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Clula - Postulados Microscopa

DESCUBRIMIENTO DE LA CLULA

El microscopio ha permitido el estudio de la clula.

Los primeros microscopios data de los aos 1600.

1. Jans y Zacharias Janssen

(1580-1638) desarrollaron los primeros microscopios compuestos 1590.

2. Galileo (1564-1642), cientfico

italiano, realiz microscopio compuesto (dos lentes montadas en cada extremo de un tubo hueco) con el que observ insectos.

3. Robert Hooke (16351703), mejor el MC (30X) y observ cortes finos de corcho. 1665 en su libro

micrographia, us la
palabra clulas. No observ clulas vivas, se le reconoce haber sido la primera persona que observ e identific las clulas.

4. Anton van Leeuwenhoek (Royal Society of London) (1632-1723), construy microscopios simples que aumentaba los objetos 200 veces.
Observ clulas sanguneas, bacterias y Microscopio de bronce hecho a organismos simples en gotas de agua mano, 1770 animalculos, espermatozoides.

Descripcin del microscopio de Leeuwenhoek

El Microscopio

Mikros= pequeo Skopein= ver

MICROSCOPIO PTICO

Tres sistemas: 1. Mecnico 2. ptico 3. Iluminacin

MICROSCOPIO PTICO

Microscopio ptico convencional con doble ptica para aprendizaje

Microscopio ptico
Microscopio ptico de luz ordinaria (campo claro)
La calidad de la imagen observada depende del poder de resolucin = capacidad del microscopio de ver la distancia entre dos puntos del objetivo. A mayor calidad del microscopio mayor poder de resolucin. El poder de resolucin depende del ngulo de la luz incidente.

Microscopio ptico de campo oscuro


Fondo oscuro, se coloca en el condensador un anillo que permite el paso de rayos de luz que sern enviados, reflejados, si no encuentran nada no entran en el objetivo y no se ve nada. Ej espiroquetas.

Ventajas
1. Observar partculas dispersas en un medio homogneo. 2. Observacin del movimiento Browniano.

3. Observacin de preparaciones sin colorear.


4. Valiosa observar Treponema pallidum, dimetros superior a 0.2.

Desventajas
1. Difcil acceso al microscopio por condensador especial (alto costo).
2. No deja visualizar estructuras celulares especificas, solo bordes de clulas o partculas.

Microscopio de fluorescencia
Incorpora lmpara especial, acta emitiendo luz excitadora de los fluorocromos, con los que se tien las muestras a observar, posee un filtro especial, que permite el paso de la luz emitida por el fluorocromo.

Para observar es necesario teirlas con sustancias fluorescentes o marcarlas con sustancias conjugadas con fluorocromos, como los anticuerpos. Espermatozoides humanos

Ventajas
1. Permite un alto contraste entre la seal y el ruido. 2. Utilizando anticuerpos dirigidos contra una protena permite ubicarla en una clula (y en relacin a otras protenas o estructuras). 3. Versatilidad de estudiar funciones y procesos en clulas vivas. 4. Inmunofluorescencia .

Microscopio ptico de contraste de fases


Las estructuras internas de las clulas presentan diferentes ndices de refraccin y tambin diferente al medio que les rodea, hace posible observacin de material en vivo, sin necesidad de tincin. Basado en las diferentes densidades que la clula posee, la luz que atravieza la clula pasa a diferentes velocidades refractantes o desvindose en diferente ngulo, produciendo un contraste entre lo enfocado y el entorno.

Ventajas
1. Produce imagen brillante contra un fondo oscuro sin halos de difraccin de una clula viva. 2. Determinacin del ndice de refraccin. 3. Determinacin de slidos, masa seca y espesor de las estructuras celulares.

Desventajas
1. Alto costo del equipo por los diferentes aditamentos utilizados. 2. Costo alto por el mantenimiento de la muestra de clulas vivas. 3. La microcinematografa requerida para mirar los procesos que realiza la clula in vivo requiere de equipos especiales y personal entrenado.

Microscopio electrnico
Ultraestructura. Investigacin.

Electrones por tubo vaco en lugar luz y electroimanes en lugar lentes.


Poder resolucin mayor (25 mil veces y ms). Imagen sobre una pantalla excitada por electrones.

1.M.E. De Transmisin:
- Estructuras internas celulares.
- Corte muy fino (ultramicrtomo),

2. M.E. De Barrido:
- Los electrones no atraviezan la muestra, son reflejados y recogidos por un amplificador. - Estructura externa clulas. - No hay cortes pero si fijaciones.

Tcnica observacin microscpica


1. Fijacin: (fsica o qumica). Metanol, formol, bicromato, calor, fro, etc.

2. Inclusin: (parafina o epoxi).


3. Deshidratacin 4. Corte (micrtomo, ultramicrtomo)

5. Tincin

La clula se puede estudiar in vivo e in vitro

Coloraciones para Microscopa ptica


Observacin de diferentes estructuras celulares, tomando en cuenta las caractersticas de las diferentes coloraciones se logra resaltar estructuras. Coloraciones bsicas, cidas, naturales y sintticas. Coloraciones bsicas: azul de metileno, azur, resaltan las estructuras cidas de ncleo celular, cromatina. Coloraciones cidas: eosina tien las protenas bsicas, enzimas lisosomales en los grnulos. La imagen microscpica, su intensidad y grado de color, dependen la calidad de la coloracin, solucin de trabajo (pH, concentracin, estabilidad, etc.) y del procedimiento tcnico.

Microscopio ptico y electrnico

Tamaos relativos

TEORA CELULAR - POSTULADOS

Teora Celular
1824, Ren Dutrochet, primero en establecer la clula era la unidad bsica de la estructura, todos los organismos estn formados por clulas. En 1833, Robert Brown (1773-1858), botnico escocs, descubri que las clulas de hojas de orqudeas tenan una estructura central (ncleo). Purkinje 1840, us la palabra protoplasma para referirse al material vivo en interior de las clulas. 1838 Matthias Schleiden botnico y 1839 Theodor Schwann, zologo; reconocieron las similitudes fundamentales entre los dos tipos de clulas; propusieron: Todos los organismos estn compuestos de una o ms clulas.

La clula es la unidad estructural de la vida.

RUDOLF VIRCHOW (1858) present evidencia que las clulas se reproducen para formar nuevas clulas, propuso: Las clulas slo pueden originarse por divisin de una clula preexistente.

POSTULADOS TEORA CELULAR 1. Todos los organismos estn compuestos de clulas.

2. En las clulas tienen lugar las reacciones metablicas del organismo.


3. Las clulas provienen de otras clulas preexistentes.

4. Las clulas contienen el material hereditario.

Caractersticas de la clula
Tiene vida. Capacidad cultivar; 1951 George Gey Johns Hopkins University, primer cultivo clulas humanas.

Henrietta Lacks HeLa, in vitro, crecimiento


indefinido, herramienta bilogos celulares y moleculares.

Propiedades bsicas de las clulas


1.Complejas y organizadas
2. Programa gentico y medios para usarlo

3. Reproducen
4. Obtencin y uso energa
5. Reacciones qumicas

6. Actividades mecnicas 7. Reaccionan a estmulos 8. Autorregularse 9. Evolucin

ORGANIZACIN ESTRUCTURAL DE LAS CLULAS

1937 Chatton propuso:

1. Clulas procariticas 2. Clulas eucariticas

CLULAS
C. COMUNES
Membrana plasmtica. Informacin gentica codificada en el DNA. Mecanismos similares transcripcin y traduccin . Vas metablicas compartidas (gliclisis). Aparato similar para la conservacin de E en forma ATP. Mecanismos semejantes para la fotosntesis. Mecanismos parecidos para sintetizar e insertar protenas membrana. Estructura similar proteosomas (arqueobacterias y eucariota)

C. DIFERENTES
Envoltura nuclear.

Cromosomas complejos (DNA). Organelos citoplasmticos complejos. Organelos especializados para respiracin y fotosntesis. Citoesqueleto Cilios y flagelos. Vesculas membranosas (endocitosis y fagocitosis). Pared celular Divisin celular con formacin huso mittico. Dos copias genes (diploide). Meiosis y fecundacin

Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

Diferencia entre clula vegetal y animal


CLULA ANIMAL 1 Membrana plasmtica 2 Retculo endoplasmtico granular 3 Retculo endoplasmtico liso 4 Aparato de Golgi 5 Mitocondria 6 Ncleo 7 Ribosomas 8 Centrosoma (Centriolos) 9 Lisosomas 10 Microtbulos (citoesqueleto) CLULA VEGETAL 1 Membrana plasmtica 2 Retculo endoplasmtico granular 3 Retculo endoplasmtico liso 4 Aparato de Golgi 5 Mitocondria 6 Ncleo 7 Ribosomas 8 Cloroplasto 9 Pared celulsica 10 Vacuola 11. Glioxisomas

CLULA ANIMAL

CLULA VEGETAL

Cultivo celular
Tcnicas que permiten el mantenimiento de las clulas 'in vitro', manteniendo al mximo sus propiedades fisiolgicas, bioqumicas y genticas.

Cultivo celular
Ventajas
-Control preciso del medio ambiente (pH) -Caracterizacin y homogeneidad

Desventajas -Tcnica sensible


(contaminantes crecimiento acelerado). - Cantidad y costo. - Inestabilidad. Validez del modelo in vitro.

-Economa (muestra pequea)


-Motivaciones ticas

REAS DE INTERS EN EL CULTIVO DE TEJIDOS Y CLULAS

CLASES DE CULTIVOS CELULARES

CLASES DE CULTIVOS CELULARES

Perspectiva Humana
Cultivo celular y de rganos en laboratorio in vitro.
Transplante de rgano (evitar rechazos HCM). Trasplante de mdula sea (leucemias).

Aplicaciones:
1. Virologa (vacunas).

2. Investigacin del cncer.


3. Inmunologa. 4. Ingeniera de protenas (interfern). 5. Interaccin y sealizacin celular. 6. Aplicaciones diagnsticas, mdicas, industriales y agronmicas.

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