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Se clasifican por el tipo de luz de fuente luminosa que usan y segn esto pueden ser de luz visible y de luz no visible:

Microscopio Microscopio de luz no de luz visible visible

M. Optico Comn M. De Luz Polarizada M. De luz ultravioleta M. De Contraste de M. Electrnico: de Transmisin fases de Centelleo M. De Interferencia M. De Campo Oscuro

Consta de una ampliacin en dos etapas:

-Lente del objetivo (aumento inicial) -Lente del ocular (segundo aumento) Posee una parte mecnica y otra ptica. Consta de una BASE, un BRAZO y un OCULAR

La BASE contiene: una Fuente Luminosa; Botones de Encendido y Apagado; Reguladores de Intensidad de Luz. Entre el BRAZO y la BASE estn los TORNILLOS: Macromtrico (sube y baja la platina con movimientos grandes)

Micromtrico (sube y baja la platina con movimientos casi imperceptibles)

Tambin se encuentran TORNILLOS DE MANDO que llevan la placa histolgica de Derecha a Izquierda y de Adelante hacia Atrs.
En la PLATINA estn las pinzas para sostener la Placa Histolgica.

En el REVOLVER se encuentran los OBJETIVOS de 10, 25, 40 y 100 aumentos.

Se los denomina: pequeo, mediano, gran aumento y de inmersin. El OCULAR posee un aumento de 10x , mximo de 15x.

Ocular

Brazo Revolver

Objetivos Platina

Macromtrico

Micromtrico

Su principio es la birrefringencia (doble refraccin) Es un microscopio normal en el que se interpone un Prisma de Nicol que transforma la luz en luz polarizada plana. El objetivo aparece como una estructura luminosa sobre un fondo oscuro.

Compuesto de una platina rotatoria que presenta dos polarizadores (PdN):

Debajo de la Platina (polarizador) Junto al ocular (analizador)

Permite determinar si la muestra tiene diferentes ndices de refraccin.

Diferencia sustancias monorrefringentes (istropas) de las birrefringentes (anistropas)

Fibras musculares, fibras del tejido conectivo, gotitas de lpido dentro de la corteza suprarrenal, bastones y conos de la retina.

Crea el contraste solo por medios pticos (no por tincin) por diferencias de contraste debido al ndice de refraccin.
Presenta placas pticas dentro del condensador y del objetivo. Se lo usa para el estudio de tejidos vivos (sin coloracin)

Depende de la capacidad de un objetivo para retrasar la velocidad de la luz. Enva dos haces de luz separados a travs de la muestra, que se recombinan en el plano de la imagen.

Luz fuerte, oblicua, no pasa por el objetivo.

El campo es oscuro pero las partculas pequeas reflejan algo de la luz y aparecen como puntos brillantes. Se utiliza en el estudio de objetos transparentes como los quilomicrones (partculas de grasa en la sangre) Ej: Ver partculas de polvo en un rayo de luz.

Utiliza lentes de quarzo. Se basa en el principio de la absorcin de la luz ultravioleta por la muestra. Toma de micrografas usando una pelcula sensible a esta radiacin.

Se subclasifica en MET (M. Elect. De Transferencia) y MEC (M. Elect. De Centelleo o Barrido)

MET: La fuente de iluminacin es un haz de electrones de alta velocidad que chocan con la muestra y se enfoca sobre una pantalla fluorescente o placa fotogrfica. Posee un poder de resolucin de 0, 2 nm.
MEC: Bombardea la muestra con un haz de electrones finamente enfocado. Los electrones derivados son reunidos sobre la superficie de la muestra en lugar de atravesarla. La imagen es tridimensional.

 Lo ms importante de un microscopio es su poder de resolucin que se entiende como la capacidad de un microscopio para separar dos puntos que se encuentran muy juntos. El Microscopio ptico tiene un poder de resolucin de 0,2 m y en el Microscopio Electrnico 0,2 nm.

 Existen dos tipos de preparacin de tejidos:

A) Tejidos Vivos B) Tejidos Muertos

A) Tejidos vivos: Por periodos cortos. El beneficio de esta tcnica es que se pueden observar procesos activos de clulas: divisin, movimientos, secrecin.

o Se utiliza el cultivo que es un medio adecuado fisiolgico que permite a las clulas estar en un ambiente semejante al del organismo.

Existen dos tipos de tincin en esta tcnica:

VITAL: Consiste en inyectar un colorante al animal vivo. Sus clulas lo fagocitan y se tien. SUPRAVITAL: Adicin del colorante a las clulas extirpadas.

B) Tejidos muertos: Proceso desde la toma de muestra hasta que se encuentra en el portaobjetos, listo para la observacin.
Consta de ocho pasos: 1. Obtencin de la Muestra: Por corte. El bistur debe estar filo. Cuidar que el corte sea hecho en un solo momento.

2. Fijacin:
Evita la autolisis del tejido. Conserva el protoplasma. Se utiliza la formalina, el alcohol, cido picrico, cido actico, cido smico, lquido de Bouin y Lquido de Zenker (combinaciones de las anteriores)

3. Deshidratacin: Elimina el agua de los tejidos. Se utiliza alcohol en graduaciones crecientes hasta llegar a alcohol absoluto.

4. Aclaramiento: Se utilizan el xilol y el benceno.

5. Inclusin: En parafina (microscopio ptico) O Resina epxica (microscopio electrnico) Le da resistencia y dureza al tejido para ser cortado posteriormente. 6. Corte: Con micrtomo de 3 10 um. La cuchilla debe estar bien fila.

7. Tincin: Existen dos tipos de elementos de tincin de pH cido y bsico. Pueden emplearse varios al mismo tiempo.

Ejemplos de colorantes: Hematoxilina, Eosina, Orceina, Fucsina, Resorcina, Nitrato de Plata, Azul de metileno, Azul de Toluidina, Azul de anilina, Naranja G, Rojo neutro, Verde de Janus, Verde de Metilo, Sudan, tincin de PAS-SCHIFF, tricrmica de Masson-Mallory, tincin de Wright, GIEMSA.

8. Montaje: Para asegurar la muestra en el portaobjetos y cubrirla con el cubreobjetos. Se utiliza para este efecto el Blsamo de Canad.
Artefactos: Se denominan artefactos a todos aquellos errores ocurridos en la preparacin de los tejidos: pliegues en los tejidos, desgarres, precipitaciones de las sustancias qumicas de la preparacin, degeneracin del tejido.