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Introduccin
Un rasgo especial de la clula es su capacidad para realizar reacciones qumicas rpidas y a temperatura ambiente, fuera de la clula estas reacciones serian lentas y la compleja actividad metablica de la clula no podra realizarse a velocidades tan bajas. La vida, tal y como la conocemos, no seria posible si no existieran catalizadores para facilitar y controlar los procesos metablicos. Esos catalizadores son las enzimas.
Enzimas y Coenzimas
Protenas sintetizadas en la clula, catalizan una reaccin, van desde 12,000 hasta 1 milln de tipos y peso molecular es en kDa
DESCRIPCION
Complejo metalorgnico llamado Coenzima, que actan como transportadores transitorios de grupos funcionales especficos.
Algunos coenzimas actan como portadores transitorios de tomos o grupos funcionales especficos
HALOENZIMA
Clasificacin y Nomenclatura
Descripcin de la Clasificacin
Deshidrogenasas
O2 acta como receptor
Oxidasas
Oxigenasas
Peroxidasas
Transaminasa Quinasas
Catalizan la transferencia de grupos de un substrato a otro como metilo, amino, alquilo y acilo y de grupos que contienen fosforo y azufre, O2 es incorporado parcialmente a las molculas.
Fosfatasas
Fumarasa Catalizan la Descarboxilasa supresin de grupos qumicos sin hidrolisis. Actan sobre enlaces C-C, CAldolasa O, C-N, C-S
LIASAS
Cantidad en el grupo: 88
Racemasas
Epimerasas
Catalizan la inversin de la configuracin alrededor del tomo de carbono asimtrico en un sustrato con nico (racemasas) o ms (epimerasas) centros de asimetra
Cis-trans isomerasa Transforma un ismero de un compuesto qumico en otro. Puede, por ejemplo, transformar una molcula de glucosa en una de galactosa.
Ceto-isomerasa intramoleculares
Pueden facilitar el traspaso de grupos acilo, o fosforilo de una parte a otra de la molcula, como la lisolecitina acil mutasa que transforma la 2 lisolecitina en 3 lisolecitina, etc
Catalizan la unin entre dos molculas, dando lugar a un nuevo enlace qumico; generalmente, sucede con la hidrlisis de un compuesto de alta energa, como el ATP, con rotura de un enlace pirofosfato del ATP, generalmente acta sobre compuestos de alta energa.
Substrato: es el compuestos o tipo de substancia sobre el cual acta la enzima. Sitio activo: bolsa enzimtica, sobre la cual se acopla el substrato.
Inhibicin Enzimtica
Son molculas que se unen a enzimas y disminuyen su actividad. La unin de un inhibidor puede impedir la entrada del sustrato al sitio activo de la enzima y/u obstaculizar que la enzima catalice su reaccin correspondiente, la unin del inhibidor puede ser reversible o irreversible.
1.
Irreversibles reaccionan con la enzima de forma covalente y modifican su estructura qumica a nivel de residuos esenciales de aminocidos necesarios para la actividad enzimtica. diferentes tipos de inhibiciones, dependiendo de si el inhibidor se une a la enzima, al complejo enzima-sustrato o a ambos.
AUMENTO DE TEMPERATURA
CAMBIO DE pH
Inhibicin competitiva
Compiten directamente con el substrato, por el lugar activo en la superficie en la enzima.
Inhibicin no competitiva
Son inhibidores potentes que se combinan, con grupo en el lugar activo de la enzima y no pueden ser desplazados por un substrato adicional.
Concentracin de substrato Sitio activo Efecto de la enzima Efecto del pH Efecto de la temperatura Efecto de los productos terminales Efecto de los inhibidores
incrementos de (S) 4. Finalmente los incrementos de (S), Vo son casi equivalente y es ah donde se forma una meseta llamada Vmax
La Vmax se alcanza cuando todos los centros activos estn ocupados con sustrato
A baja (S), Km > (S), por lo que la (S) en la ecuacin de Michaelis-Menten es insignificante y la ecuacin queda: Vo = Vmax(S)/Km, y Vo tiene una dependencia lineal con respecto a (S).
A alta (S), donde (S) > Km, Km en la ecuacin de MichaelisMenten es insignificante y la ecuacin queda: Vo = Vmax, de acuerdo a la meseta formada a (S) elevada.
Dependencia de la velocidad inicial con respecto a la concentracin de sustrato en la que se muestran los parmetros cinticos que definen los limites de la curva a (S) alta y baja.
2. Sitio Activo
En la especificidad de accin de muchas enzimas, y solo una pequea porcin de la protena enzimtica interviene en su actividad caracterstica. El sitio activo esta formado de una serie de aminocidos especficos . Por lo cual al llevarse a el complejo enzima-substrato se debe acoplar de manera completa, toda la porcin de la protena enzimtica.
3. Efecto de la Enzima
Cuando se emplea una enzima purificada, el ritmo de reaccin es proporcional a la concentracin de la enzima, por lo cual concentracin de substrato debe conservarse constante y hallarse siempre en exceso de la necesaria para combinarse con la enzima.
4. Efecto del pH
La concentracin de ion hidrogeno, en la mezcla ejerce una influencia sobre el ritmo de la actividad enzimtica. La intensidad mxima ocurre en el pH optimo, si el pH sigue aumentado la velocidad disminuye. El pH optimo representa las condiciones en que las cargas sobre la enzima, y el substrato permiten la accin cataltica mas eficaz. Los grandes cambios de pH, con adicin de cidos o bases pueden desnaturalizar o inactivar por completo la enzima.
5. Efecto de la temperatura
La rapidez de la mayor parte de las reacciones aumenta al doble o al triple por cada 10 C de temperatura., y esta debe ir entre 10 y 50 C, la temperatura optima de las enzimas en el cuerpo es de 37 C, arriba de 50 C se desnaturaliza la enzima, y la protena enzimtica se coagula, y la actividad enzimtica desaparece. Q10 es el cambio de intensidad de la actividad enzimtica, para la mayora de las enzimas es 1.5 y 3.0, es por cada 10 C.
Enzimas Reguladoras
Tienen una actividad cataltica mayor o menor en respuesta a seales enviadas en cada secuencia metablica, para regulacin de la velocidad enzimtica, la cual se ajusta constantemente para adaptarse a los cambios en las necesidades de la clula con respecto a la energa y a las biomolculas requeridas durante el crecimiento celular y e la reparacin de lesiones.
1. Enzimas alostricas 2. Enzimas reguladas
con
modificacin
covalente
reversible
1.
Homotropicas: El sustrato acta, tambin como modulador. Estas enzimas contienen dos o ms centros de unin para el sustrato. La modulacin depender de cuntos sean los centros del sustrato que estn ocupados. Heterotropicas: Son estimuladas o inhibidas por un modulador diferente a la del sustrato.
2.
aminocido de la enzima se une covalentemente a algn grupo qumico y de esta forma se activa o se inactiva la enzima. El grupo que ms frecuentemente interviene en este tipo de regulacin es el grupo fosfato (Pi) y los aminocidos que normalmente intervienen son la serina y la treonina.
Enzima regulador aspartato transcarbamoilasa. Los polipptidos catliticos de cada agrupamiento se muestran en tono azul y purpura. Los sitios de fijacin de los moduladores alostricos se encuentran en blanco y rojo. La fijacin del modulador produce grandes cambios en la conformacin y actividad de enzima.
Purificacin de enzimas mediante manipulacin y cromatografa de afinidad. 1. Se asla y se modifica el gen de la protena. 2. Se expresa el gen recombinante en una bacteria apropiada 3. Se prepara un soporte gelificado con un grupo qumico, que se una a la protena recombinante 4. Se cultiva la bacteria recombinante de forma que exprese la protena 5. Se aplica un extracto acelular de la bacteria a la columna: la protena recombinante se une al gel y las dems no 6. Se aplica una solucin que contenga un compuesto qumico o ion que desplace a la protena del gel
Inmovilizacin de Enzimas
ENZIMA
Amilasa Fosfatasa acida
UTILIDAD
Elevada en pancreatitis aguda Elevada en cncer de prstata
FARMACEUTICA FARMACEUTICA
TEXTIL
Hialuronidasa Asparraginasa
Amilasas
LAVANDERIA
Proteasa
ENZIMA
Lipasas Hemicelulasas, Celulasas, Oxidorreductasas Endoproteasas
UTILIDAD
Hidroliza las grasas, ahorrando tensoactivos Reforzar el blanqueo del papel
ACEITES Y GRASAS
Peptolticas , Lipasas
ALCOHOL
Isomerasas
Bibliografa
1.
Donald J. Burton et al., QUIMICA ORGANICA Y BIOQUIMICA, Editorial McGraw-Hill, Traduccin de la primera edicin en ingles 1997, pp. 302 a 321
2.
Direccin General de Educacin Media Superior y Superior, BIOQUIMICA, Editorial, Telebachillerato, Edicin 2004, pp. 99 a 109
Eric E. Conn et al., BIOQUIMICA FUNDAMENTAL, Limusa 1965, Capitulo 7 Francisco C. Rodrguez et al., BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL, Editorial Tebar 2005, pp. 301 a 317 Leningher et al., PRINCIPIOS DE BIOQUIMICA, Omega 2000, pp. 198 a 235
3. 4.
5.