UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARABA CENTRO DE CINCIAS EXATAS E DA NATUREZA DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR

DISCIPLINA: GENTICA MOLECULAR

Duplicao do DNA
Prof Hilzeth de Luna Freire Pessa

Mecanismo de duplicao

Semiconservativo
Cada fita da molcula de DNA origina uma nova fita Cada fita da molcula de DNA funciona como um molde

DNA helicase

Quebra as pontes de hidrognio entre as bases complementares separando as duas fitas da molcula de DNA

DNA helicase

Protenas de ligao de fita simples (SSB)

Se ligam s regies de fita simples para protege-las da degradao (hidrlise) por enzimas (nucleases)

DNA helicase

SSB

DNA topoisomerase I

Se associa com a cadeia parental a frente da helicase. Esta enzima cataliza quebras transitrias das ligaes fosfodister em um dos filamentos fornecendo um eixo de rotao que permite que os segmentos de DNA em lados opostos da quebra girem independentemente, com o filamento intacto servindo como eixo.

DNA polimerases
Adicionam nucleotdeos ao filamento em crescimento na extremidade 3 OH No so capazes iniciar a sntese, necessitam de um pequeno filamento de nucleotdeos, um iniciador Necessitam dos quatro desoxirribonucleotdeos trifosfato (dTTP, dATP, dGTP e dCTP) Dependem de Mg 2+

RNA primase

Sintetiza o fragmento iniciador para que em seguida a DNA polimerase continue a sntese
DNA molde RNA primase

Iniciador RNA

DNA polimerase III

DNA

DNA polimerase III

Complexo enzimtico com 10 subunidades responsvel pela polimerizao no sentido 53 da fita de DNA recm-formada Esta holoenzima apresenta ainda a atividade 35 exonuclesica que permite que nucleotdeos incorretos adicionados sejam prontamente removidos, um por vez, durante a duplicao e substitudos por nucleotdeos corretos, mecanismo de reviso e reparo

DNA polimerase III

Polimerizao no sentido 5 3
dTTP a ser incorporado

Fita molde

Fita em crescimento

Direo da sntese

DNA polimerase III

Mecanismo de reviso e reparo

Atividade 35 exonuclesica Remoo de nucleotdeos incorretos adicionados um nucleotdeo de cada vez durante a replicao substituio por nucleotdeos corretos

DNA polimerase III

Atividade 35 exonuclesica

DNA polimerase I
Reparo de DNA danificado Atividades

polimerase 53 exonuclease 35 exonuclease 53, permite que vrios nucleotdeos sejam removidos de cada vez

DNA polimerase I

Atividade 35 e 53 exonuclesica

Replicao do DNA
Fita lder replicada de forma contnua na direo 53 Fita retardatria replicada de forma descontnua e no sentido inverso para manter a mesma direo 53 A fita descontnua replicada atravs de fragmentos de Okasaki

Fragmentos de Okasaki
1000 a 2000 nucleotdeos DNA recm sintetizado RNA iniciador que ser substitudo por desoxirribonucleotdeos pela DNA polimerase I DNA ligase reconstituir a nova fita.

Forquilha de duplicao
Fitas molde Forquilha de replicao

DNA polimerase I Fragmentos de Okasaki Fita retardatria Fita lder DNA ligase

Duplicao do DNA
Procariontes

Eucariontes

Duplicao do DNA

A partir do ponto de origem as forquilhas de seguem nas duas direes at o(s) ponto(s) de trmino.
O
Forquilha de replicao Forquilha de replicao

O Origem T Trmino

Direo da replicao

Duplicao simultnea das duas fitas de DNA

www.enq.ufsc.br/.../genetica/DNA.html

Duplicao do DNA

A medida que as novas molculas vo sendo sintetizadas assumem a conformao em -hlice

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