Amilasa Lipasa

La amilasa, denominada tambin ptialina o tialina, es un enzima hidrolasa que tiene la funcin de catalizar la reaccin de hidrlisis de los enlaces 1-4 del componente Amilosa al digerir el glucgeno y el almidn para formar azcares simples, se produce principalmente en las glndulas salivares (sobre todo en las glndulas partidas) y en el pncreas.

Alfa-amilasa:. Actan a lo largo de cualquier punto de la cadena de los carbohidratos, descomponindolos en dextrina desde la amilopectina. Dado que puede actuar en cualquier punto de la cadena es ms rpida que la -amylasa Beta-amilasa:es tambin sintetizada por bacterias, hongos y plantas. Acta desde el extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrlisis del segundo enlace -1,4, rompiendo dos unidades de glucosa (maltosa) a la vez.

Delta-amilasa:Adems de romper el ltimo enlace (1-4)glicosdico en el extremo no reductor de la cadena de amilosa y amilopectina, liberando glucosa, la -amilasa puede romper los enlaces glicosdicos (1-6). A diferencia de las otras amilasas esta forma es ms eficaz en medios cidos y su pH ptimo es de 3

-Amilasa CNPG3 (2-cloro-p-nitrofenil- -Dmaltotriosido) 2-Cloro-p-nitrofenol La -amilasa reacciona directamente con el CNPG3 para liberar 2-cloro-p-nitrofenol que es medido a 405 nm.

Sirve en el diagnstico de enfermedades determinando sus niveles en plasma para saber si se puede producir una pancreatitis. Sus niveles pueden estar elevados por un dao a las clulas productoras de la enzima en el pncreas, o bien, por una deficiencia renal (excrecin reducida) o tambin por paperas

Los niveles elevados de amilasa pueden ocurrir debido a:

Pancreatitis aguda Cncer del pncreas, ovarios o pulmones Colecistitis Ataque de la vescula biliar causado por enfermedad Gastroenteritis (grave) Infeccin de las glndulas salivales (como paperas) o una obstruccin Oclusin intestinal Macroamilasemia Obstruccin de las vas biliares o pancreticas lcera perforada Embarazo ectpico (puede romperse)

La disminucin de los niveles de amilasa puede ocurrir debido a:

Cncer pancretico Dao al pncreas Nefropata Toxemia del embarazo

La muestra de eleccin es suero fresco, claro y no hemolizado. La amilasa es estable en suero por al menos una semana cuando se almacena a temperatura ambiente o por varios meses a 4C

Se evaluaron las interferencias por ictericia, lipemia y hemlisis.

La alfaa-amilasa se desnaturaliza al ser expuesta a una temperatura tan elevada, ya que se produce un exceso de choques entre las molculas presentes en la saliva como consecuencia del aumento de la energia cintica, produciendo la ruptura de las uniones dbiles (como puentes de hidrogeno, fuerzas de Vander Waals, interacciones ionicas), que afecta la estructura terciaria de la enzima y a su vez la conformacion de su sitio activo, perdiendo la capacidad de romper lasuniones C1C4 de las glucosas.
Con respecto a la influencia del pH del medio en la actividad enzimtica de la a -amilasa, podemos decir que a pH extremos (es decir, muy cidos o muy bsicos) la enzima no funciona, o al menos disminuye notablemente su actividad.

GENERALIDADES; La lipasa es una enzima ubicua que se usa en el organismo para disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su funcin principal es catalizar la hidrlisis de triacilglicerol a glicerol y acidos grasos libres. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos.

Esta enzima en humanos se encuentra en la leche materna y, segn estudios bioqumicos, es idntica a la enzima colesterol esterasa (o lipasa pancretica no especfica), por lo que se supone que el origen es pancretico y llega a las glndulas mamarias a travs de la circulacin sangunea. La funcin principal de esta lipasa gstrica es ayudar a la absorcin de grasas.

La Lipasa pancretica humana cataliza una reaccin de dos etapas: el 1-2-diglicerido se hidroliza a 2-monoglycerido y a los cidos grasos. El 2-monoglycerido es hidrolizado ms a fondo por la lipasa del monoglicrido (MGLP) al glicerol y a los cidos grasos. El glicerol entonces se cuantificado usando una reaccin de GPOTrinder de primer orden. Los cambios de la absorbencia se mediden a 550nm. El esquema de la reaccin ilustra las eventos que ocurren en este mtodo

1,2 dyglicerido + H2O

Lipasa

2-monoglycerido + AGL

2-monoglycerido + H2O +AGL

MGLP

Glicerol

Glicerol-3-fosfatato + O GPO dihidroxiketona-fosfatato+ H2O2 H2O2+ 4-aminoantipirina + TOOS quinonimina + 4H2O Perox Tinte-

As, la medicin de la concentracin de lipasa tiene utilidad para investigar trastornos pancreticos. La concentracin de la lipasa srica aumenta como consecuencia de una pancreatitis aguda. En general, tanto la amilasa como la lipasa siguen el mismo curso aunque la elevacin de lipasa persiste durante ms tiempo. Las elevaciones de la concentracin de lipasa tambin pueden ser debidas a una obstruccin del conducto pancretico por un clculo o bien por un carcinoma, en enfermedades renales agudas o crnicas y como consecuencia del tratamiento con opiceos2,4.

Es preferible utilizar suero libre de hemlisis. Slo se puede utilizar plasma con heparina. La lipasa se mantiene estable durante 7 das a 4C, para periodos ms largos se puede conservar congelada.

La hemlisis severa puede interferir con la reaccin visual de punto final. oxalato potsico provoca un aumento de la presin osmtica del plasma, dando lugar a un transporte de agua desde las clulas sanguneas al plasma y a una dilucin del mismo. Los quelantes del calcio producen inhibicin en la actividad de la enzima. La Lipasa Microbial y Colesterol Esterasa pueden afectar la prueba. La morfina y ciertas drogas colinrgicas originan un aumento de los niveles sricos de lipasa.