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TECNOLOGIA SUBSTRATO CROMOGNICO APLICADO A ANALISIS DE ALIMENTOS Y MONITOREO AMBIENTAL

MTODO SIMPLATE

Historia de metodos recuento bacteria


2000 1990 1970
1970s Petrifilm developed for products with low counts, i.e. dairy. Format is small and convenient but traded-off accuracy and ease of reading particularly for products with high counts.
1990s -Idexx introduced a prototypical SimPlate but plates and media not yet optimized 2001- BioControl improved the SimPlate format and media, making it the most advanced plating system available today

1890

1890s - German bacteriologist Julius Petri invented the petri dish making plate counting possible

Porque el desarollo del metodo SimPlate.


Busqueda de una forma de conteo mas fcil. Colonias de tamao uniforme. Mayor rapidez en los resultados. No hay perdida de tiempo con la preparacin de medio de cultivo.

Familia SimPlate
TPC - SimPlate para Recuento Total de Bacterias. CEC - SimPlate para Recuento de Coliformes y E.coli SYM - Simplate Hongos y Levaduras Campylobacter

La Placa Simplate
La placa Simplate es una de
las mejores ideas para conteo de microrganismos de los ultimos aos. Resultado en UFC y NMP. El medio esta siempre liquido, no hay agar. El liquido esta dentro de los pocillos por tensin superficial. Una placa sustitui dos placas Petri y tres filmes conteo de 738 UFC.

Preparacin del Medio SimPlate


Opcin 1- Multiple Test.
Transferir el contenido de un frasco del Medio SimPlate para 100 ml de agua esteril.

Agitar para disolver.

Procedimiento para Multiple Test


Transferir 1ml de la muestra Transferir 9ml del medio preparado
Usar pipeta o usar Multi dosador de 9ml

SimPlate

Como funciona?

Movimiente la placa para llenar los pocillos

Medio para Coliformes e E Coli

Inclinar la placa para eliminar excedente

Resultado SimPlate Recuento Total de Bacterias


Positivos(Colonias) Negativos

Antes de Incubar

Despues 24h Incubacin 35C

Resultado SimPlate Mohos y Levaduras


Positivos(Colonias) Negativos

Antes de Incubar

Despues 48 - 72h incubacin 25 a 30C

SimPlate Color Indicator


Conteo Total de Bacterias y Mohos y Levaduras

No es enzimatico , es un mtodo basado en reaciones de reducin. El crecimiento de la bacteria reduz la rezasurina AZUL para resofurina ROSA y/o dihidroresofurina no tiene color. El resultado son pocillos que cambian de color azul para rosa, marrom.

Resultado SimPlate Coliformes Totales e E.coli


Colonias Coliformes Totales

Para recuento de E.Coli colocar esta placa bajo Luz UV 365 nm - 6 watts.

Antes de Incubar

Despues de 24horas incubacin 35C

Lectura SimPlate Lectura de E.Coli


Colocar la placa bajo la luz UV 365 nm 6 watts efectuar el conteo de los pocillos fluorescentes. Leer el resultado en la tabla de NMP o UFC.

C O N T A G E M

Esta tabla converte el recuento de pocillos considerando los 10ml iniciais de muestra + medio.

El Resultado es UFC o NMP. La unidad puede ser cualquer una de las dos formas directamente.

Como Funciona - CPRG


(SimPlate CEC - Coliformes y E.Coli)

Como Funciona - MUG


(SimPlate CEC - Coliformes y E.Coli)

Simplate TPC-CI (Color Indicator)

SimPlate Campylobacter CI Procedimiento comparado con el metodo USDA Culture Method


Muestra Preparada
DIRECT PLATING

Muestra Preparada

+
0.1 mL each 48 hr microaerophillic incubation

Confirm by for microscopic examination latex agglutination

SimPlate Recuento Total


Resultados positivos por cambio de color. Fcil de cuantificar No sufrem interferncia de Bactrias espalladas Recuento binario Recuento hasta 738 UFC Colonias varian de color y tamao Partculas de alimentos se confunden con las colnias Colonias espalladas dificultan el conteo Recuento hasta 300UFC Recuento deve ser cuidadoso.

Comparativo
SimPlate Bolor Lev 2- 3 Days Petrifilm Bolor e Lev.- 5 days

Comparativo
SimPlate TPC - 24 hr Petrifilm APC - 48 hr

7 pozos negativas = 77positivas= 414 UFC

Comparativo
SimPlate CEc (E. coli) - 24 hr Petrifilm E. coli - 48 hr

Contar los pocillos fluorescentes y leer resultado en la Tabla

Cero x Incontable
Petrifilm E. coli - 0 Petrifilm E. coli - TNTC

Beneficios
Rpido, procedimiento fcil, medio listo para usar. Lectura Fcil - todas las colonias son del mismo tamao con distribucin regular en la placa. Con una placa se puede leer hasta 738 UFC sin dilucin.

Beneficios
No hay interferencia de residuos de alimentos. No hay interferencias de colonias invasoras. No hay lavado de placas. Doble espacio libre en la incubadora por la retirada de la muestra en 24 horas.

`An efficient Quality Control is the one that shows high precision when the process is out of standard.`

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