animales, con el fin de investison modelos adecuados, pero los ratones y los huma-

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AO 1985 1986 1991 1991 1992 1994 1997 1997 1998 2000 2001 2002 2003 2004 2005

HITOS EN LA TRANSGNESIS DE GANADO Cerdo y oveja transgnicos Embriones clnicos por transferencia nuclear en ganado ovino Transgnesis en ganado lechero Ovejas transgnicas que producen leche modificada Cerdos transgnicos resistentes a infecciones virales Cerdos que expresan un inhibidor del sistema de complemento humano Clonacin por transferencia nuclear en ovino (Dolly) Produccin de ganado transgnico, modelo de enfermedades humanas Ganado bovino transgnico conseguido por transferencia nuclear Ganado ovino transgnico conseguido por gene targeting Cerdos transgnicos ecolgicos Ternera con cromosoma artificial humano Vacas transgnicas que producen leche con protenas alteradas Inactivacin secuencial de 2 genes en ganado bovino Vacas transgnicas resistentes a infecciones bacterianas

REFERENCIA Hammer et alt. Willadsen Krimpenfort et alt. Wright et alt. Muller et alt. Fodor et alt. Wilmut et alt. Petters et alt. Cibelli et alt. McCreath et alt. Golovan et alt. Kuroiwa et alt. Brophy et alt. Kuroiwa et alt. Wall et alt.

nos difieren significativamente en su anatoma, fisiologa y modo de vida por lo que el uso del ratn como modelo gentico ha demostrado algunas limitaciones con respecto al estudio de numerosos caracteres humanos. Los animales de granja, tales como cerdos, ovejas y ganado vacuno, podran ser modelos ms apropiados para evitar algunos problemas, como por ejemplo el requerimiento de periodos de observacin ms largos en el estudio de muchas enfermedades humanas. Se han usado cerdos transgnicos como modelo experimental en estudio de la retinitis pigmentosa. Tambin se ha estudiado en modelos porcinos la alteracin del factor de liberacin de la hormona del crecimiento, que se observa en pacientes con sndrome de Turner, enfermedad de Crohn, insuficiencia renal y retraso de crecimiento intrauterino. Una diversidad de enfermedades neurodegenerativas, como el sndrome de Gerstmann-Straussler-Scheinker, la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob o el insomnio familiar fatal, debidas a una alteracin en la protena prin celular (PrPc), han sido estudiadas en modelos transgnicos de ratn y ganado vacuno, creando incluso animales resistentes a estas patologas. Tambin se han utilizado ratones transgnicos, conejos, ovejas y cerdos como modelos para examinar el crecimiento postnatal de los mamferos. Se han incorporado en los animales los genes que expresan la Hormona del Crecimiento (GH) y los factores de crecimiento anlogos a la insulina. Esto ha permitido el estudio de la expresin crnica de estas hormonas, independientemente de la regulacin normal. Los resultados han demostrado que el aumento de GH conlleva la mejora de las tasas de crecimiento y la eficiencia alimentaria en ganadera, si bien, todava se acompaa de efectos secundarios indeseables como el aumento de la incidencia de artritis y el engrosamiento de los huesos.

Son innumerables las lneas de investigacin que utilizan animales transgnicos como modelos con resultados iniciales prometedores. El estudio del envejecimiento, la ateroesclerosis, la diabetes, el Sndrome de Parkinson o las enfermedades cardiovasculares, son algunos ejemplos de campos en los que la investigacin con estos reactivos biolgicos puede dar rditos en los prximos aos. 2.2.2. Utilizacin de animales modificados genticamente como donantes de rganos para humanos: xenotrasplantes. Desde que el Doctor Barnard hiciera su primer trasplante de corazn, la tcnica del trasplante de rganos se ha generalizado en la prctica mdica, habiendo alcanzado altsimos niveles de perfeccin. Sin embargo, uno de los retos pendientes es el de la desproporcin entre la oferta y la demanda: Desgraciadamente, muchos pacientes mueren antes de tener acceso al trasplante deseado y an cuando nuestro pas sigue a la cabeza del ranquin mundial en donacin de rganos, la creciente tendencia en la disminucin de los fallecimientos por accidente de circulacin y el aumento de la esperanza de vida, hacen prever que este desequilibrio va a ser insalvable a medio plazo si no aplicamos tcnicas innovadoras para aumentar el nmero de rganos trasplantables. Por ello, la posibilidad de recurrir a especies animales como donantes de rganos se plante hace ya muchos aos. De hecho, entre los aos 1964 y 1995, se realizaron 32 xenotrasplantes de rin, corazn, hgado y mdula sea procedentes mayoritariamente de chimpanc y mandril, con un resultado negativo en todos los casos. La utilizacin de rganos procedentes de mono tena la lgica de su proximidad evoluti-

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"Aunque cada descubrimiento abre las puertas a nuevos hallazgos, todava son muchos los problemas que hay que resolver"

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va con la especie humana, pero insulina; clulas dopaminrgila diferencia de tamaos de los cas para el tratamiento de Parrganos entre las especies supokinson; hemoglobina humana na un serio inconveniente. para sangre artificial; hepatociActualmente, diversos estudios tos para hgados artificiales; han demostrado que el cerdo es clulas madre hematopoyticas el animal considerado la mejor para el tratamiento de la leuceeleccin como donante de mia o algunas formas de anemia, rganos para los humanos. Esta y corazones, pulmones, riones, afirmacin se basa en que: a) hgados y crneas para trasplansus rganos son similares en tes de rganos. Adems, existen tamao, anatoma y fisiologa a Lechonas knockout clonadas que carecen del lneas celulares especficas derigen que provoca el rechazo del sistema los rganos humanos; b) los cervadas de animales transgnicos inmunitario humano. dos crecen rpidamente y son de utilidad para otros usos en una especie prolfica; c) el manbiomedicina o para la fabricatenimiento de altos estndares higinicos es posible a cin de productos con aplicaciones en biotecnologa. un coste relativamente bajo; d) se han establecido tc2.2.3. Utilizacin de animales transgnicos en nicas de transgnesis para modificar la inmunogeniterapia gnica. cidad de las clulas y los rganos porcinos y evitar as el rechazo de su trasplante a humanos. Las causas Por terapia gnica se entiende el proceso por el principales que origina la existencia de obstculos cual se transfiere material gentico nuevo en el inteinmunolgicos en los xenotrasplantes incluyen: 1) la rior de las clulas de un individuo dando lugar a un respuesta de rechazo hiperagudo, que ocurre en efecto teraputico, que se puede conseguir por la segundos o en minutos tras el trasplante; 2) el rechaactivacin o la supresin de alguna funcin fisiolzo vascular agudo, que ocurre en das; 3) y el rechagica que est relacionada con la patogenia de la zo celular, potencialmente crnico, que ocurre semaenfermedad. nas tras el trasplante . En la actualidad, el trmino terapia gnica engloSe han desarrollado numerosas aproximaciones ba procesos de naturaleza preventiva y otros relaciotransgnicas para superar la respuesta inmunolgica nados con el avance de la investigacin en biomedique activa la cascada del complemento, que se desencina de tal manera que en algunos mbitos se ha cadena por la accin del complejo antgeno-anticuerpuesto en cuestin la idoneidad del trmino de terapo y es la responsable de la induccin de las respuespia gnica y se propone el concepto de transferencia tas de rechazo hiperagudo y de rechazo vascular gnica, que incluira tanto los procedimientos de agudo. Entre ellas estn la produccin de cerdos transingeniera gentica relacionados con la prevencin, gnicos que expresan protenas humanas que inhiben el diagnstico y la terapia de patologas humanas, la cascada del complemento y la creacin de cerdos como aquellos orientados a la investigacin bsica o Knockout para las estructuras antignicas de superfitranslacional. cie celular de los rganos porcinos que desencadeLos experimentos de terapia gnica que utilizan nan el rechazo. animales tienen tres objetivos generales: conocer la Sin embargo, el punto crtico para la aplicacin fiabilidad y seguridad de los vectores, estudiar la efide los xenotrasplantes es el peligro de transmisin de cacia de la transferencia de los genes problema y ensazoonosis a travs de los rganos trasplantados. Adeyar nuevas terapias para curar la enfermedad. ms, en los ltimos aos, el progreso acelerado que Hay que tener en cuenta que, antes de la aprobase ha producido en la investigacin con clulas madre cin de cualquier frmaco o procedimiento terapuhumanas, como medio de producir tejidos y rganos tico para su comercializacin, se humanos para trasplantes, ha redurequiere su validacin en animales cido de una manera significativa el en la fase preclnica de los ensayos. esfuerzo destinado a la investigaEntre las lneas celulares derivacin en xenotrasplantes. das de animales transgnicos de uso Una aplicacin excepcional de en biomedicina, podemos citar la la ingeniera gentica en ganadera, utilizacin de cultivos celulares de y en particular de la tecnologa transdermis de animales transgnicos que gnica, es la produccin de clulas, se utilizan como vehculos en teratejidos u rganos que contienen antpia gnica. Tambin se estn desagenos o protenas humanas que les rrollando ratones transgnicos para confieren biocompatibilidad y, por abordar estrategias teraputicas tanto, les hacen aptos para utilizarbasadas en terapia gnica en las que los en xenotrasplantes y en otros se manipula in-vivo la carga genusos biomdicos. Los ejemplos en tica del pncreas de ratones y perros los que ha participado la especie diabticos. La transferencia directa porcina incluyen la produccin de de los genes a las clulas del pnclulas pancreticas para segregar

"Hay factores externos a la secuencia del genoma que tienen una influencia trascendente en aspectos claves de la vida y que hoy desconocemos"

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nismos, como bacterias y levaduras, estos organismos no ejecutan de forma correcta muchas de las modificaciones post-traduccionales que requieren las protenas, o no permiten el adecuado plegamiento de las 2.3. APLICACIONES EN INDUSTRIA FARMACUTICA mismas, por lo que no se obtienen protenas humanas completamente funcionales. Muchos polipptidos 2.3.1. Uso de animales modificados genticamenhumanos pueden producirse en cultivos de clulas de te como biorreactores para la sntesis de protenas mamferos que s permiten recuperarlos con su funrecombinantes de alto valor con aplicaciones teracionalidad completa; pero, estos sistemas de cultivos puticas (granjas farmacuticas o granjas molecucelulares in vitro, debido a su baja capacidad produclares). tiva, generan biomolculas extremadamente caras. Por Una importante aplicacin de los transgnicos es todo esto, muchas compaas biotecnolgicas se han la produccin de protenas teraputicas para uso clorientado a la produccin de altas concentraciones nico en humanos. A travs de la ingeniera gentica de biomolculas de inters farmacutico utilizando se pueden producir protenas de animales, plantas o los animales transgnicos como biorreactores. microorganismos en la leche de los mamferos. Por La biotecnologa ha aplicado estas tcnicas expeejemplo, es posible expresar protenas de alto valor rimentales de modificacin gentica y se han creado farmacutico en la leche de ratones, conejos, cerdos, granjas farmacuticas o granjas moleculares en cabras y ovejas. Una de las ventajas de la sntesis de las que se cran ovejas, cabras, vacas, y cerdos que protenas en la glndula mamaria es la capacidad que producen protenas de uso farmacutico en una varietienen sus clulas secretoras de modificar correctadad de fluidos biolgicos tales como leche, orina, salimente las protenas para que sean biolgicamente activa, sangre y fluido seminal, dirigiendo su expresin vas y, a continuacin, secretarlas en grandes cantidamediante promotores especficos de tejido. De esta des a travs de la leche. Tambin se pueden producir manera se podran llegar a producir grandes cantidaprotenas teraputicas en los huevos de las gallinas, des de protenas utilizando como vehculos los fluisi bien en cantidades ms pequeas. Se puede oriendos corporales de las especies domsticas de ganado, tar la fraccin de albmina mediante construcciones incluidos los caballos y las aves de corral. transgnicas y obtener la consiguiente cosecha de proPor ejemplo, para la produccin de una protena tenas que estarn presentes en la clara del huevo. El humana en leche, se introduce en el genoma del anihuevo tiene la ventaja sobre la leche de que los gasmal la porcin de DNA humano que codifica ese protos de alojamiento y mantenimiento de los animales ducto en particular, unido a un elemento regulador son menores, si bien la produccin de protenas es (promotor) procedente de un gen que promueve la mucho menor. sntesis de protenas de la leche (lactoglobulina, caseLos genes que codifican determinadas protenas na, etc.). Con este regulador especfico de tejido con valor farmacutico, como el Factor de Coagulamamario, que se ha asociado al gen humano, el anicin IX, para el que los hemoflicos son genticamal transgnico no se ve perjudicado en su desarromente deficientes, pueden ser incorporados en la llo, porque el gen humano slo se expresar en las carga gentica de ovejas, cabras o vacas transgniclulas de las glndulas mamarias del animal transcas para que lo segreguen en su leche pudiendo posgnico (no sintetizndose, por tanto, la protena humateriormente recuperarlo, purificarlo y administrarlo na en el resto de tejidos del animal, ya que en stos a los hemoflicos como terapia. Algunos otros ejemel gen humano queda silenciado) . plos importantes son la 1 antitripsina para el trataLa glndula mamaria del ganado vacuno lechero miento del enfisema; la protena C para limitar la fores una excelente fbrica de produccin de protenas. macin del cogulo; la albmina srica humana para A travs de ella, se pueden generar grandes cantidalos productos sustitutivos artificiales de sangre, y los des de polipptidos de alta complejidad (llegan a expreantgenos de hepatitis para la sar ms de 2 g de protenas produccin de vacunas. recombinantes heterlogas por Debido a su alto coste, la prolitro) que es posible recuperar de duccin de animales transgnila leche a muy bajo coste. Algucos, tales como cerdos, cabras, nas protenas humanas que se ovejas y ganado vacuno, debe han expresado en la leche de proporcionar un elevado beneganado transgnico, son: lactoficio para que la inversin sea ferrina como bactericida (vacueconmicamente rentable. Por no); -antitripsina para enfisema esta razn, la produccin de susy cirrosis (ovejas); factor VIII de tancias de alto valor para la coagulacin para la hemofilia-a industria farmacutica es, en la y factor IX para la hemofilia-b actualidad, la principal y la ms (ovejas); antitrombina III para Cerdos clonados que producen el cido prometedora aplicacin para la trombosis y embolismos pulmograso Omega-3 transgnesis animal. A pesar de nares (cabras); calcitonina, para Picture courtesy of University of los bajos costes de produccin osteoporosis e hipercalcemia Missouri-Columbia. de biomolculas en microorga(conejos). http://www.jyi.org/news/nb.php?id=709 creas de los animales se realiza mediante vectores virales que infectan los islotes pancreticos.

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Tambin se producen anticuerpos humanos generando vacas transgnicas con genes de anticuerpos humanos, a las que se les ha bloqueado, a su vez, sus propios genes productores de anticuerpos. Estas vacas, una vez inmunizadas con una vacuna que contiene el agente infeccioso de inters, generan anticuerpos humanos frente a dicho agente, que son recolectados mediante la recuperacin del plasma de la vaca y su tratamiento posterior para eliminar los componentes contaminantes de origen bovino. El producto resultante, se inyecta a pacientes para combatir la infeccin frente a ese agente infeccioso.

"Se criarn animales con caractersticas revolucionarias que aportarn funcionalidades innovadoras en zootecnia con aplicaciones en mltiples sectores industriales"

2.3.2. Realizacin de ensayos farmacolgicos y toxicolgicos utilizando animales modificados genticamente. Ensayo de seguridad de vacunas y productos qumicos.

camente cuando se encuentran en un medio con altos ndices de contaminacin, por metales pesados o por otros residuos de origen industrial. Existen un buen nmero de enfermedades humanas que estn relacionadas con la exposicin a contaminantes y la sociedad est cada da ms sensibilizada ante los efectos nocivos e indeseables de la contaminacin medioambiental y sus consecuencias, por lo que cabe pensar que en un futuro inmediato se van a destinar ms recursos econmicos y humanos en este campo. Por otra parte, estos peces se pueden utilizar no solo como biosensores si no tambin como biorreactores. Peces cebra transgnicos, en estado adulto o en sus formas embrionarias, son tiles para producir protenas que requieran procesos de sntesis de gran complejidad en grandes cantidades.

2.4. APLICACIONES EN ZOOTECNIA

Los animales transgnicos son tambin muy tiles para el ensayo de nuevos frmacos o productos. Se han diseado roedores transgnicos sensibles a toxinas medioambientales que son capaces de evaluar la seguridad de medicamentos, productos o materiales mucho ms rpidamente que los ancestros de los que provienen. Este tipo de pruebas pueden realizarse con un nmero mucho menor de animales porque la presencia del transgn mejora la eficacia. La introduccin de secuencias de ADN sensibles a los cambios estructurales, mejoran la evaluacin sobre el carcter mutagnico de medicamentos, productos y condiciones ambientales. La capacidad de probar las drogas en condiciones de seguridad y, al mismo tiempo, evaluar los posibles efectos secundarios de los medicamentos, nos permitirn acelerar los procesos de validacin de los productos farmacuticos y, consecuentemente, su comercializacin a la vez que nos aseguramos de que los productos inseguros o ineficaces no llegarn a los ciudadanos. Se han desarrollado ratones transgnicos para ensayar la seguridad de las vacunas antes de suministrarlas a humanos. Tambin se han diseado animales transgnicos con genes que les hacen ms sensibles a la toxicidad de los frmacos o de los productos qumicos presentes en el ambiente, de forma que los ensayos de toxicidad se realizan utilizando menos animales y se obtienen resultados con mayor rapidez. Animales modificados genticamente para funcionar como biosensores de la contaminacin ambiental: Se han diseado variantes transgnicas del pez cebra (Zebrafish) con elementos de respuesta (RE) a contaminantes del agua que inducen la expresin de luciferasa y generan luz. Estos peces, emiten luz niLa aplicacin de metodologas transgnicas en el mbito de la medicina veterinaria puede producir una drstica renovacin de la profesin, en particular en lo referente a la produccin en ganadera. Los caracteres de produccin y reproduccin han mejorado con la introduccin de nuevos genes en los animales de abasto. Hay muchas aplicaciones potenciales de la ingeniera gentica en el desarrollo de nuevas y mejores estirpes de animales de granja que tendran utilidades prcticas en la produccin: incremento de la prolificidad y mejora de las caractersticas reproductivas, aumento de los ndices de conversin y de las tasas de crecimiento, mejora en la composicin de las canales, mayor y mejor produccin lctea y mayor resistencia a las enfermedades. La ingeniera gentica en animales de granja se ha dirigido a mejorar la productividad animal: mejorando en el ganado transgnico la composicin corporal, la calidad de la carne, la produccin de leche, la calidad de la lana, e incrementando la prolificidad y la resistencia a enfermedades. As, se han desarrollado vacas que producen ms leche, ovejas que producen ms lana y peces con mayor tasa de crecimiento. La mejora de los nutrientes de la leche o el conseguir la produccin comercial de leche con valor teraputico puede tener un profundo impacto en la supervivencia y el crecimiento de los lactantes, tanto humanos como animales. Pero, adems, otros productos de origen animal, tales como huevos y carne podran beneficiarse de la utilizacin de la transgnesis. La transgnesis ha llegado tambin a la acuicultura comercial para mejorar el crecimiento y el valor nutri-

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cional de los peces. La produccin de peces genticamente modificados es objeto de mucho inters desde el punto de vista comercial, siendo los rasgos de mayor inters: el crecimiento, la resistencia a las enfermedades y la mejor tolerancia ambiental. La modificacin gentica se ha extendido a gran nmero de especies como por ejemplo al gusano de seda, para segregar colgeno; o a orugas, portadoras de espidrona, la protena responsable del ultrarresistente hilo de las araas (utilizado para tejer paracadas y chalecos antibalas). 2.4.1 Cambios en la composicin de la leche

significativa como fuente de alimento en muchas sociedades. Aproximadamente, el 80% de las protenas de la leche son casenas (alfa, beta y kappa) que forman grandes micelas en estado coloidal. La modificacin gentica del ganado vacuno lechero, con la introduccin de copias adicionales del gen de la casena bovina, beta o kappa, ha permitido incrementar de un 8 a un 20% el contenido en -casena y duplicar el contenido en -casena. El incremento de las casenas se ha relacionado con una reduccin del tamao de las micelas de casenas y con una mayor estabilidad de stas a la accin del calor, cuestin de gran importancia para la industria quesera.

Los avances en la tecnologa del DNA recombi2.4.2 Modificacin de los ndices de crecimiento nante han permitido cambiar la composicin de la y de la composicin de la canal leche introduciendo protenas totalmente nuevas. La produccin de ganado transgnico ha sido funEstos cambios pueden aumentar las posibilidades de damental en la consecucin de nuevos conocimienutilizacin de la leche e incrementar su valor. tos sobre los mecanismos de accin de los genes impliLa mejora en los ndices de crecimiento del ganacados en el control del crecimiento. Con el uso de la do o sus tasas de supervivencia a travs de la modifitecnologa transgnica es posible manipular los faccacin de la composicin de la leche requiere la utitores de crecimiento, as como sus receptores y las lizacin de animales transgnicos con los que molculas que intervienen en su modulacin. consigamos aumentar la produccin, aumentar el conEn cerdos se han realizado esfuerzos para mejorar tenido de nutrientes o modificar su composicin para su crecimiento y variar la composicin de su carne conseguir protenas exgenas. mediante la adicin de transgenes: un estudio de Un segundo mecanismo, por el que la alteracin expresin en msculo de un gen factor de crecimiende la composicin de la leche puede afectar el crecito insulina-like exgeno demostr una significativa miento de los animales, es la adicin de hormonas, reduccin de la grasa y un incremento del msculo factores de crecimiento o factores con actividad biomagro; en otro estudio, un gen exgeno de la hormolgica beneficiosa. Se ha postulado que la presencia na del crecimiento produjo un incremento de la de determinadas sustancias bioactivas, como IGF-I, ganancia de peso, mejor la eficiencia en la alimenEGF, TGF-I o lactoferrina, produce importantes beneficios en el neonato con respecto a la regulacin del tacin y redujo el grosor de la grasa dorsal. Tambin crecimiento, el desarrollo y la maduracin del intesse han llegado a introducir genes de plantas en certino y los sistemas inmunolgico y endocrino. dos, que han podido modificar la composicin corOtras propiedades de la leche cuya modificacin poral de la grasa de estos animales (los adipocitos de debe tenerse en cuenta son las que pueden afectar a los cerdos transgnicos tenan un 20% ms de cido la salud humana y animal. Se ha demostrado que se linolnico que los de los cerdos control). pueden conseguir animales En el futuro, con la aplicacin transgnicos que secreten en la de tecnologas transgnicas se leche anticuerpos especficos, lo podr modificar la composicin que sugiere que la glndula cualitativa y cuantitativa de las mamaria podra producir anticanales actuando sobre la calicuerpos que sean capaces de dad de la carne, mejorando sus prevenir las mastitis en el ganacaractersticas organolpticas y do. las condiciones fisicoqumicas Por ltimo, debemos tambin que influyen en los procesos de considerar la aplicacin de las conservacin y degradacin. tecnologas transgnicas en zooAs, actuando sobre los genes tecnia para aumentar los comque regulan el pH de la carne se ponentes especficos de la leche han conseguido cerdos con con inters para la industria alicanales con mayor capacidad de mentaria. Un ejemplo podra ser retencin de agua, mayor firmeel incremento en los diversos za o menor resistencia al corte. componentes de la casena de la Otros locus con inters leche. Esto podra aumentar el potencial en los ritmos de crecivalor de la leche en la industria miento son el receptor de la rialctea para la produccin de nodina, el factor liberador de quesos o yogures. GH, el IGF-1 y la miostatina. Ponedoras que producen huevos La leche es un fluido biolParticularmente interesante con protenas de uso teraputico (Roslin gico complejo con importancia puede resultar la produccin de Institute)

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knockouts para el locus de la miostatina en las razas de carne, ya que la perdida de funcin del gen que expresa esta protena produce, en ratones, incremento de la masa muscular magra lo que podra traducirse en canales con menor contenido graso. Tambin se est estudiando la posibilidad de modificar la composicin de las canales alterando el metabolismo o la absorcin del colesterol y/o los cidos grasos y as reducir el contenido de stos en la carne, los huevos o los derivados lcteos, o introducir cidos grasos beneficiosos como el omega-3. Otro uso potencial de la tecnologa transgnica, es la modificacin de la eficiencia alimentaria o el apetito de los animales de produccin. El aumento de la absorcin de nutrientes en el aparato digestivo, por la alteracin de los perfiles enzimticos en el intestino, podra aumentar la eficiencia alimentaria. La posibilidad de introducir enzimas como la fitasa o la xilanasa en el intestino de especies en las que normalmente no estn presentes, como el cerdo o las aves de corral, puede ser particularmente interesante. Adems, los cerdos transgnicos casi no requieren la administracin de suplementos de fsforo inorgnico en la dieta para lograr un desarrollo normal y la produccin comercial de cerdos transgnicos que segreguen fitasa podra derivar en explotaciones ganaderas menos contaminantes por una reduccin en la proporcin de fsforo de los purines. Por ltimo, la introduccin de enzimas celulolticas en los tractos digestivos de los animales no rumiantes podra permitir el aumento de la digestin de plantas herbceas. Esto permitira el aumento de la utilizacin de piensos fibrosos en las dietas de aves de corral y cerdos. El resultado final sera una menor necesidad de grano de cereal en los piensos y un aumento de la disponibilidad de stos para el consumo humano. 2.4.3 Animales resistentes a enfermedades Un aspecto muy interesante de la transgnesis en el ganado es conseguir animales con una mayor resistencia a las enfermedades mediante la introduccin de genes especficos. La identificacin de los genes especficos del complejo mayor de histocompatibilidad que influyen en la respuesta inmune fue esencial en el reconocimiento de la base gentica de la resistencia y la susceptibilidad a las enfermedades. La aplicacin de la transgnesis para regular aspectos definidos del sistema inmunolgico puede proporcionar oportunidades para disear, por ingeniera

gentica, ganado con mayor resistencia a las enfermedades. Es conocido, desde hace tiempo, que hay muchos aspectos de la resistencia, o susceptibilidad, a las enfermedades que est determinado genticamente. Sin embargo, existe poca informacin sobre los genes especficos que actan en el sistema inmunolgico o en otros sistemas que intervienen en la etiopatogenia de las enfermedades del ganado con importancia econmica. La perspectiva de ser capaces de producir animales inmunes contra patgenos especficos abre la puerta a aplicaciones muy interesantes de la tecnologa transgnica. En concreto, se plantea el diseo de transgenes que se expresen como respuesta a determinados estmulos o estados fisiolgicos en los que se produzcan antgenos sealizados para poner en marcha la maquinaria inmunolgica y cuyo resultado sea la inmunizacin de los transgnicos ante esa enfermedad mediante la produccin de anticuerpos protectores. 2.4.4 Mejora de los rendimientos reproductivos y de la prolificidad

Recientemente, han sido identificados varios genes que pueden afectar poderosamente a los rendimientos reproductivos y a la prolificidad. stos incluyen el gen del receptor de estrgeno (ESR) y el gen Boroola. Se han publicado varios trabajos en los que se describe la relacin del ESR con el tamao de la camada en cerdos. Se encontr una diferencia de ms de 1,4 cerdos nacidos por camada entre los dos genotipos homocigotos. La introduccin de un polimorfismo en el ESR podra aumentar el tamao de la camada en varias razas de cerdos. En ovejas Merinas se ha identificado un nico gen autosmico que regula la fecundidad, el FECB, que permite una mayor tasa de ovulacin. Cada copia del gen ha demostrado que aumenta la tasa de ovulacin en aproximadamente 1,5 vulos, aunque el aumento de tamao de la camada no es exactamente proporcional. La produccin de ovejas transgnicas con el alelo adecuado de FECB podra aumentar la fecundidad en diferentes razas de ovino. El uso de los llamados genes suicidas, que controlan la muerte celular programada (apoptosis), podra ser de mucho inters en la produccin ganadera. Estos genes, una vez incorporados en la clula, se pueden estiPeces Cebra con elementos de respuesta a contaminantes del agua que inducen la expresin mular para que se inicie la de luciferasa y generan luz. apoptosis. La incorporacin

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de estas estrategias en la produccin de animales transgnicos podra permitir un control preciso de la reproduccin de ciertas cepas, e incluso el sexo distribuciones especficas de la ganadera. Un ejemplo: se podra utilizar un promotor especfico en las gnadas para que, cuando se expresase, se indujera la muerte de los espermatozoides con el cromosoma Y, consiguiendo en este caso la seleccin del sexo; o, si lo que se persigue es el control de la reproduccin, se indujera la muerte de todos los espermatozoides. Este tipo de manipulacin permitira la produccin de individuos estriles, que slo se podran utilizar para la alimentacin, sin temor a que se produjera una liberacin accidental en el medio ambiente de animales transgnicos reproductivamente competentes.

"Son enormes las posibles aplicaciones de los animales transgnicos, si bien su utilidad est limitada por nuestra capacidad para identificar las funciones especficas de los genes"

2.4.5 Modificacin de las caractersticas de los integumentos: piel, pelo y lana El control de la calidad, el color y el rendimiento del pelo y la lana tambin puede mejorarse con la manipulacin gentica del ganado. Se busca aumentar la elasticidad y la fortaleza de la fibra actuando sobre su superficie. La disminucin de la superficie de interaccin podra disminuir la tendencia a encoger de las prendas de vestir fabricadas con fibras de origen animal. Otro enfoque interesante se ha realizado utilizando cabras transgnicas. Se ha conseguido producir la fibra con las que las araas tejen sus telas en la leche de cabras transgnicas. Son innumerables las aplicaciones potenciales de estas fibras: dispositivos mdicos, suturas quirrgicas, chalecos antibalas, industria aeronutica y automovilstica, industria textil, etc. Para finalizar y como conclusin, podemos decir que las tecnologas transgnicas han evolucionado desde sus inicios para aumentar en eficacia y eficiencia, mejorando la precisin de sus intervenciones y evitando la aleatorizacin en la modificacin de la carga gentica de los animales transgnicos, pero que, aunque la innovacin en las metodologas es incesante y aunque cada descubrimiento abre las puertas a nuevos hallazgos, son muchos todava los problemas tcnicos que quedan por resolver. En ocasiones, las manipulaciones realizadas no consiguen los efectos deseados o provocan trastornos inesperados: No siempre los OMGs son viables; a veces son viables pero no son frtiles; la alteracin del genotipo provoca cambios en el fenotipo, en ocasiones silenciosas, que pueden pasar desapercibidas pese a intervenir drsticamente sobre los resultados esperados; an hoy no se conocen las funciones de un gran nmero de genes y parece claro que hay factores externos a la secuencia del genoma que tienen una influencia trascendente en

aspectos clave de la vida de los seres vivos y que hoy desconocemos. Queda mucho camino por recorrer y probablemente algunos de los trayectos iniciados llevan a callejones sin salida, por lo que no debemos ni mantener expectativas exageradas, en particular respecto a la velocidad en la aparicin de resultados espectaculares, ni desconfiar de la certeza de que la ingeniera gentica va a contribuir, en un futuro prximo, a resolver muchos problemas cientficos con aplicacin prctica en nuestra vida cotidiana: se harn progresos decisivos en el conocimiento de los mecanismos intrnsecos de un gran nmero de enfermedades, se encontrarn nuevas formas teraputicas y nuevos mtodos de tratamiento; se mejorarn los estndares de produccin en ganadera; y se criarn animales con caractersticas revolucionarias que aportarn funcionalidades innovadoras en zootecnia con aplicaciones en mltiples sectores industriales. En resumen, son enormes las posibles aplicaciones de los animales transgnicos, si bien su utilidad est limitada, de momento, por nuestra capacidad para identificar las funciones especficas de los genes y los genes que estn implicados en los factores que interfieren en la produccin de nuestras especies de ganado.

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Bibliografa
Melo EO, Canavessi AM, Franco MM, Rumpf R. Animal transgenesis: state of the art and applications. J Appl Genet 2007; 48(1):47-61. Bacci ML. A brief overview of transgenic farm animals. Veterinary Research Communications, 2007 31 (Suppl. 1), 914 Niemann H, Kues WA. Transgenic farm animals: an update. Reproduction, Fertility and Development 2007 19 (6) 762770 Rojas Muoz A, Bernad Miana A , Izpisa JC. El pez cebra, versatilidad al servicio de la biomedicina Investigacin y Ciencia 2007 Mar 366: 62-69 Wheeler MB, Walters EM, Clark SG. Transgenic animals in biomedicine and agriculture: outlook for the future Anim Reprod Sci. 2003 Dec 15; 79 (3-4):265-89. Review. Benavides F, Guenet JL. Modelos murinos de enfermedades humanas. Medicina (Buenos Aires) 2000; 61: 215-231 Lacadena, J.R. Animles transgnicos www.prodiversitas.bioetica.org/des18.htm