Estudio comparativo en base a densidad estomtica de Blechnum chilensis en la zona de Concepcin y Puerto Montt.

Mario A. Quezada Aguiluz, Claudia M. Reyes Bahamonde. Departamento de Botnica, Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas, Universidad de Concepcin, casilla 160-c, Chile.

RESUMEN Los estomas adems de regular el intercambio gaseoso de la planta por medio de su apertura, tambin provocan la prdida de agua de la planta en forma de vapor a travs del proceso denominado transpiracin.Es por esto que en regiones xerfilas, los estomas frecuentemente son pequeos o casi inexistentes, puesto que la disponibilidad de agua obliga a que se pierda lo menos posible a travs de la transpiracin y la evaporacin. El siguiente estudio se hizo con el fin de investigar si existe una variacin en el nmero de estomas de una especie ubicada en dos zonas geogrficas con distintas condiciones climticas. Para esto fueron estudiadas las hojas de la especie Blechnum chilensis de las localidades de Concepcin y Puerto Montt (Chile) con el objetivo de medir la densidad estomtica y hacer un estudio comparativo de la especie en ambos ambientes. Las hojas fueron diafanizadas y fotografiadas. Se hizo un conteo mediante microscopa ptica en los laboratorios del Departamento de Botnica de la Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas de la Universidad de Concepcin, Chile. Se calcul el rea del campo visual del microscopio y se expresaron los resultados del conteo en promedio de estomas y la densidad de estomas por unidad de rea (mm).Las muestras obtenidas en la zona de Puerto Montt presentaron un ligero aumento en la densidad estomtica con respecto a las muestras recolectadas en Concepcin. Esto nos indica que la misma especie (Blechnum chilensis) al estar expuesta a distintas condiciones climticas, presenta una variacin en su densidad estomtica debido a factores como la disponibilidad de agua y el clima.

INTRODUCCIN. La especie Blechnum Chilensis (Kaulf.) Mett. Vulgarmente conocido como costilla de vaca, perteneciente a la familia Blechnaceae, es un subarbusto perenne con rizoma erecto, escamoso, de tres a cinco centmetro de dimetros. Hojas dimorfas; las estriles de 0.5 a 1.5 metros de largos por 10 a 40 centmetros de ancho; peciolo de 20 a 40 centmetro de largo, algo leoso, en la base con escamas anchas, de color castao claro; lamina pinnada, de contorno oval- lanceolado; con pinas de 3 a 10 mm de ancho, dirigidas hacia el pice. Soros cubriendo ntegramente la cara abaxial; inducio submarginal, continuo. Nativa de Chile y Argentina, en el pas se encuentra desde la costa de la provincia de Limar y regin andina de la provincia de Santiago hasta la provincia de Magallanes. Tambin crecen en el Archipilago de Juan Fernndez. Helechos de lugares muy hmedos, a lo largo de cursos de agua y es caracterstico en pantanos formando asociaciones con Gunnera tinctoria ( Pangue). Suele invadir el interior de bosque sombro especialmente en las quebradas. (Rodrguez, R et al, 2009) El estudio de la epidermis, que es la capa de clulas ms externa del cuerpo primario de la planta se realiza para observar las clulas presentes en ella. En el presente trabajo, se estudiaron los estomas de la lmina folial, los cuales son aberturas en la epidermis rodeada por dos clulas oclusivas. Mediante cambios de forma, las clulas oclusivas controlan el tamao de la abertura. Esta abertura conduce al interior de un amplio espacio intercelular llamado cmara subestomatica, que se continua con los espacios intercelulares de mesofilo. (Esau, Katherine 1985) Para que la observacin de estos estomas se lleve a cabo bajo un microscopio se utiliza una tcnica anatmica llamada, tcnica de diafanizacin, por la cual una muestra se hace difana o transparente, mediante tcnicas que igualan los ndices de refraccin de la luz del interior del rgano con el medio que lo contiene. Esta tcnica fue extrada de Micro tcnicas de plantas vasculares (Rodriguez,R. 1989) MATERIALES Y MTODOS Las hojas para la cuantificacin de los estomas, en cuanto a su densidad, se obtuvieron de la especie Blechnum chilensis (Kaulf) Mett. Las muestras fueron extradas de la regin del Biobo, especficamente en el Campus universitario de la universidad de Concepcin, presente en la provincia de Concepcin, y de la regin de Los Lagos, especficamente en la zona de Pichiquillaipe, Puerto Montt. Para la observacin y posterior conteo de estomas se utiliz una tcnica histolgica llamada diafanizacin, el cual consiste en el aclaramiento de la hoja con hipoclorito 1:1. Se tomaron 3 muestras de cada Blechnum (Concepcin y Puerto Montt) de alrededor de un centmetro cuadrado, estos se dejaron 24 horas para obtener su total blanqueamiento, luego fueron pasados a agua destilada para retirar los restos de hipoclorito durante 20 minutos, enseguida, se pasa por alcohol 70 durante 10 minutos, luego se pas por solucin de cido tnico 50 en alcohol 70 por 15 minutos, se lava rpidamente en alcohol 70, luego se pas por solucin emprica (anaranjado) de Cl3Fe en alcohol 70 hasta que tom un color azul de 1 a 3 minutos, este color no fue completamente uniforme, por lo cual se repiti tantas veces como fue necesaria. Se tomaron las muestras difanas y se montaron con glicerina 1:1 para su posterior observacin bajo un microscopio Zeiss Axioskop con cmara de video monocromtica incluida. El clculo de la densidad estomtica se bas en el conteo del nmero de estomas observados a travs del microscopio Zeiss Axioskop, con un campo de observacin de 400X.Igualmente, se calcul el rea del campo visual del microscopio, el cual correspondi a 0.41 mm, usado luego para determinar la densidad estomtica.

Figura 1.

Figura 2.

Vista superficial de la epidermis de lmina foliar de Blechnum chilensis extrada en la zona de Concepcin. A Clulas oclusivas.B Ostilo.C Clula acompaante (Fig. 1 y 2).

Fotografa de la hoja de Blechnum chilensis recolectada En el Barrio Universitario Concepcin. (Fig.3)

Figura 3.

Figura. 4

Figura. 5

Vista superficial de la epidermis de lmina foliar de Blechnum chilensis extrada en la zona de Puerto Montt. (Fig. 4 y 5)

Fotografa de la hoja de Blechnum chilensis recolectada en Puerto Montt. (Fig. 6)

Figura 6.

RESULTADOS. El cuadro 1 muestra el conteo de estomas realizados en las dos muestras de Blechnum chilensis, promediando los 3 conteos para hechos en Concepcin y Puerto Montt. Se encontr una variacin entre el nmero de estomas encontrados en la epidermis de la lmina foliar las muestras de diferente ubicacin geogrfica, notando un incremento en las hojas muestreadas en la zona de Puerto Montt. Cuadro 1.Cantidad de estomas promedio en ambas superficies de las hojas de Blechnum chilensis procedentes de Concepcin y Puerto Montt.

Zona Concepcin Puerto Montt

Nmero de estomas 1 conteo 26 38

Nmero de estomas 2 conteo 31 42

Nmero de estomas 3 conteo 28 41

Promedio 28.33 40.33

Posteriormente, se calcul el rea del campo visual del microscopio para determinar la densidad estomatica. = Donde: r = 0.36 mm. = . A=0.41 mm. El rea del campo visual del microscopio Zeiss Axioskop, en su aumento mediano, fue de 0.41 mm. Con este dato, se procedi a calcular la densidad estomtica por unidad de rea (mm) el cual puede apreciarse en el cuadro 2. Cuadro 2. Densidad estomtica en ambas superficies de las hojas de Blechnum chilensis procedentes de Concepcin y Puerto Montt.

Zona Concepcin Puerto Montt

Estomas/mm 69.09 98.36

DISCUSIN Y CONCLUSIONES. Como se sabe, los estomas son usados para el intercambio gaseoso con el medio. El oxgeno y dixido de carbono son intercambiados con el ambiente a travs de estos poros. La adquisicin de dixido de carbono y el intercambio de oxgeno son fundamentales para que se desarrollen los procesos de fotosntesis y respiracin de las plantas. Sin embargo, su apertura tambin provoca la prdida de agua de la planta en forma de vapor a travs del proceso denominado transpiracin. Por esto, la apertura o cierre de los estomas est muy finamente regulada en la planta por factores ambientales como la luz, la concentracin de dixido de carbono o la disponibilidad de agua. Segn investigaciones, se conoce que algunos cationes como el potasio y calcio y aniones como el cloruro intervienen activamente en la apertura y cierre de los estomas. En casos de sequa (estrs hdrico) se cierran los estomas impidiendo prdidas de agua en la planta, lo cual, sin embargo, tambin imposibilita el intercambio de gases y, en consecuencia, la entrada de CO2 atmosfrico necesaria para la nutricin de las plantas mediante el proceso de fotosntesis. Es por ello que en regiones xerfilas, los estomas frecuentemente son pequeos o casi inexistentes, y adems, contienen cantidades apreciables de ceras, pelos y tricomas, que dificultan la salida del vapor de agua.Por el contrario, nosotros postulamos que plantas expuestas a condiciones de pluviometra ms altas, desarrollarn una mayor densidad estomtica, siendo inclusive, de la misma especie Las hojas de la especie estudiada presentan una variacin en la densidad estomtica, siendo las muestras pertenecientes a la zona de Puerto Montt, las que presentan una mayor densidad con respecto a las muestras de la zona de Concepcin. Esto puede en gran medida ser producto de la mayor disponibilidad de agua que presenta la especie en la zona de Puerto Montt y al clima existente en la regin.

Bibliografa Esau,K.,1985. Anatoma Vegetal. Ed. Omega. Tercera edicin. Barcelona. 779pp. Roberto, R. 1989. Microtcnicas en platas vasculares. Dpto. Botnica. Facultad de Ciencias Biolgicas y recursos Naturales. Universidad de Concepcin. Concepcin. Chile. 30 pp. Roberto, R., Alarcn., Espejo, J.2009. Helechos Nativos del Centro y Sur de Chile. Gua de Campo .Ed. corporacin chilena de la madera. Concepcin. Chile. 219pp