Energa de Activacin

Agentes auxiliares

Clasificacin Enzimtica

Enzimas
Especificida d enzimtica

Inhibicin Enzimtica

Efectos

Primera etapa:

Energa de Activacin.

Centro Activo de Enzimas.

Agentes Auxiliares:

Coenzimas

Cofactores

Segunda etapa:
Ureasa

Succinatodeshidrogenasa

Especificidad Enzimtica

fosfomonoestear -asa alcalina

Alcohol deshidrogenasa

Efectos Enzimticos:

Fuerza inica Efecto de la concentracin Efecto del pH

Efecto de la temperatura

Efectos de la Concentracin:

Expresiones Enzimticas

Expresin del Sustrato.

Inhibicin Enzimtica:
Reversible: Irreversible:

I. Competitiva

I. Acompetitiva

I. No Competitiva

Clasificacin Enzimticas:
Liasas Enzimas Alostericas.

Las Enzimas.
Son

biomoleculas proteicas con propiedades que catalizan. Y como todo catalizador, aceleran notablemente las velocidades de reacciones qumicas.

Nomenclatura de las enzimas: SUSTRATO + TIPO DE REACCION + ASA

Energa de Activacin:
Tal activacin de las molculas involucra cierta energa

adicional que es necesario entregar al sistema antes de la reaccin propiamente dicha. Esta energa adicional se denomina energa de activacin (Ea).

Centro Activo:

La unin enzima-sustrato se produce mediante fuerzas intermoleculares de carcter dbil que tienen lugar en la zona especfica del enzima que se denomina centro activo. Es una zona El centro activo es pues una zona relativamente pequeo y restringido de la molcula proteica constituida por los grupos laterales de ciertos aminocidos de la cadena polipeptdica capaces de combinarse con diferentes partes de la molcula del o los sustratos y cofactores.

Agentes Auxiliares:
Algunas enzimas dependen para ser activas

solamente de su estructura proteica. Mientras que otras necesitan adems estructuras no proteicas, denominados cofactores.

El complejo enzima cofactor catalticamente activo recibe el nombre de HOLOENZIMA. Cuando se separa el cofactor, la protena restante, que por si misma es inactiva catalticamente, se denomina APOENZIMA.

Cofactores:

Son Iones metlicos.

La forma en que dichos iones actan en el proceso cataltico es ms o menos compleja y es imposible indicar un modo de accin comn a todos ellos. Tambin los aniones pueden actuar con ciertas enzimas como activadores, por ejemplo: sulfato, fosfato, cloruro, etc.

Coenzimas:
Son molculas orgnicas de estructura ms o

menos compleja que intervienen en la reaccin generalmente como transportadores de algn grupo qumico.

Grupo Prosttico:
Algunas coenzimas estn

unidas a la molcula de la enzima, y reciben entonces el nombre de grupos prostticos.

Estn fuertemente unidos a la protena, a veces por uniones covalentes. Son de difcil disociacin y cuando esto ocurre, la enzima pierde su actividad.

Especificidad:

El grado de especificidad puede variar de una

enzima a otra. As por ejemplo algunas poseen especificidad absoluta. Estas enzimas tan solo pueden ejercer su accin sobre un sustrato determinado (o un par de sustratos, si la reaccin es bimolecular, donde la enzima utiliza dos sustratos).

Ureasa:
NH2-CO-NH2 + H2O CO2 + 2NH3
Esta ltima enzima es una flavoprotena

que contiene FAD covalentemente unido el cual tambin acta especficamente en la reaccin como aceptor de hidrgeno

Succinato deshidrogenasa:
Succinato + enzima-FAD fumarato + enzima-FADH2

En algunos casos de reacciones bimoleculares, la

enzima es altamente especfica para uno de los sustratos de la reaccin y no para el otro.

Alcohol deshidrogenasa:
Alcohol + NAD aldehido (o cetona) + NADH + H+
Otras enzimas presentan especificidad de reaccin

Es decir son especficas en relacin al tipo de reaccin que catalizan pero no lo son tanto con respecto al sustrato involucrado. A este grupo de enzimas pertenecen algunas enzimas hidrolticas.

Fosfomonoestearasa alcalina:
R-O-PO3 2- + H2O R-OH + PO4H2 Por ltimo debemos mencionar aquellas enzimas que actan

con sustratos que pueden existir en dos formas isomricas (ya se trate de ismeros pticos ogeomtricos). En esos casos la enzima acta preferentemente sobre uno de los ismeros y no sobre el otro.

Efecto de la temperatura:

En primer lugar, las reacciones qumicas, catalizadas o no, aumentan su velocidad al aumentar la temperatura. Debido a su naturaleza proteica, por encima de cierta temperatura (variable con cada enzima) las mismas comienzan a desnaturalizarse convirtindo ese proceso de inactivacin trmica en un factor ms importante que el del incremento de la velocidad de la reaccin.

Su temperatura ptima est por lo

general comprendida entre

25 y 37C.

Efecto del pH:

En general, cada enzima es activa tan slo en un mbito de pH

ms o menos restringido y en la mayora de los casos presenta un pH ptimo definido, es decir un pH para el cual la actividad es mxima. A partir de ese punto hacia un lado y hacia el otro la actividad disminuye.
Tanto el mbito del pH dentro del cual es activa una enzima as

como su pH ptimo son caractersticas de cada enzima y se adaptan a las condiciones fisiolgicas en las cuales la misma debe actuar.

Expresin de las concentraciones enzimticas:

En cuanto a la cantidad de enzimas presente, como en la

mayora de los casos es imposible determinar la cantidad de la misma en trminos absolutos (miligramos o micromoles de enzima) ya que por lo general se trata de medios que contienen una mezcla compleja de diversas protenas adems de la enzima en estudio. Por lo tanto, se recurre a la medida de la velocidad de la reaccin catalizada por la misma. Se entiende por velocidad de una reaccin qumica a la cantidad de reactivos que se transforman en producto en la unidad de tiempo, en condiciones ptimas.

Efecto de la concentracin del sustrato:

Este es uno de los factores ms importantes que determinan la

velocidad de las reacciones enzimticas. En la mayora de los casos, cuando se representa esta ltima en funcin de la concentracin de sustrato, manteniendo la concentracin de la enzima, pH, temperatura y fuerza inica constante.
Esquemticamente el mecanismo de la reaccin podra

representarse en la siguiente forma:

E + S ES E + P En las cuales E, representa a la enzima; S, al sustrato; E-S al complejo enzima-sustrato y P y el producto o los productos.

Fuerza inica:
La fuerza inica de una solucin esta relacionada

con la cantidad y el tipo de iones presentes en la misma. Como ya mencionamos anteriormente, fundamentalmente algunos cationes son necesarios en el centro activo de algunas enzimas para su normal funcionamiento.

Inhibicin Enzimtica:
La actividad de una enzima puede ser disminuida o eliminada

completamente por la accin de ciertas sustancias a las cuales se las conoce con el nombre genrico de inhibidores enzimticos. Debemos aclarar que no deben ser incluidos en este grupo de sustancias, aquellos agentes que producen simplemente una destruccin irreversible de la enzima, como podran ser todos aquellos que conducen a su desnaturalizacin. Los inhibidores pueden clasificarse en dos grandes grupos:
1) Irreversibles. 2) Reversibles

i) competitivos ii) no competitivos

Inhibicin Irreversible:
La inhibicin irreversible es diferente de la inactivacin

enzimtica reversible. Los inhibidores irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima y no inactivan a todas las protenas. No funcionan destruyendo la estructura protenica, sino alterando especficamente la estructura tridimensional del sitio activo inhabilitndolo. Por ejemplo, el pH y las temperaturas extremas causan la desnaturalizacin de casi todas las protenas, pero este no es un efecto especfico. De forma similar, algunos tratamientos qumicos no especficos destruyen la estructura de la protena: por ejemplo, si son sometidas a una elevada concentracin de HCL, el cual hidrolizar los enlaces peptidicos que mantienen unidos los aminocidos de las protenas.

Inhibicin Reversible:
Los inhibidores reversibles se unen a las enzimas

mediante interacciones no covalentes tales como los puentes de Hidrgeno, las interacciones hidrofbicas y los enlaces inicos. Los enlaces dbiles mltiples entre el inhibidor y el sitio activo se combinan para producir una unin fuerte y especfica. Al contrario de lo que ocurre con el sustrato y los inhibidores irreversibles, los inhibidores reversibles generalmente no experimentan reacciones qumicas cuando se unen a la enzima y pueden ser eliminados fcilmente por dilucin o por dilisis.

Inhibicin Competitiva:
En la inhibicin competitiva el inhibidor se combina

reversiblemente con la enzima en el sitio por el cual se debera unir el sustrato, impidiendo por lo tanto la formacin del complejo activo enzima-sustrato. De ah el nombre de competitiva porque efectivamente tanto el inhibidor como el sustrato compiten por el mismo sitio y tratan de desplazarse mutuamente de la enzima.

Inhibicin Acompetitiva:
El inhibidor se puede unir a la enzima al mismo tiempo que el

sustrato. Sin embargo, la unin del inhibidor afecta la unin del sustrato, y viceversa. Este tipo de inhibicin se puede reducir, pero no superar al aumentar las concentraciones del sustrato. Aunque es posible que los inhibidores de tipo mixto se unan en el sitio activo, este tipo de inhibicin resulta generalmente de un efecto alostrico donde el inhibidor se une a otro sitio que no es el sitio activo de la enzima. La unin del inhibidor con el sitio alostrico cambia la conformacin (es decir, la estructura terciaria o la forma tridimensional) de la enzima de modo que la afinidad del sustrato por el sitio activo se reduce

Inhibicin No Competitiva:
En la inhibicin no competitiva, se postula que el inhibidor

se une con la enzima en otro sitio, que no es aquel por el cual se une el sustrato. Por esa razn la unin del sustrato con la enzima no es afectada por la presencia del inhibidor y se puede formar entones un complejo enzima-sustrato-inhibidor. Pero este complejo es catalticamente inactivo y no puede escindirse en productos de la reaccin y complejo enzimainhibidor.

Oxido-Reductasas:
Catalizan la transferencia de electrones, casi siempre en
forma de iones hidruro (H:-) o tomos de hidrgeno (H.). Ejemplos son las deshidrogenasas, oxidasas, oxigenasas, reductasas, peroxidasas e hidroxilaxas.

Trasferasas:
Catalizan la transferencia de grupos funcionales de una

molcula a otra; por ejemplo, las cinasas transfieren el grupo fosforilo (-PO32-). Otros grupos transferibles son: amino (-NH2); carboxilo (COOH); carbonilo (C=O); metilo (-CH3); y acilo (R-C=O).

Hidrlasas:
Catalizan la ruptura de ciertos enlaces por hidrlisis.

Liasas:
Catalizan la formacin de dobles enlaces por

eliminacin de grupos (H2O; CO2; NH3) o la adicin de grupos a un doble enlace (saturacin). Ejemplos son las descarboxilasas (CO2); deshidratasas (H2O) y desaminasas (NH3).

somerasas:
Catalizan

la transferencia de grupos dentro de una molcula (rearreglos intramoleculares) para dar formas isomricas. Ejemplos: epimerasas, que catalizan la inversin de un carbono quiral y las mutasas, que catalizan la transferencia intramolecular de grupos funcionales.

Ligasas:
Catalizan la formacin de enlaces C-C, C-S, C-O, y

C-N por condensacin acoplada con la ruptura (hidrlisis) de ATP, que suple la energa necesaria. Ejemplos: sintetasas; carboxilasas.

Enzimas Alostericas:
Pero adems existen ciertas enzimas con caractersticas

regulatorias que poseen propiedades que las distinguen de las primera y que e denominan enzimas alostricas. Las enzimas alostricas como las clsicas reconocen y se asocian en su centro activo a un sustrato especfico y catalizan su conversin en productos. Pero adems estas enzimas tienen la propiedad de reconocer selectivamente a uno o varios compuestos distintos del sustrato cuya asociacin reversible con la proteina tiene por efecto modificar su actividad frente al sustrato, ya sea activndolo o inhibindolo, sin participar en nada en la reaccin en s.

Desde ese punto de vista las enzimas alostricas pueden clasificar en tres grandes grupos:
a) Homotrficas: en las cuales el mismo sustrato puede actual como modulador, generalmente positivo. b) Heterotrficas: aquellas que son moduladas positiva o negativamente por sustancias distintas del sustrato para cada una de las cuales la enzima posee un sitio especfico de reconocimiento. c) Homotrficas-heterotrficas: responden a efectos regulatorios del mismo sustrato y de sustancias distintas del mismo. Desde el punto de vista metablico, estas enzimas, que generalmente catalizan reacciones prcticamente irreversibles, se encuentran ubicadas estratgicamente en ciertos puntos de las vas metablicas, de tal manera que su regulacin coopera en forma efectiva en la economa general de la clula.

Ejemplo de Enzima:
3.1.1.3 LIPASA (Acilhidrolasa Triacilglicerol )

La lipasa es una enzima que se usa en el organismo para disgregar las grasas de losalimentos de manera que se puedan absorber. La enzima se encuentra en la leche materna y, segn estudios bioqumicos, es idntica a la enzima colesterol esterasa (o lipasa pancretica no especfica), por lo que se supone que el origen es pancretico y llega a las glndulas mamarias a travs de la circulacin sangunea. Son hidrolasas que pueden catalizar diversas reacciones orgnicas y son adecuadas para la resolucin cintica de alcoholes, cidos carboxlicos y steres en agua como endisolventes orgnicos.

Bibliografas:

Lehninger Principles of Biochemistry 3th.ed. Nelson, DL and Cox, M.M. Worth Publishers, 2000.) Revista Factores de riesgo hoy. Laboratorios Phoenix. Numero 2. Talleres Grficos Valdez. Abril 2001. Raquel Osatinski, Luis Garnek. Revista de la Asociacin Bioqumica Argentina. Ao 1997. Lorena L. Enzimologa Clnica. Ao 1990. Smith-Thier. Fisiopatologa Clnica. Editorial Panamericana. Ao 1986. Anderson SC, Cockayne S. (1995). Qumica Clnica. Mjico. Ed. Interameericana McGraw-Hill.