DNS 1.

Se disuelven los reactivos Hidrxido de sodio, Tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6*4H2O), Fenol, Metabisulfito de sodio (Na2S2O5) en aproximadamente 600 ml de agua destilada. 2. Se adiciona el Acido 3,5 dinitrosaliclico (DNS) poco a poco hasta lograr una completa disolucin. 3. Se afora a 1 litro de agua destilada. La solucin debe guardarse en frasco mbar y alejado de la luz, a temperatura ambiente durando hasta dos meses, antes de mostrar precipitacin o vestigios de descomposicin.

DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES Se adiciona en tubos de ensayo 0.5 ml de la muestra Se aade 1.5 ml de DNS, se agita Se colocan los tubos en bao de agua a punto de ebullicin durante 15 minutos Se deja enfriar a temperatura ambiente Se agrega 8 ml de agua destilada y se agita en un vortex Se toman lecturas de absorbancia a 550 nm

Determinacin de azcares reductores Los azcares reductores pueden reducir al cido 3,5-dinitrosaliclico (DNS) bajo determinadas condiciones. Preparar el reactivo DNS: 100ml de solucin DNS 2mM en NaOH 0,2N y 250ml de solucin de tartrato de sodio y potasio 4-hidrato 2,12M. Mezclar ambas soluciones y se llevar a 500ml. Si la muestra contiene protenas stas pueden producir falsos negativos, para evitarlos desproteinizar 5ml de leche aadiendo 1 ml de cido actico 1N; centrifugar a 4.000 x g durante 10 minutos. Si en la muestra es posible la presencia de di, tri o polisacridos con ms de un componente reductor, neutralizar con NaOH 1N para evitar una posterior hidrlisis cida (se sobrestimara la cantidad del sacrido).Aadir 4,475ml de agua destilada y 25ml de muestra 500l de reactivo DNS. Mantener la mezcla en bao de agua hirviendo durante 5 minutos y medir a continuacin absorbancia a 540nm, interpolando el valor obtenido con los valores calculados para soluciones de sacrido de concentracin conocida.